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Fe_3O_4/Au复合微粒制备条件及性质研究 被引量：19
1
作者 崔亚丽 惠文利 +2 位作者 汪慧蓉 王利军 陈超 《中国科学（B辑）》 CSCD 北大核心 2003年第6期482-488,共7页
在纳米级Fe_3O_4作为种子,过量的盐酸羟胺为还原剂的条件下,将Au^(3+)在分散于水相中的Fe_3O_4胶态种子表面还原为Au^0,得到核壳结构,粒径为170nm左右的Fe_3O_4/Au磁性复合微粒,并对磁性复合微粒的制备条件进行了优化。通过激光粒度散... 在纳米级Fe_3O_4作为种子,过量的盐酸羟胺为还原剂的条件下,将Au^(3+)在分散于水相中的Fe_3O_4胶态种子表面还原为Au^0,得到核壳结构,粒径为170nm左右的Fe_3O_4/Au磁性复合微粒,并对磁性复合微粒的制备条件进行了优化。通过激光粒度散射仪和透射电子显微镜分析了不同条件下磁性复合微粒的粒径分布及形貌,结果表明:Fe_3O_4种子的磁响应性、悬浮稳定性以及种子表面Au^(3+)的还原条件等是得到单分散性、粒径均一、磁响应性和悬浮性能好的胶态Fe_3O_4/Au复合微粒的主要影响因素。通过紫外-可见分光光度计对Fe_3O_4/Au复合微粒的扫描分析发现,磁性复合微粒在可见光区域呈现与胶体金类似的特征吸收峰,d(0.5)=168nm的Fe_3O_4/Au磁性复合微粒的最大吸收峰位于波长625nm处。 展开更多
关键词 Fe3O4/Au复合微粒 制备 磁性复合微粒 胶体金
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Fe_3O_4/Au纳米复合粒子及其光学性质 被引量：17
2
作者 崔亚丽 惠文利 +2 位作者 苏婧 王亚妮 陈超 《中国科学（B辑）》 CSCD 北大核心 2005年第2期89-93,共5页
在过量Fe3O4种子的存在下,通过盐酸羟氨对四氯合金酸的还原,制备得到了100nm以下核壳结构Fe3O4/Au磁性复合粒子,体系中未反应的Fe3O4种子可通过稀盐酸的处理去除.Fe3O4/Au复合粒子表现出特有的纳米光学效应,可见光区等离子体共振吸收峰... 在过量Fe3O4种子的存在下,通过盐酸羟氨对四氯合金酸的还原,制备得到了100nm以下核壳结构Fe3O4/Au磁性复合粒子,体系中未反应的Fe3O4种子可通过稀盐酸的处理去除.Fe3O4/Au复合粒子表现出特有的纳米光学效应,可见光区等离子体共振吸收峰的最大波长与纳米复合粒子的粒径、掺合的种子量以及分散介质的离子强度等有关.随着纳米复合粒子粒径的增大和分散介质离子强度的增高,最大吸收峰发生红移,并出现峰形展宽的情况.以水作为分散介质,种子去除得愈彻底,体系纳米粒子粒径就愈均一,特征吸收峰会变窄.这种纳米复合粒子的光学性质对生物分子检测新方法的建立具有重要的意义. 展开更多
关键词 纳米复合粒子 Fe3O4 光学性质 Au 等离子体共振 分散介质 离子强度 粒子粒径 最大吸收峰 特征吸收峰 核壳结构 光学效应 可见光区 分子检测 种子 稀盐酸 去除 磁性 峰形
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组装型金磁微粒的制备及其在免疫学检测中的应用 被引量：16
3
作者 崔亚丽 张连营 +5 位作者 苏婧 张彩峰 李琦 崔婷 金伯泉 陈超 《中国科学（B辑）》 CSCD 北大核心 2006年第2期159-165,共7页
以化学共沉淀和柠檬酸还原法分别合成纳米级Fe3O4和Au粒子,将经3-巯丙基三乙氧基硅烷修饰形成的Fe3O4聚集体与纳米金粒子相互作用,制备得到组装型Fe3O4/Au磁性复合微粒（简称金磁微粒）,并对其形成过程、形貌特征、磁学性质等进行表征.... 以化学共沉淀和柠檬酸还原法分别合成纳米级Fe3O4和Au粒子,将经3-巯丙基三乙氧基硅烷修饰形成的Fe3O4聚集体与纳米金粒子相互作用,制备得到组装型Fe3O4/Au磁性复合微粒（简称金磁微粒）,并对其形成过程、形貌特征、磁学性质等进行表征.此外,对金磁微粒作为新型免疫学检测载体的特性包括抗体固定化、质量控制及其在免疫学检测中的应用开展研究.结果表明： 组装型金磁微粒形状不规则、表面粗糙,平均粒径约为2～3 μm; 具有超顺磁性,比饱和磁化强度达41 A·m^2/kg; 1 mg金磁微粒最多可固定人IgG的量为330 μg,以含有500 ng人IgG的金磁微粒为一个检测单位,与辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG的每批5个重复特异性反应测定结果的相对标准偏差均小于6%,5批特异性反应测定结果的批间相对标准偏差小于7%（以每批5次测定结果的平均值计算）,符合免疫学检测载体的质量要求; 将抗乙肝表面抗原单克隆抗体和抗白介素-8单克隆抗体分别固定于金磁微粒表面,采用双抗体夹心法对乙肝表面抗原和白介素-8分别进行定性和定量检测,结果表明金磁微粒是一种较好的免疫学检测载体. 展开更多
关键词 组装型 金磁微粒 合成 载体 免疫学检测
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金属螯合亲和层析介质用于六聚组氨酸融合蛋白的纯化研究 被引量：13
4
作者 李淑娟 孙永亮 +2 位作者 胡道道 陈超 崔亚丽 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期941-946,共6页
以Sepharose CL-6B为载体,环氧氯丙烷为活化剂,羧甲基天冬氨酸(CM-Asp)为螯合配基制备载有Co2+的金属螯合亲和层析介质Co-CM-Asp-Sepharose,并将其用于六聚组氨酸融合蛋白的纯化研究。对纯化200μL细胞裂解液中靶蛋白所需Co-CM-Asp-Seph... 以Sepharose CL-6B为载体,环氧氯丙烷为活化剂,羧甲基天冬氨酸(CM-Asp)为螯合配基制备载有Co2+的金属螯合亲和层析介质Co-CM-Asp-Sepharose,并将其用于六聚组氨酸融合蛋白的纯化研究。对纯化200μL细胞裂解液中靶蛋白所需Co-CM-Asp-Sepharose介质用量,Co-CM-Asp-Sepharose与细胞裂解液的孵育时间,介质清洗条件及靶蛋白洗脱时所需咪唑浓度等进行了优化。比较了Co-CM-Asp-Sepharose与Ni-NTA-Agarose(Qiagen公司)两种螯合介质对融合蛋白的纯化效果,开展了从5mL细胞裂解液中放大规模纯化融合蛋白的研究,并通过Bradford法测定了Co-CM-Asp-Sepharose对CD155D1蛋白的纯化量。结果表明:对200μL细胞裂解液纯化体系,Co-CM-Asp-Sepharose(50%悬浮液)的优选体积为60μL,最佳孵育时间为30min,洗脱液最佳咪唑浓度为200mmol/L,纯化得到融合蛋白的量约为200μg。介质用量放大为1.5mL(50%悬浮液)对CD155D1蛋白的纯化量可达4.6mg。与商品化Ni-NTA-Agarose相比,本介质具有选择性好,清洗条件简单,得到的靶蛋白纯度高等优点。 展开更多
关键词 羧甲基天冬氨酸 CO^2+ 金属螯合亲和层析 纯化 多聚组氨酸融合蛋白
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链亲和素-磁性微粒的制备及其应用 被引量：8
5
作者 张志锋 朱宏莉 +4 位作者 唐一通 崔婷 耿婷婷 陈超 崔亚丽 《中国科学（B辑）》 CSCD 北大核心 2006年第4期353-360,共8页
通过物理吸附和共价作用机制,制备两种链亲和素-磁性微粒,即链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒,并对其在不同缓冲液中的稳定性进行研究;采用酶抑制法测定两种链亲和素-磁性微粒对游离生物素的结合能力;分别以紫外吸收和固相核酸杂... 通过物理吸附和共价作用机制,制备两种链亲和素-磁性微粒,即链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒,并对其在不同缓冲液中的稳定性进行研究;采用酶抑制法测定两种链亲和素-磁性微粒对游离生物素的结合能力;分别以紫外吸收和固相核酸杂交方法,测定两种链亲和素-磁性微粒对生物素标记寡核苷酸探针的固定化容量及活性,并与Dynabeads（R）M-270 Streptavidin进行比较.结果表明：通过物理吸附作用制备的链亲和素-金磁微粒,适用于核酸杂交与检测常用的STE（Tris-NaCl-EDTA）缓冲系统,通过共价作用形成的链亲和素-氨基磁粒,适用于STE和磷酸盐（PBS）缓冲系统;1 mg链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒对游离生物素的最大结合容量分别为4950和5115 pmol;对生物素标记寡核苷酸探针（24 mer）的结合容量分别为2839和2978 pmol,测定结果均是Dynabeads（R）M-270 Streptavidin的6～7倍;与FITC-标记互补寡核苷酸的杂交结果表明,固定于链亲和素-磁性微粒表面的寡核苷酸探针保持了较好的生物学活性. 展开更多
关键词 链亲和素 磁性微粒 制备 应用
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纯化组氨酸标签蛋白金属螯合亲和色谱填料的制备与性能 被引量：3
6
作者 孙永亮 李淑娟 +4 位作者 胡道道 崔亚丽 陈超 杨菊香 沈淑坤 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期67-71,共5页
以琼脂糖(agarose)凝胶的珠状产品SepharoseCl-6B为基质,以环氧氯丙烷为活化剂,将天冬氨酸固定在琼脂糖凝胶微球上,在经与溴乙酸修饰后,最终得到含有羧甲基天冬氨酸结构的琼脂糖凝胶微球.以凝胶微球负载的多羧基为配体分别与Co2+及Ni2+... 以琼脂糖(agarose)凝胶的珠状产品SepharoseCl-6B为基质,以环氧氯丙烷为活化剂,将天冬氨酸固定在琼脂糖凝胶微球上,在经与溴乙酸修饰后,最终得到含有羧甲基天冬氨酸结构的琼脂糖凝胶微球.以凝胶微球负载的多羧基为配体分别与Co2+及Ni2+配位分别得到两种金属螯合亲和层析介质.依照上述方法制备了具有不同负载羧基含量的色谱介质.以六聚组氨酸融合蛋白为分离样品,研究了所制备的色谱分离介质的分离纯化性能,并与商品化色谱分离介质Agarose-NTA-Ni进行了比较.结果表明,目标介质蛋白结合容量大,与蛋白结合快、易洗脱、选择性高,金属离子不易脱落. 展开更多
关键词 金属螯合亲和色谱 羧甲基天冬氨酸配体 多聚组氨酸融合蛋白 纯化
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金磁微粒介导的盐酸克伦特罗多克隆抗体的纯化 被引量：2
7
作者 汪慧蓉 朱宏莉 +3 位作者 惠文利 张志锋 陈超 崔亚丽 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第5期18-22,26,共6页
以重氮化法制备盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白(CBL-BSA)抗原并免疫家兔制备多克隆抗体,将表面固定有BSA的金磁微粒(金磁微粒-BSA)与多克隆抗体反应,抗BSA抗体通过抗原抗体反应被吸附在金磁微粒表面,磁性分离,利用ELISA法对纯化前后抗CBL及... 以重氮化法制备盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白(CBL-BSA)抗原并免疫家兔制备多克隆抗体,将表面固定有BSA的金磁微粒(金磁微粒-BSA)与多克隆抗体反应,抗BSA抗体通过抗原抗体反应被吸附在金磁微粒表面,磁性分离,利用ELISA法对纯化前后抗CBL及抗BSA抗体的效价进行测定,确定最佳纯化条件,得到高纯度的抗CBL抗体。结果表明,通过一步反应．可实现载体蛋白BSA在金磁微粒表面的固定化,每毫克金磁微粒固定 BSA的容量可达236 μg;在最佳纯化条件(温度4C,反应时间2h,金磁微粒表面BSA质量与抗体质量比为7:1) 下,金磁微粒-BSA可有效地去除偶联物多克隆抗体中的抗BSA抗体,而纯化前后抗CBL抗体的效价基本保持不变,分离纯化效果较好。该方法可方便、快速地去除多克隆抗体中的无关抗体,对小分子半抗原多克隆抗体的纯化具有重要意义。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 金磁微粒 亲和吸附 抗体纯化
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重组SARS冠状病毒S蛋白的原核表达研究 被引量：1
8
作者 颜桦 陈功 +1 位作者 蒙世杰 陈超 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期777-780,共4页
目的克隆表达SARS冠状病毒的主要结构蛋白(S蛋白)。方法合成SARS冠状病毒S蛋白特异性基因片断并克隆入pET32a原核表达载体,转化BL21菌,经IPTG诱导高效表达得到重组S蛋白,并通过W estern印迹对重组蛋白质进行鉴定。结果重组蛋白质经镍柱... 目的克隆表达SARS冠状病毒的主要结构蛋白(S蛋白)。方法合成SARS冠状病毒S蛋白特异性基因片断并克隆入pET32a原核表达载体,转化BL21菌,经IPTG诱导高效表达得到重组S蛋白,并通过W estern印迹对重组蛋白质进行鉴定。结果重组蛋白质经镍柱亲和层析得到了部分纯化,免疫动物后得到SARS病毒的多克隆抗体。结论经E lisa检测,表达的重组S蛋白基本具备检测病人血清中抗SARS病毒IgG和IgM的能力,可进一步用于S蛋白功能研究与SARS诊断试剂盒的研制。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征(SARS) 重组S蛋白 表达 纯化
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