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HBV Pre S1蛋白在酵母细胞中的转录激活功能
被引量：
1
1
作者
肖生祥
吴艳红
+4 位作者
曹振平
楚雍烈
王翠玲
肖生彬
彭宣宪
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期154-156,共3页
目的 探索应用双杂交体系统克隆与乙型肝炎病毒 (HBV)PreS1蛋白结合的肝细胞受体的可行性。方法 构建编码HBVPreS1全序列或部分序列与酵母蛋白GAL 4DNA结合区域融合蛋白的酵母表达质粒 ,应用这些质粒转化酵母报道菌株SFY52 6 ,检测 β...
目的 探索应用双杂交体系统克隆与乙型肝炎病毒 (HBV)PreS1蛋白结合的肝细胞受体的可行性。方法 构建编码HBVPreS1全序列或部分序列与酵母蛋白GAL 4DNA结合区域融合蛋白的酵母表达质粒 ,应用这些质粒转化酵母报道菌株SFY52 6 ,检测 β 半乳糖苷酶活性作为酵母中转录激活的指标。构建编码PreS1全序列与GAL4DNA结合区域融合蛋白的哺乳动物细胞表达质粒 ,与CAT报道质粒共转染肝癌细胞系Huh 7,使用薄层层析法检测细胞提取物的氯霉素乙酰转移酶活性。结果 全序列PreS1蛋白与GAL4DNA结合区域的融合蛋白在酵母细胞中呈现转录激活功能 ,其转录激活序列被定位于PreS1第 2 1～ 47氨基酸之间。全序列PreS1蛋白与GAL 4DNA结合区域的融合蛋白在哺乳动物细胞中未呈现转录激活功能。结论 HBVPreS1蛋白在酵母细胞中的转录激活功能 ,限制了研究人员应用酵母双杂交体系统克隆与PreS1结合的HBV受体。然而 ,PreS1蛋白在哺乳动物细胞未呈现转录激活功能。
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关键词
HBV
蛋白Pre
S1
转录因子
酵母
原文传递
半巢式聚合酶链反应一次加样法检测血液HBV DNA
2
作者
肖生祥
闰呼玲
+1 位作者
吴艳红
肖生彬
《中国公共卫生》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期541-542,共2页
目的 消除巢式聚合酶链反应 (nestedPCR)检测乙型肝炎病毒 (HBV)实验中 2次加样带来交叉污染的机会 ,提高PCR特异性和敏感性。方法 通过设计内部、外部引物的不同长度和不同反应浓度 ,改变退火温度 ,建立半巢式PCR一次加样法检测HBVDN...
目的 消除巢式聚合酶链反应 (nestedPCR)检测乙型肝炎病毒 (HBV)实验中 2次加样带来交叉污染的机会 ,提高PCR特异性和敏感性。方法 通过设计内部、外部引物的不同长度和不同反应浓度 ,改变退火温度 ,建立半巢式PCR一次加样法检测HBVDNA。 3个PCR引物同时加入反应管进行 2次PCR反应 ,在一个反应管内完成巢式PCR。结果 该法可检出 4个分子的目的基因片段。在 16例ELISA和常规PCR检测HBV阴性的血清标本中 ,半巢式PCR一次加样法检出 2例阳性。结论 该方法简便、敏感、特异。与ELISA同时应用 ,可提高临床标本HBV阳性检出率 ,减少假阴性 。
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关键词
乙型肝炎
半巢式聚合酶链反应
一次加样法
检测
血液
HBV
DNA
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职称材料
题名
HBV Pre S1蛋白在酵母细胞中的转录激活功能
被引量：
1
1
作者
肖生祥
吴艳红
曹振平
楚雍烈
王翠玲
肖生彬
彭宣宪
机构
西安交通大学
第二
医院
皮肤病
研究所
分子生物学
研究室
西安交通大学
第二
医院
微
生物
学
教研
室
西安交通大学
第二
医院
预防医
学
系
厦门
大学
肿瘤细胞工程国家专业实验
室
出处
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期154-156,共3页
基金
国家自然科学基金资助(396 0 0 0 0 6 )
文摘
目的 探索应用双杂交体系统克隆与乙型肝炎病毒 (HBV)PreS1蛋白结合的肝细胞受体的可行性。方法 构建编码HBVPreS1全序列或部分序列与酵母蛋白GAL 4DNA结合区域融合蛋白的酵母表达质粒 ,应用这些质粒转化酵母报道菌株SFY52 6 ,检测 β 半乳糖苷酶活性作为酵母中转录激活的指标。构建编码PreS1全序列与GAL4DNA结合区域融合蛋白的哺乳动物细胞表达质粒 ,与CAT报道质粒共转染肝癌细胞系Huh 7,使用薄层层析法检测细胞提取物的氯霉素乙酰转移酶活性。结果 全序列PreS1蛋白与GAL4DNA结合区域的融合蛋白在酵母细胞中呈现转录激活功能 ,其转录激活序列被定位于PreS1第 2 1～ 47氨基酸之间。全序列PreS1蛋白与GAL 4DNA结合区域的融合蛋白在哺乳动物细胞中未呈现转录激活功能。结论 HBVPreS1蛋白在酵母细胞中的转录激活功能 ,限制了研究人员应用酵母双杂交体系统克隆与PreS1结合的HBV受体。然而 ,PreS1蛋白在哺乳动物细胞未呈现转录激活功能。
关键词
HBV
蛋白Pre
S1
转录因子
酵母
Keywords
HBV
\ Protein Pre S1
\ Transcriptional factors
\ Yeast
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
半巢式聚合酶链反应一次加样法检测血液HBV DNA
2
作者
肖生祥
闰呼玲
吴艳红
肖生彬
机构
西安交通大学
第二
医院
皮肤病
研究所
分子生物学
研究室
西安交通大学
第二
医院
皮肤
科
西安交通大学
预防医
学
系
出处
《中国公共卫生》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期541-542,共2页
基金
国家自然科学基金资助项目 (3960 0 0 0 6)
文摘
目的 消除巢式聚合酶链反应 (nestedPCR)检测乙型肝炎病毒 (HBV)实验中 2次加样带来交叉污染的机会 ,提高PCR特异性和敏感性。方法 通过设计内部、外部引物的不同长度和不同反应浓度 ,改变退火温度 ,建立半巢式PCR一次加样法检测HBVDNA。 3个PCR引物同时加入反应管进行 2次PCR反应 ,在一个反应管内完成巢式PCR。结果 该法可检出 4个分子的目的基因片段。在 16例ELISA和常规PCR检测HBV阴性的血清标本中 ,半巢式PCR一次加样法检出 2例阳性。结论 该方法简便、敏感、特异。与ELISA同时应用 ,可提高临床标本HBV阳性检出率 ,减少假阴性 。
关键词
乙型肝炎
半巢式聚合酶链反应
一次加样法
检测
血液
HBV
DNA
Keywords
drop in
drop out
heminested PCR
HBV DNA
分类号
R512.620.4 [医药卫生—内科学]
R446.61 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HBV Pre S1蛋白在酵母细胞中的转录激活功能
肖生祥
吴艳红
曹振平
楚雍烈
王翠玲
肖生彬
彭宣宪
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
1
原文传递
2
半巢式聚合酶链反应一次加样法检测血液HBV DNA
肖生祥
闰呼玲
吴艳红
肖生彬
《中国公共卫生》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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