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水稻PCR扩增模板的快速制备 被引量:74
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作者 桑贤春 何光华 +2 位作者 张毅 杨正林 裴炎 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期705-707,共3页
用碱处理水稻嫩叶,取碱处理水稻叶片浸出液直接用作PCR扩增的模板,扩增结果稳定、准确,与常规提取的DNA扩增效果相比没有显著差异。用此方法制备的模板室温下2周之内、4℃下3周之内、-20℃下4个月以上扩增结果不变。此方法所需试剂均为... 用碱处理水稻嫩叶,取碱处理水稻叶片浸出液直接用作PCR扩增的模板,扩增结果稳定、准确,与常规提取的DNA扩增效果相比没有显著差异。用此方法制备的模板室温下2周之内、4℃下3周之内、-20℃下4个月以上扩增结果不变。此方法所需试剂均为常规试剂,具有需要材料少、成本低、简便、快捷等优点,尤其适合材料比较宝贵的转基因水稻的预筛选和大样本量的PCR检测,为分子标记技术的实际应用创造了条件。 展开更多
关键词 水稻 基因组DNA PCR模板 方法
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5个骨干籼型恢复系再生能力的比较研究 被引量:11
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作者 肖向文 李平 +4 位作者 杨正林 钟秉强 侯磊 李德谋 何光华 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第3期378-381,共4页
以5个有重要育种价值的籼型恢复系为材料,研究了影响籼稻愈伤组织诱导、生长和再生的几个重要因素。结果表明,对于籼稻品种而言,MS,NB培养基都是较为适合的培养基类型,愈伤诱导率都比较高,且愈伤质量较好,具有较强的再生能力,但是不同... 以5个有重要育种价值的籼型恢复系为材料,研究了影响籼稻愈伤组织诱导、生长和再生的几个重要因素。结果表明,对于籼稻品种而言,MS,NB培养基都是较为适合的培养基类型,愈伤诱导率都比较高,且愈伤质量较好,具有较强的再生能力,但是不同品种对不同培养基的反应有所不同,籼稻品种之间再生能力存在极大差异;分化培养基中适宜的激素配比为BAP3mg/L+NAA0.5mg/L;适当的干燥处理可以极大地提高愈伤组织的再生能力。还从这5个品种中初步确定了3个再生频率较高的品种,作为进一步研究籼稻组织培养特性的材料,并进行下一步的遗传转化试验。 展开更多
关键词 籼稻 组织培养 再生
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水稻芽鞘紫线抑制与反抑制现象的遗传及反抑制基因的SSR分析 被引量:4
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作者 张毅 沈福成 +3 位作者 杨光伟 何光华 张正圣 杨正林 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第8期830-835,共6页
从芽鞘有紫线和无紫线的杂交组合中发现 6个组合的F2 代紫线有无比例为 13∶3,以无紫线且为不育系的亲本XNA为母本对组合XNA/ 2 1A15 0进行回交 ,BF1代的分离比例符合 1∶1。遗传分析表明 :水稻芽鞘紫线表达受抑制基因I和反抑制基因Ai(... 从芽鞘有紫线和无紫线的杂交组合中发现 6个组合的F2 代紫线有无比例为 13∶3,以无紫线且为不育系的亲本XNA为母本对组合XNA/ 2 1A15 0进行回交 ,BF1代的分离比例符合 1∶1。遗传分析表明 :水稻芽鞘紫线表达受抑制基因I和反抑制基因Ai(t) 的影响 ,I抑制芽鞘紫线C_A_P_系统中的P基因 ,Ai(t) 抑制I基因。以BF1构建了Ai(t) 基因的定位群体 ,SSR分析表明 :Ai(t) 基因与RM 335、RM 2 95、RM2 87、RM 2 1连锁 ,其遗传距离分别为2 8cM、10 2cM、13 9cM、2 6 1cM。 展开更多
关键词 水稻 芽鞘紫线 抑制和反抑制基因 遗传 定位 SSR
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两个棉花Rac蛋白基因的克隆与表达分析 被引量:10
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作者 李先碧 肖月华 +4 位作者 罗明 侯磊 李德谋 罗小英 裴炎 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第1期72-78,共7页
为研究棉花纤维起始和伸长的分子机理 ,在棉花纤维EST序列分析的基础上 ,从棉花纤维中扩增并克隆了 2个棉花Rac蛋白的cDNA基因 ,分别命名为GhRacA和GhRacB。GhRacAcDNA长 95 9bp ,推测的编码蛋白包含2 11个氨基酸。GhRacBcDNA长 92 0bp ... 为研究棉花纤维起始和伸长的分子机理 ,在棉花纤维EST序列分析的基础上 ,从棉花纤维中扩增并克隆了 2个棉花Rac蛋白的cDNA基因 ,分别命名为GhRacA和GhRacB。GhRacAcDNA长 95 9bp ,推测的编码蛋白包含2 11个氨基酸。GhRacBcDNA长 92 0bp ,编码 195个氨基酸的蛋白。GhRacA和GhRacB蛋白均含有GTP/GDP结合和激活区域、Effector区和碱性氨基酸区。GhRacB的C末端有保守的异戊烯基化位点CSIL ,而GhRacA没有明显的异戊烯基化位点。序列比较分析表明 ,GhRacA和GhRacB是 2个新的棉花Rac蛋白。RT PCR分析表明 ,GhRacA和GhRacB在根、下胚轴、茎、叶和纤维中都有表达 ,但均在棉花纤维起始和伸长时期有优势表达 ,推测 展开更多
关键词 棉花 Rac蛋白 GhRacA基因 GhRacB基因 纤维发育
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