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用小鼠骨髓内皮细胞条件培养液代替造血刺激因子培养CFU-GM和HPP-CFC 被引量：3
1
作者 程腊梅 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 2000年第6期539-541,共3页
利用大于 10kD组分的小鼠骨髓内皮细胞条件培养液 (mBMEC CM)作刺激物体外琼脂培养CFU GM ,与rmGM CSF合用培养HPP CFC获得成功。就培养CFU GM和HPP CFC而言 ,用细胞因子作刺激物与并用大于 10kD组分的mBMEC CM作刺激物相比较 ,以后者的... 利用大于 10kD组分的小鼠骨髓内皮细胞条件培养液 (mBMEC CM)作刺激物体外琼脂培养CFU GM ,与rmGM CSF合用培养HPP CFC获得成功。就培养CFU GM和HPP CFC而言 ,用细胞因子作刺激物与并用大于 10kD组分的mBMEC CM作刺激物相比较 ,以后者的CFU GM及HPP 展开更多
关键词 骨髓内皮细胞 CFU-GM HPP-CFC 造血细胞
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骨髓内皮细胞无血清条件培养液对CFU-E和BFU-E生成的影响 被引量：1
2
作者 黄艳红 李卫民 +1 位作者 蒋德昭 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 2000年第2期201-202,共2页
利用本室建立的小鼠骨髓内皮细胞株作传代培养 ,收集其无血清条件培养液 ,离心超滤 ,观察分子量(MW) >1 0 0 0 0组分及分子量 <1 0 0 0 0组分对红系生成的影响。结果表明 :分子量 >1 0 0 0 0组分对CFU E和BFU E有明显刺激作用 ... 利用本室建立的小鼠骨髓内皮细胞株作传代培养 ,收集其无血清条件培养液 ,离心超滤 ,观察分子量(MW) >1 0 0 0 0组分及分子量 <1 0 0 0 0组分对红系生成的影响。结果表明 :分子量 >1 0 0 0 0组分对CFU E和BFU E有明显刺激作用 ,且在 2 %～ 6% (V/V ,下同 )范围内集落产率随浓度增加而增加 ;而分子量 <1 0 0 0 0组分对CFU E ,BFU E有明显抑制作用 ,且在 1 0 %～ 40 展开更多
关键词 骨髓细胞 内皮细胞 造血细胞 CFU-E BFU-E
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补益中药复方对环磷酰胺处理小鼠粒系造血的影响 被引量：19
3
作者 罗志勇 谭孟群 +1 位作者 王绮如 蒋德昭 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期181-184,共4页
为了从传统中药中寻找防治化疗和放疗所致骨髓粒系造血抑制的药物，通过建立实验性环磷酰胺（Cy：0．08g／kg）低白细胞血症小鼠模型，观察了参芪补苦复方（GAFS：13．9g／kg·dip6d）对粒系造血的影响。结果表明：GAFS对Cy所致外... 为了从传统中药中寻找防治化疗和放疗所致骨髓粒系造血抑制的药物，通过建立实验性环磷酰胺（Cy：0．08g／kg）低白细胞血症小鼠模型，观察了参芪补苦复方（GAFS：13．9g／kg·dip6d）对粒系造血的影响。结果表明：GAFS对Cy所致外周血白细胞和中性粒细胞数下降具有对抗和促恢复作用（P＜0．01），能防治骨髓有核细胞数、粒-巨噬系祖细胞（CFU－GM）数的减少（P＜0．01），促进CFU－GM增殖并诱导其向粒系、巨噬系分化，且其促粒系造血作用优于鲨肝醇。 展开更多
关键词 参芪补苦复方 中药 低白细胞血症 环磷酰胺
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血清及细胞因子对人骨髓间质干细胞增殖的影响 被引量：7
4
作者 雷军 程腊梅 +1 位作者 谭孟群 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期469-472,共4页
目的 :探讨影响体外骨髓间质干细胞增殖的因素。方法 :取胸部外科手术无血液系统疾病病人肋骨 ,采用密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以每皿 5× 10 5个的细胞浓度接种 ,9d后 ,瑞士 吉姆萨染色 ,计数集落并进行统计分析。结果 :在 ... 目的 :探讨影响体外骨髓间质干细胞增殖的因素。方法 :取胸部外科手术无血液系统疾病病人肋骨 ,采用密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以每皿 5× 10 5个的细胞浓度接种 ,9d后 ,瑞士 吉姆萨染色 ,计数集落并进行统计分析。结果 :在 5 %～ 30 %的血清浓度范围内 ,骨髓间质干细胞集落数随血清浓度的升高而增多。bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 6等细胞因子可促进骨髓间质干细胞的增殖。结论 :血清浓度与细胞因子bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 增殖 血清 细胞因子
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灵芝复方诱导HL-60白血病细胞凋亡的研究 被引量：6
5
作者 钟理 蒋德昭 王绮如 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期34-36,共3页
应用体外集落与液体培养、细胞形态学观察、DNA片段凝胶电泳及 DNA片段百分率测定等方法观察灵芝复方对人骨髓 CFU- GM生长及 HL- 6 0细胞增殖和凋亡的作用。发现灵芝复方在一定浓度范围内对人骨髓 CFU - GM生长有促进作用 ,而对白血病... 应用体外集落与液体培养、细胞形态学观察、DNA片段凝胶电泳及 DNA片段百分率测定等方法观察灵芝复方对人骨髓 CFU- GM生长及 HL- 6 0细胞增殖和凋亡的作用。发现灵芝复方在一定浓度范围内对人骨髓 CFU - GM生长有促进作用 ,而对白血病细胞系 HL - 6 0细胞集落生长则表现出剂量依赖性抑制 ;细胞形态学结果表明 ,灵芝复方对 HL- 6 0细胞凋亡具有剂量和时间依赖性诱导作用。 8和 16 mg/ m L 灵芝复方作用48h,可使 HL - 6 0细胞 DNA片段百分率明显升高 ;DNA片段凝胶电泳显示有明显的细胞凋亡“梯形”表现。 展开更多
关键词 灵芝复方 HL-60细胞 白血病 中医药疗法
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中草药及其有效成分促粒系造血的研究进展 被引量：8
6
作者 罗志勇 谭孟群 蒋德昭 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1995年第12期653-656,共4页
白细胞减少症发病率呈上升趋势，目前尚乏满意疗法，而部分中草药对此症有较好疗效。现将对迄今为止证实有确切疗效的升白细胞中草药及其有效成分在促进骨髓粒系造血方面的药理及临床研究进展作一介绍。
关键词 中草药 造血 白细胞减少 中医药疗法
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苦参促粒系造血机制及对白血病HL-60细胞的诱导凋亡作用 被引量：2
7
作者 罗志勇 谭孟群 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2001年第8期26-27,34,共3页
目的 :进一步探讨苦参促粒系造血机制及新的抗白血病作用机理。方法 :建立实验性环磷酰胺 (Cy :0 .0 8g/kg)低白细胞血症小鼠模型 ,观察苦参对粒系造血的影响和对白血病HL - 6 0细胞的诱导凋亡作用。结果 :苦参对Cy所致外周血白细胞和... 目的 :进一步探讨苦参促粒系造血机制及新的抗白血病作用机理。方法 :建立实验性环磷酰胺 (Cy :0 .0 8g/kg)低白细胞血症小鼠模型 ,观察苦参对粒系造血的影响和对白血病HL - 6 0细胞的诱导凋亡作用。结果 :苦参对Cy所致外周血白细胞和中性粒细胞数下降具有对抗和促恢复作用 (P <0 .0 1) ,能增加骨髓有核细胞、粒 -巨噬系祖细胞 (CFU -GM)数 (P <0 .0 1)促进CFU -GM增殖并诱导其向粒系、巨噬系分化 ,且其促粒系造血作用与鲨肝醇一致。此外 ,苦参可明显诱导白血病HL - 6 0细胞凋亡 ,呈药物浓度 -效应关系。结论 展开更多
关键词 环磷酰胺 低白细胞血症小鼠模型 苦参 粒系造血 白血病 HL-60细胞 凋亡
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骨髓内皮细胞产生造血抑制因子 被引量：8
8
作者 程腊梅 王绮如 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期485-491,共7页
本研究探讨骨髓内皮细胞分泌的造血抑制因子在扩增造血祖细胞中的作用并初步探讨其作用机制。收集无血清骨髓内皮细胞条件培养液 (BMEC CM) ,离心超滤 ,获得 >1 0kD和 <1 0kD的组分 ,以观察BMEC CM原液及其 >1 0kD和 <1 0k... 本研究探讨骨髓内皮细胞分泌的造血抑制因子在扩增造血祖细胞中的作用并初步探讨其作用机制。收集无血清骨髓内皮细胞条件培养液 (BMEC CM) ,离心超滤 ,获得 >1 0kD和 <1 0kD的组分 ,以观察BMEC CM原液及其 >1 0kD和 <1 0kD组分对CFU GM及HPP CFC的增殖作用的影响 ;检测骨髓内皮细胞及BMEC CM中抑制因子的表达 ,用抗体中和实验检测BMEC CM中的抑制因子对造血集落的抑制活性 ;用膜杂交法检测抑制因子联合造血刺激因子扩增造血细胞时增殖与分化相关基因的改变。结果表明 :①BMEC CM ,>1 0kD及 <1 0kD组分分别加入集落培养体系 ,BMEC CM对CFU GM及HPP CFC的生成无明显影响 ,>1 0kD组分增加CFU GM及HPP CFC的生成 ,<1 0kD组分抑制CFU GM及HPP CFC的生成。②BMEC CM ,>1 0kD及 <1 0kD组分分别加入骨髓细胞液体培养体系培养 2 4小时后 ,BMEC CM组CFU GM明显减少 ,HPP CFC显著增加 ;>1 0kD组分组CFU GM明显增加 ,HPP CFC无显著改变 ;<1 0kD组分组CFU GM及HPP CFC均明显减少。③小鼠骨髓内皮细胞表达MIP 2 ,MIP 1α ,MSP ,TGF β,TNF α,IFN γ及Tβ4。BMEC CM中存在有MIP 2 ,MIP 1α ,MSP ,TGF β ,TNF α和Tβ4。④抗体中和实验结果表明在BMEC CM中的TGF β ,MSP ,MIP 1α,IFN γ和Tβ4有明显抑制活性。 展开更多
关键词 造血干细胞扩增 造血祖细胞扩增 骨髓内皮细胞 造血抑制因子
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粒-巨噬细胞集落刺激因子对小鼠骨髓内皮细胞增殖的刺激作用 被引量：4
9
作者 王绮如 汪保和 夏晖 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期320-321,共2页
粒巨噬细胞集落刺激因子对小鼠骨髓内皮细胞增殖的刺激作用王绮如汪保和夏晖骨髓内皮细胞是组成造血微环境的基质细胞之一，对造血过程有重要调控作用［１］。我们报道粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）对骨髓内皮细胞生长的... 粒巨噬细胞集落刺激因子对小鼠骨髓内皮细胞增殖的刺激作用王绮如汪保和夏晖骨髓内皮细胞是组成造血微环境的基质细胞之一，对造血过程有重要调控作用［１］。我们报道粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）对骨髓内皮细胞生长的影响。材料和方法１材料小鼠骨髓内皮... 展开更多
关键词 骨髓内皮细胞 增殖 GM-CSF 造血调控
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腺相关病毒载体应用的研究进展 被引量：5
10
作者 孙小娟 谭孟群 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 2003年第6期588-590,共3页
以腺相关病毒作为基因治疗载体近年来备受关注。通过提高腺相关病毒载体的产量 ,扩大其载体容量 ,提高基因的转染效率和克服体内的免疫反应等手段 ,使腺相关病毒载体的应用更加符合临床的需要。
关键词 腺相关病毒 载体 基因治疗
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2型重组腺相关病毒介导的β-地中海贫血基因治疗实验 被引量：6
11
作者 田晶 王峰 +4 位作者 薛金凤 赵霏 钟梅 宋柳江 谭孟群 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期9-14,共6页
目的探讨2型重组腺相关病毒(rAAV2)能否有效转染重型β-地中海贫血患者造血细胞,通过体外途径基因治疗地中海贫血。方法 6只BALB/c裸小鼠分为转染组(n=4)和未转染组(n=2),经X射线照射后,分别移植入经rAAV2β-珠蛋白病毒转染(MOI=50)或... 目的探讨2型重组腺相关病毒(rAAV2)能否有效转染重型β-地中海贫血患者造血细胞,通过体外途径基因治疗地中海贫血。方法 6只BALB/c裸小鼠分为转染组(n=4)和未转染组(n=2),经X射线照射后,分别移植入经rAAV2β-珠蛋白病毒转染(MOI=50)或未转染的β41-42/β654杂合子型重型β-地中海贫血流产胎儿造血细胞,转染后第28天和第70天分别处死rAAV2转染小鼠(n=2)和未转染受体小鼠(n=1)。采用RT-PCR、等位基因特异性PCR(ASPCR)法检测rAAV2介导的人β-珠蛋白基因在小鼠骨髓中的表达,并以高压液相色谱法量化分析受体小鼠外周血中人β-珠蛋白肽链的水平。结果①RT-PCR于所有受体小鼠样本中均可检测到人β-actin和人β-珠蛋白基因的表达。②ASPCR检测中,β41-42突变基因稳定表达于所有受体小鼠,β654突变基因仅在移植后第70天受体小鼠样本中被检测到;移植后第28天,rAAV2转染及未转染小鼠体内均可检测到主要来自于β654突变基因的正常β-珠蛋白基因表达;但至移植后第70天,仅rAAV2转染小鼠骨髓样本中仍可检测到rAAV2-β-globin载体介导的正常β-珠蛋白基因表达。③移植后第70天处死的转染小鼠外周血中人β链/α链分别为0.328和0.325,相对未转染组0.135的比值,两者的增加百分比高达144.78%和142.54%。结论经rAAV2介导基因修饰后的重型β-地中海贫血患者造血细胞在体内可长期稳定表达正常人β-珠蛋白基因,而其分化产生的外周血人红系细胞内β-珠蛋白肽链的合成增加。 展开更多
关键词 重组腺相关病毒 Β-地中海贫血 人造血细胞 基因治疗
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重组人干细胞因子在大肠杆菌中的表达及活性鉴定 被引量：6
12
作者 谭文斌 成光杰 +2 位作者 李卫民 谭运年 朱定尔 《生命科学研究》 CAS CSCD 1999年第1期48-52,共5页
采用ＰＣＲ方法从重组载体ｐＫＫＳＣＦ扩增出人干细胞因子（ＳＣＦ）基因ｃＤＮＡ片段，经亚克隆构建成表达载体ｐＥＴ１１ｄＳＣＦ，经限制性酶谱分析鉴定证实．继用ＩＰＴＧ诱导重组ｐＥＴ１１ｄＳＣＦ在大肠杆菌ＨＭＳ１７４（ＤＥ... 采用ＰＣＲ方法从重组载体ｐＫＫＳＣＦ扩增出人干细胞因子（ＳＣＦ）基因ｃＤＮＡ片段，经亚克隆构建成表达载体ｐＥＴ１１ｄＳＣＦ，经限制性酶谱分析鉴定证实．继用ＩＰＴＧ诱导重组ｐＥＴ１１ｄＳＣＦ在大肠杆菌ＨＭＳ１７４（ＤＥ３）中表达，经初步纯化获得重组人ＳＣＦ蛋白质，经检测具有生理活性，对脐带血ＣＦＵ－ＣＭ和ＨＰＰ－ＣＦＣ增殖有明显刺激作用，为进一步的生物工程研究奠定了基础． 展开更多
关键词 干细胞因子 基因表达 生物工程 重组
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苦参抗急性髓性白血病 被引量：3
13
作者 向秋 王建红 +1 位作者 黄艳红 谭孟群 《华夏医学》 2004年第1期10-11,共2页
目的 :研究苦参对急性髓性白血病 HL- 6 0细胞系作用 ,探讨苦参抗白血病的作用及机理。方法 :采用细胞培养计数 ,3H- Td R掺入实验 ,NBT/ MTT比值实验研究苦参抗白血病的作用及机理。结果 :苦参浓度在 2 .0～ 8.0 mg/ ml范围内 ,苦参抑... 目的 :研究苦参对急性髓性白血病 HL- 6 0细胞系作用 ,探讨苦参抗白血病的作用及机理。方法 :采用细胞培养计数 ,3H- Td R掺入实验 ,NBT/ MTT比值实验研究苦参抗白血病的作用及机理。结果 :苦参浓度在 2 .0～ 8.0 mg/ ml范围内 ,苦参抑制 HL- 6 0细胞的 DNA合成 ,抑制白血病细胞增殖 ,并诱导 HL- 6 0细胞分化。结论 展开更多
关键词 苦参 白血病 分化 HL-60
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骨髓内皮细胞分泌的抑制CFU-F生长的因子(英文) 被引量：2
14
作者 汪保和 黄炜琦 王绮如 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期20-23,共4页
为探讨骨髓微环境中内皮细胞调节造血的可能机制 ,本实验研究了骨髓内皮细胞无血清条件培养液(BMEC CM )及其不同分子量组分对骨髓成纤维祖细胞 (CFU F)生长的作用。在体外培养条件下 ,收集人和小鼠纯骨髓内皮细胞无血清条件培养液 ,应... 为探讨骨髓微环境中内皮细胞调节造血的可能机制 ,本实验研究了骨髓内皮细胞无血清条件培养液(BMEC CM )及其不同分子量组分对骨髓成纤维祖细胞 (CFU F)生长的作用。在体外培养条件下 ,收集人和小鼠纯骨髓内皮细胞无血清条件培养液 ,应用连续超滤技术从其中制备出分子量 >10kD ,3- 10kD和 <3kD三种组分 ,进行骨髓CFU F集落形成实验 ,检测这些条件培养液及其超滤组分的作用。结果显示 ,人和小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液和分子量 <3kD超滤组分都抑制CFU F的生长 ,但是分子量 >10kD和 3- 10kD组分却不产生这种效应。两种条件培养液及其 <3kD组分不仅减少CFU F集落形成数 ,同时也使集落变小 ,而且 ,<3kD组分与CFU F集落数之间有明显的负相关浓度依赖性关系。这些结果提示 ,骨髓内皮细胞至少能分泌一种分子量小于 3kD的对骨髓CFU F生长有抑制作用的细胞因子。 展开更多
关键词 骨髓内皮细胞 生长抑制因子 造血微环境 CFU-F
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小鼠骨髓内皮细胞系的建立(英文) 被引量：4
15
作者 王绮如 阎艳 汪保和 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期360-366,共7页
对来源于正常小鼠的骨髓内皮细胞经连续传代培养18个月以上。这一培养是在加入经短期培养而获得的内皮细胞条件培养液及GM-CSF,在纤连蛋白覆盖的培养皿上种入低浓度的骨髓基质细胞完成的。在内皮细胞条件培养液和GM-CSF存在的条件下,细... 对来源于正常小鼠的骨髓内皮细胞经连续传代培养18个月以上。这一培养是在加入经短期培养而获得的内皮细胞条件培养液及GM-CSF,在纤连蛋白覆盖的培养皿上种入低浓度的骨髓基质细胞完成的。在内皮细胞条件培养液和GM-CSF存在的条件下,细胞平均倍增时间为49小时。快速增殖时,细胞先为圆形,以后可变为立方形或梭形。所有培养的细胞与vWF,VCAM-1抗体染色阳性,UEA-1反应阳性,并产生细胞因子。这一骨髓内皮细胞系的建立可用于研究骨髓内皮细胞在造血过程中的作用。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 骨髓内皮细胞 内皮细胞系 造血
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小鼠骨髓内皮细胞条件培养液复合FL及TPO对HPP-CFC及CFU-GM增殖的影响 被引量：5
16
作者 那晓东 王绮如 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期316-320,共5页
通过传代培养小鼠骨髓内皮细胞 ,收集无血清条件培养液 (ECM) ,并经超滤得到大于 10kD的浓缩液 ,分别观察ECM和大于 10kD的浓缩液复合flt3ligand (FL)及thrombopoietin (TPO)对体外培养HPP CFC、CFU GM的影响。结果表明 :ECM或大于 10k... 通过传代培养小鼠骨髓内皮细胞 ,收集无血清条件培养液 (ECM) ,并经超滤得到大于 10kD的浓缩液 ,分别观察ECM和大于 10kD的浓缩液复合flt3ligand (FL)及thrombopoietin (TPO)对体外培养HPP CFC、CFU GM的影响。结果表明 :ECM或大于 10kD的浓缩液对HPP CFC、CFU GM的生长均有支持作用 ;FL或 /和TPO与ECM或大于 10kD的浓缩液合用能加强对HPP CFC、CFU GM生长的刺激作用 ;FL加TPO与ECM或大于 10kD的浓缩液合用对HPP CFC、CFU GM生长的刺激作用更加明显 ;选择FL和TPO特异性的引物 ,用RT PCR技术未能检测到小鼠骨髓内皮细胞有FL和TPOmRNA的表达。 展开更多
关键词 骨髓内皮细胞 无血清条件培养液 造血调控 小鼠 祖细胞 CFU-GM
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抑癌基因p21 被引量：4
17
作者 万伍卿 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 北大核心 1996年第4期262-264,共3页
抑癌基因Ｗａｆｌ／Ｃｉｐｌ／ｐ２１（Ｗｉｌｄ┐ｔｙｐｅ┐ｐ５３┐ａｃｔｉｖａｔｅｄｆｒａｇｍｅｎｔ／ＣＤＫ┐ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ１／ｐ２１）既与肿瘤抑制作用密切相关，又能通过抑制周期素┐周期素依赖激酶... 抑癌基因Ｗａｆｌ／Ｃｉｐｌ／ｐ２１（Ｗｉｌｄ┐ｔｙｐｅ┐ｐ５３┐ａｃｔｉｖａｔｅｄｆｒａｇｍｅｎｔ／ＣＤＫ┐ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ１／ｐ２１）既与肿瘤抑制作用密切相关，又能通过抑制周期素┐周期素依赖激酶（Ｃｙｃｌｉｎ┐ＣＤＫｓ）复合物活性，协调细胞周期、ＤＮＡ复制与修复之间的关系，从而将肿瘤抑制作用与细胞周期控制过程紧密相连。ｐ２１基因的发现。 展开更多
关键词 肿瘤抑制基因 RAS 细胞周期 肿瘤
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三类骨髓基质细胞条件培养液体外扩增巨核系细胞 被引量：5
18
作者 黄艳红 王绮如 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期247-253,共7页
为了研究骨髓成纤维细胞、内皮细胞和巨噬细胞条件培养液对巨核细胞的体外扩增作用,本文通过分离纯化骨髓成纤维细胞、内皮细胞和巨噬细胞,收集无血清骨髓成纤维细胞条件培养液(fibroblast conditioned medium,F-CM)、骨髓内皮细胞条件... 为了研究骨髓成纤维细胞、内皮细胞和巨噬细胞条件培养液对巨核细胞的体外扩增作用,本文通过分离纯化骨髓成纤维细胞、内皮细胞和巨噬细胞,收集无血清骨髓成纤维细胞条件培养液(fibroblast conditioned medium,F-CM)、骨髓内皮细胞条件培养液(endothelial cell conditioned medium,E-CM)和骨髓巨噬细胞条件培养液(macrophage conditioned medium,M- CM),分别离心、超滤,获得原液、分子量(MW)>10 kDa组分及MW<10 kDa组分。将三种无血清条件培养液及其> 10 kDa组分和<10 kDa组分,分别加入巨核细胞体外液体培养体系,观察成熟巨核细胞的生成。结果表明:F-CM和E-CM 及其>10 kDa组分加入培养体系后,成熟巨核细胞的生成显著增多,分别为对照组的(287.33±16.77)%、(141.21±17.47)%、(236.67±39.72)%和(179.03±30.98)%;F-CM的作用明显大于E-CM(P<0.001);F-CM和E-CM的<10 kDa组分、M-CM 及其>10 kDa组分和<10 kDa组分加入培养体系后成熟巨核细胞数无明显改变。分别将F-CM、E-CM、M-CM加入巨核细胞液体扩增体系,24 h后取细胞作巨核细胞集落形成单位(colony forming unit-megakaryocyte,CFU-Meg)的测定。结果表明:F-CM和E-CM对CFU-Meg生成均有促进作用,M-CM对CFU-Meg生成无明显影响,扩增强度分别为扩增前的(168.18 ±30.24)%、(215.17±17.4)%和(85.0±7.0)%。逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT- PCR)实验结果表明:骨髓成纤维细胞表达促血小板生成素(thrombopoietin,TPO),不表达转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1);骨髓内皮细胞表达TGF-β1,不表达TPO。上述结果提示:F-CM、E-CM及其>10 kDa组分均对巨核系成熟细胞及巨核系祖细胞体外扩增有促进作用;F-CM对巨核系成熟细胞体外扩增的促进作用强于E-CM。 展开更多
关键词 骨髓 基质细胞 条件培养液 巨核细胞 扩增
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2型腺相关病毒载体介导正常人β珠蛋白基因在重型地贫流产胎儿造血细胞中的表达 被引量：4
19
作者 田晶 王峰 +3 位作者 薛金凤 赵霏 宋柳江 谭孟群 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第11期2028-2033,共6页
目的:探讨2型重组腺相关病毒(recombin antadeno-associated virus 2,rAAV2)载体介导人β-珠蛋白基因转染地贫患者造血细胞治疗β-地中海贫血的可行性。方法:分离β41-42/β654杂合子型重型β-地贫流产胎儿造血细胞,经rAAV2-β-globin... 目的:探讨2型重组腺相关病毒(recombin antadeno-associated virus 2,rAAV2)载体介导人β-珠蛋白基因转染地贫患者造血细胞治疗β-地中海贫血的可行性。方法:分离β41-42/β654杂合子型重型β-地贫流产胎儿造血细胞,经rAAV2-β-globin病毒转染(MOI=50)后移植入经X射线照射的BALB/c裸小鼠体内,分别于移植后14d、21d处死受体小鼠,RT-PCR及等位基因特异性PCR法检测人珠蛋白基因在受体小鼠体内的表达。结果:RT-PCR方法于3只受体小鼠骨髓样本中成功检测到人β-actin和人β-珠蛋白基因的表达,而21d处死的转染与对照小鼠外周血样本中未检测到人β-珠蛋白基因表达;等位基因特异性PCR方法在所有受体鼠体内同时检测到β41-42和β654突变基因,以及正常β-珠蛋白基因的表达,但rAAV2-β-globin转染组小鼠体内正常人β-珠蛋白基因表达水平明显高于对照组。结论:rAAV2可有效转染β41-42/β654杂合子型重型地中海贫血患者造血细胞,并通过exvivo途径介导β-珠蛋白转基因的体内表达,提高红系细胞内正常β-珠蛋白基因的表达水平。 展开更多
关键词 重组腺相关病毒 Β-地中海贫血 人造血细胞 基因治疗
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新型氨基甾体类对人粒系白血病HL-60细胞系的增殖抑制和分化诱导的作用(英文) 被引量：4
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作者 何群 蒋德昭 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期287-292,共6页
研究发现一种新型氨基甾体化合物,2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α,17β二羟基-5α-雄甾烷(HY)可抑制HL-60细胞的增殖,并诱导该类细胞向巨噬样细胞分化。其主要证据如下:①细胞计数,集落计数及MTT检测显示抑制HL-60细胞的增殖;②液体培养... 研究发现一种新型氨基甾体化合物,2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α,17β二羟基-5α-雄甾烷(HY)可抑制HL-60细胞的增殖,并诱导该类细胞向巨噬样细胞分化。其主要证据如下:①细胞计数,集落计数及MTT检测显示抑制HL-60细胞的增殖;②液体培养6天后形态学显示诱导HL-60细胞向巨噬样细胞分化;③可诱导NBT反应阳性;④可诱导α-萘酚醋酸酯酶反应阳性;⑤流式细胞术显示可诱导CD11b和CD14的表达。结论提示该化合物具有治疗白血病的潜在价值。 展开更多
关键词 氨基甾体 粒细胞白血病细胞系 HL—60细胞 增殖 分化
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