农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究 被引量：43

1

作者 张艳贞 王罡 +4 位作者 胡汉桥 魏松红 季静 王军军 李昌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期35-39,共5页

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体 ,结果还发现将共培养温度降到 2 2℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。 展开更多

关键词 玉米 自交系 转基因 农杆菌 预培养 共培养温度 PCR Bt杀虫蛋白基因

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用花粉管通道法将Bt杀虫基因导入玉米自交系的研究 被引量：33

2

作者 王罡 杜娟 张艳华 《玉米科学》 CAS CSCD 2002年第1期36-37,共2页

本文利用花粉管通道技术 ,以生产上优良玉米自交系 792 2、3 4 0、4 4 4、4 112、吉 85 3、890 2、吉 83 5、吉 84 6、Mo17为材料 ,将Bt杀虫蛋白基因导入这 9个玉米自交系中 ,在D1代对转基因的 80 0株植株进行PPT( 3 0 0X)筛选 ,转基因... 本文利用花粉管通道技术 ,以生产上优良玉米自交系 792 2、3 4 0、4 4 4、4 112、吉 85 3、890 2、吉 83 5、吉 84 6、Mo17为材料 ,将Bt杀虫蛋白基因导入这 9个玉米自交系中 ,在D1代对转基因的 80 0株植株进行PPT( 3 0 0X)筛选 ,转基因植株成活率为 3 0 % ,对其中 60株进行PCR分子检测 ,得到 3株抗性转化植株 ,证明目的基因已转入玉米中 ,转化率为 0 3 75 %。 展开更多

关键词 玉米 自交系 花粉管通道技术 Bt杀虫蛋白基因 PCR 遗传转化

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番茄组织培养体系的建立及其影响因素的研究 被引量：42

3

作者 何秀霞 陆一鸣 +1 位作者 白杰英 李彦舫 《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》 2003年第1期30-33,共4页

以 11种番茄 (lylopersiconesculentum Mill)栽培品种为实验材料 ,以 10～ 12天的无菌苗的子叶、下胚轴段、叶片、茎段为外植体 ,通过对供体基因型、激素浓度及培养条件的研究 ,建立了一套优化的适于番茄遗传转化的组织培养与再生体系 .

关键词 番茄 组织培养 影响因素

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春小麦穗发芽抗性鉴定及机理研究 被引量：31

4

作者 胡汉桥 王罡 +2 位作者 张艳贞 张领兵 杜娟 《麦类作物学报》 CAS CSCD 2001年第3期13-17,共5页

对国内外 5 7个春小麦品种 (系 )开花后不同时期进行穗发芽抗性和α-淀粉酶活性的测定 ,用改进的凝胶扩散法测定小麦种子α-淀粉酶活性。结果表明 ,不同春小麦品种的抗穗发芽特性及α-淀粉酶活性具有明显差别 ,来自东北地区的大部分主... 对国内外 5 7个春小麦品种 (系 )开花后不同时期进行穗发芽抗性和α-淀粉酶活性的测定 ,用改进的凝胶扩散法测定小麦种子α-淀粉酶活性。结果表明 ,不同春小麦品种的抗穗发芽特性及α-淀粉酶活性具有明显差别 ,来自东北地区的大部分主栽品种的穗发芽抗性中等。总体上 ,红粒品种的穗发芽抗性比普通白粒品种强 ,在白粒品种中也存在抗性极强的品种。不同穗型对发芽率的结果影响不大 ,小麦品种的穗发芽抗性可以用开花后 35～ 40 d的籽粒发芽率为指标。不同品种的α-淀粉酶活性和降落值存在显著差异 ,穗发芽率与种子中α-淀粉酶活性呈显著正相关 ,与降落值呈显著负相关。开花 2 5～ 40 d期间 ,穗发芽总体上呈上升趋势 ,α-淀粉酶有下降趋势 。 展开更多

关键词 春小麦 穗发芽 Α-淀粉酶 降落值 抗性鉴定 酶活性 发芽机理

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花粉管通道法将Bt毒蛋白基因导入优良玉米自交系 被引量：27

5

作者 王罡 张艳贞 +3 位作者 魏松红 胡应刚 吴颖 季静 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期40-44,共5页

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系为材料 ,用花粉管通道法介导质粒pGBIL0 4(actin Bt 35S bar)DNA的转化 ,经对T0 代 1 4 0 3株植株Basta抗性筛选和PCR分子鉴定 ,共获得 5株PCR阳性植株 ,分别为授粉后 8,1 2 ,1 4 ,1 8h导入所得 ,... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系为材料 ,用花粉管通道法介导质粒pGBIL0 4(actin Bt 35S bar)DNA的转化 ,经对T0 代 1 4 0 3株植株Basta抗性筛选和PCR分子鉴定 ,共获得 5株PCR阳性植株 ,分别为授粉后 8,1 2 ,1 4 ,1 8h导入所得 ,总的平均转化率为 0 36 %。结果表明 :只要掌握好导入时机 。 展开更多

关键词 BT毒蛋白基因 玉米 自交系 花粉管通道法 苏云金牙孢杆菌 转化率 基因转化

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重组质粒导入根癌农杆菌冻融法的研究 被引量：30

6

作者 余云舟 杜娟 +1 位作者 王罡 季静 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期257-259,262,共4页

对重组质粒导入农杆菌冻融法的几个技术环节进行改进与优化。结果表明:该方案可简便、快速、有效地将重组质粒导入农杆菌,转化效率高、重复性好。应用该改进和优化的标准冻融法将重组质粒pBISP1,pBIP1,pBIAP1和pBISgp120分别导入根癌农... 对重组质粒导入农杆菌冻融法的几个技术环节进行改进与优化。结果表明:该方案可简便、快速、有效地将重组质粒导入农杆菌,转化效率高、重复性好。应用该改进和优化的标准冻融法将重组质粒pBISP1,pBIP1,pBIAP1和pBISgp120分别导入根癌农杆菌EHA105和LBA4404,构建了植物双元表达载体,为用农杆菌介导法进行植物遗传转化提供了良好的载体系统。 展开更多

关键词 植物基因转化 重组质粒 根癌农杆菌 冻融法 转化效率

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类胡萝卜素概述 被引量：24

7

作者 任永霞 王罡 +2 位作者 郭郁频 王萍 季静 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第3期485-488,共4页

类胡萝卜素是广泛存在于自然界中的一类色素,和人类健康密切相关。本文就类胡萝卜素的重要生物学功能、生物合成途径及影响其合成的相关合成酶基因的研究进展作一概要综述。

关键词 类胡萝卜素 生物学功能 生物合成 合成酶基因

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红景天属4种植物RAPD分析与分类鉴定 被引量：26

8

作者 胡挺松 陆一鸣 +1 位作者 马兰青 李彦舫 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1286-1289,共4页

目的　用 RAPD技术对红景天属 (Rhodiola L.)的大花红景天 R.crenulata、长鞭红景天 R.fastigiata、狭叶红景天 R. kirilowii和高山红景天 R. sachalinensis 4种药用植物进行分子水平鉴定。方法　 CATB法提取红景天属原植物总 DNA,以 2 ... 目的　用 RAPD技术对红景天属 (Rhodiola L.)的大花红景天 R.crenulata、长鞭红景天 R.fastigiata、狭叶红景天 R. kirilowii和高山红景天 R. sachalinensis 4种药用植物进行分子水平鉴定。方法　 CATB法提取红景天属原植物总 DNA,以 2 0 0条随机引物进行随机扩增。结果　用 OPA4 (AATCGGGCTG)、OPB7(GGTGACGCAG)、OPB18(CCACAGCAGT)、OPX14 (ACAGGTGCTG)和 OPZ13(GACTAAGCCC)作随机扩增引物进行随机扩增时 ,可得到识别这些物种基因组 DNA的多态片段。结论　 RAPD法能有效地鉴别红景天类药材 ,把大花红景天、长鞭红景天、狭叶红景天和高山红景天区分开。 展开更多

关键词 红景天属 狭叶红景天 大花红景天 法能 原植物 鉴别 高山红景天 RAPD分析 种植 随机扩增

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大豆基因型对根癌农杆菌菌株敏感性的研究 被引量：23

9

作者 王罡 王萍 +2 位作者 蔺宇 张领兵 吴颖 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期297-300,共4页

以栽培大豆 [Glycinemax (L .)Mer]吉林 30、吉林 43、绥农 8、黑农 35和东农 42等的下胚轴为外植体 ,用EHA10 5和LBA44 0 42个根癌农杆菌菌株 (分别含有 pGBI12 1S4ABC和pGBI4A2B质粒 )研究大豆基因型对根癌农杆菌的敏感性 ,以及根癌... 以栽培大豆 [Glycinemax (L .)Mer]吉林 30、吉林 43、绥农 8、黑农 35和东农 42等的下胚轴为外植体 ,用EHA10 5和LBA44 0 42个根癌农杆菌菌株 (分别含有 pGBI12 1S4ABC和pGBI4A2B质粒 )研究大豆基因型对根癌农杆菌的敏感性 ,以及根癌农杆菌对大豆的侵染能力。结果表明 ,大豆基因型对根癌农杆菌的敏感性存在显著差异 ,以吉林 43最敏感。根癌农杆菌菌株对大豆下胚轴侵染能力不同 ,含有 pGBI12 1S4ABC质粒的LBA44 0 4侵染能力较强 ,但差异未达显著水平。 展开更多

关键词 大豆 基因型 根癌农杆菌 菌株敏感性

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玉米遗传转化系统的研究进展 被引量：11

10

作者 杜娟 王罡 +2 位作者 王萍 张艳华 张艳贞 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期69-72,共4页

本文介绍了近年来玉米遗传转化系统的建立、基因导入手段、方法等方面的研究进展。

关键词 玉米 遗传转化 基因导入

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影响大豆子叶节丛生芽形成的诱导因子研究 被引量：22

11

作者 王萍 王军军 +1 位作者 商德虎 王罡 《吉林农业科学》 CSCD 2001年第6期20-23,29,共5页

以栽培大豆品种吉林 4 3和东农 4 2的子叶节为外植体 ,研究了无菌苗培养基、基本培养基、6_苄氨基嘌呤 (6BA)和吲哚丁酸 (IBA) 4个因子对丛生芽形成的影响。结果表明 :3种无菌苗培养基在诱导丛生芽率和每个外植体丛生芽数上无显著差异 ... 以栽培大豆品种吉林 4 3和东农 4 2的子叶节为外植体 ,研究了无菌苗培养基、基本培养基、6_苄氨基嘌呤 (6BA)和吲哚丁酸 (IBA) 4个因子对丛生芽形成的影响。结果表明 :3种无菌苗培养基在诱导丛生芽率和每个外植体丛生芽数上无显著差异 ,基本培养基MSB诱导丛生芽的效果好于B5,在基本培养基中附加 1 1mg/L或 1 7mg/L的 6_苄氨基嘌呤对诱导子叶节丛生芽有显著的促进作用。子叶节丛生芽诱导率在吉林 4 3和东农 4 2两个基因型间存在差异。 展开更多

关键词 转基因 大豆 子叶节 丛生芽 诱导因子

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玉米自交系Ⅱ型胚性愈伤组织诱导及遗传转化初报 被引量：23

12

作者 杜娟 余云舟 +2 位作者 张领兵 季静 王罡 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期41-44,共4页

以玉米自交系 340芽尖、4112未成熟幼胚为试验材料 ,诱导出良好的Ⅱ型胚性愈伤组织 ;用这 2种材料的Ⅱ型胚性愈伤组织为受体 ,通过基因枪轰击法将Bar基因转入玉米细胞 ,然后用GUS基因检测 ,结果为阳性。

关键词 玉米 愈伤组织 基因枪 BAR基因 培养配方

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东北春麦区小麦白粉病菌生理小种鉴定及其RAPD分析 被引量：18

13

作者 魏松红 王罡 +2 位作者 张领兵 张艳贞 杨家书 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期35-37,40,共4页

对 1999～ 2 0 0 0年小麦白粉病菌的生理小种进行了鉴定 ,并分析了小种种群的变化。应用 2 3个随机引物对白粉病菌 8个不同生理小种进行RAPD分析 ,其中 11个引物的扩增带型在不同生理小种间出现差异 ,共扩增出 5 9条谱带 ,多态性为 47 ... 对 1999～ 2 0 0 0年小麦白粉病菌的生理小种进行了鉴定 ,并分析了小种种群的变化。应用 2 3个随机引物对白粉病菌 8个不同生理小种进行RAPD分析 ,其中 11个引物的扩增带型在不同生理小种间出现差异 ,共扩增出 5 9条谱带 ,多态性为 47 5 %。通过对RAPD分析结果进行聚类分析 ,初步探明了白粉菌小种间的亲缘关系及其与小种毒力高低的相关性。 展开更多

关键词 小麦 白粉病菌 生理小种 鉴定 RAPD分析 东北春麦区 白粉病

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植物遗传转化育种技术的研究进展及评价 被引量：7

14

作者 杜娟 王萍 王罡 《吉林农业科学》 CSCD 2000年第5期23-27,共5页

介绍了全球转基因作物的研究方法、种植面积、推广效益。

关键词 作物育种 基因枪 农杆菌 遗传转化 转基因技术

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转基因植物与生物安全性 被引量：19

15

作者 张艳华 季静 王罡 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期4-7,共4页

自 1 995年以来 ,转基因作物的商业化取得了迅速发展。随着转基因植物的释放 ,其安全性评价越来越引起人们的关注。本文就转基因植物的产业化现状、潜在的生态风险。

关键词 转基因植物 生物安全性 生态风险 安全性评价

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农杆菌介导法获得优良玉米自交系转Bt基因植株 被引量：11

16

作者 张艳贞 王罡 +1 位作者 魏松红 季静 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2004年第1期31-36,共6页

用根癌农杆菌介导法将携带有苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因(Bt)和PPT乙酰转移酶基因(bar)的质粒pGBIL04导入优良玉米自交系340和4112经预培养的幼胚初始愈伤组织,抗性植株平均发生频率为11.21%,经PCR、PCR-Southern和Southernblotting检... 用根癌农杆菌介导法将携带有苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因(Bt)和PPT乙酰转移酶基因(bar)的质粒pGBIL04导入优良玉米自交系340和4112经预培养的幼胚初始愈伤组织,抗性植株平均发生频率为11.21%,经PCR、PCR-Southern和Southernblotting检测证明外源基因Bt已稳定整合到13株玉米基因组中,平均转化率为2.35%。降低共培养温度到22℃的转化率最高达4.44%,Basta抗性检测bar基因也同时转移进再生植株中,部分转化植株已经结实。 展开更多

关键词 农杆菌介导法 玉米 自交系 转Bt基因植株 根癌农杆菌 平均转化率 抗性植株 共培养温度 PCR

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大豆转基因体系的研究进展 被引量：14

17

作者 王萍 王罡 +1 位作者 季静 吴颖 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期969-976,共8页

从大豆的转基因方法和受体系统两个方面概述大豆转基因体系的最新研究进展 ,并讨论了大豆遗传转化的主要障碍及可能的解决途径。作者认为 ,以根癌农杆菌介导大豆子叶节和基因枪轰击大豆未成熟子叶是较有效的大豆遗传转化系统。目前 ,在... 从大豆的转基因方法和受体系统两个方面概述大豆转基因体系的最新研究进展 ,并讨论了大豆遗传转化的主要障碍及可能的解决途径。作者认为 ,以根癌农杆菌介导大豆子叶节和基因枪轰击大豆未成熟子叶是较有效的大豆遗传转化系统。目前 ,在大豆遗传转化研究中存在着大豆组织培养体系有待于进一步完善、遗传转化率较低、重复性差、大豆受体基因型单一等问题 ,建立新的、高效和稳定的大豆组织培养体系 ,提高生产上栽培大豆品种的组织培养能力 ,改遗传转化现有的单一基因为多基因 。 展开更多

关键词 大豆 转基因方法 受体系统

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农杆菌介导的优良玉米自交系遗传转化体系的建立 被引量：7

18

作者 张艳贞 魏松红 +2 位作者 胡汉桥 王军军 王罡 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第3期195-199,共5页

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S .bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,经PPT抗性筛选后分化再生植株。PCR分子检测初步证明Bt基因已整合到再生植株基因组中 ,... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S .bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,经PPT抗性筛选后分化再生植株。PCR分子检测初步证明Bt基因已整合到再生植株基因组中 ,转化率为1.68 %～4.44%。本实验利用转化受体的抗性筛选频率对转化体系进行了优化 ,结果表明 :比较适宜的感染液浓度为OD600=0.5;预培养有利于幼胚转化 ,预培养时间以刚刚诱导出新鲜稳定的初始愈伤为宜 ; 展开更多

关键词 农杆菌介导 玉米 自交系 遗传转化体系 转基因 苏云金芽孢杆菌 预培养 共培养

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小麦基因枪高效转化体系的建立 被引量：5

19

作者 魏松红 张领兵 +2 位作者 张艳贞 王罡 杨家书 《吉林农业科学》 CSCD 2001年第3期7-11,共5页

以小麦幼胚为基因枪转化受体 ,用含GUS和bar基因的质粒pDM80 3对小麦幼胚进行转化 ,并对幼胚大小、轰击距离、质粒和金粉用量等参数对GUS瞬时表达率及表达量的影响进行了研究。幼胚以 1 0～ 1 5mm最为适宜 ,6cm和 9cm各轰击一次、质粒 0... 以小麦幼胚为基因枪转化受体 ,用含GUS和bar基因的质粒pDM80 3对小麦幼胚进行转化 ,并对幼胚大小、轰击距离、质粒和金粉用量等参数对GUS瞬时表达率及表达量的影响进行了研究。幼胚以 1 0～ 1 5mm最为适宜 ,6cm和 9cm各轰击一次、质粒 0 .5μg/枪及金粉 30 0 μg/枪 ,GUS瞬时表达率及表达量最高。通过对以上参数的优化 ,建立了一个高效的小麦基因枪转化体系。 展开更多

关键词 小麦 基因枪 幼胚 遗传转让 报告基因GUS BAR基因

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玉米自交系愈伤组织的诱导、RAPD分析及扫描电镜观察 被引量：11

20

作者 杜娟 常国权 +1 位作者 季静 王罡 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期282-285,共4页

以玉米不同自交系的幼胚为材料 ,用诱导培养基进行培养 ,以获得愈伤组织。结果发现所有自交系幼胚均可诱导出白色或黄白色的愈伤组织 ,但其再生能力差异显著 ,这主要取决于基因型和培养基种类。自交系 792 2、 340幼胚的再生频率高达 85... 以玉米不同自交系的幼胚为材料 ,用诱导培养基进行培养 ,以获得愈伤组织。结果发现所有自交系幼胚均可诱导出白色或黄白色的愈伤组织 ,但其再生能力差异显著 ,这主要取决于基因型和培养基种类。自交系 792 2、 340幼胚的再生频率高达 85 .5 %和 78%。植株再生途径也有所不同 ,890 2、 Mo17、 4 112和 84 6以器官发生途径为主 ,340、 792 2、92 1、 85 3和 835以体胚发生途径为主。经长期继代的愈伤组织失去再生能力。通过 RAPD方法发现不同愈伤组织的基因组之间存在差异。通过扫描电镜观察发现玉米体胚发生有两种情况 :一是直接诱导产生胚性愈伤组织和胚状体 ; 展开更多

关键词 玉米 自交系 组织培养 再生植株 RAPD分析 扫描电镜观察 愈伤组织

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