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lncRNA FOXP4-AS1通过miR-507调控甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的作用机制研究
1
作者 朱雪音 马宁 +2 位作者 陈松 高庆军 赵代伟 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期796-814,共19页
背景与目的:长链非编码RNA(lncRNA)可通过结合mircoRNA(miRNA)来间接调控下游mRNA的转录及降解,从而调控肿瘤发生与发展。lncRNA FOXP4-AS1是近年来发现的一种新的肿瘤相关生物标志物,在不同的肿瘤中发挥着不同的调控作用,笔者前期研究... 背景与目的:长链非编码RNA(lncRNA)可通过结合mircoRNA(miRNA)来间接调控下游mRNA的转录及降解,从而调控肿瘤发生与发展。lncRNA FOXP4-AS1是近年来发现的一种新的肿瘤相关生物标志物,在不同的肿瘤中发挥着不同的调控作用,笔者前期研究发现,FOXP4-AS1在甲状腺乳头状癌(PTC)中呈低表达,发挥抑癌作用。此外,笔者通过数据库预测miR-507可与FOXP4-AS1互补结合。因此,本研究探讨FOXP4-AS1通过调控miR-507及其下游靶mRNA抑制PTC细胞的生长的作用与机制。方法:通过TCGA数据库分析miR-507在甲状腺癌(TC)中的表达水平及其在TC中的临床意义。qRT-PCR检测PTC细胞系(TPC-1、K1)和正常甲状腺滤泡上皮细胞(Nthy-ori3-1)中miR-507的表达水平,以及过表达及敲低FOXP4-AS1后检测miR-507表达水平的变化。用双荧光素酶报告基因实验验证FOXP4-AS1与miR-507靶向关系。分别在FOXP4-AS1过表达及敲低稳转株上转染miR-507的模拟物、抑制物,并分别用CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell实验、划痕愈合实验以及流式细胞术检测细胞功能的变化。用生物信息学方法分析mi R-507下游靶点并用qRT-PCR验证。结果:TCGA数据库分析结果显示,miR-507在TC中高表达,且其表达水平TC患者与临床病理分期、T分期、腺外浸润等临床病理特征有关(均P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与Nthy-ori3-1细胞比较,miR-507在两种PTC细胞中呈高表达,且过表达和敲低FOXP4-AS1后,两种PTC细胞中miR-507的表达水平随之反向改变(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,FOXP4-AS1与miR-507靶向结合,并抑制miR-507的表达。细胞功能实验及功能回复实验显示,FOXP4-AS1过表达后,PTC细胞的增殖活力、迁移能力和抗凋亡能力明显减弱,同时加入miR-507的模拟物后,PTC细胞以上功能回复(均P<0.05);敲低FOXP4-AS1后,PTC细胞的增殖活力、迁移能力和抗凋亡能力明显升高,同时加入miR-507的抑制物后,PTC细� 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 RNA 长链非编码 微RNAS 细胞增殖 细胞凋亡
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甲状腺乳头状癌细胞中长链非编码RNA FoxP4-AS1的表达及其生物学功能 被引量：4
2
作者 杨惠芳 汤蕊 +3 位作者 罗雪 高庆军 陈星宏 赵代伟 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期619-630,共12页
背景与目的:笔者前期研究发现,长链非编码RNA Fox P4-AS1 (lnc RNA Fox P4-AS1)在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中异常表达,其低表达是PTC区域淋巴结转移的独立危险因素,但其功能及作用机制尚不清楚。因此,本研究探讨lnc RNA Fox P4-AS1在PT... 背景与目的:笔者前期研究发现,长链非编码RNA Fox P4-AS1 (lnc RNA Fox P4-AS1)在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中异常表达,其低表达是PTC区域淋巴结转移的独立危险因素,但其功能及作用机制尚不清楚。因此,本研究探讨lnc RNA Fox P4-AS1在PTC细胞中的表达,初步分析其对PTC细胞生物学行为的影响。方法:用q RT-PCR检测PTC细胞系(TPC-1、K1细胞)和正常甲状腺滤泡上皮细胞(Nthy-ori3-1细胞)中lnc RNA Fox P4-AS1的表达;将TPC-1、K1细胞分别转染Fox P4-AS1过表达慢病毒载体和空载病毒载体(阴性对照)后,并分别用CCK-8实验、克隆形成实验、Ed U、Transwell实验、流式细胞术分析细胞生物学功能的变化;通过GEPIA数据库和Lnc Tar网站预测Fox P4-AS1的靶基因,并用Western blot进行验证。用以上转染后的细胞构建小鼠皮下移植瘤模型,观察移植瘤的生长情况,免疫组化检测瘤组织Ki-67的表达。通过KEGG数据库初步分析Fox P4-AS1可能影响的信号通路。结果:q RT-PCR结果显示,与正常甲状腺滤泡上皮细胞比较,lnc RNA Fox P4-AS1在两种PTC细胞中的表达水平均明显降低(均P<0.05)。细胞功能实验显示,转染Fox P4-AS1过表达慢病毒载体的TPC-1、K1细胞增殖活力明显减弱、侵袭和迁移能力均较阴性对照组细胞明显降低,且细胞周期阻滞在G0/G1期(均P<0.01)。GEPIA数据库和Lnc Tar网站预测Fox P4-AS1与CDK4存在潜在的相互作用靶点,Western blot结果显示,转染Fox P4-AS1过表达慢病毒载体两种细胞的CDK4/cyclin D1表达水平较各自阴性对照组细胞明显降低(均P<0.05)。皮下移植瘤实验结果显示,转染Fox P4-AS1过表达慢病毒载体的PTC细胞较转染空载病毒载体的PTC细胞在小鼠体内生长慢,形成的瘤体小,且瘤组织中Ki-67表达减少。KEGG通路富集分析显示,Fox P4-AS1低表达主要富集于PI3K-Akt-m TOR通路、细胞周期、细胞凋亡、免疫调节相互作用,Fox P4-AS1高表达主要富集于DNA甲基� 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 RNA 长链非编码 细胞增殖 肿瘤浸润
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尿毒症患者继发甲状旁腺功能亢进症伴甲状腺乳头状癌1例并文献复习
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作者 陈星宏 赵代伟 +1 位作者 高庆军 张翊伦 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期499-502,共4页
继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism,SHPT)作为尿毒症患者的一个常见并发症,主要是由代谢紊乱引起的甲状旁腺增生,从而引起骨痛、皮肤瘙痒等临床症状。目前针对SHPT的治疗方法主要采用透析、药物及手术治疗。难治... 继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism,SHPT)作为尿毒症患者的一个常见并发症,主要是由代谢紊乱引起的甲状旁腺增生,从而引起骨痛、皮肤瘙痒等临床症状。目前针对SHPT的治疗方法主要采用透析、药物及手术治疗。难治性SHPT患者需行外科治疗[1]。术后会发生一定程度的低钙血症、高钾血症、复发、甲状旁腺功能降低等并发症,若不及时处理则会导致严重后果。 展开更多
关键词 甲状旁腺增生 甲状腺乳头状癌 尿毒症患者 继发性甲状旁腺功能亢进症 高钾血症 常见并发症 甲状旁腺功能 皮肤瘙痒
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