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鸭GAPDH基因实时荧光定量PCR方法的建立 被引量:10
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作者 杨发龙 岳华 +1 位作者 谢秀兰 贾文祥 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2007年第1期92-95,共4页
本研究旨在建立鸭GAPDH基因的real-time PCR技术,为鸭功能基因mRNA水平的定量分析提供有用的方法学基础.根据GenBank中鸭GAPDH基因的序列设计引物,建立了基于SYBR Green I染料技术的real-time PCR方法.结果表明,所建立的方法具有快速、... 本研究旨在建立鸭GAPDH基因的real-time PCR技术,为鸭功能基因mRNA水平的定量分析提供有用的方法学基础.根据GenBank中鸭GAPDH基因的序列设计引物,建立了基于SYBR Green I染料技术的real-time PCR方法.结果表明,所建立的方法具有快速、高通量、线性范围广以及重复性强等特点.研究结果为鸭GAPDH作为内参基因用于鸭相关基因定量表达分析奠定了基础. 展开更多
关键词 GAPDH基因 REAL-TIMEPCR 内参基因
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鸭疱疹病毒1型实时荧光定量PCR方法的建立 被引量:4
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作者 杨发龙 贾文祥 +3 位作者 谢轶 曾蔚 杨维青 岳华 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期801-803,813,共4页
目的 建立检测鸭疱疹病毒1型(鸭瘟病毒)的实时荧光定量PCR方法,为快速诊断、致病机理研究及抗病毒药物筛选等奠定基础。方法 根据病毒DNA聚合酶基因的序列,设计引物和探针,采用TaqMan探针技术进行实时荧光定量PCR,用含有125bp扩... 目的 建立检测鸭疱疹病毒1型(鸭瘟病毒)的实时荧光定量PCR方法,为快速诊断、致病机理研究及抗病毒药物筛选等奠定基础。方法 根据病毒DNA聚合酶基因的序列,设计引物和探针,采用TaqMan探针技术进行实时荧光定量PCR,用含有125bp扩增产物的pMD18-T载体质粒为阳性对照,构建标准曲线,对该方法的特异性、可重复性、敏感性进行评价,同时与传统PCR方法进行比较研究。结果 标准曲线表明在2.3×10^5~2.3×10拷贝数之间有很好的线性关系(r=0.999);实时荧光定量PCR最少可检测到23个阳性质粒,说明有很好的敏感性;试验内及试验间变异系数分别为1.22~6.69以及2.09~8.84,说明有较好的重复性;对非鸭瘟病毒DNA无扩增,说明有很好的特异性;在对病毒DNA的检测方面,比传统PCR的敏感性高出10^4倍。结论 成功建立了针对鸭瘟病毒的特异、敏感、重复性强且可准确定量的实时荧光定量PCR方法。 展开更多
关键词 鸭疱疹病毒1型 鸭瘟 实时荧光定量PCR TAQMAN
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Real-time PCR在病毒学研究中的应用 被引量:5
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作者 杨发龙 岳华 +1 位作者 张焕容 贾文祥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第3期22-23,共2页
关键词 实时荧光定量PCR Real-time 病毒学 应用 PCR技术 基因表达水平 定量分析 致病机理
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