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荧光RT-PCR快速检测禽流感病毒H5亚型的研究 被引量:39
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作者 朱文斯 赖平安 +2 位作者 黄茜华 张鹤晓 杨伟 《中国医药导刊》 2003年第1期27-30,共4页
本研究根据禽流感病毒H5亚型的RNA4节段,设计、合成多对引物、探针,并通过筛选获得灵敏度、特异性好的组合,在此基础上对荧光RT-RCR反应体系中的各组分进行优化,并建立对各种禽类样品中病毒核酸的提取方法。通过对阳性鸡胚尿囊液及人工... 本研究根据禽流感病毒H5亚型的RNA4节段,设计、合成多对引物、探针,并通过筛选获得灵敏度、特异性好的组合,在此基础上对荧光RT-RCR反应体系中的各组分进行优化,并建立对各种禽类样品中病毒核酸的提取方法。通过对阳性鸡胚尿囊液及人工攻毒的SPF鸡、肉鸡、肉鸭的各脏器进行检测,并与传统鸡胚病毒分离进行对比,显示该方法与传统鸡胚病毒分离灵敏度接近,但检测时间由原来的21天缩短为4小时。 展开更多
关键词 荧光RT-PCR 快速检测 禽流感病毒H5亚型 研究 传染病
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植原体TaqMan探针实时荧光PCR检测鉴定方法的建立 被引量:39
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作者 廖晓兰 朱水芳 +5 位作者 陈红运 黄文胜 罗宽 赵文军 马荣群 朱建裕 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期361-367,共7页
本研究成功建立了植原体分类鉴定和检测的 Taq Man探针实时荧光 PCR方法 ,该方法根据植原体 16S r DNA保守区设计了 1个 Taq Man广谱探针和 3个植原体组间点突变特异性探针 ,并对 9种植原体和 5种细菌以及 3个植物样本进行实时荧光 PCR... 本研究成功建立了植原体分类鉴定和检测的 Taq Man探针实时荧光 PCR方法 ,该方法根据植原体 16S r DNA保守区设计了 1个 Taq Man广谱探针和 3个植原体组间点突变特异性探针 ,并对 9种植原体和 5种细菌以及 3个植物样本进行实时荧光 PCR。结果表明 ,用广谱探针可检测到所有植原体产生荧光信号 ,而细菌不产生荧光信号。当用植原体组间特异性探针检测时 ,仅能检测到该组植原体产生荧光信号 ,检测的敏感性比常规的 PCR-电泳检测高约 10 0倍、检测速度有较大提高。由于PCR产物是荧光探针检测 ,本方法特异性强 ,并可以用组特异探针直接确定植原体种类。实验采用完全闭管检测 ,降低了污染机会。本研究为其它原核生物、特别是不能培养菌。 展开更多
关键词 植原体 TAQMAN探针 实时荧光 PCR 检测鉴定方法
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风险预警系统的一般理论研究 被引量:33
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作者 黄冠胜 林伟 +1 位作者 王力舟 徐战菊 《中国标准化》 2006年第3期9-11,共3页
作为科技部“十五”重大科技专项《技术性贸易措施战略与预警工程方案》的子课题之一,“质检系统技术性贸易措施的技术预警与快速反应系统的研究”已由国家质检总局标准法规中心完成。课题组研究了风险预警系统的一般理论,创建了技术性... 作为科技部“十五”重大科技专项《技术性贸易措施战略与预警工程方案》的子课题之一,“质检系统技术性贸易措施的技术预警与快速反应系统的研究”已由国家质检总局标准法规中心完成。课题组研究了风险预警系统的一般理论,创建了技术性贸易措施的风险评价体系,设定了技术性贸易措施风险预警与快速反应系统的框架,建立并试运行了进出境商品检验检疫风险预警与快速反应系统。本专栏中的七篇论文反映了上述研究成果。 展开更多
关键词 风险预警 预警系统 理论研究 技术性贸易措施 快速反应系统 国家质检总局 工程方案 质检系统 标准法规 评价体系
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水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌的实时荧光PCR快速检测鉴定 被引量:33
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作者 廖晓兰 朱水芳 +2 位作者 赵文军 罗宽 漆艳香 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期626-634,共9页
成功建立了水稻白叶枯菌与水稻细菌性条斑病菌快速检测鉴定的实时荧光PCR方法。根据含铁细胞接受子基因设计两菌的通用引物PSRGF PSRGR(扩增一个 1 5 2bpDNA片段 )和特异性探针 (Baiprobe和Tiaoprobe) ,并对 1 3种细菌和 1种植原体进行... 成功建立了水稻白叶枯菌与水稻细菌性条斑病菌快速检测鉴定的实时荧光PCR方法。根据含铁细胞接受子基因设计两菌的通用引物PSRGF PSRGR(扩增一个 1 5 2bpDNA片段 )和特异性探针 (Baiprobe和Tiaoprobe) ,并对 1 3种细菌和 1种植原体进行实时荧光PCR。结果表明 ,两个特异性探针能分别特异性检测到目标病原菌产生荧光信号而其它参考菌不产生荧光信号。检测的绝对灵敏度是 3 0 .6fg μL质粒DNA和 1 0 3CFU mL的菌悬浮液 ,相当于 1个细菌细胞的基因 ,比常规PCR电泳检测高约 1 0 0倍 ,相对灵敏度为 1 0 5CFU mL。整个检测过程只需 2h ,完全闭管 ,降低了污染的机会 ,无需PCR后处理。用这两个特异性探针分别对自然感染白叶枯菌和条斑菌的叶片DNA提取液和种子浸泡液进行实时荧光PCR ,结果均可特异性检测到目标菌的存在并完全可将两种病原细菌区分开来 ,且只需 0 3g叶片和 1 展开更多
关键词 水稻白叶枯病菌 水稻细菌性条斑病菌 实时荧光PCR 检测
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从口岸截获疫情浅析外来昆虫入侵特点和防范对策 被引量:33
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作者 施宗伟 姚文国 《昆虫知识》 CSCD 北大核心 2004年第4期371-374,共4页
从我国口岸截获外来昆虫比例高以及入侵昆虫危害严重情况 ,论述了昆虫是外来生物入侵的主要物种 ;并从昆虫的独特性 ,分析了外来昆虫传播途径多 ,入侵成功率高的原因 ,并提到相应的防范对策。
关键词 外来昆虫 传播途径 入侵 物种 生物多样性
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桔小实蝇分子生物学研究进展 被引量:31
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作者 李志红 龚鹏 +1 位作者 陈洪俊 陈乃中 《植物检疫》 北大核心 2002年第3期165-166,共2页
桔小实蝇是我国重要的检疫性有害生物。本文在概述桔小实蝇的危害及检疫现状的基础上,对国内外分子生物学技术在桔小实蝇中的应用研究进行了分析,并就我国桔小实蝇的分子鉴定及种群分化研究进行了初步探讨。
关键词 植物检疫 桔小实蝇 分子鉴定 种群分化 分子生物学 果树虫害
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植物病毒检测新技术研究进展 被引量:21
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作者 商明清 魏梅生 《植物检疫》 北大核心 2004年第4期236-240,共5页
本文主要介绍了酶联免疫吸附测定、快速免疫滤纸测定、免疫胶体金技术、毛细管区带电泳、免疫PCR等血清学方法和PCR、分子信标、实时RT PCR、核酸杂交等分子生物学方法的原理及特点 ,并重点介绍了近几年发展起来的免疫胶体金技术、毛细... 本文主要介绍了酶联免疫吸附测定、快速免疫滤纸测定、免疫胶体金技术、毛细管区带电泳、免疫PCR等血清学方法和PCR、分子信标、实时RT PCR、核酸杂交等分子生物学方法的原理及特点 ,并重点介绍了近几年发展起来的免疫胶体金技术、毛细管区带电泳、分子信标和TaqMan 实时RT PCR等植物病毒检测技术。 展开更多
关键词 植物病毒 检测 免疫胶体金技术 免疫毛细管区带电泳 分子信标
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压力容器风险评估技术在国家安全技术规范中的采用 被引量:35
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作者 陈学东 艾志斌 +7 位作者 李景辰 顾望平 寿比南 贾国栋 谢铁军 陈钢 王晓雷 高继轩 《压力容器》 北大核心 2008年第12期1-4,共4页
在即将颁布的国家安全技术规范"固定式压力容器安全技术监察规程"中采用了承压设备风险评估技术,受规范编制组委托,本文结合近十年国内外风险评估技术研究与应用实践,就规范中的相关条款做一简要说明。
关键词 压力容器 风险评估 安全技术规范
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苜蓿萎蔫病菌Taq Man探针实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:24
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作者 漆艳香 赵文军 +3 位作者 朱水芳 肖启明 廖晓兰 陈红运 《植物检疫》 北大核心 2003年第5期260-264,共5页
苜蓿萎蔫病菌是我国对外检疫性二类有害生物 ,目前国内尚无发生。在出入境检验检疫中主要是采用生物学和血清学方法进行检测 ,劳动强度大 ,耗费时间长。根据苜蓿萎蔫病菌与其它细菌菌株 1 6SrDNA序列差异 ,设计出对苜蓿萎蔫病菌具有稳... 苜蓿萎蔫病菌是我国对外检疫性二类有害生物 ,目前国内尚无发生。在出入境检验检疫中主要是采用生物学和血清学方法进行检测 ,劳动强度大 ,耗费时间长。根据苜蓿萎蔫病菌与其它细菌菌株 1 6SrDNA序列差异 ,设计出对苜蓿萎蔫病菌具有稳定点突变特异性探针 ,利用该探针对棒形杆菌属 4个种及其它属细菌进行了实时荧光PCR检测实验。结果表明 ,只有苜蓿萎蔫病菌能检测到荧光信号 ,其它细菌没有荧光产生。该方法特异性强 ,灵敏度高 ,能检测到 2 1 4fg质粒DNA ,比常规PCR灵敏 1 0 0倍 ,而且整个过程只需要 2~ 3h。该方法可有效地应用于进出境病原菌检测之中。 展开更多
关键词 中国 苜蓿萎蔫病菌 TAQMAN探针 实时荧光PCR检测 出入境捡验检疫
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基因芯片技术快速检测SARS病毒 被引量:22
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作者 周琦 赖平安 +6 位作者 汪琳 黄文胜 朱水芳 李明福 吴小兵 何新舟 任鲁峰 《检验检疫科学》 2003年第5期33-36,共4页
以SARS冠状病毒TOR2株序列为设计标准 ,研制出用于检测SARS病毒的全基因芯片 ,芯片探针长度为 70nt,相邻探针序列重复 2 5nt,共 6 6 0条病毒探针 ,覆盖了SARS冠状病毒的全部序列 ,另外设计了内对照探针和阴性对照探针。应用该基因芯片... 以SARS冠状病毒TOR2株序列为设计标准 ,研制出用于检测SARS病毒的全基因芯片 ,芯片探针长度为 70nt,相邻探针序列重复 2 5nt,共 6 6 0条病毒探针 ,覆盖了SARS冠状病毒的全部序列 ,另外设计了内对照探针和阴性对照探针。应用该基因芯片对病人、出入境食品、动植物及其产品进行检测 ,结果表明基因芯片技术检测SARS冠状病毒灵敏度高、特异性强、准确性好 ,稳定快速 ,在检验检疫中应用是可行的。 展开更多
关键词 SARS冠状病毒 TOR2株序列 全基因芯片 检验检疫
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梨火疫细菌实时荧光PCR和诱捕PCR-ELISA检测方法的建立 被引量:18
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作者 朱建裕 廖晓兰 +3 位作者 高必达 朱水芳 陈红运 戴富泉 《植物检疫》 北大核心 2003年第1期7-10,共4页
根据梨火疫细菌中独特而保守存在的质粒pEA2 9,设计了 1对引物和 3条探针 ,建立了实时荧光PCR检测方法和诱捕PCR ELISA检测方法。实时荧光PCR采用带荧光标记的核酸杂交探针 ,边扩增边检测 ,步骤简单 ,不需PCR后处理 ,可避免假阳性和交... 根据梨火疫细菌中独特而保守存在的质粒pEA2 9,设计了 1对引物和 3条探针 ,建立了实时荧光PCR检测方法和诱捕PCR ELISA检测方法。实时荧光PCR采用带荧光标记的核酸杂交探针 ,边扩增边检测 ,步骤简单 ,不需PCR后处理 ,可避免假阳性和交叉污染 ;诱捕PCR ELISA检测方法只需简单处理的样品就能检测 ,减少了核酸不纯出现的漏检 ,由于增加了核酸杂交探针 ,可不需凝胶电泳EB染色检测 ,不会出现假阳性问题。 展开更多
关键词 梨火疫细菌 实时荧光PCR 检测方法 聚合酶链式反应 诱捕PCCR-ELISA
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我国现行真菌毒素检测标准概述 被引量:26
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作者 王文珺 孙双艳 +2 位作者 叶金 王松雪 桑华春 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第4期837-847,共11页
真菌毒素污染是一个世界性的公共安全问题,也是我国食品安全监管的重点,近年来我国多次修订该类标准。真菌毒素检测标准数量众多,标准的制定发展迅速。本文系统的描述了我国现行有效的各类真菌毒素检测标准:国家标准(GB)、行业标准(LS... 真菌毒素污染是一个世界性的公共安全问题,也是我国食品安全监管的重点,近年来我国多次修订该类标准。真菌毒素检测标准数量众多,标准的制定发展迅速。本文系统的描述了我国现行有效的各类真菌毒素检测标准:国家标准(GB)、行业标准(LS、NY、SN)及部分地方标准,通过对这些标准的检测方法和检出限的阐述和分析,从应用和市场的角度提出了一些建议和看法,以期能为质检部门监管及企业自检提供科学依据,同时,希望为我国标准的修订提供参考性建议。 展开更多
关键词 真菌毒素 限量 检测标准
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转基因食品检验分析技术概述 被引量:22
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作者 姚文国 朱水芳 《粮油食品科技》 2003年第1期26-28,共3页
随着转基因产品的出现,人们对其安全性愈来愈重视。转基因产品在研究、生产和销售的过程中,存在各种转基因产品扩散、污染及安全隐患,因此对转基因产品的检测监管是非常必要的。本文详细介绍了国内转基因产品的检验分析技术,对指导转基... 随着转基因产品的出现,人们对其安全性愈来愈重视。转基因产品在研究、生产和销售的过程中,存在各种转基因产品扩散、污染及安全隐患,因此对转基因产品的检测监管是非常必要的。本文详细介绍了国内转基因产品的检验分析技术,对指导转基因产品的检测具有重要的意义。 展开更多
关键词 转基因食品 检验分析技术 安全性
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外来生物入侵及其国境控制体系构想 被引量:22
14
作者 朱水芳 陈乃中 +1 位作者 李伟才 张艺兵 《植物检疫》 北大核心 2004年第1期32-36,共5页
关键词 外来生物 入侵 国境控制体系 动植物检疫
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玉米细菌性枯萎病菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:20
15
作者 漆艳香 朱水芳 +2 位作者 赵文军 肖启明 廖晓兰 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期51-56,共6页
成功建立了玉米细菌性枯萎病菌快速检测鉴定的实时荧光PCR方法。该方法根据细菌16S rDNA序列的特异性,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变特异性探针,并对10种细菌菌株和5种植原体进行了实时荧光PCR。结果表明,只有玉米细菌性... 成功建立了玉米细菌性枯萎病菌快速检测鉴定的实时荧光PCR方法。该方法根据细菌16S rDNA序列的特异性,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变特异性探针,并对10种细菌菌株和5种植原体进行了实时荧光PCR。结果表明,只有玉米细菌性枯萎病菌产生荧光信号,而其它参考菌不产生荧光信号,检测的绝对灵敏度是14.2 fg/μl质粒DNA,比常规的PCR电泳检测高约100倍。整个检测过程只需2h,完全闭管,降低了污染的机会,无须PCR后处理。 展开更多
关键词 玉米 细菌性枯萎病菌 TAQMAN探针 实时荧光PCR 检测方法 细菌性枯萎病
原文传递
完善口岸公共卫生体系 保障国门生物安全 被引量:22
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作者 张际文 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2016年第3期153-157,共5页
在非传统安全问题日益突出的新形势下,生物安全成为国家安全体系的重要组成部分。本文分析了生物安全风险的多种表现形式和我国目前面临的生物安全问题,以及我国口岸公共卫生管理现状不适应形势发展需要的主要表现,提出建立完善口岸公... 在非传统安全问题日益突出的新形势下,生物安全成为国家安全体系的重要组成部分。本文分析了生物安全风险的多种表现形式和我国目前面临的生物安全问题,以及我国口岸公共卫生管理现状不适应形势发展需要的主要表现,提出建立完善口岸公共卫生体系,包括国境口岸疾病预防控制体系、突发公共卫生事件应急管理体系、口岸卫生监督管理体系、国际旅行健康服务体系和口岸核生化有害因子监测体系共5个子体系,更好地保障国门生物安全。 展开更多
关键词 公共卫生 生物安全 口岸
原文传递
玉米细菌性枯萎病菌16S rDNA基因克隆及TaqMan探针实时荧光PCR 被引量:14
17
作者 漆艳香 肖启明 朱水芳 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期183-187,共5页
为给农业和植物检疫部门提供一种特异性强、灵敏度高,可以快速、直接检测植物病原菌的方法,将玉米细菌性枯萎病菌16SrDNA基因克隆测序,根据该细菌与其他细菌菌株16SrDNA序列差异,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定点突变的特异性探针... 为给农业和植物检疫部门提供一种特异性强、灵敏度高,可以快速、直接检测植物病原菌的方法,将玉米细菌性枯萎病菌16SrDNA基因克隆测序,根据该细菌与其他细菌菌株16SrDNA序列差异,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定点突变的特异性探针,除泛菌属3个种和欧氏菌属3个种外,还对假单胞菌属1个种,黄单胞菌属1个种,棒形杆菌属1个种,短小杆菌属1个种以及5种植原体进行了实时荧光PCR检测.结果表明:只有玉米细菌性枯萎病菌产生荧光,其他细菌和植原体都没有荧光产生.检测的灵敏度为104CFU/mL的菌悬浮液,相当于4个细菌细胞的基因,灵敏度高,也就是说,反应体系中只要有2个活细菌,实时荧光PCR就能检测到.相对灵敏度为107CFU/mL,而且整个检测过程只需2h,由于实验采用独特全封闭反应管及光电传导系统,不用凝胶电泳,降低了污染. 展开更多
关键词 玉米细菌性枯萎病菌 16S RDNA TAQMAN探针
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植原体的分类及分子生物学研究进展 被引量:16
18
作者 廖晓兰 罗宽 朱水芳 《植物检疫》 北大核心 2002年第3期167-172,共6页
植原体(Phytoplasma),原称类菌原体(Mycoplasma-Like organism,MLO),在植物和昆虫中广泛分布,能引起许多重要的粮食作物、蔬菜和果树以及观赏植物、林木树和林荫树的严重病害,造成巨大损失。
关键词 植原体 分类 分子生物学 病害防治 植物病害
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国家质检总局关于2014年全国特种设备安全状况情况的通报 被引量:21
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作者 国家质检总局网站 《中国特种设备安全》 2015年第5期1-5,共5页
根据《中华人民共和国特种设备安全法》《特种设备安全监察条例》的规定,现将2014年全国特种设备安全状况公布如下。1特种设备基本情况1.1特种设备登记数量情况截至2014年底,全国特种设备总量达1036.46万台,较2013年上升10.63%;其中:锅... 根据《中华人民共和国特种设备安全法》《特种设备安全监察条例》的规定,现将2014年全国特种设备安全状况公布如下。1特种设备基本情况1.1特种设备登记数量情况截至2014年底,全国特种设备总量达1036.46万台,较2013年上升10.63%;其中:锅炉63.89万台,压力容器322.79万台,电梯359.85万台,起重机械226.26万台,场(厂)内专用机动车辆61.66万辆,大型游乐设施1.92万台(套),客运索道925条。另有:气瓶14250万只,压力管道92.47万公里。 展开更多
关键词 设备安全 起重机械 客运索道 大型游乐设施 机动车辆 安全附件 压力管道 行政许可 检验机构 特种设备检验
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政府办公自动化系统的设计、实现和应用 被引量:11
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作者 王连印 余师孟 +4 位作者 林德康 王寅 丰苏 赵阳 陆春明 《计算机工程与设计》 CSCD 2003年第6期78-80,88,共4页
政府办公自动化是电子政务系统的一个重要组成部分,实现政府办公自动化是提高办公质量和效率、促进政务公开的一个重要手段。以国家质量监督检验检疫总局办公自动化系统为原型,阐述了政府办公自动化系统的设计和实现方法,描述了系统的... 政府办公自动化是电子政务系统的一个重要组成部分,实现政府办公自动化是提高办公质量和效率、促进政务公开的一个重要手段。以国家质量监督检验检疫总局办公自动化系统为原型,阐述了政府办公自动化系统的设计和实现方法,描述了系统的功能和特点,介绍了推广应用措施和效果。 展开更多
关键词 办公自动化系统 设计 电子政务 政府 办事效率 办事管理
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