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经胸超声和X线透视引导Amplatzer封堵器治疗房间隔缺损
1
作者 陈名武 陈兰举 +4 位作者 潘家华 赵武 黄元云 宋伟 高杰 《蚌埠医学院学报》 CAS 2004年第6期550-551,共2页
关键词 心间隔缺损 房 AMPLATZER封堵器 超声诊断 X线
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国产封堵器治疗膜周部室间隔缺损疗效初评 被引量：1
2
作者 张恒 包宗明 +5 位作者 蔡鑫 高大胜 史晓俊 王洪巨 宋伟 吕宏安 《安徽医学》 2004年第6期455-457,共3页
目的　评价国产封堵器治疗膜周部室间隔缺损 (VSD)疗效。方法　自 2 0 0 3年以来 ,采用膜部VSD封堵器对 5例膜周部VSD患者进行封堵治疗 ,经胸超声心动图 (TTE)提示VSD直径 4～ 10mm。所有患者在透视及超声监测下通过建立股动静脉轨道、... 目的　评价国产封堵器治疗膜周部室间隔缺损 (VSD)疗效。方法　自 2 0 0 3年以来 ,采用膜部VSD封堵器对 5例膜周部VSD患者进行封堵治疗 ,经胸超声心动图 (TTE)提示VSD直径 4～ 10mm。所有患者在透视及超声监测下通过建立股动静脉轨道、经右心系统释放封堵器。并分别于术后 1个月、3个月、6个月进行超声、心电图、胸片随访评价。结果　 5例患者封堵器置入全部成功 ,术后无残余分流、溶血及其他严重并发症发生。随访中无封堵器移位、脱落以及瓣膜损伤等。结论　国产封堵器治疗膜周部VSD近、中期效果良好 ,我们将进一步观察远期疗效。 展开更多
关键词 国产封堵器 治疗 膜周部室间隔缺损 疗效观察
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VEGFA基因重组真核表达载体的构建与表达 被引量：1
3
作者 吴勇 刘学刚 +6 位作者 郭嘉诚 李慧敏 丁周志 王亚明 宋伟 徐家丽 赵武 《安徽医药》 CAS 2013年第1期45-47,共3页
目的构建VEGFA基因重组真核表达载体pEGFP-VEGFA,并检测其在人胚胎肾细胞(HEK293T)中的表达。方法以人脐血单核细胞的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增VEGFA基因,并将其定向插入真核表达载体pEGFP-Nl中,构建重组真核表达载体pEGFP-VEGFA。... 目的构建VEGFA基因重组真核表达载体pEGFP-VEGFA,并检测其在人胚胎肾细胞(HEK293T)中的表达。方法以人脐血单核细胞的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增VEGFA基因,并将其定向插入真核表达载体pEGFP-Nl中,构建重组真核表达载体pEGFP-VEGFA。经限制性核酸内切酶BglII和SalI酶切和DNA测序鉴定后,用脂质体法将pEGFP-VEGFA转染HEK293T细胞,转染后24 h和48 h采用荧光显微镜观察pEGFP-VEGFA的表达。结果 pEGFP-VEGFA被双酶切为4 697 bp和1 251 bp两条条带,测序结果证实VEGFA序列与GenBank公布的VEGFA mRNA序列完全一致。在经转染的HEK293T细胞内观察到较强的绿色荧光,表明pEGFP-VEGFA成功转染HEK293T细胞,并在其中得到了表达。结论成功构建重组真核表达载体pEGFP-VEGFA,为进一步研究VEGFA基因的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子A 基因 遗传载体
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野生型及突变型人血管内皮生长因子A真核表达载体的构建与鉴定 被引量：1
4
作者 吴勇 刘学刚 +6 位作者 郭嘉诚 李慧敏 宋伟 丁周志 王亚明 赵武 徐家丽 《蚌埠医学院学报》 CAS 2013年第9期1077-1080,共4页
目的:构建人野生型和c.454C>T突变型血管内皮生长因子A(VEGFA)真核表达载体。方法:采用反转录聚合酶链反应扩增人VEGFA基因,用限制性核酸内切酶BglⅡ和SalⅠ双酶切后连接真核表达载体pEGFP-N1,构建野生型VEGFA真核表达载体(野生型pEG... 目的:构建人野生型和c.454C>T突变型血管内皮生长因子A(VEGFA)真核表达载体。方法:采用反转录聚合酶链反应扩增人VEGFA基因,用限制性核酸内切酶BglⅡ和SalⅠ双酶切后连接真核表达载体pEGFP-N1,构建野生型VEGFA真核表达载体(野生型pEGFP-VEGFA),通过双酶切和测序进行鉴定。采用定点诱变PCR技术构建c.454C>T突变型人VEGFA真核表达载体(突变型pEGFP-VEGFA),同样通过双酶切和测序进行鉴定。结果:野生型和突变型pEGFP-VEGFA被双酶切为4 697 bp和1 251 bp两条条带。测序结果证实野生型pEGFP-VEGFA VEGFA序列与GenBank公布的VEGFA mRNA序列完全一致,突变型pEGFP-VEGFA除第454位碱基C被T替代以外,其余序列与野生型完全一致。结论:成功构建了野生型和突变型pEGFP-VEGFA,为下一步研究VEGFA基因功能提供参考。 展开更多
关键词 分子遗传学 血管内皮生长因子A 基因 重叠延伸PCR 定点突变 载体
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野生型及c.454C>T突变型人血管内皮生长因子A基因重组真核表达载体的体外表达
5
作者 吴勇 刘学刚 +6 位作者 赵武 徐家丽 郭嘉诚 李慧敏 丁周志 王亚明 宋伟 《蚌埠医学院学报》 CAS 2015年第2期148-151,共4页
目的:探讨野生型和c.454C>T突变型人血管内皮生长因子A(VEGFA)基因重组真核表达载体(p EGFP-VEGFA)体外表达有无差异。方法:用脂质体法将野生型和突变型p EGFP-VEGFA转染人胚胎肾细胞(HEK293T),采用荧光显微镜观察重组载体VEGFA和增... 目的:探讨野生型和c.454C>T突变型人血管内皮生长因子A(VEGFA)基因重组真核表达载体(p EGFP-VEGFA)体外表达有无差异。方法:用脂质体法将野生型和突变型p EGFP-VEGFA转染人胚胎肾细胞(HEK293T),采用荧光显微镜观察重组载体VEGFA和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白的表达,以实时荧光定量PCR法检测VEGFA mRNA的表达。结果:在经转染的HEK293T细胞内观察到绿色荧光,转染后48 h突变型p EGFP-VEGFA转染组荧光强度低于野生型p EGFPVEGFA转染组。突变型p EGFP-VEGFA转染组VEGFA mRNA表达明显低于野生型p EGFP-VEGFA转染组(P<0.01)。结论:在HEK293T细胞中,初步表明VEGFA突变体导致VEGFA mRNA和蛋白的表达水平均下调,为进一步研究VEGFA c.454C>T突变体在先天性左心室流出道病变发生中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子A 突变 遗传载体 实时荧光定量聚合酶链反应 左心室流出道梗阻
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