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流式细胞仪分离工作犬XY精子的研究 被引量:8
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作者 韦云芳 张跃骏 +8 位作者 唐树生 陈方良 程鲁光 黎立光 刘庆 杜晓鹏 毛爱国 汪斌 万九生 《安徽农业科学》 CAS 2015年第9期95-98,123,共5页
[目的]探索适用于犬性别控制的流式细胞仪分离精子的方法。[方法]采集昆明犬和德国牧羊犬的精液,采用不同浓度(6、8、10、12μl/ml)的Hoechst 33342对精液进行染色,探讨不同浓度的荧光染料Hoechst 33342及公犬个体对精子分离效果的影响... [目的]探索适用于犬性别控制的流式细胞仪分离精子的方法。[方法]采集昆明犬和德国牧羊犬的精液,采用不同浓度(6、8、10、12μl/ml)的Hoechst 33342对精液进行染色,探讨不同浓度的荧光染料Hoechst 33342及公犬个体对精子分离效果的影响。[结果]当Hoechst 33342浓度分别为6、8、10μl/ml时,X和Y精子的DNA差异不能被分辨成双峰,只有当Hoechst 33342为12μl/ml时,X/Y双峰能有效并稳定地分离。不同公犬的鲜精死精率与X/Y精子分离速度呈明显负相关性,而分离准确率则与鲜精死精率无明显相关性。[结论]当Hoechst 33342浓度为12μl/ml时,流式细胞仪能将警犬X、Y精子成功分离。选择适宜的种公犬对提高精子的分离效率和分离精液的品质都有重要意义。 展开更多
关键词 流式细胞仪 XY精子分离 性别控制
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昆明犬IGF1基因在肝脏中的表达特征及遗传多样性分析
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作者 韦云芳 李飞翔 +2 位作者 汪斌 陈方良 魏红江 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第4期108-114,共7页
为了探究IGF1基因在不同生长发育阶段昆明犬肝脏中的表达特征,并筛选与昆明犬体重和体尺性状相关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,试验首先采用实时荧光定量PCR方法检测IGF1基因在不同年龄段昆明犬肝脏中的m... 为了探究IGF1基因在不同生长发育阶段昆明犬肝脏中的表达特征,并筛选与昆明犬体重和体尺性状相关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,试验首先采用实时荧光定量PCR方法检测IGF1基因在不同年龄段昆明犬肝脏中的mRNA表达水平,然后分别针对IGF1基因5′和3′侧翼序列、外显子1~4和内含子1设计引物,采用PCR-单链构象多态性(SSCP)技术对昆明犬IGF1基因单核苷酸多态性(SNP)位点进行筛查,通过测序分析其突变情况,统计该SNP位点的基因型频率和基因频率及遗传多样性指标[纯合度(homozygosity,Ho)、杂合度(heterozygosity,He)和有效等位基因数(number of effective alleles,Ne)],最后分析该SNP位点与昆明犬体重和体尺性状的关联性。结果表明:IGF1基因在5个年龄段的昆明犬肝脏中均有表达,且表达量随着月龄的增大呈现逐渐下降的趋势;与2月龄比较,6,12,20,30月龄昆明犬肝脏中IGF1基因的相对表达量均极显著降低(P<0.001)。昆明犬IGF1基因仅外显子3中识别到1个SNP位点,其他区域未识别到SNP位点。该位点位于外显子3第464位核苷酸处,发生了T→C的点突变,但氨基酸未变,命名为T464C位点。T464C位点在昆明犬群体中共存在两种基因型,分别为TT纯合型和TC杂合型,其中优势基因型为TT纯合型,优势等位基因为T,表现为低度多态(PIC<0.25),Ho为0.97,He为0.03,Ne为1.03,在昆明犬群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态。昆明犬IGF1基因T464C位点TT纯合型个体胸深、头长显著高于TC杂合型个体(P<0.05)。说明IGF1基因在昆明犬生长发育过程中具有重要作用,T464C位点可作为昆明犬品种培育的潜在辅助选择标记。 展开更多
关键词 昆明犬 胰岛素样生长因子1(IGF1) 差异表达 单核苷酸多态性(SNP) 遗传多样性 关联性分析
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昆明犬IGF1R基因外显子多态性与体重和体尺性状的关联性分析
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作者 韦云芳 李飞翔 +2 位作者 彭建国 陈方良 魏红江 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第12期115-121,共7页
为了解胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因外显子多态性与昆明犬体重和体尺性状的关系,从而为优质昆明犬的培育寻找可靠的分子选择标记,试验采用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对昆明犬IGF1R基因外显子区域单核苷酸多态性(single nucl... 为了解胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因外显子多态性与昆明犬体重和体尺性状的关系,从而为优质昆明犬的培育寻找可靠的分子选择标记,试验采用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对昆明犬IGF1R基因外显子区域单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)位点进行筛选,通过测序分析其突变情况,统计SNP位点的优势基因型、优势等位基因、多态信息含量(polymorphism information content, PIC)、纯合度(homozygosity, Ho)、杂合度(heterozygosity, He)、有效等位基因数(number of effective alleles, Ne)、Hardy-Weinberg平衡状态,并采用一般线性模型分析SNP位点与昆明犬体重和体尺性状的关联性。结果表明:在昆明犬IGF1R基因外显子中仅识别到1个SNP位点,该位点位于外显子8的第1 773位核苷酸处,发生了C→T的点突变,但氨基酸未变,命名为C1773T位点。C1773T位点在昆明犬群体中共存在两种基因型,分别为CC纯合型和CT杂合型,其中优势基因型为CC纯合型,优势等位基因为C,表现为低度多态(PIC<0.25),Ho为0.97,He为0.03,Ne为1.03,在昆明犬群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态。昆明犬IGF1R基因C1773T位点CT杂合型个体胸宽显著高于CC纯合型个体(P<0.05),其他体重和体尺性状指标均差异不显著(P>0.05)。说明IGF1R基因C1773T位点对昆明犬胸宽具有一定影响,可作为昆明犬品种培育的潜在分子选择标记。 展开更多
关键词 昆明犬 IGF1R基因 基因多态性 体尺性状 关联性分析
原文传递
昆明犬IGF-1基因CDS区克隆、生物信息学分析及组织表达研究 被引量:6
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作者 韦云芳 李飞翔 +5 位作者 马卫国 徐陶 李居东 陈方良 万九生 陈超 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1659-1667,共9页
试验旨在系统研究昆明犬胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)基因的结构和功能,揭示该基因的组织表达规律,为探讨工作犬体型及生长发育性状提供基本数据。以昆明犬为试验材料,运用分子克隆技术扩增IGF-1基因CDS区,... 试验旨在系统研究昆明犬胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)基因的结构和功能,揭示该基因的组织表达规律,为探讨工作犬体型及生长发育性状提供基本数据。以昆明犬为试验材料,运用分子克隆技术扩增IGF-1基因CDS区,应用生物信息学方法进行序列同源性比对并构建系统进化树;获得对应的氨基酸序列并分析蛋白理化特性及蛋白亚细胞结构、亲疏水性和磷酸化位点,利用SOPMA和SWISS-MODEL软件预测蛋白二级结构并构建蛋白质三级结构模型;同时利用实时荧光定量方法检测该基因在昆明犬各组织的表达情况。结果显示,昆明犬IGF-1基因CDS区长462 bp,编码153个氨基酸,其核苷酸序列与家犬的同源性较高(100%),与小鼠和鸡的同源性较低(82.6%和81.2%)。IGF-1蛋白分子质量和理论等电点分别为16.97 ku和9.36,属亲水性分泌型蛋白,无跨膜结构,存在信号肽区域(第1-48位氨基酸);亚细胞定位分析表明,IGF-1蛋白主要分布于细胞核(56.5%)及线粒体(17.4%)中;磷酸化位点分析发现,IGF-1蛋白存在15个磷酸化位点;该蛋白的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。组织表达显示,IGF-1基因在昆明犬不同组织中均有表达,尤其在脾脏、肝脏及肾脏中呈现高表达。本试验结果为今后深入研究IGF-1基因功能提供了理论参考,并为深入探讨IGF-1基因对昆明犬生长发育性状研究提供一定的基础资料。 展开更多
关键词 昆明犬 IGF-1基因 克隆 组织表达 生物信息学分析
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警犬参与治安处突情况调研分析
5
作者 张松 陈方良 +3 位作者 龙凌 马卫国 李飞翔 姚庆琛 《中国工作犬业》 2024年第7期4-7,共4页
近年来,公安机关在治安处突工作中面临新形势、新挑战,警犬技术作为传统技术是否能顺应时代发挥出独特功效,是摆在研究者面前的重要课题。为掌握各级警犬技术部门现状,项目组收集、分析全国警犬工作统计数据,在全国警犬工作部门展开广... 近年来,公安机关在治安处突工作中面临新形势、新挑战,警犬技术作为传统技术是否能顺应时代发挥出独特功效,是摆在研究者面前的重要课题。为掌握各级警犬技术部门现状,项目组收集、分析全国警犬工作统计数据,在全国警犬工作部门展开广泛调查,旨在掌握现状、发现问题、提出对策,为警犬技术在新时期治安处突工作中发挥出独特效用提供理论支持和实践方向。 展开更多
关键词 警犬技术 工作部门 统计数据 治安 独特功效 公安机关 实践方向 处突
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犬胸腹部皮下气肿合并药物性肝损伤的诊疗1例
6
作者 包喜军 秦海斌 +2 位作者 冯秀娟 李刚 贺星亮 《中国工作犬业》 2024年第3期48-50,共3页
皮下气肿也被称为组织气肿,是指因在外伤或感染的作用下,气体在皮下组织积聚,使充气组织(如气管、食道、胸腔等)与皮下组织之间形成了病理性连接而产生的病理变化。通常情况下,出现气肿的部位常见于头面部、颈部、胸部等。本文介绍了一... 皮下气肿也被称为组织气肿,是指因在外伤或感染的作用下,气体在皮下组织积聚,使充气组织(如气管、食道、胸腔等)与皮下组织之间形成了病理性连接而产生的病理变化。通常情况下,出现气肿的部位常见于头面部、颈部、胸部等。本文介绍了一例犬的皮下气肿合并药物性肝损伤。 展开更多
关键词 药物性肝损伤 气肿 皮下组织 头面部 病理性
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昆明犬IGF2基因克隆、生物信息学分析及其时空表达研究 被引量:4
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作者 韦云芳 李飞翔 +4 位作者 星云 黄庆国 李居东 万九生 陈方良 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第3期866-875,共10页
【目的】克隆昆明犬胰岛素样生长因子2(IGF2)基因并研究其序列特征及时空表达规律,为工作犬体型及生长发育相关研究提供基础资料。【方法】采用PCR法扩增昆明犬IGF2基因CDS区,运用生物信息学分析预测昆明犬IGF2蛋白的结构与功能;利用实... 【目的】克隆昆明犬胰岛素样生长因子2(IGF2)基因并研究其序列特征及时空表达规律,为工作犬体型及生长发育相关研究提供基础资料。【方法】采用PCR法扩增昆明犬IGF2基因CDS区,运用生物信息学分析预测昆明犬IGF2蛋白的结构与功能;利用实时荧光定量PCR技术检测IGF2基因在2.5月龄昆明犬心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及大腿内侧肌肉和不同年龄段肝脏中的表达情况。【结果】昆明犬IGF2基因CDS区全长717 bp,编码238个氨基酸;系统进化树分析显示,昆明犬IGF2基因与赤狐的遗传距离最近,与鸡的遗传距离最远。生物信息学分析表明,IGF2蛋白分子质量为26.46 ku,理论等电点为9.61,无信号肽和跨膜结构,属于亲水性非分泌蛋白;主要分布于细胞核(47.8%)和线粒体(17.4%),存在23个磷酸化位点;该蛋白的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,三级结构与二级结构预测结果相符。组织表达谱分析显示,IGF2基因在2.5月龄昆明犬肝脏中相对表达量最高,且极显著高于肾脏、肺脏及肌肉组织(P<0.01);仔犬期(2.5月龄)肝脏中的IGF2基因的表达量极显著高于幼犬期(6月龄)、青年期(1岁)及成年期(1.7和2.5岁)(P<0.01)。【结论】本研究成功克隆昆明犬IGF2基因,并发现IGF2在多个组织广泛表达,在肝脏中的表达量最高,可为深入探讨昆明犬IGF2基因在生长发育中的调控机理提供参考。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子2(IGF2) 昆明犬 克隆 序列分析 组织表达
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犬益生菌的研究与应用 被引量:4
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作者 徐陶 星云 毛爱国 《中国动物保健》 2021年第7期111-113,共3页
益生菌作为人类最早开始利用的微生物,其作用机制正在逐渐得到揭示。而在犬的日常饲喂和疾病治疗中,益生菌也在改善新陈代谢、提高免疫力等方面等起到保健和治疗作用。本文从益生菌的概念、益生菌的作用机制、益生菌对犬的作用、益生菌... 益生菌作为人类最早开始利用的微生物,其作用机制正在逐渐得到揭示。而在犬的日常饲喂和疾病治疗中,益生菌也在改善新陈代谢、提高免疫力等方面等起到保健和治疗作用。本文从益生菌的概念、益生菌的作用机制、益生菌对犬的作用、益生菌在犬上的应用及存在的问题几个方面进行阐述,综合现有益生菌的作用机制以及益生菌对犬的作用的理论学说,分析其应用前景,探讨存在的问题,以期对未来犬源益生菌的开发与应用提供理论依据。 展开更多
关键词 益生菌 作用机制 应用
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昆明犬IGF1R基因克隆及组织表达分析 被引量:2
9
作者 韦云芳 李飞翔 +4 位作者 星云 李居东 万九生 陈方良 陈超 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第9期2197-2203,共7页
【目的】旨在阐明昆明犬IGF1R基因序列特征及组织表达模式,为深入探究IGF1R基因在昆明犬生长发育中的调控机制及分子遗传育种相关研究奠定基础。【方法】基于分子克隆技术获得昆明犬IGF1R基因编码区序列,利用生物信息学手段进行序列同... 【目的】旨在阐明昆明犬IGF1R基因序列特征及组织表达模式,为深入探究IGF1R基因在昆明犬生长发育中的调控机制及分子遗传育种相关研究奠定基础。【方法】基于分子克隆技术获得昆明犬IGF1R基因编码区序列,利用生物信息学手段进行序列同源性比对、系统进化树分析,对相应的氨基酸序列进行蛋白理化特性、蛋白结构特征分析,并构建蛋白质三级结构模型。同时利用qRT-PCR方法检测该基因在昆明犬各组织的表达情况。【结果】昆明犬IGF1R基因CDS区长4104 bp,编码1367个氨基酸,其核苷酸序列与家犬(100%)与赤狐(99.3%)的同源性较高,与鸡的同源性较低(78.8%)。IGF1R蛋白分子质量和理论等电点分别为154890.07 ku和5.58,包含3个纤连蛋白型结构域,1个半胱氨酸富集区和1个酪氨酸激酶结构域,属亲水性跨膜蛋白;亚细胞定位分析表明,IGF1R蛋白均匀地分布于内质网、高尔基体及质膜上,比例均为33.3%;磷酸化位点分析发现,IGF1R蛋白存在123个磷酸化位点;该蛋白的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。组织表达显示,IGF1R基因在昆明犬不同组织中均有表达,尤其在肺脏、心脏及肾脏中呈现高表达。【结论】IGF1R基因在生物进化过程中具有较强的保守性。昆明犬IGF1R蛋白具有IGF受体蛋白特征性结构域,属亲水性跨膜蛋白。IGF1R基因在昆明犬6个组织中均有表达,其中心脏、肺脏及肾脏组织中的表达量较高。 展开更多
关键词 昆明犬 IGF1R基因 克隆 序列分析 组织表达
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犬体型大小相关基因的研究进展 被引量:2
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作者 韦云芳 李飞翔 +5 位作者 汪斌 李静 毛爱国 陈方良 万九生 陈超 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期51-57,共7页
犬作为人类最早驯化的家养动物,在人类发展史和现代生活中扮演着非常重要的角色,如伴侣、看护、导盲、军警用犬等。人工选择过程使得家犬产生了极大的表型多样性,其中体型性状是犬最显著的表型性状之一,属高遗传力性状。本文综述了犬体... 犬作为人类最早驯化的家养动物,在人类发展史和现代生活中扮演着非常重要的角色,如伴侣、看护、导盲、军警用犬等。人工选择过程使得家犬产生了极大的表型多样性,其中体型性状是犬最显著的表型性状之一,属高遗传力性状。本文综述了犬体型性状相关基因IGF1、IGF1R、GHR1、GHR2、SMAD2、STC2、HMGA2、IGSF1、ACSL4及IRS4的研究进展,为未来工作犬体型遗传改良育种提供重要的靶点和依据,为进一步阐明人类及其他家养动物在体型上的遗传变异提供参考。 展开更多
关键词 体型 候选基因 遗传变异
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拉布拉多犬X/Y精子分选及性别控制冷冻精液制备实验研究 被引量:2
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作者 高一龙 秦海斌 +6 位作者 温海 强京宁 贺星亮 张汇东 马大君 朱骞 李刚 《实验动物与比较医学》 CAS 2015年第6期484-489,共6页
目的探讨流式细胞分选技术在分离拉布拉多犬X、Y精子方面的应用,并研究拉布拉多犬性别控制(性控)冷冻精液的制备方法。方法人工按摩刺激法采集8只拉布拉多种公犬精液,利用SX_MOFLO流式细胞仪展开X、Y精子分离实验,并对分离后的X/... 目的探讨流式细胞分选技术在分离拉布拉多犬X、Y精子方面的应用,并研究拉布拉多犬性别控制(性控)冷冻精液的制备方法。方法人工按摩刺激法采集8只拉布拉多种公犬精液,利用SX_MOFLO流式细胞仪展开X、Y精子分离实验,并对分离后的X/Y精子冷冻、解冻后进行精液重分析和品质鉴定。结果流式细胞仪分选的X/Y精子纯度达到89%以上(89%~91%),X精子平均分离速度(4260个/s)极显著高于Y精子分离速度(3930个/s)(P〈0.01);常规冷冻精液和X、Y型冷冻精液性别比差异显著(P〈0.05);冻融后活率则无明显差异(P〉0.05);常规冷冻精液与X、Y型冷冻精液解冻后1h存活指数差异明显(P〈0.05),分别为0.251±0.006、0.054±0.007和0.048±0.006;冻融后顶体完整率差异显著(P〈0.05),分别为77.00%±0.98%、84.66%±1.22%和84.01%±1.23%。结论用流式细胞分选技术可以获得高纯度的拉布拉多犬X/Y冷冻精液,性别比和精液品质达到低剂量人工授精的要求。 展开更多
关键词 拉布拉多犬 性别控制(性控) XY精子 流式细胞仪 精液品质
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IGF-1基因变异与犬体型及衰老的关系
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作者 李飞翔 汪斌 +5 位作者 毛爱国 李居东 陈方良 万九生 韦云芳 陈超 《动物医学进展》 北大核心 2020年第3期118-122,共5页
体型较大往往是预测哺乳动物寿命较长的最佳指标之一,与此形成鲜明对比的是,有相当多的证据表明,在物种内部,体型较大的个体实际上寿命较短。这种体型增大的明显代价在犬上表现得尤为突出,人工选择导致犬种间体型相差近2个数量级,平均... 体型较大往往是预测哺乳动物寿命较长的最佳指标之一,与此形成鲜明对比的是,有相当多的证据表明,在物种内部,体型较大的个体实际上寿命较短。这种体型增大的明显代价在犬上表现得尤为突出,人工选择导致犬种间体型相差近2个数量级,平均寿命相差2倍。胰岛素样生长因子1(IGF-1)是GH/IGF-1和IIS(insulin/IGF-1)通路中关键的调控基因,对各种生物的生长、发育、寿命以及代谢均具有重要作用。IGF-1与犬的体型和寿命都有着千丝万缕的联系,犬可作为一种研究IGF-1基因变异与体型大小和寿命之间关系的模型。论文综述了IGF-1基因变异与犬体型及衰老的研究,为抗衰老相关研究提供参考。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子1 基因变异 体型 衰老
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一种轻便警犬背笼的研制
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作者 何宁 孙勇 +3 位作者 房亮亮 梁占华 岳东鹏 汪荣波 《中国工作犬业》 2021年第9期60-62,共3页
近年来,杰克罗素猿小型警用犬种进入警务实战,给警犬背笼的研制带来了灵感。所谓背笼,兼具了背和犬笼的功能。其作为警犬技术人员执行任务过程中的一种警犬携行装备,用以便于警犬的运输,减少警犬的体能消耗,并能够在执行任务的间隙作为... 近年来,杰克罗素猿小型警用犬种进入警务实战,给警犬背笼的研制带来了灵感。所谓背笼,兼具了背和犬笼的功能。其作为警犬技术人员执行任务过程中的一种警犬携行装备,用以便于警犬的运输,减少警犬的体能消耗,并能够在执行任务的间隙作为临时关犬的犬笼。 展开更多
关键词 警犬技术 警务实战 体能消耗 执行
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关于警用杰克罗素[犭更]居家饲养模式的探索
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作者 孙勇 岳冬鹏 +8 位作者 何宁 汪荣波 樊文军 马海谱 房亮亮 梁占华 彭军 张国权 邱永珍 《中国工作犬业》 2021年第11期6-8,共3页
一、工作犬居家饲养模式的历史和现状犬是人类的朋友,从近万年的家犬进化史谈起,犬一直和人类共同生活,承担着看门护院、报警、防盗和保护家庭成员免受攻击等任务。战争中军犬和主人战斗在一起,生活在一起,负责警戒、传信、运输、炸毁... 一、工作犬居家饲养模式的历史和现状犬是人类的朋友,从近万年的家犬进化史谈起,犬一直和人类共同生活,承担着看门护院、报警、防盗和保护家庭成员免受攻击等任务。战争中军犬和主人战斗在一起,生活在一起,负责警戒、传信、运输、炸毁敌军坦克等任务。执行特战任务时,军犬是突击尖刀,随同特战队员深入任务区隐蔽守候,等待指令攻击。现代社会,德国巴伐利亚州、柏林等州市、美国纽约州、阿拉斯加州、华盛顿特区等州市警察局遴选符合条件的警察。 展开更多
关键词 华盛顿特区 美国纽约州 饲养模式 阿拉斯加州 工作犬 家庭成员 任务区 进化史
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犬肠道菌群的研究进展
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作者 毛爱国 黎立光 李锐 《畜牧业环境》 2021年第6期84-85,共2页
犬肠道内聚居着大量微生物,与机体形成共生关系,参与机体的各种生理过程,肠道稳态与宿主的健康息息相关。本文从犬肠道菌群的组成与特点、功能、肠道菌群失调以及如何维持肠道菌群健康等方面的最新研究进展进行综述,以期了解犬肠道菌群... 犬肠道内聚居着大量微生物,与机体形成共生关系,参与机体的各种生理过程,肠道稳态与宿主的健康息息相关。本文从犬肠道菌群的组成与特点、功能、肠道菌群失调以及如何维持肠道菌群健康等方面的最新研究进展进行综述,以期了解犬肠道菌群的结构、功能以及菌群平衡的关系。 展开更多
关键词 肠道菌群 菌群失调 腹泻
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热应激对拉布拉多犬生理、激素、血液生化指标的影响 被引量:12
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作者 秦海斌 朱骞 +5 位作者 张汇东 温海 高一龙 贺星亮 强京宁 李刚 《动物医学进展》 北大核心 2015年第4期41-45,共5页
为研究犬热应激时的生理生化状态,并探讨以生理生化指标作为衡量犬热应激程度的可行性,分别在14、18、28、35℃测量了拉布拉多犬的生理生化指标。结果表明,犬在14℃、18℃体内指标处于正常水平,在28℃、35℃时处于热应激状态;与正常水... 为研究犬热应激时的生理生化状态,并探讨以生理生化指标作为衡量犬热应激程度的可行性,分别在14、18、28、35℃测量了拉布拉多犬的生理生化指标。结果表明,犬在14℃、18℃体内指标处于正常水平,在28℃、35℃时处于热应激状态;与正常水平比较,犬在热应激时呼吸频率显著加快、血清皮质醇(COR)水平显著升高,呼吸、COR值升高与温度、温湿指数(THI)之间存在显著相关性;直肠温度、ACTH未发生显著变化;血清中的主要酶类中ALT、ASP、CK、LDH在急性热应激时显著升高,然后恢复至正常水平,GLU、ALP未发生显著变化。证明在犬热应激研究中,气温、THI、COR、呼吸频率可作为主要的参考指标;体温及血液中ACTH、GLU、ALP含量与犬热应激程度不相关;ALT、ASP、CK、LDH在不同动物热应激中的变化规律不一致,能否作为犬热应激程度的指示指标有待进一步研究。 展开更多
关键词 热应激 温湿指数 激素 生理指标 生化指标
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运输应激对拉布拉多犬血液皮质醇和生化指标的影响 被引量:4
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作者 朱骞 秦海斌 +5 位作者 温海 高一龙 贺星亮 宋珍华 李刚 张汇东 《天津农学院学报》 CAS 2018年第2期39-41,共3页
为探讨运输对犬的影响,本试验以拉布拉多犬为实验动物,运输前和运输2 h后分别采血,应用放射免疫、生化等方法测定血液皮质醇、促肾上腺皮质激素和生化指标。结果显示,运输后皮质醇(COR)浓度和谷草转氨酶(AST)比运输前显著增高(P<0.0... 为探讨运输对犬的影响,本试验以拉布拉多犬为实验动物,运输前和运输2 h后分别采血,应用放射免疫、生化等方法测定血液皮质醇、促肾上腺皮质激素和生化指标。结果显示,运输后皮质醇(COR)浓度和谷草转氨酶(AST)比运输前显著增高(P<0.05),肌酸激酶(CK)活性极显著增高(P<0.01),促肾上腺皮质激素(ACTH)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖(GLU)无明显差异(P>0.05)。结果表明,2 h运输可引起拉布拉多犬血液皮质醇、谷草转氨酶和肌酸激酶水平的变化。 展开更多
关键词 运输应激 拉布拉多犬 生化指标 皮质醇
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H3N2亚型犬流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立及应用 被引量:4
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作者 秦海斌 温海 +5 位作者 贺星亮 宋珍华 朱骞 包喜军 蒿阳 张艳龙 《动物医学进展》 北大核心 2019年第4期9-15,共7页
为了快速诊断H3N2亚型犬流感病毒(CIV)感染,根据H3N2亚型CIV的M和HA基因序列,设计了3组LAMP引物,优化反应条件,建立了H3N2亚型CIV的RT-LAMP检测方法。结果表明,RT-LAMP方法能在63℃恒温条件下,在45min内完成扩增,通过反应管中预加的荧... 为了快速诊断H3N2亚型犬流感病毒(CIV)感染,根据H3N2亚型CIV的M和HA基因序列,设计了3组LAMP引物,优化反应条件,建立了H3N2亚型CIV的RT-LAMP检测方法。结果表明,RT-LAMP方法能在63℃恒温条件下,在45min内完成扩增,通过反应管中预加的荧光染料颜色的变化实现目视化判定。该方法对犬的常见病原无交叉反应,具有较好特异性;灵敏度是常规RT-PCR方法的100倍。该方法操作简单、快速灵敏、特异性强,适合现场应用,对H3N2亚型CIV的检测具有实际的应用价值。 展开更多
关键词 H3N2亚型犬流感病毒 环介导等温扩增 检测
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犬热应激过程中HSP70和免疫相关细胞因子的变化 被引量:4
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作者 朱骞 秦海斌 +5 位作者 孙钦伟 宋珍华 张雅晨 温海 贺星亮 张汇东 《动物医学进展》 北大核心 2016年第1期29-33,共5页
为研究热应激造成犬免疫机能损伤的机制及损伤过程中免疫相关细胞因子的变化规律,分别在夏季持续高热天气中每隔7d、分5次采集了拉布拉多犬的血清和外周血单个核细胞(PBMC),检测血清中皮质醇(COR)、热休克蛋白70(HSP70)、白细胞介素2((I... 为研究热应激造成犬免疫机能损伤的机制及损伤过程中免疫相关细胞因子的变化规律,分别在夏季持续高热天气中每隔7d、分5次采集了拉布拉多犬的血清和外周血单个核细胞(PBMC),检测血清中皮质醇(COR)、热休克蛋白70(HSP70)、白细胞介素2((IL-2)和白细胞介素(IL-10)、Toll样受体2(TLR-2)和Toll样受体4(TLR-4)的含量及PBMC中HSP70、IL-2、IL-10、TLR-2、TLR-4的mRNA的表达,并与春季非应激温度下检测的同类指标进行比较。结果显示,夏季持续高热天气中犬长期处于应激状态,其PBMC中HSP70mRNA表达上调,IL-2、IL-10、TLR-2、TLR-4mRNA表达下调;血清中COR浓度持续高于正常值,HSP70浓度升高,IL-2、TLR-2浓度未发生显著变化,IL-10、TLR-4浓度显著低于正常水平。热应激条件下PBMC中白介素和Toll样受体mRNA表达下调,可能是导致犬的免疫功能抑制、抗感染免疫机能下降的原因。 展开更多
关键词 热应激 热应激蛋白 白细胞介素 TOLL样受体 MRNA
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犬体内唾液酸受体的组织分布及对H3N2亚型犬流感病毒的易感性研究 被引量:2
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作者 秦海斌 强京宁 +5 位作者 宋珍华 贺星亮 温海 朱骞 包喜军 宋庆平 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期76-83,共8页
目的测定犬体不同组织器官内流感病毒受体的类型和分布差异,验证犬对H3N2亚型犬流感病毒的易感性。方法采集健康英国史宾格犬的不同组织器官,利用凝集素免疫荧光组织染色方法,检测组织内人型流感病毒唾液酸受体唾液酸α2,6-半乳糖(SAα2... 目的测定犬体不同组织器官内流感病毒受体的类型和分布差异,验证犬对H3N2亚型犬流感病毒的易感性。方法采集健康英国史宾格犬的不同组织器官,利用凝集素免疫荧光组织染色方法,检测组织内人型流感病毒唾液酸受体唾液酸α2,6-半乳糖(SAα2,6Gal)和禽型流感病毒唾液酸受体唾液酸α2,3-半乳糖(SAα2,3Gal)类型与分布;用H3N2亚型犬流感病毒人工感染英国史宾格犬,采集不同组织器官,用免疫组织化学染色法进行病毒的组织分布差异性分析。结果多种组织器官中同时存在着SAα2,6Gal和SAα2,3Gal两种类型的受体,少数组织器官中存在单一受体;SAα-2,6Gal受体在分布的广泛性、在同一器官中的表达量上高于SAα-2,3Gal型受体。人工感染后,病毒分布量与受体量整体趋势基本一致,仅在个别器官中存在差别。结论禽型和人型流感病毒受体广泛分布于犬的各个组织器官,犬具备同时感染禽型和人型流感病毒的分子基础。 展开更多
关键词 犬流感病毒 唾液酸受体 H3N2 人工感染
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