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小鼠shRNA-Slfn3重组腺病毒载体的构建及其在EPCs中转染效率的测定
1
作者 辛晨 况春燕 刘兴德 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第9期1013-1019,1046,共8页
目的构建小鼠短发夹RNA(shRNA)-Schlafen3(Slfn3)重组腺病毒载体,并检测其在内皮祖细胞(EPCs)中的转染效率。方法采用GenBank基因软件查询小鼠Slfn3基因序列,设计并合成3个siRNA片段及其引物,取腺病毒干扰载体pADV-U6-shRNA-CMV-EGFP,... 目的构建小鼠短发夹RNA(shRNA)-Schlafen3(Slfn3)重组腺病毒载体,并检测其在内皮祖细胞(EPCs)中的转染效率。方法采用GenBank基因软件查询小鼠Slfn3基因序列,设计并合成3个siRNA片段及其引物,取腺病毒干扰载体pADV-U6-shRNA-CMV-EGFP,采用限制性内切酶进行酶切,线性化后连接siRNA片段,获得重组腺病毒载体shRNA-Slfn3,从中筛选阳性克隆抽提质粒,进行DNA测序验证;取对数生长期的人胚胎肾细胞HEK293,采用Admax系统将目的质粒转染至HEK293细胞,获得重组腺病毒shRNA-Slfn3后进行小量扩增及病毒滴度测定;取小鼠脾脏单个核细胞体外培养至对数期EPCs,用前述所得重组腺病毒shRNA-Slfn3对其进行转染48 h,采用绿色荧光蛋白量检测重组腺病毒的转染效率。结果测序验证3组目的质粒构建成功;获得shRNA-Slfn3重组腺病毒,病毒滴度分别为2.37×10^(13)pfu/L、3.16×10^(13)pfu/L及4.74×10^(13)pfu/L;EPCs转染效率为(63.64±2.58)%。结论成功构建了小鼠shRNA-Slfn3重组腺病毒载体,转染小鼠脾源EPCs后的转染效率较高。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 基因敲低技术 Slfn3基因 短发夹RNA 载体构建 包装
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血清25-羟维生素D_(3)水平与STEMI患者直接PCI术后恶性心律失常相关性研究 被引量：3
2
作者 田水 巫廷春 +1 位作者 田龙海 叶芸 《心脑血管病防治》 2021年第4期353-356,共4页
目的探讨血清25-羟维生素D_(3)[25-(OH)-D_(3)]水平与ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者直接经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后恶性室性心律失常(MVA)的关系。方法收集2016年3月至2019年3月在贵州省人民医院接受直接PCI治疗的STEMI患者90例进... 目的探讨血清25-羟维生素D_(3)[25-(OH)-D_(3)]水平与ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者直接经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后恶性室性心律失常(MVA)的关系。方法收集2016年3月至2019年3月在贵州省人民医院接受直接PCI治疗的STEMI患者90例进行回顾性研究,根据PCI术后48h是否发生MVA分为MVA组28例和非MVA组62例,比较两组间一般资料、实验室指标的差异,分析MVA的影响因素。结果MVA组多支病变的比例及入院后白细胞计数(WBC)、血糖(BG)、C反应蛋白(CRP)、脑钠肽(BNP)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的水平明显高于非MVA组,25-(OH)-D_(3)的水平明显低于非MVA组(χ^(2)/t=9.060、6.960、6.255、11.575、8.005、13.674、5.358、6.264,P<0.05);血清25-(OH)-D_(3)水平与病变支数及WBC、CRP、BNP、BG、cTnI、CK-MB水平均呈负相关(r=-0.251、-0.244、-0.342、-0.294、-0.384、-0.291、-0.310,P<0.05);多支病变及WBC、CRP、BNP增加及25-(OH)-D_(3)缺乏是MVA的危险因素(Wald=6.022、7.981、9.187、5.477、7.587,P<0.05)。结论血清25-(OH)-D_(3)水平减少能够增加STEMI患者直接PCI术后MVA的发生风险,且与病情、炎症反应激活、心功能变化有关。 展开更多
关键词 ST段抬高型心肌梗死 经皮冠状动脉介入术 恶性室性心律失常 25-羟维生素D_(3)
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C242T基因多态性与老年急性心肌梗死患者的相关性
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作者 田水 巫廷春 +1 位作者 田龙海 叶芸 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第10期2026-2028,共3页
目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶细胞色素p22phox亚基C242T基因多态性与老年急性心肌梗死(AMI)患者的相关性。方法回顾性分析老年AMI患者126例为病例组,同期健康体检者132例为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片... 目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶细胞色素p22phox亚基C242T基因多态性与老年急性心肌梗死(AMI)患者的相关性。方法回顾性分析老年AMI患者126例为病例组,同期健康体检者132例为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测两组C242T基因多态性位点的基因型和等位基因,分析C242T基因多态性与老年AMI的相关性。结果病例组心率、三酰甘油、白细胞计数、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血浆氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)、血浆氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、丙二醛水平和NADPH氧化酶活性高于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);病例组平均舒张压、空腹血糖及肌钙蛋白水平显著高于对照组(P<0.05);病例组CT+TT基因型携带者高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);病例组TT、CT基因型频率和T等位基因频率明显高于对照组,而CC基因型频率和C等位基因频率明显低于对照组(P<0.05);丙二醛、ox-HDL、ox-LDL、NADPH氧化酶活性与C242T基因型相关(P<0.05)。结论C242T基因多态性与老年AMI患者存在相关性。 展开更多
关键词 C242T基因多态性 急性心肌梗死 基因多态性
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