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miR-96-5p靶向FOXO1调节脑缺血再灌注损伤机制 被引量:1
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作者 鲁传豪 孙应辉 +3 位作者 李肖亮 袁晨阳 曹建华 汪仁聪 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第12期2221-2228,2279,共9页
目的:探究miR-96-5p在脑缺血再灌注损伤(CIRI)中的作用及机制。方法:通过qRT-PCR检测36例确诊的缺血性脑卒中患者(IS患者组)和30例健康体检者(健康组)的血清miR-96-5p水平。将PC12细胞分为5组:对照组、NC-ag组、miR-96-5p-ag组、NC-an组... 目的:探究miR-96-5p在脑缺血再灌注损伤(CIRI)中的作用及机制。方法:通过qRT-PCR检测36例确诊的缺血性脑卒中患者(IS患者组)和30例健康体检者(健康组)的血清miR-96-5p水平。将PC12细胞分为5组:对照组、NC-ag组、miR-96-5p-ag组、NC-an组、miR-96-5p-an组。采用Lipofectamine 2000对PC12细胞进行转染,通过qRT-PCR验证转染效率。将PC12细胞分为6组:对照组、氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)组、OGD/R+NC-ag组、OGD/R+miR-ag组、OGD/R+NC-an组、OGD/R+miR-an组。根据分组对PC12细胞进行OGD/R处理和转染。通过MTT法检测PC12细胞活力,TUNEL法检测PC12细胞凋亡。采用改良Longa法建立大鼠CIRI模型,然后将大鼠分为假手术组、CIRI组、CIRI+NC-an组和CIRI+miR-an组。假手术组和CIRI组大鼠尾静脉注射生理盐水,CIRI+NC-an组和CIRI+miR-an组大鼠分别尾静脉注射NC-antagomir和miR-96-5p-antagomir。然后检测各组大鼠的神经功能评分、脑梗死体积和脑组织细胞凋亡情况。按照试剂盒说明书测定PC12细胞和大鼠脑组织中MDA、SOD和GSH-Px的含量。通过qRT-PCR检测PC12细胞和大鼠脑组织miR-96-5p和Forkhead box O1(FOXO1)m RNA水平,通过Western blot检测FOXO1、Ac-FOXO1、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平。结果:与Health组比较,IS组患者的血清miR-96-5p水平显著升高(P<0.001)。与对照组和NC-ag组比较,miR-96-5p-ag组的miR-96-5p水平升高,FOXO1的m RNA和蛋白表达水平均降低,FOXO1的乙酰化水平升高(P<0.05)。与对照组和NC-an组比较,miR-96-5p-an组的miR-96-5p水平降低,FOXO1的m RNA和蛋白表达水平均升高,FOXO1的乙酰化水平降低(P<0.05)。与OGD/R组和OGD/R+NC-an组比较,OGD/R+miR-an组的相对细胞活力升高,TUNEL阳性率降低,Bax的蛋白相对表达量降低,Bcl-2的蛋白相对表达量升高,MDA水平降低,SOD和GSH-Px水平升高,miR-96-5p水平降低,FOXO1的m RNA和蛋白表达水平升高,FOXO1的乙酰化水平降低(P<0.05)。与CIRI组和CIRI+NC-an组比较,CIRI+miR-an组大� 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 脑缺血再灌注损伤 miR-96-5p Forkhead box O1 氧化应激
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