慢性重型肝炎患者生活质量评估及影响因素分析 被引量：4

1

作者 张南 王宇明 +1 位作者 邓国宏 张磊 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第11期19-21,共3页

目的:测量并评价重型肝炎患者生活质量HRQOL),分析影响其生活质(量的主要相关因素。方法:记录130例慢性重性乙型肝炎患者的35项一般资料及临床资料,采用中国版生活质量SF-36表,对重型肝炎患者及100例正常对照进行生活质量评分并进行比... 目的:测量并评价重型肝炎患者生活质量HRQOL),分析影响其生活质(量的主要相关因素。方法:记录130例慢性重性乙型肝炎患者的35项一般资料及临床资料,采用中国版生活质量SF-36表,对重型肝炎患者及100例正常对照进行生活质量评分并进行比较。对影响生活质量的因素进行单因素分析和多元逐步回归分析,筛选主要影响因素。结果:慢性重型肝炎患者组的SF-36总评分52±22及躯体角色62±27、总的健康40±16、活力43±23、社会功能56±26、情绪角色33±24、心理卫生40±19的平均评分与对照组(80±23,78±25,80±21,82±28,84±20,85±30,79±19)相比显著降低t=4.651～15.940,P(<0.001);影响慢性重型肝炎患者生活质量的主要因素是并发症、血白蛋白、血清胆红素和凝血酶原活动度。结论:慢性重型肝炎患者的生活质量显著下降,有效的治疗和护理有利于改善患者的生活质量。 展开更多

关键词 肝炎 生活质量 因素分析 统计学

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聚砜膜生物反应器实验系统构建及对重型肝炎患者血浆的影响(英文) 被引量：2

2

作者 陈志 王英杰 +2 位作者 张世昌 刘俊 刘涛 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1175-1178,共4页

背景:人工肝反应器性能的评价通常需要构建一个密闭实验装置模拟生物人工肝支持系统来对反应器内肝细胞的生物功能以及生物反应效率等进行综合评价,对聚砜膜中空纤维反应器的性能进行初步评价对优化生物人工肝支持治疗系统具有一定意义... 背景:人工肝反应器性能的评价通常需要构建一个密闭实验装置模拟生物人工肝支持系统来对反应器内肝细胞的生物功能以及生物反应效率等进行综合评价,对聚砜膜中空纤维反应器的性能进行初步评价对优化生物人工肝支持治疗系统具有一定意义。目的:构建聚砜膜生物反应器实验系统,了解该系统对重型肝炎患者血浆的影响,观察聚砜膜中空纤维反应器作为生物人工肝反应器的可行性。设计:重复测量实验。单位:第三军医大学西南医院全军感染病研究所。材料:选用7只新生1～7d中国实验小型猪,雌雄不拘,由第三军医大学实验动物中心提供,许可证号码:F99017实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。肿瘤坏死因子α、转化生长因子β1试剂盒购自中国晶美生物工程公司;聚砜膜中空纤维反应器订制于中国上海德宏生物材料研究所;Cellco培养循环式人工毛细管培养系统购于美国Spectrum公司;7份重型肝炎患者血浆样本均取自住院慢性重型肝炎患者做血浆置换时分离的血浆。患者均对实验项目知情同意,实验经过医院伦理委员会批准。方法:实验于2004-01/2005-07在第三军医大学西南医院全军感染病研究所实验室完成。①实验过程:实验前12h对实验猪进行断乳,清洁皮毛后分离肝细胞。将聚砜膜中空纤维反应器的内腔通过氧和二氧化碳弥散管与培养液贮池和Cellco培养液循环式人工毛细管培养系统连接成为密闭系统,外腔接口用洁净橡胶塞封闭。用磁力搅动法将分离的肝细胞进行球形体培养,接种到本系统的聚砜膜中空纤维反应器外腔,然后加重型肝炎患者血浆样本200mL于贮液池中,以80mL/min的速度在反应器内腔及贮液池中循环。②实验评估:在循环的0,2,4,6h从反应器内腔各取出2mL循环液,用谷氨酸脱氢酶-紫外法检测上清中氨的水平,全自动生化分析仪上检测标本� 展开更多

关键词 聚砜膜 生物反应器 重型肝炎患者血浆 生物人工肝 猪肝细胞

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乙型肝炎的宿主遗传易感性的研究进展及前景 被引量：16

3

作者 晏泽辉 邓国宏 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第8期1002-1007,共6页

乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界范围的严重公共卫生问题之一,宿主对HBV感染的遗传易感性在HBV感染发病和疾病进展方面都发挥重要作用.研究乙型肝炎的宿主遗传易感性具有十分重要的意义.本文综述了近年来在乙型肝炎的宿主遗传易感性方面的... 乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界范围的严重公共卫生问题之一,宿主对HBV感染的遗传易感性在HBV感染发病和疾病进展方面都发挥重要作用.研究乙型肝炎的宿主遗传易感性具有十分重要的意义.本文综述了近年来在乙型肝炎的宿主遗传易感性方面的研究进展,重点介绍了人类白细胞抗原(HLA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白介素10(IL-10)、干扰素γ诱导的蛋白10(IP-10)、雌激素受体α(ESR1)、甘露糖结合蛋白(MBP)、维生素D受体(VDR)等基因的多态性与HBV感染的关系.同时就乙型肝炎的宿主遗传易感性方面的研究前景作一展望. 展开更多

关键词 乙型肝炎 宿主 遗传易感性 研究进展 肿瘤坏死因子Α 干扰素Γ 白介素10

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乙型肝炎病毒感染孪生子宿主遗传因素与临床表型关系的初步研究 被引量：9

4

作者 徐宝艳 王宇明 +6 位作者 邓国宏 黄燕萍 钟履华 刘国栋 谭朝霞 范燚 丁世涛 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期189-193,共5页

目的　以 2 0对HBV感染孪生子和感染高危孪生子为研究对象 ,初步研究宿主遗传因素与乙型肝炎临床表型的关系。方法　采用人基因组短串联重复序列 (shorttandemrepeates ,STR)多态性扫描技术进行孪生子卵型鉴定 ,同时进行HAV、HBV、HCV、... 目的　以 2 0对HBV感染孪生子和感染高危孪生子为研究对象 ,初步研究宿主遗传因素与乙型肝炎临床表型的关系。方法　采用人基因组短串联重复序列 (shorttandemrepeates ,STR)多态性扫描技术进行孪生子卵型鉴定 ,同时进行HAV、HBV、HCV、HDV、HEV等肝炎标志物检测 ,HBVDNA荧光定量检测及肝功能 (ALT ,AST ,TBil)检测。对临床指标数据进行Fisher′s精确检验 ,在单卵孪生子 (monozygotictwins ,MZ)组、双卵孪生子 (dizygotictwins ,DZ)组、对照 (control)组之间进行比较。结果　单卵孪生子组、双卵孪生子组与对照组两两之间 ,其感染率、HBsAg阳性率、HBeAg阳性率、无症状携带者 (AsC)比率及清除病毒比率差异无显著意义 (P >0 0 5 )。在同病率、疾病表型一致率、血清学模式相同者比率的比较中发现单卵孪生子组与双卵孪生子组之间及单卵孪生子组与对照组之间差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ,而双卵孪生子组与对照组之间差异无显著意义 (P >0 0 5 )。另外研究亦发现疾病表型一致率可能与患者年龄及是否进行抗病毒治疗等相关。对于HBV感染高危孪生子 ,出生后立即进行HBIg注射或疫苗接种 ,可阻断HBV感染。 结论　单卵孪生子组其同病率、疾病表型一致率、血清学模式相同者比率显著高于双卵孪生子组以及对照组 。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 遗传因素 易感因素 孪生子 基因表型

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乙型肝炎病毒准种异质性对干扰素应答性的影响 被引量：11

5

作者 兰林 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第2期169-172,共4页

目的:了解乙型肝炎病毒(HBV)准种遗传异质性对干扰素(IFN-α)应答性的影响.方法:用构象敏感凝胶电泳(CSGE)对20例(完全应答者和无应答者各10例)已接受IFN-α治疗的慢性乙型肝炎患者治疗前血清中HBV准种的异质性进行检测,分析准种的异质... 目的:了解乙型肝炎病毒(HBV)准种遗传异质性对干扰素(IFN-α)应答性的影响.方法:用构象敏感凝胶电泳(CSGE)对20例(完全应答者和无应答者各10例)已接受IFN-α治疗的慢性乙型肝炎患者治疗前血清中HBV准种的异质性进行检测,分析准种的异质性与IFN-α应答性的关系.结果:HBVDNA含量在IFN-α应答患者和非IFN-α应答患者之间无差异(7.27×1010±8.79×1010vs5.16×1010±5.13×1010,P>0.05),但是,在无应答患者HBV准种的复杂性和遗传差异性明显高于应答患者(8.30±1.89vs18.5±2.68,P<0.001和0.926±0.008vs0.869±0.016,P<0.001).结论:HBV准种的异质性对IFN-α的应答性有影响. 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒准种 异质性 干扰素 应答性 乙型肝炎 治疗

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HLA-Ⅱ类基因与慢性乙型肝炎重型化的相关性 被引量：8

6

作者 蒋业贵 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第3期622-625,共4页

目的:探讨HLA-DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性与慢性乙型肝炎重型化之间的关系. 方法:采用聚合酶链反应/序列特异性引物(PCR/SSP)技术对52例慢性乙型肝炎和32例性慢性重症乙型肝炎的HLA DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性进行了分析.... 目的:探讨HLA-DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性与慢性乙型肝炎重型化之间的关系. 方法:采用聚合酶链反应/序列特异性引物(PCR/SSP)技术对52例慢性乙型肝炎和32例性慢性重症乙型肝炎的HLA DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性进行了分析. 结果:HLA-DRB1*1 001在慢性重症乙型肝炎组的等位基因频率明显高于慢性乙型肝炎组(14.1% vs 1.9%,X2= 19.2 997,Pc=0.0281,RR=9.78).HLA-DQA1和HLA- DQB1等位基因频率在慢性重症乙型肝炎组和慢性乙型肝炎组间差异无显著性. 结论:HLA-DRB1*1 001与慢性乙型肝炎的重型化有关, 可能是—个对判断病情和预后有价值的实验指标. 展开更多

关键词 HLA-Ⅱ类基因 慢性乙型肝炎 基因多态性 相关性 PCR/SSP技术 预后 免疫功能

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慢性乙型肝炎肝组织中HLA-DR和HSP70的表达意义 被引量：8

7

作者 蒋业贵 王宇明 李奇芬 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第8期907-910,共4页

目的探讨 HLA-DR 抗原和热休克蛋白70(HSP70)在慢性乙型肝炎肝组织中的表达及其意义.方法采用免疫组化技术对36例慢性乙型肝炎和20例正常肝组织中 HLA-DR 抗原和 HSP70的表达进行检测.结果正常肝组织中肝细胞未见 HLA-DR 表达.慢性乙型... 目的探讨 HLA-DR 抗原和热休克蛋白70(HSP70)在慢性乙型肝炎肝组织中的表达及其意义.方法采用免疫组化技术对36例慢性乙型肝炎和20例正常肝组织中 HLA-DR 抗原和 HSP70的表达进行检测.结果正常肝组织中肝细胞未见 HLA-DR 表达.慢性乙型肝炎肝细胞 HLA-DR 表达阳性率为28%,其中,中重度肝炎HLA-DR 阳性率明显高于轻度肝炎(阳性率分别为38%和20%,x^2=13.6,P<0.01).慢性乙型肝炎和正常肝组织中肝细胞 HSP70表达阳性率分别为45%和15%,两者相比差异显著(x^2=6.3,P<0.05).中度和重度肝炎 HSP70阳性率明显高于轻度肝炎(阳性率分别为63%和30%,x^2=3.9,P<0.05).结论肝细胞 HLA-DR 和 HSP70的异常表达在慢性乙型肝炎免疫损伤和免疫保护中起重要作用。 展开更多

关键词 乙型肝炎 免疫学 HLA-DR抗原 生物合成 热休克蛋白类70 免疫组织化学

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乙型肝炎病毒遗传异质性对干扰素应答性的影响 被引量：3

8

作者 兰林 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 2002年第6期696-698,共3页

迄今IFN-α仍是治疗乙型肝炎的主要抗病毒药物,但其总体疗效并不理想。究其原因,HBV基因组的多样性可能是重要原因之一。HBV种群具有高度的异质性,存在着多种不同的血清型、基因型及变异株,即使在单个感染个体内,也可能包含异质性的HBV... 迄今IFN-α仍是治疗乙型肝炎的主要抗病毒药物,但其总体疗效并不理想。究其原因,HBV基因组的多样性可能是重要原因之一。HBV种群具有高度的异质性,存在着多种不同的血清型、基因型及变异株,即使在单个感染个体内,也可能包含异质性的HBV病毒群体(准种)。研究发现不同的HBV株对IFN-α治疗的敏感性不同,个体内准种的异质性程度也对扰素治疗的应答性有影响。因此,正确深入地认知和分析HBV遗传异质性,对阐明影响IFN-α治疗的病毒学因素有着重要的意义。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 遗传异质性 干扰素 应签性 影响

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人胎儿骨髓间充质干细胞来源的类肝细胞的分子生物学鉴定 被引量：5

9

作者 何念海 赵文利 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第8期1844-1848,共5页

目的:对MMSCs来源类肝细胞进行分子生物学鉴定. 方法:从人胎儿骨髓中分离MMSCs,在10 g/L Matrigel作基质,2.5 mmoL/L AZA预处理10-12 h,HGF 10 μg/L +FGF4 10 μg/L+HGM培养基中培养和诱导.收集诱导培养4,7,14,21,28 d时的细胞爬片,SAB... 目的:对MMSCs来源类肝细胞进行分子生物学鉴定. 方法:从人胎儿骨髓中分离MMSCs,在10 g/L Matrigel作基质,2.5 mmoL/L AZA预处理10-12 h,HGF 10 μg/L +FGF4 10 μg/L+HGM培养基中培养和诱导.收集诱导培养4,7,14,21,28 d时的细胞爬片,SABC免疫组化法DAB显色检测肝细胞早期标志AFP,CK19及早期转录因子GATA4,成熟肝细胞标志ALB,CK18,GST-π,肝细胞转录因子HNF1α;提取诱导分化10 dN第28 d细胞RNA 及蛋白质,设计AFP,CK19,ALB,CK18,CYP1B1,CYP286 引物,进行RT-PCR,观察在mRNA水平肝细胞标志的表达,采用Western blot检测CK18,AFP,ALB的表达量. 结果:未诱导培养的MMSCs中,有较少的细胞表达AFP, 未见其他肝脏特有的转录因子或者胞质蛋白标志.免疫组化显示在诱导早期可见较多细胞呈GATA4,AFP和CK19阳性表达,至诱导后期表达下降,而ALB,CK18,GST-π和肝细胞转录因子HNF1α阳性细胞比例逐渐上升.RT-PCR显示,未诱导的MMSCs仅可表达微弱的AFP mRNA,诱导早期可见AFP mRNA和CK19 mRNA表达,诱导后期未见扩增,而ALB,CK18,CYP1B1 mRNA早期和后期均可见表达,在诱导后期可见CYP286 mRNA表达,但很弱.Western blot检测显示诱导细胞中AFP,ALB和CK18 蛋白的表达趋势同基因表达类似.在65 ku和68 ku处诱导细胞组可见AFP和ALB目的条带,在45ku处诱导细胞组可见CK18目的条带.未诱导的细胞和诱导早期细胞中AFP有表达,后期未见.诱导早期和后期CK18和ALB均有表达,且后期增强. 结论:MMSCs向类肝细胞的横向分化是先分化为肝前体细胞,再分化为成熟肝细胞,在本实验诱导条件下可获得在复制及翻译各环节肝细胞标志阳性的类肝细胞. 展开更多

关键词 AFP 肝细胞 ALB 诱导 早期 表达 CYP MRNA水平 转录因子 胞质蛋白

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人胎肝干细胞的体外分离培养与鉴定 被引量：7

10

作者 毛海洲 陈耀凯 +2 位作者 王宇明 张磊 刘国栋 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第4期452-455,共4页

目的:对人胎肝干细胞进行体外分离、培养与鉴定, 为其在生物人工肝及肝细胞移植方面的应用奠定基础方法:取16—29周龄死产人胚胎肝脏,参照本室建立的方法对胎肝干细胞进行分离.所获细胞悬液用50 g反复离心,沉淀物用F12培养液悬浮细胞:... 目的:对人胎肝干细胞进行体外分离、培养与鉴定, 为其在生物人工肝及肝细胞移植方面的应用奠定基础方法:取16—29周龄死产人胚胎肝脏,参照本室建立的方法对胎肝干细胞进行分离.所获细胞悬液用50 g反复离心,沉淀物用F12培养液悬浮细胞:将细胞悬液加入Percoll液进行梯度离心,吸取50%与70%Percoll层之间的细胞层,用Hanks液洗涤两次后离心.将细胞团悬浮于DMEM/F12(2:1)培养液中,接种于塑料培养瓶或六孔培养板中;在37℃50 mL/L CO2孵箱中培养. 采用免疫组织化学法鉴定细胞表型. 结果:原代细胞呈圆形或卵圆形,体积明显小于肝细胞,胞核大而胞质少,核浆比较小,培养中细胞生长旺盛.培养的细胞胞质CK19,OV6及白蛋白染色均呈阳性;部分细胞胞质同时表达白蛋白和CK19. 结论:人胚胎肝脏中存在在肝干细胞,这些细胞表现出不同的分化状态. 展开更多

关键词 胎肝 肝干细胞 人胎 CK19 人胚胎 体外分离 肝脏 细胞悬液 DMEM 悬浮细胞

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肝移植后乙型肝炎病毒再感染相关因素的研究进展 被引量：5

11

作者 王永刚 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第9期1460-1464,共5页

目前,全球约有3亿5千万人感染乙型肝炎病毒(hepatitisB virus,HBV),近50％的感染者出现临床症状,约有5％发展为肝炎肝硬化,而每年因HBV感染而死亡的人数近一百万.对HBV相关的终末期肝病,根治一直是世界性难题,近年来,原位肝移植(OLT)的... 目前,全球约有3亿5千万人感染乙型肝炎病毒(hepatitisB virus,HBV),近50％的感染者出现临床症状,约有5％发展为肝炎肝硬化,而每年因HBV感染而死亡的人数近一百万.对HBV相关的终末期肝病,根治一直是世界性难题,近年来,原位肝移植(OLT)的成功开展无疑为此类患者带来了曙光.但如果不给予一定的预防措施,其OLT后HBV再感染率可高达58-83％,最高可达90％.文献资料显示,OLT后HBV再感染发生可能与术前HBV复制状态、抗HBV药物应用前后病毒变异、免疫抑制剂及糖皮质激素的应用、肝外组织HBV存在情况等因素有关.本文就近年来相关的研究进展作一综述. 展开更多

关键词 肝移植 乙型肝炎病毒 再感染 影响因素 研究进展 终末期肝病 免疫抑制剂

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进一步深化慢性乙型肝炎诊断治疗的实用性研究 被引量：5

12

作者 李梦东 聂青和 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第6期760-762,共3页

自1965年Blumberg发现HBsAg以来,乙型病毒性肝炎(HBV)在分子病毒学、组织病理学、免疫学、流行病学及临床诊断治疗学等方面已取得了长足的发展,一些问题得到阐明达成了共识,但仍存在许多问题,我国是乙型肝炎的高流行区,全世界的慢性乙... 自1965年Blumberg发现HBsAg以来,乙型病毒性肝炎(HBV)在分子病毒学、组织病理学、免疫学、流行病学及临床诊断治疗学等方面已取得了长足的发展,一些问题得到阐明达成了共识,但仍存在许多问题,我国是乙型肝炎的高流行区,全世界的慢性乙型肝炎患者我国占50％以上,而我国的乙型肝炎防治工作存在一些国外不曾有过的问题,这些问题需要我们自己来研究解决,可以说,在乙型肝炎临床与科研过程中充满了艰辛,我国的临床医师及基础科研工作者尽管在治疗中做了大量工作,遗憾的是至今尚未有重大性突破,这使我们喜忧参半、任重而道远。在临床研究中我国与欧美存在较大的差距,除外经济、政治和学风中的一些问题外,主要存在以下一些问题:(1)临床治疗试验不规范,难以严格的按照随机、双盲、对照和多中心原则实施临床科研方案;(2)临床科研与基础实验研究结合不够,重基础研究,轻临床科研;(3)存在多经验,少证据的现象;(4)肝活体组织检查较少,尤其是治疗前、后自身对照的肝活体组织标本甚少;(5)缺乏长期随访资料,医学资料保管不善,丢失现象较为普遍;(6)国内诊断试剂质量不稳定,缺乏统一标准,大多不能通过国际质检要求,实验数据难以得到国际权威性杂志的认可;(7)临床研究及经典流行病学调研难以获得基金资助等。慢性乙型肝炎已成为相关临床医生面临的重要问题,为了更好地解决这些临床问题,我们组织国内部分专家结合个人的临床经验及科研体会,对“慢性乙型病毒性肝炎的诊断与治疗”进行讨论,目的是引导临床医生科学、准确地处理这些问题,同时进一步深入开展慢性乙型肝炎的临床实用性研究,为提高我国慢性乙型肝炎诊治水平做出应有的贡献,造福于人类,这也是本期“焦点论坛”主办者的心愿。 展开更多

关键词 慢性乙型肝炎 诊断 治疗 实用性 病毒性肝炎 基因突变 干扰素

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大鼠肝卵圆细胞的生物学特征 被引量：5

13

作者 陈耀凯 王宇明 +1 位作者 李俊刚 郎松 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第4期430-433,共4页

目的:观察大鼠肝卵圆细胞的形态学参数、细胞表型及分化演变等生物学特征。方法:建立大鼠肝卵圆细胞增生模型,在肝组织切片上对大鼠肝卵圆细胞进行细胞图像分析及免疫组化染色。结果:肝卵圆细胞体积小、外形及胞核为椭圆形;胞质对细胞... 目的:观察大鼠肝卵圆细胞的形态学参数、细胞表型及分化演变等生物学特征。方法:建立大鼠肝卵圆细胞增生模型,在肝组织切片上对大鼠肝卵圆细胞进行细胞图像分析及免疫组化染色。结果:肝卵圆细胞体积小、外形及胞核为椭圆形;胞质对细胞角蛋白(CK)19,OV6,甲胎蛋白(AFP)及波形蛋白染色呈阳性,对白细胞共同抗原(LCA)染色呈阴性,胞核对增生细胞核抗原(PCNA)染色呈阳性;在汇管区外周部位可见肝细胞样细胞,CK19及OV6染色呈阳性。结论:肝卵圆细胞在形态学上明显不同于肝细胞,同时具有胆管细胞及肝细胞的表型;肝细胞样细胞为肝卵圆细胞向肝细胞演变的中间过渡细胞。 展开更多

关键词 大鼠 肝卵圆细胞 生物学特征 形态学参数 细胞表型 分化演变 卵圆细胞增生 白细胞共同抗原 甲胎蛋白 肝病

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基因功能研究新途径-RNA干扰 被引量：5

14

作者 万志红 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第4期962-964,共3页

近年来的研究表明,一些小的双链RNA可以高效特异地阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference, RNAi).他是体内抵御外在感染的—种重要保护机制,也可以作为一种简单有效的代替... 近年来的研究表明,一些小的双链RNA可以高效特异地阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference, RNAi).他是体内抵御外在感染的—种重要保护机制,也可以作为一种简单有效的代替基因敲除的遗传工具.现就RNAi 的研究进展做一综述. 展开更多

关键词 基因功能 RNA干扰 双链RNA 基因转录 同源基因

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冻存保护剂浓度对乳猪肝细胞-80℃低温保存的影响 被引量：1

15

作者 刘鸿凌 王英杰 +2 位作者 郭海涛 刘俊 于乐成 《世界华人消化杂志》 CAS 2002年第12期1392-1395,共4页

目的:探索适宜于乳猪肝细胞-80℃长期低温保存的冻存保护剂浓度.方法:体外分离乳猪肝细胞,以含不同浓度二甲基亚砜(DMSO,浓度分别为50、100、150和200mL/L)的低温保存液-80℃分别保存肝细胞30d与60d.复苏后接种培养,对其存活率、贴壁率... 目的:探索适宜于乳猪肝细胞-80℃长期低温保存的冻存保护剂浓度.方法:体外分离乳猪肝细胞,以含不同浓度二甲基亚砜(DMSO,浓度分别为50、100、150和200mL/L)的低温保存液-80℃分别保存肝细胞30d与60d.复苏后接种培养,对其存活率、贴壁率、白蛋白及尿素合成能力等进行检测,并观察其形态结构变化.结果:不同DMSO浓度的低温保存液保存复苏后猪肝细胞的活力及形态学表现均有所不同,其中含50mL/LDMSO低温保存液组保存效果最差;100mL/L组次之;150mL/L组最佳.150mL/LDMSO低温保存液组保存60d肝细胞复苏后的存活率为81%,贴壁率是79%,较50mL/L与100mL/LDMSO组有显著性差别(P<0.05),150mL/LDMSO组复苏后接种培养肝细胞的形态与未冻存组无明显差别,均保持较强的合成尿素及白蛋白能力.结论:150mL/LDMSO浓度适合于乳猪肝细胞的-80℃长期超低温保存,保存时间对其活力无明显影响.冷冻保存;冻存保护剂;二甲基亚砜. 展开更多

关键词 冻存保护剂 乳猪 肝细胞 低温保存 生物人工肝

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经皮脾内无水酒精注射治疗脾功能亢进18例 被引量：4

16

作者 付敏 陈耀凯 +1 位作者 王新国 袁翠云 《世界华人消化杂志》 CAS 2002年第8期985-986,共2页

为探讨脾内无水酒精注射治疗肝硬化所致脾功能亢进的疗效,我们在B超引导下对18例肝硬化合并脾功能亢进患者分次进行经皮穿剌脾脏内无水酒精注射,注射剂量为1.0-2.0ml,1wk,总疗程为5次.结果,治疗后患者外周血血红蛋白含量、白细胞及血小... 为探讨脾内无水酒精注射治疗肝硬化所致脾功能亢进的疗效,我们在B超引导下对18例肝硬化合并脾功能亢进患者分次进行经皮穿剌脾脏内无水酒精注射,注射剂量为1.0-2.0ml,1wk,总疗程为5次.结果,治疗后患者外周血血红蛋白含量、白细胞及血小板计数较治疗前明显升高(P<0.01),门静脉宽度较治疗前亦有显著减小(P<0.05),肝功能及脾脏大小无明显变化,治疗过程中及治疗后无严重不良反应发生.我们认为这一方法操作简单、疗效可靠、安全性好且费用低廉,适于基层医院开展. 展开更多

关键词 无水酒精 治疗 脾功能亢进 经皮脾内注射 肝硬化

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生物人工肝细胞材料研究进展 被引量：3

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作者 李俊刚 陈耀凯 《世界华人消化杂志》 CAS 2002年第6期699-701,共3页

肝细胞是生物人工肝(bioartificial liver, BAL)中的核心生物成分,其研究颇受国内外学者的重视。猪肝细胞具有类似人肝细胞的高代谢功能,在BAL中可作为人肝细胞的替代品。重组具有氨清除等功效的人肝细胞系在BAL中取得了较好成效,具有... 肝细胞是生物人工肝(bioartificial liver, BAL)中的核心生物成分,其研究颇受国内外学者的重视。猪肝细胞具有类似人肝细胞的高代谢功能,在BAL中可作为人肝细胞的替代品。重组具有氨清除等功效的人肝细胞系在BAL中取得了较好成效,具有一定的应用前景。为了探索一种永生化的、无致瘤性的、有分化功能的人肝细胞系,作为BAL生物成分的理想细胞来源,国外学者研究设计了一种可回复性永生化程序,为解决细胞材料问题提供了新的思路和手段。肝非实质细胞及某些种类细胞,对维持肝细胞的三维结构的生存环境,改善肝细胞的代谢活性和存活起重要作用,与肝细胞混合培养后明显促进肝细胞的增生和分化,其在BAL系统中的潜在价值已逐渐引起注意。然而,肝细胞的增生、长期培养、功能维持及人源肝细胞的严重短缺等都是亟待解决的问题。 展开更多

关键词 生物人工肝 细胞材料 研究进展 肝功能衰竭

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SV40T外显子的拼接及逆转录病毒载体pLLTSN的构建 被引量：3

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作者 李俊刚 陈耀凯 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第5期1104-1107,共4页

目的:为构建肝细胞永生化载体,对猿猴病毒40大T抗原基因(SV40T)外显子进行拼接并以其为外源片段构建逆转录病毒永生化载体pLLTSN. 方法:以质粒pUC19-SV40T为模板,高保真PCR扩增SV40T的2个外显子,重叠延伸拼接法将两个外显子拼接到一起,... 目的:为构建肝细胞永生化载体,对猿猴病毒40大T抗原基因(SV40T)外显子进行拼接并以其为外源片段构建逆转录病毒永生化载体pLLTSN. 方法:以质粒pUC19-SV40T为模板,高保真PCR扩增SV40T的2个外显子,重叠延伸拼接法将两个外显子拼接到一起,然后用双粘端连接法将其克隆到空载体pLXSN 的EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点之间,通过菌落PCR和酶切法筛选,鉴定阳性克隆并经DNA测序验证. 结果:拼接成2.1 kb的SV40T,用菌落PCR和酶切法随机筛选的10个菌落中4个为阳性,均含有2.1 kb SV40T插入片段.经质粒DNA测序分析的阳性克隆,确证无内含子. 结论:获得重组的2.1 kb无内含子的SV40T,成功构建了逆转录病毒载体pLLTSN. 展开更多

关键词 SV40T外显子 逆转录病毒 载体pLLTSN 肝细胞 抗原

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鼠特异性Fas抗体对人鼠嵌合肝中人肝细胞增殖的促进作用 被引量：3

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作者 蒋黎 李俊刚 +2 位作者 兰林 王宇明 刘国栋 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第16期1734-1740,共7页

目的:探讨人胎肝细胞移植联合使用JO2抗体的策略,促进人胎肝细胞在小鼠肝内存活和增殖.方法:裸鼠经脾移植1×106人胎肝细胞,移植后第1天ipJO2抗体,剂量为0.2mg/kg,1次/wk,持续12wk为实验组,裸鼠经人胎肝细胞移植后未给予JO2抗体为... 目的:探讨人胎肝细胞移植联合使用JO2抗体的策略,促进人胎肝细胞在小鼠肝内存活和增殖.方法:裸鼠经脾移植1×106人胎肝细胞,移植后第1天ipJO2抗体,剂量为0.2mg/kg,1次/wk,持续12wk为实验组,裸鼠经人胎肝细胞移植后未给予JO2抗体为对照组,建立人鼠嵌合肝动物模型.采用HE染色、原位末端标记方法(TUNEL染色)观察未经人胎肝细胞移植而给予JO2抗体24h后处死的裸鼠肝脏组织.免疫组化、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时相点实验组和对照组嵌合肝中肝组织人白蛋白、特异人增殖细胞核抗原(PCNA)和人白蛋白mRNA表达.结果:未经人胎肝细胞移植而给予JO2抗体的裸鼠病理组织切片发现肝组织出血、坏死和细胞凋亡.实验组和对照组裸鼠均能存活至24wk.移植后嵌合鼠肝组织表达人白蛋白和人PCNA阳性细胞的时间:实验组2-20wk,对照组2-12wk;白蛋白mRNA表达:实验组4-16wk,对照组4-8wk;实验组与对照组移植后8、12wkPCNA表达差异有显著性(25.7%±8.5%vs13.4%±7.8%,29.4%±5.0%vs8.5%±2.3%,均P<0.05).结论:人肝细胞异种移植于裸鼠体内能够存活,经小剂量JO2抗体ip裸鼠,使人鼠嵌合肝中人肝细胞得以增殖,存活时间延长. 展开更多

关键词 FAS抗体 人肝细胞 移植 人鼠嵌合肝 增殖

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人工肝生物反应器研究进展 被引量：3

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作者 向德栋 王英杰 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第5期598-600,共3页

肝功能衰竭有很高的死亡率,肝脏移植是治疗终末期肝病的较好方法,由于供体器官缺乏,费用高昂,需长期使用免疫抑制剂等原因,仍有较多患者不能进行肝脏移植,探索肝功能衰竭非肝脏移植治疗显得非常必要.生物人工肝是近年来肝功能衰竭治疗... 肝功能衰竭有很高的死亡率,肝脏移植是治疗终末期肝病的较好方法,由于供体器官缺乏,费用高昂,需长期使用免疫抑制剂等原因,仍有较多患者不能进行肝脏移植,探索肝功能衰竭非肝脏移植治疗显得非常必要.生物人工肝是近年来肝功能衰竭治疗的热门课题,而生物人工肝装置及对肝功能衰竭治疗效果最有影响的关键部分是生物反应器,因此,生物反应器已成为人工肝研究的重要课题. 展开更多

关键词 人工肝 生物反应器 研究进展 肝脏移植 终末期肝病

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