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集落刺激因子1受体抑制剂培西达替尼对脂多糖刺激骨髓来源巨噬细胞衰老的调节作用 被引量：2
1
作者 肖天骄 张洁 +4 位作者 康佳兵 李丽 湛济帆 韦艳 田艾 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期575-583,共9页
目的探讨集落刺激因子1受体(colony-stimulating factor 1 receptor,CSF-1R)抑制剂培西达替尼(pexidartinib,PLX3397)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下的骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)衰老的调节作用... 目的探讨集落刺激因子1受体(colony-stimulating factor 1 receptor,CSF-1R)抑制剂培西达替尼(pexidartinib,PLX3397)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下的骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)衰老的调节作用。方法从10只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠(贵州医科大学实验动物中心获取)的股骨和胫骨分离、培养BMDM,将BMDM分为空白对照组、LPS组(1μg/ml LPS处理24 h)和低、中、高浓度PLX3397预处理组(分别给予100、500和1000 nmol/L PLX3397处理4 h后,再以1μg/ml LPS处理24 h),采用细胞计数(cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒检测细胞活力;通过衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated-β-galactosidase,SA-β-gal)染色检测细胞衰老;蛋白质印迹法检测细胞周期依赖性激酶抑制因子p16、p21和CSF-1R的蛋白表达;细胞免疫荧光法检测p16、p21在细胞内的表达;实时定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)因子包括白细胞介素(interleukin,IL)、趋化因子1/10(chemokine-1/10,CXCL-1/10)、基质金属蛋白酶8(matrix metalloproteinase-8,MMP-8)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的mRNA表达。结果中、高浓度PLX3397预处理组SA-β-gal染色阳性细胞率[分别为(39.33±4.93)%、(36.33±3.06)%]均较LPS组[(52.00±3.00)%]显著下调(P=0.020,P=0.005);低、中、高浓度PLX3397预处理组CSF-1R的蛋白表达(分别为0.74±0.18、0.61±0.07、0.54±0.06)均较LPS组(1.16±0.08)显著下调(P=0.013,P=0.002,P<0.001);低、中、高浓度PLX3397预处理组CSF-1R的mRNA表达(分别为1.04±0.06、0.90±0.05、1.18±0.08)均较LPS组(2.90±0.25)显著下调(P<0.001);低、中、高浓度PLX3397预处理组p16平均荧光强度(分别为49.76±3.65、48.21±1.72、47.99±1.26)均显著低于LPS组(66.88±5.85)(P=0.001,P<0.001,P<0.001);中、高浓度PLX3397预处理组p21平均荧光强度(分别为34.43±3.62、30.13±0.86)均较LPS组( 展开更多
关键词 细胞衰老 受体 巨噬细胞集落刺激因子 脂多糖类 骨髓来源巨噬菌细胞
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