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富含半胱氨酸蛋白61对人肾小管上皮细胞增殖与细胞周期的影响 被引量：5
1
作者 徐岩 沈学飞 +1 位作者 宋年华 吴道诩 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期273-276,共4页
目的观察富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）蛋白对人肾小管上皮细胞（HK-2）增殖与细胞周期的影响。方法细胞被分为空白对照、阴性对照和Cyr61转染组。克隆Cyr61cDNA，构建pEGFP-N2-Cyr61重组质粒，利用脂质体分别将重组质粒与pEGFP—N2空质... 目的观察富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）蛋白对人肾小管上皮细胞（HK-2）增殖与细胞周期的影响。方法细胞被分为空白对照、阴性对照和Cyr61转染组。克隆Cyr61cDNA，构建pEGFP-N2-Cyr61重组质粒，利用脂质体分别将重组质粒与pEGFP—N2空质粒瞬时转染HK-2。四唑盐比色实验（MTT）检测细胞增殖；流式细胞分析术检测转染效率和细胞凋亡率；Western印迹法检测Cyr61蛋白、磷酸化黏着斑激酶（p-FAK）、细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）的表达。结果pEGFP-N2-Cyr61重组质粒可高效转染HK-2细胞。与空白对照、阴性对照组相比，Cyr61转染组细胞和培养液中的Cyr61蛋白表达量显著提高，细胞增殖活力明显增强，细胞中G1时相的比例显著减少，s时相显著增加，细胞凋亡率下降（均P〈0．01）。Cyr61转染组细胞中P—FAK、CDK2表达量亦显著提高（P〈0．01）。结论高表达的Cyr61蛋白可通过FAK途径促进CDK2表达，从而促进HK-2细胞进入S期，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞增殖 细胞周期 黏着斑蛋白酪氨酸激酶类 细胞周期蛋白质依赖激酶类 Cyr61蛋白 肾小管上皮细胞
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富含半胱氨酸蛋白61对缺氧后肾小管上皮细胞氧化应激的影响 被引量：3
2
作者 徐岩 沈学飞 +1 位作者 宋年华 刘雪梅 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期530-534,共5页
目的 观察富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）对缺氧后人肾小管上皮细胞（HK-2）氧化应激的影响,探讨Cyr61对HK-2的保护机制.方法 将HK-2细胞分为5组：空白组、Cyr61处理组、MAPK抑制剂组（Cyr61＋ PD98059预处理）、p38抑制剂组（Cyr61 ＋SB2... 目的 观察富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）对缺氧后人肾小管上皮细胞（HK-2）氧化应激的影响,探讨Cyr61对HK-2的保护机制.方法 将HK-2细胞分为5组：空白组、Cyr61处理组、MAPK抑制剂组（Cyr61＋ PD98059预处理）、p38抑制剂组（Cyr61 ＋SB203580预处理）、PI3K抑制剂组[Cyr61＋渥曼青霉素（Wortmannin）预处理].各组细胞预处理12h后进行缺氧培养.采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测缺氧前后细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,双氯荧光黄乙酸乙酯（DCFH-DA）染色检测细胞内活性氧簇（ROS）的生成量,比色法检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性,Western印迹法检测细胞磷酸化（p）Akt及细胞核内Nrf2蛋白表达水平. 结果 缺氧培养后空白组HK-2细胞内ROS含量和Nrf2蛋白表达增加,SOD、CAT活性下降,同时细胞存活率下降,凋亡率增高（均P＜0.05）.Cyr61处理组缺氧后存活率、细胞内SOD、CAT活性和p-Akt、Nrf2蛋白显著高于空白组,同时其凋亡率及ROS含量明显低于空白组（均P＜ 0.05）.与Cyr61处理组相比,缺氧后PI3K抑制剂组HK-2细胞存活率、细胞内SOD、CAT活性和p-Akt、Nrf2蛋白显著下降,凋亡率及ROS含量显著增加（均P＜0.05）;而MAPK抑制剂组和p38抑制剂组HK-2细胞的各项指标同Cyr61处理组相比差异无统计学意义（均P＞ 0.05）.结论 Cyr61可通过PI3K途径促进Nrf2表达,增强抗氧化物质SOD、CAT产生,减少ROS生成,在缺氧诱导的HK-2细胞氧化应激损伤中发挥保护作用. 展开更多
关键词 肾小管 上皮细胞 氧化性应激 NF-E2相关因子2 磷脂酰肌醇3-激酶
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富半胱氨酸蛋白61对转化生长因子β1诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响 被引量：5
3
作者 徐岩 沈学飞 宋年华 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期813-814,共2页
转化生长因子β1（TGF-p1）是一种重要的炎性因子，也是介导。肾小管上皮细胞凋亡最关键的细胞因子。富半胱氨酸蛋白61（cysteine-rich61，Cyr61）是一种即刻早期基因产物，在肾损伤、炎性反应等囚素下表达增高。
关键词 肾小管上皮细胞凋亡 转化生长因子Β1 半胱氨酸蛋白 炎性反应 CYR61 炎性因子 细胞因子 基因产物
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