目的探讨人胃癌细胞中β-内酰胺酶基因(LACTB)不同转录本的表达特点。方法取对数期生长的人正常胃黏膜细胞株(GES-1)、不同分化程度胃癌细胞株[AGS(高分化)、MKN-28(中分化)、MKN-45(低分化)]及HGC-27(未分化)提取RNA,采用反转录PCR(RT-...目的探讨人胃癌细胞中β-内酰胺酶基因(LACTB)不同转录本的表达特点。方法取对数期生长的人正常胃黏膜细胞株(GES-1)、不同分化程度胃癌细胞株[AGS(高分化)、MKN-28(中分化)、MKN-45(低分化)]及HGC-27(未分化)提取RNA,采用反转录PCR(RT-PCR)、巢式PCR、original TA cloning kit(T-A)克隆方法及DNA测序确定各细胞中LACTB表达的转录本类型,采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LACTB不同转录本在胃癌细胞中的表达水平。结果在胃癌细胞株中检测到LACTB的3个转录本;以GES-1为对照,LACTB转录本1在AGS、MKN-28、MKN-45中高表达(P<0.05),在HGC-27中低表达(P<0.05);以GES-1为对照,转录本2在AGS、MKN-28、MKN-45、HGC-27中低表达(P<0.05),转录本3在MKN-28、MKN-45、HGC-27中低表达(P<0.05)。结论与正常胃黏膜细胞相比,胃癌细胞中LACTB转录本1表达水平增加、转录本2和3表达水平降低,转录本1可能是胃癌细胞分化的指标之一。展开更多
文摘目的探讨人胃癌细胞中β-内酰胺酶基因(LACTB)不同转录本的表达特点。方法取对数期生长的人正常胃黏膜细胞株(GES-1)、不同分化程度胃癌细胞株[AGS(高分化)、MKN-28(中分化)、MKN-45(低分化)]及HGC-27(未分化)提取RNA,采用反转录PCR(RT-PCR)、巢式PCR、original TA cloning kit(T-A)克隆方法及DNA测序确定各细胞中LACTB表达的转录本类型,采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LACTB不同转录本在胃癌细胞中的表达水平。结果在胃癌细胞株中检测到LACTB的3个转录本;以GES-1为对照,LACTB转录本1在AGS、MKN-28、MKN-45中高表达(P<0.05),在HGC-27中低表达(P<0.05);以GES-1为对照,转录本2在AGS、MKN-28、MKN-45、HGC-27中低表达(P<0.05),转录本3在MKN-28、MKN-45、HGC-27中低表达(P<0.05)。结论与正常胃黏膜细胞相比,胃癌细胞中LACTB转录本1表达水平增加、转录本2和3表达水平降低,转录本1可能是胃癌细胞分化的指标之一。
