135例Duchenne型肌营养不良症DMD基因缺失分析 被引量：5

1

作者 闫杨 杨晓凤 +1 位作者 尹富华 黄胜男 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第8期872-874,共3页

目的杜氏肌营养不良(DMD)患者基因缺失检测。方法应用12对引物、PCR多重反应体系和聚丙烯酰胺凝胶电泳对135个患者进行基因分析研究,设正常和空白对照,检测结果再以二重PCR进行验证。结果54例患者有不同区域的缺失,基因缺失检出率为40%... 目的杜氏肌营养不良(DMD)患者基因缺失检测。方法应用12对引物、PCR多重反应体系和聚丙烯酰胺凝胶电泳对135个患者进行基因分析研究,设正常和空白对照,检测结果再以二重PCR进行验证。结果54例患者有不同区域的缺失,基因缺失检出率为40%。结论其缺失区域集中在45～53号外显子,最高峰在48号外显子。 展开更多

关键词 杜氏肌营养不良 基因诊断 PCR

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自体骨髓干细胞移植治疗酒精性股骨头坏死的临床观察 被引量：3

2

作者 吕乃武 杨晓凤 +4 位作者 王红梅 张轶斌 许忆峰 吴雁翔 单鸿 《医学临床研究》 CAS 2008年第3期497-499,共3页

【目的】探讨自体骨髓干细胞移植治疗酒精性股骨头坏死的临床疗效。【方法】对自愿接受自体骨髓干细胞移植治疗酒精性股骨头坏死的55例、68髋进行股骨头供血动脉干细胞灌注术。移植后随访观察患者髋关节疼痛程度、行走距离、髋关节活动... 【目的】探讨自体骨髓干细胞移植治疗酒精性股骨头坏死的临床疗效。【方法】对自愿接受自体骨髓干细胞移植治疗酒精性股骨头坏死的55例、68髋进行股骨头供血动脉干细胞灌注术。移植后随访观察患者髋关节疼痛程度、行走距离、髋关节活动度及影像学改变。【结果】移植后Ⅰ～Ⅲ期3～12个月患者的髋关节疼痛缓解、行走距离增加、活动度增加。48髋干细胞移后6个月,77%(37髋)在股骨头区有新生血管形成。Ⅳ期6髋中干细胞移植后,16.7%(1髋)在股骨头区有新生血管形成。术后18个月38髋行股骨头影像学检查,30髋表现为不同程度的骨质修复、死骨吸收、死骨范围缩小,有新生骨形成。【结论】自体骨髓干细胞移植治疗酒精性股骨头坏死是一种简便、安全、有效的治疗方法。 展开更多

关键词 股骨头坏死/治疗 移植 自体 造血干细胞移植

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PCR-RFLP和MLPA两种技术方法对脊髓性肌萎缩症的诊断 被引量：2

3

作者 闫杨 王红梅 +2 位作者 宋楠 黄胜男 孙斌 《中国优生与遗传杂志》 2017年第4期49-51,共3页

目的应用PCR-RFLP和多重连接依赖式探针扩增法(MLPA)技术对临床诊断为脊髓性肌萎缩症(SMA)患儿进行基因诊断,并比较两种方法检测SMN基因缺失改变的效果。方法应用DNA抽提试剂盒抽提3个SMA家系成员的外周血样品DNA,电泳检测,定量,常规PC... 目的应用PCR-RFLP和多重连接依赖式探针扩增法(MLPA)技术对临床诊断为脊髓性肌萎缩症(SMA)患儿进行基因诊断,并比较两种方法检测SMN基因缺失改变的效果。方法应用DNA抽提试剂盒抽提3个SMA家系成员的外周血样品DNA,电泳检测,定量,常规PCR法扩增SMN基因的7、8号外显子,Dra I、Dde I酶切PCR产物,常规聚丙烯胺凝胶电泳法分离酶切后PCR产物,Genefinder染色检测。同时应用M LPA检测试剂盒P021进行检测。结果 PCR-RFLP显示3个家系中的患儿均纯合缺失SMN1的第7、8号外显子,MLPA检测结果与之完全相符。结论与PCR-RFLP相比,MLPA更加简便、快捷、可靠,是一种高效的遗传病基因诊断手段。 展开更多

关键词 脊髓性肌萎缩症 多重连接依赖式探针扩增 基因诊断

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基于MLPA技术对单基因遗传病DMD/BMD、SMA基因诊断的研究 被引量：2

4

作者 闫杨 王红梅 《中国优生与遗传杂志》 2017年第9期8-10,共3页

目的建立单基因遗传病DMD/BMD与SMA的多重连接依赖性探针扩增技术(MLPA)检测平台,提高患者诊断率和携带者检出率,并指导再生育。方法选择2010年至2013年在解放军四六三医院就诊的50例DMD患者,5例BMD患者和7例SMA患者,运用MLPA技术对患者... 目的建立单基因遗传病DMD/BMD与SMA的多重连接依赖性探针扩增技术(MLPA)检测平台,提高患者诊断率和携带者检出率,并指导再生育。方法选择2010年至2013年在解放军四六三医院就诊的50例DMD患者,5例BMD患者和7例SMA患者,运用MLPA技术对患者的DMD基因、SMN1基因的缺失/重复突变进行突变筛查,同时对有基因缺失的DMD、SMA先症者的姐妹或母亲进行DMD、SMN1基因携带者筛查。结果 DMD:55例患者中30例患者有外显子缺失,3例有外显子重复,其中20例外显子缺失的患者中8例其姐妹或母亲为缺失携带者。SMA:7例患者中5例SMN1第7+8号外显子纯合缺失和1例7外显子纯合缺失,1例没有缺失,5例患儿的父母亲中4例为SMN1外显子7+8部分缺失携带者。结论 MLPA是一种高效、灵敏、准确、性价比较高的DMD/BMD、SMA分子诊断新方法。MLPA的应用不依赖患者信息,可有效对DMD/BMD、SMA致病基因拷贝数进行相对定量,检出遗传缺陷携带者和提高患者诊断率。 展开更多

关键词 多重连接依赖性探针扩增技术 假肥大型进行性肌营养不良 脊髓性肌营养不良症 基因诊断

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15例儿童型脊肌萎缩症的基因分析 被引量：1

5

作者 闫杨 杨晓凤 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第2期202-203,共2页

脊肌萎缩症（spinal muscular atrophy，SMA）是一种较常见的常染色体隐性遗传病，由于脊髓前角运动神经细胞退行性变，导致患者进行性骨骼肌无力和肌萎缩。根据发病年龄和病情轻重，临床上将SMA分为4型，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型称为儿童型SMA，... 脊肌萎缩症（spinal muscular atrophy，SMA）是一种较常见的常染色体隐性遗传病，由于脊髓前角运动神经细胞退行性变，导致患者进行性骨骼肌无力和肌萎缩。根据发病年龄和病情轻重，临床上将SMA分为4型，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型称为儿童型SMA，Ⅳ型为成人型SMA。小儿时期起病的SMA是婴儿期最常见的致死性遗传病。因此，对此病进行深入研究是十分必要的。为此，我们对15例患者进行运动神经元生存基因（survival motor neuron，SMN）基因分析。 展开更多

关键词 脊肌萎缩症 基因分析 儿童型 常染色体隐性遗传病 运动神经元生存基因 神经细胞退行性变 neuron 骨骼肌无力

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应用多重连接依赖探针扩增技术对脊髓性肌萎缩症患者及致病基因携带者进行基因诊断 被引量：1

6

作者 闫杨 宋楠 +2 位作者 王红梅 孙斌 黄胜男 《中国优生与遗传杂志》 2016年第9期16-17,共2页

目的探讨多重连接依赖探针扩增(Multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术对脊髓性肌萎缩症(SMA)患者及携带者基因检测的临床应用价值。方法本研究采用盐析法提取患者外周血DNA,利用MLPA试剂盒P021方法进行分析。结... 目的探讨多重连接依赖探针扩增(Multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术对脊髓性肌萎缩症(SMA)患者及携带者基因检测的临床应用价值。方法本研究采用盐析法提取患者外周血DNA,利用MLPA试剂盒P021方法进行分析。结果 10例疑是SMA患者中7例SMN1第7+8号外显子纯合缺失和2例7外显子纯合缺失,1例没有缺失,患儿的父母亲中5例为SMN1外显子7+8部分缺失携带者。结论 MLPA更加简单、准确、高效,仅需要少量的DNA模板就能快速准确的定量SMN1、SMN2,还有助于区分表型和筛查携带者,是一种高效的遗传病基因诊断方法,能为遗传咨询提供可靠的信息,相信以后会在临床广泛应用。 展开更多

关键词 脊肌萎缩症 MLPA SMN基因 基因诊断

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假肥大型肌营养不良肌细胞抗肌萎缩蛋白的免疫组化研究 被引量：1

7

作者 宋楠 杨晓凤 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期377-379,共3页

目的研究假肥大型肌营养不良患者肌细胞中抗肌萎缩蛋白（dystrophin）的表达及其诊断意义。方法应用针吸型活检术取121例假肥大型肌营养不良症患者（108例DMD患者,13例BMD患者）的肌组织,采用HE染色观察被检肌肉病理改变,免疫组织化学... 目的研究假肥大型肌营养不良患者肌细胞中抗肌萎缩蛋白（dystrophin）的表达及其诊断意义。方法应用针吸型活检术取121例假肥大型肌营养不良症患者（108例DMD患者,13例BMD患者）的肌组织,采用HE染色观察被检肌肉病理改变,免疫组织化学染色技术检测抗肌营养不良蛋白表达,以正常人肌细胞作为对照。结果正常人肌细胞膜上抗肌营养不良蛋白染色阳性,呈完整环形条带沿肌细胞膜分布;DMD患者肌膜完全无显色;BMD患者染色弱阳性,可见沿肌细胞膜分布的间断表达。结果 应用针吸型活检技术和免疫组化染色法检测抗肌营养不良蛋白,有助于DMD和BMD确诊及鉴别诊断。 展开更多

关键词 假肥大肌营养不良 免疫组化 抗肌萎缩蛋白

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应用多重连接依赖探针扩增技术对假肥大型肌营养不良患者及致病基因携带者进行基因诊断

8

作者 闫杨 杨晓凤 王红梅 《中国优生与遗传杂志》 2013年第5期10-13,共4页

目的探讨多重连接依赖探针扩增(Multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术对假肥大型肌营养不良(DMD)患者及携带者基因检测的临床应用价值,为进一步创建可靠的DMD产前诊断技术平台奠定基础。方法选择2010年至2011年... 目的探讨多重连接依赖探针扩增(Multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术对假肥大型肌营养不良(DMD)患者及携带者基因检测的临床应用价值,为进一步创建可靠的DMD产前诊断技术平台奠定基础。方法选择2010年至2011年在解放军四六三医院就诊的45例DMD患者和5例BMD患者,运用MLPA技术对患者的DMD基因的缺失/重复突变进行突变筛查,同时对20例有基因缺失先症者的姐妹或母亲进行DMD基因缺失携带者筛查。结果50例患者中30例患者有外显子缺失,3例有外显子重复,其中20例外显子缺失的患者中10例其姐妹或母亲为缺失携带者。结论 MLPA是一种快速、准确、简便检测缺失及重复突变的方法,同时可以对携带者进行诊断,是一种高效的遗传病基因诊断手段。 展开更多

关键词 假肥大性肌营养不良症 多重连接依赖式探针扩增 缺失 重复突变

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异基因造血干细胞对假肥大性肌营养不良患者DMD基因修复的实验研究

9

作者 闫杨 王红梅 +3 位作者 杨晓凤 宋楠 孙斌 黄胜男 《中国优生与遗传杂志》 2015年第12期9-10,共2页

目的假肥大性肌营养不良(Duchenne/Becker muscular dystrophy,DMD/BMD)是一种X-连锁隐性遗传病,是由dystrophin基因突变引起的,目前没有有效的治疗方法,希望异基因造血干细胞移植治疗能够修复dystrophin基因。方法收集9例DMD造血干细... 目的假肥大性肌营养不良(Duchenne/Becker muscular dystrophy,DMD/BMD)是一种X-连锁隐性遗传病,是由dystrophin基因突变引起的,目前没有有效的治疗方法,希望异基因造血干细胞移植治疗能够修复dystrophin基因。方法收集9例DMD造血干细胞移植病例,从外周血白细胞中抽提移植前后基因组DNA,应用多重连接依赖探针扩增(Multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术对9例DMD患者进行造血干细胞移植前后DMD基因检测,用短串联重复序列(Short tandem repeats,STR)技术对MLPA检测结果进行验证。结果 MLPA试剂盒P034-A2/P035-A2检测9例患者造血干细胞移植前外周血标本均存在外显子缺失,移植后缺失的外显子修复,其中2例患者造血干细胞移植前肌肉标本均存在外显子缺失,移植后缺失的外显子部分修复。结论 MLPA技术更加简便、快捷、可靠对DMD/BMD患者造血干细胞移植移植前后DMD基因进行分析,为遗传病造血干细胞移植后是否植入提供另一可靠依据,异基因造血干细胞移植能修复DMD缺失的基因。 展开更多

关键词 多重连接探针扩增 假肥大性肌营养不良 DMD基因 短串联重复序列

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经动脉骨髓干细胞移植治疗股骨头坏死63例 被引量：51

10

作者 杨晓凤 王红梅 +5 位作者 许忆峰 张轶斌 徐波 吴雁翔 吕欣 林慧丽 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第13期3-5,共3页

目的:观察经动脉骨髓干细胞移植治疗股骨头坏死的效果。方法:选择2004-08/2005-12在解放军第四六三医院细胞治疗中心收治的股骨头坏死接受动脉内骨髓干细胞移植治疗患者63例113髋。年龄12～54岁(平均33岁),曾经应用皮质激素史29例,外伤... 目的:观察经动脉骨髓干细胞移植治疗股骨头坏死的效果。方法:选择2004-08/2005-12在解放军第四六三医院细胞治疗中心收治的股骨头坏死接受动脉内骨髓干细胞移植治疗患者63例113髋。年龄12～54岁(平均33岁),曾经应用皮质激素史29例,外伤史17例,大量饮酒史11例,原因不明6例。63例患者均行髋关节X射线摄片检查确诊,15例同时行髋关节MRI检查,38例行髋关节CT检查。根据Ficat分期法Ⅱ期52髋(46.0%),Ⅲ期58髋(51.3%),Ⅵ期3髋(2.7%)。①采集自体骨髓200～400mL,Ficoll密度梯度离心,分离单个核细胞(1～4)×1011L-1,CD34+细胞1.4%～3.5%(2.4%),CD133+细胞1.13%～3.25%(1.88%),制备成单个核细胞悬液10～20mL。②在数字减影血管造影术下行股动脉穿刺,将导管超选插入旋股内动脉、旋股外动脉及闭孔动脉,将细胞悬液缓慢灌注入动脉内。③干细胞移植后随访观察患者髋关节疼痛程度、疼痛性质及疼痛时间变化、行走距离及步态变化、髋关节外展与内旋功能变化;6个月后复查股骨头供血动脉造影,观察血管新生及股骨头供血动脉充盈情况;观察干细胞移植后不良反应。12个月后行髋关节X射线摄片、CT,MRI扫描观察股骨头形态学变化。结果:63例患者关节疼痛、行走距离及关节功能平均随访3.2个月,其中5例行数字减影血管造影术,15例行X射线检查(2例同时做CT检查)。①随访时观察髋关节疼痛有不同程度的缓解54例(54/63,85.7%),关节功能改善19例(19/63,30.2%),行走间距延长34例(34/63,54%),生活质量提高。②干细胞移植术后6个月5例患者行数字减影血管造影术股骨头供血动脉造影检查,显示旋股内动脉、旋股外动脉及闭孔动脉管径增粗,新生血管增多,血流速度增快,与移植前血管造影结果比较,股骨头区血液供应明显改善。③2例18个月X射线摄片、CT扫描股骨头坏死区缩小,可见新骨形成。④63例患者在治疗中未发生� 展开更多

关键词 干细胞移植 骨髓 动脉 股骨头坏死

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干细胞移植改善股骨头坏死缺血状态的实验及临床效应:20只模型兔及188例患者资料分析(英文) 被引量：15

11

作者 杨晓凤 王红梅 +6 位作者 许忆峰 张轶斌 吴雁翔 吕欣 吕乃武 单鸿 马淑彦 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1558-1562,共5页

背景：缺血性股骨头坏死由于股骨头局部滋养血管损伤、供血不足致病，迄今尚无最佳治疗方案，改善股骨头血液供应成为治疗本病的关键。目的：通过动物实验和临床观察，验证自体骨髓问充质干细胞移植血管再生技术改善股骨头坏死缺血状态... 背景：缺血性股骨头坏死由于股骨头局部滋养血管损伤、供血不足致病，迄今尚无最佳治疗方案，改善股骨头血液供应成为治疗本病的关键。目的：通过动物实验和临床观察，验证自体骨髓问充质干细胞移植血管再生技术改善股骨头坏死缺血状态的效果。设计：对比动物实验和自身对照临床观察。单位：解放军第四六三医院细胞治疗中心。资料：①动物：选用日本大耳白兔20只，雌雄不拘，体质量3．0—4．0kg，购于沈阳军区总医院动物实验中心。此动物实验符合动物伦理学要求。②对象：选择2004—07／2007—07在解放军第四六三医院细胞治疗中心住院的具有完整随访资料的缺血性股骨头坏死患者188例（335髋），男113例，女75例，年龄18-72岁。均经髋关节X线摄片、核素扫描、MRI、CT检查确诊；对治疗和实验知情同意。实验经医院伦理委员会批准。方法：①动物实验：实验于2004—01／2004—06在沈阳军区总医院动物实验中心完成。采用液氮冷冻股骨头缺血性坏死模型建立方法，双后肢股骨头均制作缺血模型，右侧为移植组，左侧为对照组。抽取骨髓，将所获单个核细胞经右股动脉注入；同法将生理盐水注入左侧股动脉内。②临床观察：密度梯度离心缺血性股骨头坏死患者自体骨髓，分离单个核细胞。行旋股内、旋股外及闭孔动脉干细胞移植术。主要观察指标：①4周后行DSA动脉造影观察双侧血管新生情况。4，12周后取双侧股骨头标本，行病理切片观察新骨再生及股骨头修复程度。②于移植后第3，6，12，24个月观察患者髋关节疼痛、行走间距及步态、髋关节外展与内旋功能变化。于干细胞移植后6个月行股骨头供血动脉造影术，观察血管新生及股骨头供血动脉充盈情况。于干细胞移植后6，12，24个月行CT，X射线，MRI检查，观察股骨头区形态� 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 动脉内干细胞移植 股骨头坏死 血管新生

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骨髓和脐血间充质干细胞改善肌营养不良患者肌力的临床观察 被引量：15

12

作者 杨晓凤 许忆峰 +8 位作者 张轶斌 王红梅 吕乃武 吴雁翔 吕欣 崔激萍 单鸿 阎杨 周金旭 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第36期2552-2556,共5页

目的观察骨髓和脐血间充质干细胞双移植方案治疗进行性肌营养不良（PMD）患者的安全性和有效性。方法2007年6月至2008年6月对经血清酶学、肌电图、基因分析、肌肉活检、肌肉磁共振成像（MRI）确诊的82例PMD患者采用干细胞双移植方案进... 目的观察骨髓和脐血间充质干细胞双移植方案治疗进行性肌营养不良（PMD）患者的安全性和有效性。方法2007年6月至2008年6月对经血清酶学、肌电图、基因分析、肌肉活检、肌肉磁共振成像（MRI）确诊的82例PMD患者采用干细胞双移植方案进行治疗。采用自身治疗前后对照方法进行研究，随访Z～12个月。治疗方法：①骨髓间充质干细胞（BMSC）：经双侧髂后上脊穿刺采集骨髓80～150ml，Ficoll密度梯度离心分离单个核细胞并诱导分化为BMSC。②人脐血间充质干细胞（CB—MSC）：采集脐带血80～160ml，CB—MSC制备过程同BMSC。③干细胞移植术：收集BMSC和CB—MSC，制备成1×10^8／m]BMSC细胞悬液和1×10^7／mlCB—MSC细胞悬液，分次移植于患者的四肢肌肉内和静脉内。移植后3、6、9、12个月观察患者日常生活活动能力评价（ADL）、临床分级疗效评定、酶学、肌电图、肌肉MRI变化。结果82例患者干细胞移植后3、6、9、12个月进行临床分级疗效评定，显效31例（37．8％），有效37例（45．1％），无效14例（17．1％），总有效率为82．9％。70例患者（85．4％）肌力提高，肢端温暖、食欲改善、动作灵活、体重增加。72例患者ADL评分增加（87．8％），治疗前后结果差异有统计学意义（P〈0．01）。于细胞移植后LDH降低，差异有统计学意义[（475±223）u／L比（410±216）u／L，P〈0．05，t=6．650]，肌酸激酶f（2952±2259）u／L比（2841±2092）u／L，P=0．225，t=1．094]、肌酐[（26±12）μmol／L比（25±11）μmol／L，P=0．306，t=1．029]轻度降低，但差异无统计学意义。干细胞双移植方案实施中儿童患者依从性好，未发生不良反应及并发症。结论干细胞双移植方案治疗进行性肌营养不良可使82．9％的患者获得临床症状改善，运动功能及肌力提高，安全性好，无排斥反应，是一种治疗进行性肌营养 展开更多

关键词 进行性肌营养不良 骨髓 脐带血 间充质干细胞 移植

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干细胞移植改善股骨头坏死缺血状态122例临床观察 被引量：10

13

作者 杨晓凤 王红梅 +5 位作者 许忆峰 张轶斌 吴雁翔 吕欣 吕乃武 单鸿 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期1428-1431,共4页

目的探讨经动脉自体骨髓于细胞(BMSC)和外周血干细胞(PBSC)移植改善股骨头坏死缺血状态的临床疗效。方法 2004年7月至2006年12月对122例(211髋)成人缺血性股骨头坏死(ANFH)患者施行自体 BMSC 或 PBSC 移植治疗,按国际分期标准(ARCO)分期... 目的探讨经动脉自体骨髓于细胞(BMSC)和外周血干细胞(PBSC)移植改善股骨头坏死缺血状态的临床疗效。方法 2004年7月至2006年12月对122例(211髋)成人缺血性股骨头坏死(ANFH)患者施行自体 BMSC 或 PBSC 移植治疗,按国际分期标准(ARCO)分期,设自身前后对照方法进行疗效观察。BMSC 组90例和 PBSC 组32例在 DSA 下行股骨头供血动脉干细胞移植术,移植后第3、6、12、24个月进行髋关节 Harris 评分做疗效评价,6个月复查股骨头供血动脉造影观察血管新生情况。每间隔6个月复查影像学变化。结果 122例患者随访3～24个月(平均10.2个月),髋关节疼痛缓解104例(85.1%),关节功能改善76例(62.0%),90例(73.9%)行走间距延长。干细胞移植术后6个月,15例患者股骨头供血动脉造影检查见供血动脉较移植前明显增多、增粗,血流速度增快;12～24个月20例股骨头区可见骨质病变获得改善。结论经动脉自体 BMSC 和 PBSC 移植方法简便,安全有效,对缺血性股骨头无再次损伤,患者依从性好,是治疗缺血性股骨头坏死的一种新途径。 展开更多

关键词 骨髓 造血干细胞移植 股骨头坏死 外周血

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骨髓间充质干细胞移植治疗Becker型肌营养不良症58例临床分析 被引量：9

14

作者 王红梅 杨晓凤 +6 位作者 张轶斌 许忆峰 吴雁翔 吕乃武 单鸿 崔激平 周金旭 《中国临床医学》 2010年第1期11-14,共4页

目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）移植治疗Becker型肌营养不良症的临床效果。方法：2007年6月-2009年4月对58例Becker型肌营养不良症患者，进行自身治疗前后对照研究，患者按照3～10μg·kg^-1·d^-1。剂量，皮下注射粒细胞... 目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）移植治疗Becker型肌营养不良症的临床效果。方法：2007年6月-2009年4月对58例Becker型肌营养不良症患者，进行自身治疗前后对照研究，患者按照3～10μg·kg^-1·d^-1。剂量，皮下注射粒细胞集落刺激因子，动员4d后采集骨髓．利用Ficoll密度梯度离心方法，体外培养每例患者的骨髓干细胞7～10d，然后配制成浓度为2．46×10^10·L^-1的骨髓间充质干细胞悬液，采用经静脉及四肢肌肉局部双移植途径，其一部分经局部肌内注射移植入患者四肢近端肌肉群中，另一部分经静脉移植入患者体内，单次移植提取的单个核细胞总量为（6．25±2．19）×10^8，间充质细胞含量为（1．96±0．92）×10^8。观察移植后3个月，6个月，9个月，12个月患者的肌力、行走间距以及心肌酶谱变化。结果：MSCs移植后75．9％的患者肌力有所改善，行走间距延长，心肌酶谱好转。结论：MSCs双途径移植治疗Becker型进行性肌营养不良症是一种新的有效治疗方法。 展开更多

关键词 骨髓间充质 干细胞移植 BECKER型肌营养不良症

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骨髓和脐血间充质干细胞联合移植治疗杜氏型肌营养不良 被引量：6

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作者 杨晓凤 许忆峰 +7 位作者 张轶斌 王红梅 吕乃武 吴雁翔 吕欣 崔激萍 单鸿 周金旭 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第36期7015-7019,共5页

背景:杜氏型肌营养不良的肌细胞损伤并非单一细胞受损,而是多因素缺陷导致肌细胞进行性萎缩的严重后果,患儿一经确诊即被告之无法医治。近年来国内外学者把目光转向具有修复和再生功能的干细胞,研究发现干细胞技术可以改善肌营养不良的... 背景:杜氏型肌营养不良的肌细胞损伤并非单一细胞受损,而是多因素缺陷导致肌细胞进行性萎缩的严重后果,患儿一经确诊即被告之无法医治。近年来国内外学者把目光转向具有修复和再生功能的干细胞,研究发现干细胞技术可以改善肌营养不良的运动功能。目的:首次采用骨髓和脐血间充质干细胞联合移植方法,首次采用静脉注射和局部2种治疗途径,观察治疗杜氏型肌营养不良患者的安全性和有效性。设计:自身前后对照。对象:2007-06/2008-09解放军第四六三医院细胞治疗中心应用骨髓和脐血间充质干细胞联合移植方案治疗杜氏型肌营养不良患者31例,男29例,女2例(双胞胎),平均年龄9.7岁,平均病程5.1年,阳性家族史11例,均经临床症状、酶学、肌电图、基因分析、肌肉活检、肌肉核磁共振检查确诊。方法:经双侧髂后上棘抽取患者自体骨髓80～150mL,采用Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞,并诱导分化为骨髓间充质干细胞,调整细胞悬液浓度为1×1010L-1,采用多点注射法移植于患者四肢肌肉内,移植细胞数为(1.5～6.0)×108个。选择健康足月产妇脐带血80～145mL,同法制备脐血间充质干细胞,经静脉植入(1.0～4.8)×107个细胞,1次/周,共3次。主要观察指标:干细胞移植前后患者日常生活活动能力评价,临床分级评价,以及酶学、肌电图、肌肉MRI变化。结果:31例患者均完成15个月随访,中途无脱落。与移植前比较,干细胞移植后3,6,9,12,15个月,26例(84.7%)动作灵活度增强,运动功能改善,日常生活活动能力评分升高(P<0.05);干细胞移植后6个月,血清肌酸肌酶、乳酸脱氢酶水平降低11例,升高8例;5例复查肌电图,波幅改善2例;5例复查MRI,肌肉轮廓较前清晰2例。临床分级评定显效12例(38.7%),有效14例(45.2%),无效5例(16.1%),总有效率为83.9%,未发生不良反应及并发症。结论:骨髓和脐血间充质干细胞联� 展开更多

关键词 杜氏型肌营养不良 骨髓 脐带血 间充质干细胞 移植

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自体骨髓单个核细胞经介入途径移植治疗股骨头坏死54例:12个月疗效随访 被引量：5

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作者 许忆峰 杨晓凤 +5 位作者 王红梅 张轶斌 吴雁翔 吕乃武 单鸿 吕欣 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第15期2904-2906,共3页

目的:观察经介入途径移植自体骨髓单个核细胞在股骨头坏死治疗中的应用,并评价其疗效。方法:选择2004-07/2005-11在解放军四六三院细胞治疗中心住院的,具有完整随访资料的股骨头坏死确诊患者共54例91髋。纳入确诊股骨头坏死,有关节疼痛... 目的:观察经介入途径移植自体骨髓单个核细胞在股骨头坏死治疗中的应用,并评价其疗效。方法:选择2004-07/2005-11在解放军四六三院细胞治疗中心住院的,具有完整随访资料的股骨头坏死确诊患者共54例91髋。纳入确诊股骨头坏死,有关节疼痛、功能障碍等症状患者,性别、年龄不限;排除有严重心力衰竭、严重肾功能异常等不能耐受手术者。符合纳入标准54例,男45例,女9例,12～68岁。按ARCO分期Ⅱ期42髋,Ⅲ期47髋,Ⅳ期2髋。实验对象对治疗的相关内容知情同意并签知情同意。干预措施:抽取患者髂后上嵴骨髓进行单个核细胞悬液的制备。在DSA监视下将采集的单个核细胞混悬液经股动脉行Seldinger法穿刺,穿刺成功后,置入4F动脉鞘,经动脉鞘置入Cobra导管,将导管超选择至闭孔动脉及旋股内外侧动脉,平均注入单个核细胞悬液。术后定期随访症状变化情况,1年后复查X射线或CT,随访疼痛、关节活动度等情况。实验评估:①疼痛指数:无疼痛症状为3分,Harris髋关节评分疼痛分级A级;时有隐痛2分,Harris髋关节评分疼痛B级;轻度疼痛为1分,Harris髋关节评分疼痛C级;中度疼痛为0分,Harris髋关节评分疼痛D级。②功能指数:髋关节屈、伸、展、收、旋转度评分达Harris髋关节活动范围评分4～5分为3分;3～4分为2分;2～3分为1分;小于2分为0分。③X射线平片指数:股骨头形态无变化,应力骨小梁清晰,坏死区明显缩小为3分;坏死区略缩小为2分;治疗前后无明显变化为1分;坏死区扩大为0分。④血管指数:治疗后旋股内、外侧动脉及其分支增粗、增多,延长1cm以上者3分;1～0.5cm者2分;小于0.5cm者1分,无变化者0分。结果:54例患者均完成疼痛症状、关节功能及影像学随访1年。①术后12个月复查疼痛消失9髋,缓解61髋,无缓解21髋,缓解率为76.9%。②关节功能缓解33髋,无缓解58髋,缓解率为36.3%。③1年后X射线平� 展开更多

关键词 股骨头缺血性坏死 骨髓 干细胞移植

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自体外周血干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎:8例报告 被引量：3

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作者 杨晓凤 吴雁翔 +3 位作者 王红梅 许忆峰 吕欣 张轶斌 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第18期41-43,共3页

目的:对血栓闭塞性脉管炎患者行自体外周血干细胞移植治疗前后的相关指标进行综合评估。方法:选择2004-01/11解放军第四六三医院细胞治疗中心收治的自愿接受自体外周血干细胞移植的血栓闭塞性脉管炎患者8例,双下肢病变7例,单肢病变1例,... 目的:对血栓闭塞性脉管炎患者行自体外周血干细胞移植治疗前后的相关指标进行综合评估。方法:选择2004-01/11解放军第四六三医院细胞治疗中心收治的自愿接受自体外周血干细胞移植的血栓闭塞性脉管炎患者8例,双下肢病变7例,单肢病变1例,共累及15只足,均有严重足部静息痛。其中足趾溃疡2例,坏疽3例。全部患者均给予重组人粒细胞集落刺激因子450-600μg/d,皮下注射,进行外周血干细胞动员5d,第6天用COBE6.1血细胞分离机单采干细胞,总量82-106mL,单个核细胞散(129.8-376.7)×109L-1,CD34+细胞0.32%-0.48%。将干细胞悬液制备为(1-2.8)×1011L-1。细胞浓度,按3cm×3cm距离进行缺血肢体移植术。术后对患者经皮氧分压、皮温、踝眩指数和足底深感觉、主观感觉、溃疡及坏疽情况、数字减影血管造影结果及不良事件和副反应进行综合评估,与移植前进行对照。结果:接意向处理分析,8铡患者均进人结果分析。随访时间3个月。①经皮氧分压:6例患者干细胞移植3个月后足部经皮氧分压较移植前有不同程度的改善。②皮温:移植后1个月患者皮温均有不同程度上升(1-5℃)。③踝肱指数:移植后3个月有3例患者足部血流渡幅较移植前有不同程度的增加(为0.22/0.16,0.82/0.43,0.76/0.40)。④足底深感觉:移植后3个月有3例患者较移植前轻度改善。⑤主观感觉:7例患者于术后3-21d疼痛减轻或消失,8例足部冷感在2-28d明显好转。⑥溃疡及坏疽情况:移植后8-16周2例足部溃疡愈合。⑦数字减影血管造影结果:1例患者于干细胞移植后3个月行动脉造影,可见下肢及足部有新生侧支血管形成。⑧不良事件和副反应:6例患者应用细胸动员时感骨骼和肌肉酸痛,移植后3d8例患者均感足部及小腿腓肠肌轻度胀痛,但能耐受。结论:自体外周血干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎,能有效地增加患者的下肢血流量,改善症状,使 展开更多

关键词 血栓性脉管炎 闭塞性 下肢 外周血干细胞移植

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干细胞移植治疗假肥大型肌营养不良症手术前后肌电图演变对照研究 被引量：2

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作者 吴雁翔 杨晓凤 +3 位作者 王红梅 许忆峰 张轶斌 吕乃武 《现代医学》 2010年第2期93-95,共3页

目的:观察干细胞移植治疗假肥大型肌营养不良症的疗效在肌电图上的表现。方法:对46例自愿接受干细胞移植的假肥大型肌营养不良症患者予骨髓血干细胞及脐血干细胞联合移植,术前检查肌电图,术后半年复查,进行前后对照评估。结果:患者术后... 目的:观察干细胞移植治疗假肥大型肌营养不良症的疗效在肌电图上的表现。方法:对46例自愿接受干细胞移植的假肥大型肌营养不良症患者予骨髓血干细胞及脐血干细胞联合移植,术前检查肌电图,术后半年复查,进行前后对照评估。结果:患者术后复查肌电图显示各检测值均有不同程度改善。结论:干细胞移植治疗假肥大型肌营养不良症是一种有效的手段,在肌电图上有比较明确的显示。 展开更多

关键词 干细胞 肌营养不良症 肌电图

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自体骨髓和脐血间充质干细胞联合移植治疗杜氏型肌营养不良症疗效分析 被引量：2

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作者 张轶斌 杨晓凤 +5 位作者 王红梅 许忆峰 崔激平 吴雁翔 吕乃武 单鸿 《临床荟萃》 CAS 2010年第13期1130-1133,共4页

目的探讨自体骨髓间充质干细胞（BMSC）和脐血间充质干细胞（CB-MSC）联合移植治疗杜氏型肌营养不良症临床效果。方法 2007年6月至2009年10月我中心应用自体BMSC和UMSC联合移植治疗杜氏型肌营养不良症患者,并对132例移植满1年的患者采... 目的探讨自体骨髓间充质干细胞（BMSC）和脐血间充质干细胞（CB-MSC）联合移植治疗杜氏型肌营养不良症临床效果。方法 2007年6月至2009年10月我中心应用自体BMSC和UMSC联合移植治疗杜氏型肌营养不良症患者,并对132例移植满1年的患者采用自身治疗前后对照的方法进行研究。全部患者皮下注射粒细胞集落刺激因子,动员4天后采集骨髓,Percoll梯度离心,提取的单个核细胞（MNC）,总量为（5.81±1.82）×10^8,培养骨髓单个核细胞7-14天,最终得到间充质干细胞含量为（1.88±0.92）×10^8。应用四肢肌肉内注射的方式进行干细胞移植。采集人脐带血,制备CB-MSC方法同BMSC,应用静脉滴注方式将CB-MSC移植至患者体内。结果干细胞移植治疗1年后肌力增加者占总患者数的82.6%（109/132）。临床升级人数占24.2%（32/132）。血清肌酸激酶（CK）降低率81.8%,血清乳酸脱氢酶（LDH）降低率85.6%。结论自体BMSC和UMSC联合移植可使部分杜氏型肌营养不良症患者肌力改善,生活自理能力增加,血清CK、LDH水平下降,其安全性高,无不良反应,是治疗杜氏型肌营养不良症的一种新方法 。 展开更多

关键词 肌营养不良 杜氏 干细胞移植 治疗结果

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序贯式干细胞移植治疗Duchenee型肌营养不良症 被引量：1

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作者 杨晓凤 许忆峰 +6 位作者 吕乃武 张轶斌 王红梅 陆岩 吕欣 周金旭 刘心萍 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第40期7487-7492,共6页

背景:Duchenne型肌营养不良症是一种累及肌肉系统的致死性遗传疾病,迄今尚无有效治疗方法。近年来学者们针对干细胞治疗Duchenne型肌营养不良症进行了基础研究和动物实验,在此基础上又进行了有意义的临床试验。目的:观察Duchenne型肌营... 背景:Duchenne型肌营养不良症是一种累及肌肉系统的致死性遗传疾病,迄今尚无有效治疗方法。近年来学者们针对干细胞治疗Duchenne型肌营养不良症进行了基础研究和动物实验,在此基础上又进行了有意义的临床试验。目的:观察Duchenne型肌营养不良症患儿接受序贯式干细胞移植治疗前后,其运动功能、肌细胞修复与再生、抗肌萎缩蛋白表达和缺失基因替代的变化,评价治疗的可行性和安全性。方法:于2009-05应用序贯式干细胞移植治疗1例8岁男性Duchenne型肌营养不良症患儿,多重连接探针扩增方法基因分析13外显子缺失。序贯式干细胞移植,即依次行脐带间充质干细胞经静脉内移植-肌肉内移植-单倍体异基因造血干细胞移植。定期检测血清酶学变化、供者HLA植入证据、缺陷基因表达、肌细胞膜抗肌萎缩蛋白表达、运动功能改善情况。结果与结论:序贯式干细胞移植治疗Duchenne型肌营养不良症,可使缺失基因替代,肌细胞膜dystrophin阳性表达,血清酶学显著降低,进一步提高运动功能。可阻止Duchenne型肌营养不良症患儿疾病进展,有望获得持续性改善。 展开更多

关键词 假肥大型肌营养不良症 序贯 脐带间充质干细胞 单倍体异基因 造血干细胞移植 抗肌萎缩蛋白

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