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中性乳酸通过PI3K/Akt信号通路促进肝癌细胞增殖、迁移及侵袭 被引量：4
1
作者 彭明兵 郑志菊 +4 位作者 曾智锐 张强 孙达权 夏庆 徐国强 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期9-19,共11页
目的:探讨中性乳酸对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,及其可能的作用机制。方法:肝癌SMMC-7721和HepG2细胞分别予以不同浓度(0、2.5、5和10 mmol/L)(以0 mmol/L浓度组为对照组)的中性乳酸处理后,采用MTT法检测细胞的增殖能力;Trans... 目的:探讨中性乳酸对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,及其可能的作用机制。方法:肝癌SMMC-7721和HepG2细胞分别予以不同浓度(0、2.5、5和10 mmol/L)(以0 mmol/L浓度组为对照组)的中性乳酸处理后,采用MTT法检测细胞的增殖能力;Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能力;蛋白质印迹法检测各组肝癌细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)、磷酸化Akt(Ser473)[phospho-Akt(Ser473),p-Akt(S473)]、基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase-2,MMP-2)和MMP-9蛋白的表达水平。将SMMC-7721和HepG2细胞各分为4组,分别予以等体积培养液(对照组)、中性乳酸、PI3K/Akt信号通路抑制剂哌立福新和中性乳酸联合哌立福新处理后,再用MTT法和Transwell小室实验检测各组肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法检测细胞中PI3K、Akt、p-Akt(S473)、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,5和10 mmol/L中性乳酸处理组SMMC-7721和HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显增强(P值均<0.01);2株细胞中PI3K、p-Ak(tS473)、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平均明显上调(P值均<0.01)。与对照组相比,哌立福新单药组SMMC-7721和HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(P值均<0.05),且PI3K、p-Akt(S473)、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均明显下调(P值均<0.01);与中性乳酸单药组相比,中性乳酸联合哌立福新处理组SMMC-7721和HepG2细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(P值均<0.01),且PI3K、p-Akt(S473)、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.01)。结论:中性乳酸通过激活PI3K/Akt信号通路促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,PI3K/Akt抑制剂哌立福新可以显著减少中性乳酸对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用。 展开更多
关键词 肝肿瘤 乳酸 磷脂酰肌醇3-激酶类 原癌基因蛋白质c-Akt 细胞运动 细胞增殖
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Mmp-2重组真核表达载体的构建及MMP-2蛋白对肝癌细胞的作用机制探讨 被引量：2
2
作者 夏庆 彭明兵 +4 位作者 郑志菊 王伟 孙达权 曹煜姗 徐国强 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1447-1453,共7页
目的:构建人基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)基因重组真核表达载体,探讨MMP-2蛋白对肝癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:以肝癌SMMC-7721细胞为研究模型,以基因重组技术构建pEYFP-Mmp-2重组真核表达载体,p ... 目的:构建人基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)基因重组真核表达载体,探讨MMP-2蛋白对肝癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:以肝癌SMMC-7721细胞为研究模型,以基因重组技术构建pEYFP-Mmp-2重组真核表达载体,p EYFP-Mmp-2一过性转染模型细胞过表达MMP-2-YFP,siRNA转染沉默模型细胞内源性MMP-2表达,设立空白对照、MMP-2沉默对照组、MMP-2沉默组、过表达MMP-2融合蛋白对照组、过表达MMP-2融合蛋白组,划痕实验检测细胞迁移能力,侵袭小室实验检测细胞侵袭能力,钙蛋白酶(calcium-activated neutral protease,Calpain)特异性抑制剂Calpeptin抑制Calpain活性,蛋白印记实验检测MMP-2、MMP-2-YFP、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达变化。结果:成功构建人Mmp-2重组真核表达载体pEYFP-Mmp-2。pEYFP-Mmp-2转染过表达MMP-2融合蛋白组细胞高表达MMP-2-YFP。与MMP-2沉默对照组相比,MMP-2沉默组内源性MMP-2表达明显下调(P=0.000),细胞12 h、24 h及48 h迁移率明显降低(P=0.000或P=0.001),48 h侵袭率明显降低(P=0.004),E-cadherin表达明显上调,N-cadherin及Vimentin表达明显下调(P=0.000)。与过表达MMP-2融合蛋白对照组相比,过表达MMP-2融合蛋白组12 h、24 h及48 h迁移率明显增强(P=0.015或P=0.001),48 h侵袭率明显升高(P=0.011),细胞E-cadherin表达明显下调,N-cadherin及Vimentin表达明显上调(P=0.003或P=0.001)。Calpeptin预处理明显降低过表达MMP-2融合蛋白组细胞迁移率和侵袭率(P=0.000),上调E-cadherin,下调N-cadherin及Vimentin蛋白表达水平(P=0.000)。结论:本实验通过基因重组技术成功构建人Mmp-2重组真核表达载体pEYFP-Mmp-2,成功表达MMP-2-YFP融合蛋白;并发现MMP-2通过调节Calpain介导肝癌SMMC-7721细胞迁移、侵袭及EMT。 展开更多
关键词 肝细胞癌 基质金属蛋白酶2 迁移 侵袭 上皮-间质转化
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Ndfip2表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及机制
3
作者 张强 罗彩云 +3 位作者 孙达权 曾志锐 郑志菊 徐国强 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第4期397-403,共7页
目的探究Nedd4家族交互作用蛋白2(Ndfip2)对人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2增殖和凋亡能力的影响。方法选择正常肝细胞LO2、肝癌细胞SMMC-7721和HepG2进行培养,采用蛋白印迹法检测3组细胞中的Ndfip2的蛋白表达;对培养的SMMC-7721和HepG2细... 目的探究Nedd4家族交互作用蛋白2(Ndfip2)对人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2增殖和凋亡能力的影响。方法选择正常肝细胞LO2、肝癌细胞SMMC-7721和HepG2进行培养,采用蛋白印迹法检测3组细胞中的Ndfip2的蛋白表达;对培养的SMMC-7721和HepG2细胞转染靶向Ndfip2小干扰RNA(siRNA)构建Ndfip2基因沉默组(si-Ndifip2组),转染无义siRNA序列构建阴性对照组(NC组),采用蛋白印迹检测两组细胞的转染效率,CCK-8、平板克隆形成和流式细胞术检测两组细胞的增殖率和凋亡率,蛋白免疫印迹检测相关细胞内磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(Ser473)[p-Akt(S473)]、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl2关联X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)的蛋白表达。结果与正常肝细胞LO2组比较,肝癌细胞SMMC-7721组和HepG2组中Ndfip2表达升高(P<0.05);与NC组比较,si-Ndfip2组SMMC-7721和HepG2细胞Ndfip2蛋白表达明显下调(P<0.01);与NC组相比,si-Ndifip2组肝癌细胞的增殖速率明显降低(P<0.01),凋亡率增加(P<0.05);si-Ndifip2组肝癌细胞中PI3K、p-Akt(S473)和Bcl2的蛋白表达水平均下降(P<0.05);而PTEN、E-cadherin、Caspase-3和Bax蛋白的表达则增加(P<0.05)。结论沉默Ndfip2抑制肝癌细胞的增殖能力,促进肝癌细胞凋亡,其可能机制与PTEN-PI3K/Akt信号通路的失活有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤细胞 Nedd4家族交互作用蛋白2 增殖 凋亡 基因 蛋白激酶B
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沉默Ndfip2对肝癌细胞迁移和侵袭的影响 被引量：1
4
作者 张强 罗彩云 +3 位作者 孙达权 曾志锐 郑志菊 徐国强 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第8期893-899,953,共8页
目的探究Nedd4家族交互作用蛋白2(Ndfip2)对人肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法采用免疫组织化学EnVision染色法和蛋白印迹法检测Ndfip2在肝癌组织和和肝癌细胞SMMC-7721、HepG2中的表达;在SMMC-7721和HepG2细胞中转染靶向Ndfip2小干... 目的探究Nedd4家族交互作用蛋白2(Ndfip2)对人肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法采用免疫组织化学EnVision染色法和蛋白印迹法检测Ndfip2在肝癌组织和和肝癌细胞SMMC-7721、HepG2中的表达;在SMMC-7721和HepG2细胞中转染靶向Ndfip2小干扰RNA(si-Ndfip2)和无义siRNA序列分别构建Ndfip2基因沉默(si-Ndifip2)组和阴性对照(NC),蛋白印迹检测转染效率;采用划痕、Transwell以及形态学观察检测NC和si-Ndifip2组细胞的迁移、侵袭以及形态学变化,蛋白印迹法检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达的影响。结果与癌旁组织比较,肝癌组织中Ndfip2表达显著上调(P<0.05);与正常肝细胞LO2细胞比较,肝癌细胞SMMC-7721和HepG2细胞中Ndfip2表达均明显上调(P<0.01);Ndfip2 si-RNA转染SMMC-7721和HepG2细胞后,Ndfip2蛋白表达均明显下调(P<0.01);划痕实验、Trasnwell实验和形态学观察结果表明,与NC组比较,si-Ndifip2组SMMC-7721和HepG2细胞迁移和侵袭能力均明显减弱(P<0.01),细胞形态上皮样转化;蛋白印迹法检测显示,与NC组比较,si-Ndifip2组SMMC-7721和HepG2细胞中N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均下降(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达则增加(P<0.05)。结论沉默Ndfip2基因可以抑制肝癌细胞的迁移、侵袭能力,其机制可能与EMT过程有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤细胞 Nedd4家族交互作用蛋白2 迁移 侵袭 上皮间质转化
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手术室护理路径应用于腔镜下胆囊切除术中的临床价值分析
5
作者 余红玉 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2022年第7期169-171,共3页
探讨手术室护理路劲应用于腔镜下胆囊切除术中的临床价值。方法 收集2019年9月-2021年9月,在我院接受腔镜下胆囊切除术干预的患者资料,筛选出其中符合条件者共84例作为研究对象,采取随机数字表法分为观察组和对照组,两组人数均等。观察... 探讨手术室护理路劲应用于腔镜下胆囊切除术中的临床价值。方法 收集2019年9月-2021年9月,在我院接受腔镜下胆囊切除术干预的患者资料,筛选出其中符合条件者共84例作为研究对象,采取随机数字表法分为观察组和对照组,两组人数均等。观察组应用手术室护理路径,对照组予以常规护理干预,一段时间后,观察并记录两组手术相关指标、遵医行为等情况。结果 经过组间对比分析可知,观察组较对照组出血量更低,此外该组的手术操作时间、术后肠道恢复时间也相对更短,各指标数据差异较大(P<0.05);另外,采用不同的护理方法干预后,得出观察组患者遵医用药、规律饮食等维度的评分均更高,且各项评分差异较大(P<0.05);而在SAS 评分、SDS 评分方面,观察组较对照组低,且差异较大(P<0.05);在并发症发生率方面,观察组和对照组分别为4.76%、19.05%,差异显著(P<0.05)。结论 与常规护理方法相比,手术室护理路径更具有优势,能够显著缩短手术操作时间,降低手术创伤,有利于提高患者的术后生活质量,具有较高的临床价值。 展开更多
关键词 腔镜下胆囊切除术 手术室 护理路径
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深静脉输液时采血作血液成分及生化指标检测可行性的研究 被引量：9
6
作者 宋丽娟 崔嵩 《护士进修杂志》 北大核心 2002年第2期92-93,共2页
目的对深静脉输液时采血做血液成分及生化指标检测可行性研究。方法 2 0例手术病人于全麻后行股静脉穿刺置入静脉导管 ,输液 10 0 0ml后停止输液 1min ,抽血 5ml,同时于肘正中静脉抽血 5ml,分别行血Na+ 、K+ 、Cl- 、红细胞压积、肾功... 目的对深静脉输液时采血做血液成分及生化指标检测可行性研究。方法 2 0例手术病人于全麻后行股静脉穿刺置入静脉导管 ,输液 10 0 0ml后停止输液 1min ,抽血 5ml,同时于肘正中静脉抽血 5ml,分别行血Na+ 、K+ 、Cl- 、红细胞压积、肾功能检查 ,并对两组数据进行t检验。结果深静脉输液时与浅静脉采血做血液成分及生化指标检测 ,两者差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论危重病人通过已备深静脉导管直接抽血 ,能减少病人多次静脉穿刺带来的不良后果 ,同时降低住院费用 。 展开更多
关键词 深静脉采血 血生化检验 血液成分检验
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分析罗森塔尔效应护理对先天性心脏病(CHD)患儿治疗依从性、生活质量及患儿家长满意度的影响
7
作者 殷远秀 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2022年第1期105-108,共4页
对先天性心脏病(CHD)患儿应用罗森塔尔效应护理,并统计患儿依从性、生活质量、家长满意度等情况,以探讨罗森塔尔效应护理的临床应用价值。方法:收集2019年10月-2021年10月被我院确诊并接受治疗的CHD患儿资料,筛选出其中符合条件者共64... 对先天性心脏病(CHD)患儿应用罗森塔尔效应护理,并统计患儿依从性、生活质量、家长满意度等情况,以探讨罗森塔尔效应护理的临床应用价值。方法:收集2019年10月-2021年10月被我院确诊并接受治疗的CHD患儿资料,筛选出其中符合条件者共64例作为研究对象,之后进行组别的划分,即对照组和观察组,两组人数各32例,前一组应用常规护理,后一组除了给予常规护理外,还联合应用罗森塔尔效应护理。干预一段时间后,对收集的各项研究数据进行 统计,以得出患儿治疗依从性、生活质量、家长满意度等情况。结果:采用软件对研究所得数据进行处理后,得出观察组患儿治疗依从率为93.75%,另外一组为71.88%,差异明显(P<0.05);经过组间对比分析发现,采用联合护理的一组患者各方面生活质量评分明显高于常规护理组,两组数据差异较大(P<0.05);在家长满意率方面,观察组为96.88%,另外一组为78.13%,差异较大(P<0.05);进一步的统计分析发现,联合护理组家长基础护理、沟通技巧、疾病认知、操作技能等自我效能感评分明显高于对照组;经过一段时间的护理后,观察组家长SAS评分、SDS评分较另外一组明显偏低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:对CHD患儿应用罗森塔尔效应护理可提高患儿治疗依从性,改善其生活质量,同时可提高家长满意度及自我效能感,减轻其负面情绪,具有推广价值。 展开更多
关键词 先天性心脏病 罗森塔尔效应 生活质量 治疗依从性 满意度
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急诊开颅术中静脉窦修补的护理配合
8
作者 宋丽娟 李丽娜 《护士进修杂志》 北大核心 1999年第9期49-49,共1页
颅脑损伤术中静脉窦破裂大出血是手术过程中较为严重的情况 ,能否及时、有效、可靠地止血 ,直接关系到患者的生死存亡。本文报告 14例术中应用丁氰脂ISobuty 2 cyanoacrylate(IBCA)肌筋膜片粘贴修补大静脉窦破裂护理配合体会 ,主要是... 颅脑损伤术中静脉窦破裂大出血是手术过程中较为严重的情况 ,能否及时、有效、可靠地止血 ,直接关系到患者的生死存亡。本文报告 14例术中应用丁氰脂ISobuty 2 cyanoacrylate(IBCA)肌筋膜片粘贴修补大静脉窦破裂护理配合体会 ,主要是术前应对可能出现术中大出血 ,特别是可疑有静脉窦损伤的急诊手术作好充分的术前准备。如开放双路静脉 ,增加巡回护士 ,充分备血等。 展开更多
关键词 颅脑损伤 静脉窦修补 护理
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