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兰科药用植物杜鹃兰的研究进展 被引量:8
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作者 韦红边 吕享 +1 位作者 高晓峰 张明生 《贵州农业科学》 CAS 2017年第7期88-92,共5页
杜鹃兰为兰科珍稀药用植物,具有清热解毒、润肺止咳、活血止痛、消肿散结等功效。为杜鹃兰药用植物资源的保护及开发利用提供参考,从物种特性、繁殖方式、化学成分和药理作用等方面对杜鹃兰的研究进展进行归纳总结,对其今后研究方向进... 杜鹃兰为兰科珍稀药用植物,具有清热解毒、润肺止咳、活血止痛、消肿散结等功效。为杜鹃兰药用植物资源的保护及开发利用提供参考,从物种特性、繁殖方式、化学成分和药理作用等方面对杜鹃兰的研究进展进行归纳总结,对其今后研究方向进行展望。 展开更多
关键词 杜鹃兰 物种特性 繁殖方式 化学成分 药理作用
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影响狐臭柴扦插繁殖成活率的主要因素研究 被引量:8
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作者 颜跃跃 张明生 +2 位作者 王汪中 李小兰 黄图成 《中药材》 CAS 北大核心 2017年第6期1270-1273,共4页
目的:筛选并优化适于狐臭柴扦插繁殖的主要条件,探索其扦插繁殖的有效技术。方法:以一年生狐臭柴为试验材料,首先进行单因素试验,研究不同扦插材料来源、扦插时期、不同植物生长调节物质及其浓度对扦插成活率的影响。然后进行正交试验,... 目的:筛选并优化适于狐臭柴扦插繁殖的主要条件,探索其扦插繁殖的有效技术。方法:以一年生狐臭柴为试验材料,首先进行单因素试验,研究不同扦插材料来源、扦插时期、不同植物生长调节物质及其浓度对扦插成活率的影响。然后进行正交试验,优化不同生长素和细胞分裂素及浸泡时间组合。结果:单因素试验结果表明,狐臭柴扦插适宜的材料为中度遮光下的枝条,适宜扦插时期为芽休眠期,200和400 mg/L 6-BA及200 mg/L NAA能显著提高扦插成活率。正交试验优化后的插穗处理方法为300 mg/L 6-BA+200 mg/L NAA的溶液中浸泡1 h。结论:在狐臭柴芽休眠期剪取中度遮光条件下的枝条为插条,将修剪好的插穗基部置于300 mg/L 6-BA+200 mg/L NAA的溶液中浸泡1 h后扦插,其成活率高达88.33%,且平均根长最长、平均根数最多,生长情况较好。 展开更多
关键词 狐臭柴 扦插 成活率 植物生长调节物质
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杜仲EuABCF1基因克隆及表达分析 被引量:5
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作者 王磊 赵懿琛 +1 位作者 李义 赵德刚 《植物生理学报》 CSCD 北大核心 2021年第7期1401-1409,共9页
ABC转运蛋白参与调节植物体内的多种生理过程,本研究从杜仲(Eucommia ulmoides)中克隆得到EuABCF1基因,并对其表达及功能进行研究。EuABCF1基因ORF序列长1809 bp,编码602个氨基酸,相对分子质量67 kDa,等电点6.38,有2个核苷酸结合域,不... ABC转运蛋白参与调节植物体内的多种生理过程,本研究从杜仲(Eucommia ulmoides)中克隆得到EuABCF1基因,并对其表达及功能进行研究。EuABCF1基因ORF序列长1809 bp,编码602个氨基酸,相对分子质量67 kDa,等电点6.38,有2个核苷酸结合域,不具有跨膜域和信号肽,属于稳定亲水性蛋白。进化树分析表明,杜仲EuABCF1蛋白与其他物种ABCF1蛋白有一定的同源性,其中与毛果杨(Populus trichocarpa)的ABCF1蛋白亲缘性较近。基因表达分析发现EuABCF1基因在杜仲雄花、根、茎、叶中等不同组织中均有表达,在雄花中表达量最高。在4°C处理下,EuABCF1基因在杜仲叶中的相对表达量呈现先下降后上升;EuABCF1表达对400μmol·L-1 IAA和100μmol·L-1 MeJA也有响应,本研究结果表明杜仲EuABCF1基因可能直接或间接参与IAA、MeJA信号转导及杜仲冷应答。 展开更多
关键词 杜仲 ABC转运蛋白 基因克隆 表达分析
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花椒几丁质酶基因ZaCHIT1的原核表达及纯化
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作者 杨德奕 毛俊文 +1 位作者 赵德刚 赵懿琛 《种子》 北大核心 2021年第12期19-25,共7页
花椒中含有的几丁质酶基因ZaCHIT1在植物病程中诱导相关蛋白表达,在植物对抗真菌病害过程中起重要作用。本研究将原核表达载体pMCSG19-ZaCHIT1转化到大肠杆菌BL 21(DE 3)菌株中,之后进行IPTG诱导表达并从诱导温度、时长和IPTG浓度3个方... 花椒中含有的几丁质酶基因ZaCHIT1在植物病程中诱导相关蛋白表达,在植物对抗真菌病害过程中起重要作用。本研究将原核表达载体pMCSG19-ZaCHIT1转化到大肠杆菌BL 21(DE 3)菌株中,之后进行IPTG诱导表达并从诱导温度、时长和IPTG浓度3个方面检测对ZaCHIT 1重组蛋白表达的影响,以获得最优体系,最优体系为诱导温度37℃、IPTG浓度为1 mmol·L^(-1)、诱导时长为14 h。进一步离心后分析各组分发现,ZaCHIT 1重组蛋白多以可溶性蛋白形式存在。利用Ni-NTA亲和层析纯化方法对ZaCHIT 1重组蛋白进行纯化,发现在经过300 mmol·L^(-1)咪唑洗脱液洗脱后的洗脱组分中的ZaCHIT 1重组蛋白表达浓度最大。经Western Blot鉴定发现,在77.51 kDa处有符合ZaCHIT 1重组蛋白大小的特异性条带出现。本研究将为后续研究ZaCHIT1基因在植物中的抗菌作用机制及结构提供依据。 展开更多
关键词 花椒 几丁质酶 原核表达 可溶性蛋白
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杜仲糖基转移酶基因EuCGT1克隆及序列分析 被引量:7
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作者 李永捷 董旋 赵德刚 《山地农业生物学报》 2014年第4期27-35,共9页
本研究以杜仲(Eucommia ulmoides)7月雌株新生幼枝的树皮为材料,根据杜仲转录组测序数据中筛选的一个糖基转移酶基因(CGT)片段信息设计引物,采用SMART RACE技术,克隆了5’-端1432bp和3’-端535 bp cDNA片段,测序拼接后获得全长1 583 bp... 本研究以杜仲(Eucommia ulmoides)7月雌株新生幼枝的树皮为材料,根据杜仲转录组测序数据中筛选的一个糖基转移酶基因(CGT)片段信息设计引物,采用SMART RACE技术,克隆了5’-端1432bp和3’-端535 bp cDNA片段,测序拼接后获得全长1 583 bp的杜仲CGT的cDNA序列。分析结果表明,该cDNA开放阅读框长1 464 bp,编码487个氨基酸,命名为EuGT基因。EuGT在NCBI中经blastn比对,显示序列与甜橙和草莓的UDP-葡萄糖基转移酶基因同源性分别为72%和67%;推测的氨基酸序列经blastp和CDD比对,显示序列与UDP-葡萄糖类黄酮3-O-糖基转移酶-6同源,其中含有UDP-葡萄糖基转移酶的保守域(pfam00201),初步推测EuCGT1蛋白属于糖基转移酶家族。本研究克隆的EuGT基因是首次从杜仲中克隆的糖基转移酶家族基因。以EuCGT1基因构建的植物表达载体pSH-35S-EuCGT1采用农杆菌介导法遗传转化烟草,获得了含EuCGT1基因的转基因烟株,移栽生长1个月的转基因烟草植株在表型上与野生型烟草无明显差异。 展开更多
关键词 杜仲 糖基转移酶 RACE技术
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农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化研究及转TPS1基因和VlmybA2基因玉米鉴定 被引量:7
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作者 安立昆 赵德刚 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期578-584,共7页
本研究以优良玉米自交系交51为材料,通过农杆菌介导的茎尖转化将海藻糖-6-磷酸合成酶基因TPS1和葡萄花青素调控基因VlmybA2转入玉米中。确立了最佳的除草剂Basta筛选浓度,研究了不同真空渗透压、农杆菌液浓度、侵染时间等因素在转化过... 本研究以优良玉米自交系交51为材料,通过农杆菌介导的茎尖转化将海藻糖-6-磷酸合成酶基因TPS1和葡萄花青素调控基因VlmybA2转入玉米中。确立了最佳的除草剂Basta筛选浓度,研究了不同真空渗透压、农杆菌液浓度、侵染时间等因素在转化过程中对玉米植株存活率的影响。结果表明80 mg/L除草剂Basta为最佳筛选浓度,真空渗透压为60 kPa、农杆菌液浓度OD600为0.8、侵染时间为8 min时是最佳转化条件,经过GUS组织化学染色和PCR检测,证明TPS1基因和VlmybA2基因已经整合到玉米基因组中。 展开更多
关键词 玉米 茎尖 农杆菌 TPS1基因 VlmybA2基因
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杜仲EuFLC1基因克隆与生物信息学分析 被引量:5
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作者 高源隆 董旋 赵德刚 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期836-844,共9页
以杜仲(Eucommia ulmoides Olive)雄花花芽为材料,依靠实验室构建的杜仲转录组库,采用cDNA末端快速扩增法克隆了3'端包含完整开放阅读框的745bpcDNA序列。经3'RACE产物和转录组库中5'端序列拼接,获得全长为872bp的杜仲FLC的... 以杜仲(Eucommia ulmoides Olive)雄花花芽为材料,依靠实验室构建的杜仲转录组库,采用cDNA末端快速扩增法克隆了3'端包含完整开放阅读框的745bpcDNA序列。经3'RACE产物和转录组库中5'端序列拼接,获得全长为872bp的杜仲FLC的cDNA序列,编码86个氨基酸,命名为EuFLC1。生物信息学分析显示:EuFLC1蛋白分子量约为10.005 kD,理论等电点为10.47,为亲水性蛋白;存在3个可能的磷酸化位点、1个可能的核定位信号和1个可能的核输出信号;不存在跨膜螺旋和信号肽;蛋白二级结构中包含2个α螺旋和4个β折叠,无规卷曲连接α螺旋及β折叠;蛋白三级结构同源建模结果表明,EuFLC1蛋白包含2个互相垂直的α螺旋,α螺旋间有2个处于同一平面的β折叠,蛋白的N端和C端为无规卷曲并伸向整体结构的一侧;是含有MEF2_like型MADS-box结构域的MADS-Box基因。Blastp结果中,与EuFLC1同源性较高的序列有:葡萄的floweringlocus C、小粒种咖啡的MADS-box protein FLC subfamily、巨峰葡萄的flowering locus C-like MADS-box protein,因此认为EuFLC1是杜仲FLC基因。系统发育树表明杜仲与同属唇形类植物的小粒咖啡聚为一支,与APGⅢ分类系统的分类结果一致。该基因为首次从第三纪孑遗植物杜仲中克隆到的MADS-Box基因,为研究MADS-Box基因的演化的提供了一个重要材料,为研究杜仲开花时间的分子调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 杜仲 EuFLC1 克隆 生物信息学分析
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