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基于蛋白L染色方法的流式细胞术检测嵌合抗原受体的表达
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作者 邓海峰 韩为东 蒋敬庭 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第4期241-244,共4页
目的探讨以蛋白L(protein L)为基础的流式细胞染色方法用于检测患者T细胞表面嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)表达的技术可行性。方法单采2例CD19阳性淋巴瘤患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC... 目的探讨以蛋白L(protein L)为基础的流式细胞染色方法用于检测患者T细胞表面嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)表达的技术可行性。方法单采2例CD19阳性淋巴瘤患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),磁珠分选法获得T细胞,加入靶向CD19、CD22的CAR逆转录病毒,转染、诱导培养成CAR-T细胞。通过生物素化蛋白L(biotinylated protein L)-亲合素(streptavidin-PE)系统对CAR-T细胞表面的单链抗体片段(single-chain variable fragment,sc Fv)进行标记,用流式细胞术检测活化培养的T细胞中CD19-CAR、CD22-CAR表达阳性T细胞的比例,以常规Anti-Ig G染色的流式细胞检测方法作为对照组,进行结果对比。结果 sc Fv-biotinylated protein L-streptavidin-PE-流式细胞染色方法能够检测到CAR-T细胞表面CAR表达。2例患者蛋白L实验组和Anti-Ig G对照组CD19-CAR-T细胞比例分别为71.6%vs64.2%和49.3%vs 43.8%;CD22-CAR-T细胞比例分别为53.1%vs 46.3%和56.5%vs 64.0%,测定结果相似。结论以蛋白L为基础的染色方法可以作为流式细胞术检测CAR-T细胞的常规染色方法。 展开更多
关键词 嵌合抗原受体T细胞 蛋白L 流式细胞术
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