李斯特菌诱导宿主细胞骨架重排与磷脂酶D 被引量：2

1

作者 韩黎 吴旭琴 +2 位作者 孟玉芬 纪蕾 陈世平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期852-855,共4页

无论是免疫细胞对病原体的主动吞噬,还是病原体诱导非吞噬细胞的被动吞噬,均是不同细胞膜受体介导的细胞肌动蛋白骨架重排过程,受到单体G蛋白和肌动蛋白骨架相关蛋白的精密调控。细胞内重要信号蛋白,磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D(PLD)的活... 无论是免疫细胞对病原体的主动吞噬,还是病原体诱导非吞噬细胞的被动吞噬,均是不同细胞膜受体介导的细胞肌动蛋白骨架重排过程,受到单体G蛋白和肌动蛋白骨架相关蛋白的精密调控。细胞内重要信号蛋白,磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D(PLD)的活性变化与细胞肌动蛋白骨架重排密切相关,其参与调节了由抗体受体(FcγR)及补体受体(CR3)介导的免疫细胞的主动吞噬,而细胞肌动蛋白骨架解聚蛋白cofilin被磷酸化后可与PLD结合并激活PLD,进而调节肌动蛋白骨架重排。另一方面,cofilin磷酸化状态严格调控李斯特菌感染细胞过程中的肌动蛋白骨架重排。因此,阐明PLD是否在李斯特菌感染细胞过程中被激活并参与调节肌动蛋白骨架重排,将有助于揭示PLD激活对感染发生的调控作用,对透彻理解细菌感染宿主细胞的分子机制具有重要意义。 展开更多

关键词 肌动蛋白骨架重排 磷脂酶D 李斯特菌

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病原真菌感染与TOLL样受体 被引量：2

2

作者 韩黎 纪蕾 +1 位作者 孟玉芬 陈世平 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期158-162,共5页

TOLL样受体(TLR)是参与天然免疫的主要模式识别受体之一,与许多微生物病原体及其产物的病原相关分子模式PAMP结合后通过MyD88依赖性或非依赖性途径启动宿主胞内信号传导途径,引发一系列生物学效应。白色念珠菌表面的特征性糖磷脂甘露聚... TOLL样受体(TLR)是参与天然免疫的主要模式识别受体之一,与许多微生物病原体及其产物的病原相关分子模式PAMP结合后通过MyD88依赖性或非依赖性途径启动宿主胞内信号传导途径,引发一系列生物学效应。白色念珠菌表面的特征性糖磷脂甘露聚糖可被TLR2、TLR4识别,诱导前炎性细胞因子的释放及促进中性粒细胞的聚集等来介导宿主的抗真菌免疫反应。烟曲霉则可能利用表型转换(酵母样与菌丝态),通过不同TLRs逃避宿主天然免疫系统的识别。新型隐球菌的多糖荚膜成分葡糖醛氧化甘露聚糖GXM可与TLR2、TLR4、CD14结合,在单核细胞、巨噬细胞对GXM的内化、吞噬中起重要作用,而不是诱导细胞因子的分泌;酿酒酵母胞壁成分酵母多糖则可激活TLR2、TLR6异源二聚体。总之,TLR与真菌配体相互作用的具体机制及其活化后胞内信号传导调控机制的深入研究与分析,对临床真菌病的免疫调节及治疗具有重要意义。 展开更多

关键词 病原真菌 感染 TOLL样受体

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结核分枝杆菌培养滤液蛋白32的克隆表达及血清学检测 被引量：2

3

作者 毕爱笑 丁元生 +1 位作者 刘忠华 胡忠义 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期81-85,共5页

目的构建结核分枝杆菌培养滤液蛋白32（culture filtrate protein32，CFP32）的重组质粒，在大肠杆菌中表达并纯化重组蛋白CFP32，探讨其对结核病的诊断价值。方法通过聚合酶链反应技术从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中扩增出Rv0577基因... 目的构建结核分枝杆菌培养滤液蛋白32（culture filtrate protein32，CFP32）的重组质粒，在大肠杆菌中表达并纯化重组蛋白CFP32，探讨其对结核病的诊断价值。方法通过聚合酶链反应技术从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中扩增出Rv0577基因，将其克隆到pMDl8一T载体后，再亚克隆到表达载体pET21a，在大肠杆菌BL21（DE3）进行表达，经纯化及复性后，通过Western blot分析，并以酶联免疫吸附试验检测160例血清抗体，其中肺结核患者97例、非结核肺部疾病患者25例，正常对照38名。结果构建了CFP32重组质粒，并在大肠杆菌中进行了高效表达，表达蛋白经SDS—PAGE分析，在约相对分子质量30000处有表达条带，镍柱纯化后的重组蛋白占总蛋白的90％以上。Western blot证实重组蛋白可以与结核患者血清特异结合。并以此蛋白进行160份血清结核抗体检测，结果敏感度为63．9％（62／97），特异度为96．8％（2／63）。结论成功构建pET21a—CFP32表达载体，并在大肠杆菌中高效表达CFP32蛋白，对其血清抗体检测证明重组的CFP32蛋白有希望成为结核病血清学诊断的有效候选者之一。 展开更多

关键词 分枝杆菌 结核 基因表达 血清学试验

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Toll样受体在烟曲霉侵染宿主细胞过程中作用的研究进展 被引量：1

4

作者 韩黎 纪蕾 +1 位作者 王菡 胡小华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期973-975,共3页

烟曲霉侵染宿主细胞时伴有明显的细胞肌动蛋白骨架重排,而重要模式识别受体PRRs(pattern recognition receptors)之一,Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)参与调节病原细菌诱导的宿主细胞肌动蛋白骨架重排,其中TLR2和TLR4两亚型可以... 烟曲霉侵染宿主细胞时伴有明显的细胞肌动蛋白骨架重排,而重要模式识别受体PRRs(pattern recognition receptors)之一,Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)参与调节病原细菌诱导的宿主细胞肌动蛋白骨架重排,其中TLR2和TLR4两亚型可以识别烟曲霉的病原相关分子模式PAMP(pathogen-assosiated molecular patterns),并诱发炎症因子表达等一系列效应信号,在宿主细胞抗烟曲霉天然免疫中发挥重要作用,但在烟曲霉内化侵入过程中TLR能否特异性介导细胞肌动蛋白骨架重排尚不清楚。因此,研究揭示TLR激活在烟曲霉侵入宿主细胞的调控作用,对寻找可能的抗真菌药物作用靶点具有重要意义。 展开更多

关键词 TOLL样受体 烟曲霉 细胞肌动蛋白骨架

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骨髓细胞来源的树突状细胞体外刺激T淋巴细胞增殖的研究

5

作者 吴文璎 刘建华 +1 位作者 黄瑞 张雁云 《中国血液流变学杂志》 CAS 2004年第1期50-51,共2页

分离骨髓单核细胞 ,在一定的培养条件下将其诱导成树突状细胞 ,通过混合淋巴细胞反应检测这些树突状细胞的体外刺激T淋巴细胞增殖的能力。

关键词 骨髓细胞 树突状细胞 体外刺激 T淋巴细胞 细胞增殖

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细菌外膜泡与致病性的关系

6

作者 吴淑燕 黄瑞 林发榕 《国外医学（微生物学分册）》 2002年第4期13-15,共3页

多种革兰阴性菌在其对数生长期可产生外膜泡。它是外膜的最新合成部分,不含肽聚糖、内膜和细胞质成分。其主要化学成分是脂多糖,外膜泡的形成与脱落实质是活菌释放内毒素的一种方式。此外,它还能作为一些细菌毒素的载体。外膜泡具有蛋... 多种革兰阴性菌在其对数生长期可产生外膜泡。它是外膜的最新合成部分,不含肽聚糖、内膜和细胞质成分。其主要化学成分是脂多糖,外膜泡的形成与脱落实质是活菌释放内毒素的一种方式。此外,它还能作为一些细菌毒素的载体。外膜泡具有蛋白水解酶活性,能增强细菌的粘附力,并赋予细菌抵抗宿主血清杀菌的能力。它还具有防御作用,细菌通过释放外膜泡可摆脱吸附的噬菌体。外膜泡的多种生物学活性使细菌的致病性大大增强,是一种重要的毒力因子。 展开更多

关键词 细菌外膜泡 致病性 噬菌体 毒力因子 外毒素

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伤寒杆菌耐药质粒pRST98介导细菌毒力的研究 被引量：18

7

作者 黄瑞 吴淑燕 闻玉梅 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期302-306,共5页

目的　研究伤寒杆菌耐药质粒pRST98能否介导细菌毒力。方法　将pRST98导入鼠伤寒杆菌低毒株RIA ,经口和腹腔感染小鼠 ,测定半数致死量 (LD50 ) ;口饲细菌后检测在体内播散、繁殖及引起脏器的组织学改变 ;在体外对其进行细胞的粘附和侵... 目的　研究伤寒杆菌耐药质粒pRST98能否介导细菌毒力。方法　将pRST98导入鼠伤寒杆菌低毒株RIA ,经口和腹腔感染小鼠 ,测定半数致死量 (LD50 ) ;口饲细菌后检测在体内播散、繁殖及引起脏器的组织学改变 ;在体外对其进行细胞的粘附和侵袭试验。分别用含pRST98的野生伤寒杆菌、消除pRST98的突变体菌株及pRST98再重新导入突变体的菌株 ,研究对人、兔及豚鼠血清杀菌的抵抗力。结果　导入pRST98的鼠伤寒杆菌口服和腹腔注射组LD50 比阴性对照分别降低约 70 0倍和75倍 ;在小鼠肠系膜淋巴结、脾和肝脏内增殖 (P <0 .0 5 )并引起脏器严重病变 ;但在体外不影响鼠伤寒杆菌对HEp 2、CHO和HeLa细胞的粘附和侵袭。携带pRST98的伤寒杆菌在血清中的抵抗力显著高于无此质粒的菌株 (P <0 .0 5 )。结论　伤寒杆菌耐药质粒pRST98不但介导对药物的抗性 ,同时还能使宿主菌的毒力增强。 展开更多

关键词 伤寒杆菌 耐药质粒 细菌毒力 PRST98 抗生素

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伤寒杆菌耐药质粒pR_(ST98)毒力基因的研究 被引量：15

8

作者 黄瑞 吴淑燕 张学光 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期393-396,共4页

目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属其他致病菌毒力质粒上的保守基因spv。方法　用QIAGEN试剂盒提取pRST98,精确定量后选用 8种限制性核酸内切酶消化 ,建立该质粒的酶切图谱。用spv特异引物的PCR扩增和spv探针... 目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属其他致病菌毒力质粒上的保守基因spv。方法　用QIAGEN试剂盒提取pRST98,精确定量后选用 8种限制性核酸内切酶消化 ,建立该质粒的酶切图谱。用spv特异引物的PCR扩增和spv探针Southernblot法分析pRST98的基因构成。结果　pRST98酶切图谱显示BglⅡ、PstⅠ和SacⅡ作用后片段均一 ,是对该质粒进行分子生物学和分子流行病学研究的理想工具。PCR和Southernblot结果显示 ,伤寒杆菌耐药质粒pRST98上存在其他沙门菌毒力质粒上高度保守基因spv的同源序列。结论　从基因水平首次证实伤寒杆菌耐药质粒pRST98具有多效性 ,是既编码抗药性又编码细菌毒力的“嵌合型”质粒。 展开更多

关键词 伤寒杆菌 耐药性 PRST98 毒力基因

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粪便标本中细菌DNA提取方法的比较 被引量：16

9

作者 陈蓓 黄瑞 《中国血液流变学杂志》 CAS 2007年第2期210-212,307,共4页

目的比较粪便标本中细菌DNA三种提取方法的优缺点。方法采用传统法,溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)提取法和试剂盒法提取粪便标本中细菌DNA,比较其作为模板用于PCR扩增细菌16SrDNA的优缺点。结果三种方法制备的细菌DNA均能成功用作后续PCR... 目的比较粪便标本中细菌DNA三种提取方法的优缺点。方法采用传统法,溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)提取法和试剂盒法提取粪便标本中细菌DNA,比较其作为模板用于PCR扩增细菌16SrDNA的优缺点。结果三种方法制备的细菌DNA均能成功用作后续PCR扩增的模板。传统法经济可靠,但提取的DNA量及纯度均较低。利用CTAB法进行提取可有效去除粪便中的色素和多糖成分,但操作要求较高,难以标准化。试剂盒法提取方便,操作简单,质量稳定,易标准化,且价格适中,是临床值得推荐的提取方法。结论三种方法各具优缺点,应根据实验室条件和实验要求进行选择。 展开更多

关键词 粪便 细菌 DNA提取

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沙门菌属质粒毒力基因spv的研究 被引量：14

10

作者 焦旸 黄瑞 《国外医学（流行病学．传染病学分册）》 2004年第2期119-120,124,共3页

沙门菌属质粒携带的spv基因是一段约8kb的高度保守的核苷酸区域,普遍存在于许多非伤寒沙门菌的一个毒力质粒上,其开放读码框由spv R、A、B、C、D、E6个基因组成,主要与细菌的毒力有关,如血清抗性、粘附与定居、沙门菌在肠外组织细胞的... 沙门菌属质粒携带的spv基因是一段约8kb的高度保守的核苷酸区域,普遍存在于许多非伤寒沙门菌的一个毒力质粒上,其开放读码框由spv R、A、B、C、D、E6个基因组成,主要与细菌的毒力有关,如血清抗性、粘附与定居、沙门菌在肠外组织细胞的生长、细菌在巨噬细胞内存活和生长等。以往的研究认为,spv基因只存在于非伤寒沙门菌中,但最近发现在伤寒沙门菌耐药质粒上亦有spv。 展开更多

关键词 沙门菌属 毒力质粒 spv基因 病原体 巨噬细胞

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烧伤病房MRSA医院感染暴发的PFGE分型研究 被引量：10

11

作者 孟玉芬 韩黎 +4 位作者 吴桂芝 常东 徐培君 吴旭琴 殷伟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期65-69,共5页

利用表型分型和基因分型的方法解析医院感染常见致病菌——耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)造成医院感染暴发的可能传播途径。本实验对某医院烧伤科、ICU、肿瘤科病房内从患者和环境分离的19株MRSA,进行了16种抗生素的耐药性实验和全基... 利用表型分型和基因分型的方法解析医院感染常见致病菌——耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)造成医院感染暴发的可能传播途径。本实验对某医院烧伤科、ICU、肿瘤科病房内从患者和环境分离的19株MRSA,进行了16种抗生素的耐药性实验和全基因组稀有位点限制性内切酶酶切脉冲凝胶电泳(PFGE)分析,并聚类分析归纳了菌株之间的相关性。结果发现在19株MRSA中有11株属于同一个菌种A型,在这些菌株中,有8株属于相同的克隆亚型A1型,分别来自烧伤科和ICU患者以及烧伤科医生、护士的手。4株属于B型,均分离自同一烧伤病房。这暗示该医院可能存在MRSA(A型)院内感染的暴发,并且存在B型流行的潜在危险。MRSA很有可能通过医护工作人员的手及鼻腔等媒介在患者间传播。因此,加强医护人员的感染控制观念,利用灵敏、可靠且分辨率强的分型技术加强MRSA感染监控至关重要。 展开更多

关键词 MRSA 脉冲场凝胶电泳 基因分型

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细菌的五种鞭毛染色方法比较研究 被引量：8

12

作者 顾冠彬 房红莹 徐培君 《中国血液流变学杂志》 CAS 2005年第3期483-485,共3页

目的比较细菌的五种鞭毛染色方法染色效果。方法用Ryu法、Ryu改良法、Blendon染色法、Fontana染色法、碱性复红法等五种不同鞭毛染色法对奇异变形杆菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门菌、大肠埃希菌染色,参照West提出的评分方法打分。结果... 目的比较细菌的五种鞭毛染色方法染色效果。方法用Ryu法、Ryu改良法、Blendon染色法、Fontana染色法、碱性复红法等五种不同鞭毛染色法对奇异变形杆菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门菌、大肠埃希菌染色,参照West提出的评分方法打分。结果五种染色方法中,Blendon染色法效果最佳。鞭毛清晰,形态良好,很少脱落,背景杂质颗粒少见,背景底色浅,易于观察。其次为Ryu红法,最差为Fontana染色法。结论Blendon鞭毛染色法效果最好,值得临床推广使用。 展开更多

关键词 鞭毛染色 方法比较

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中西药消除耐药质粒pR_(ST98)的研究 被引量：8

13

作者 祁汝峰 黄瑞 祁小飞 《中国血液流变学杂志》 CAS 2004年第1期46-47,132,共3页

目的　用SouthernBlot杂交法检测中、西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒pRST98的结果。方法　用氧氟沙星和中药双黄连对携带pRST98的伤寒杆菌、大肠杆菌和鼠伤寒杆菌进行亚抑菌浓度的质粒消除试验 ;用地高辛标记的氨苄青霉素和四环... 目的　用SouthernBlot杂交法检测中、西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒pRST98的结果。方法　用氧氟沙星和中药双黄连对携带pRST98的伤寒杆菌、大肠杆菌和鼠伤寒杆菌进行亚抑菌浓度的质粒消除试验 ;用地高辛标记的氨苄青霉素和四环素耐药基因探针进行SouthernBlot。结果　SouthernBlot杂交结果显示两种药物作用后pRST98上的耐药基因并未丢失 ,但同一质粒耐药基因在不同宿主菌中表达不同 ,导致最小抑菌浓度 (MIC)变化有明显差异。结论　氧氟沙星和双黄连能降低pRST98宿主菌的耐药性。 展开更多

关键词 中药 西药 耐药质粒 PRST98 细菌耐药 形成机制

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医疗产品细胞毒性3种评价方法的比较 被引量：6

14

作者 房红莹 顾冠彬 +2 位作者 杨珠英 徐培君 万海燕 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第4期605-608,共4页

目的比较评价医疗产品细胞毒性的3种方法,即MTT法、活细胞计数法及形态观察法。方法用MTT法、活细胞计数法及形态观察法对19种医疗产品进行细胞毒性测试,并对样品毒性分级及作出合格与否的判断,比较这些方法之间的符合程度及在检测细胞... 目的比较评价医疗产品细胞毒性的3种方法,即MTT法、活细胞计数法及形态观察法。方法用MTT法、活细胞计数法及形态观察法对19种医疗产品进行细胞毒性测试,并对样品毒性分级及作出合格与否的判断,比较这些方法之间的符合程度及在检测细胞毒性方面各自的优缺点。结果MTT法与活细胞计数法的毒性级别判断符合率为73.7%(14/19),判断样品合格与否,两者符合率为94.7%(18/19),15号样品MTT法毒性级别判为4级,但细胞形态观察法发现细胞形态正常,贴壁生长良好,结果与活细胞计数法一致。重复3次检测,仍出现这种现象。结论MTT法操作简便,人为误差小,更适于多种医疗产品的同时检测,但对于MTT检测不合格产品要结合活细胞计数法及形态观察法,作出综合判断。 展开更多

关键词 MTT法 活细胞计数法 形态观察法 医疗产品 细胞毒性

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两种药物对肠道杆菌耐药质粒的影响 被引量：4

15

作者 黄瑞 刘晓颖 +1 位作者 祁小飞 张学光 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期908-909,i001,共3页

目的　探讨中西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒 pRST98的可能性。方法　将原存在于伤寒杆菌中的多重耐药质粒pRST98,分别导入大肠杆菌和鼠伤寒杆菌 ,选用氧氟沙星和双黄连对上述三种携带 pRST98的肠道细菌进行质粒消除试验 ;对受... 目的　探讨中西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒 pRST98的可能性。方法　将原存在于伤寒杆菌中的多重耐药质粒pRST98,分别导入大肠杆菌和鼠伤寒杆菌 ,选用氧氟沙星和双黄连对上述三种携带 pRST98的肠道细菌进行质粒消除试验 ;对受试菌进行药敏试验及质粒电泳检测 ;用地高辛标记的氯霉素、氨苄青霉素和四环素耐药基因探针进行Southernblot。结果　两种药物虽然未能将受试菌携带的 pRST98消除 ,但该质粒编码的耐药种类却减少 ;部分菌株对一些药物的耐药程度明显下降甚至恢复敏感 ,但SouthernBlot结果却显示 pRST98上的耐药基因并未丢失。结论氧氟沙星和双黄连能降低pRST98宿主菌的耐药性 ,但药物作用后同一质粒在不同种属或同种细菌的不同菌株间耐药性变化有差异 ,显示该质粒耐药基因表达的多样性和复杂性。 展开更多

关键词 携带 耐药质粒 药物 耐药基因 肠道杆菌 氧氟沙星 双黄连 质粒消除 地高辛标记 菌株

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影响质粒提取的关键因素及提取方法的选择 被引量：3

16

作者 祁汝峰 黄瑞 《中国血液流变学杂志》 CAS 2006年第4期530-531,533,共3页

通过对质粒DNA提取过程的分析,探讨质粒DNA提取过程中的影响因素,分析影响质粒DNA纯度和量的关键因素,以利解决质粒提取过程中遇到的问题。

关键词 质粒提取 方法 影响因素

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93株痢疾杆菌血清学分类及药敏试验 被引量：5

17

作者 顾冠彬 《中国血液流变学杂志》 CAS 2006年第1期142-143,共2页

目的对江苏省苏州地区痢疾杆菌进行血清学分类及药敏试验,为临床提供耐药谱。方法按细菌检验常规法, 痢疾病人粪便标本接种S-S和麦康凯培养基培养分离,用特异性抗血清鉴定分类,用14种抗菌约物纸片做药敏试验。结果分离山93株痢疾杆菌,... 目的对江苏省苏州地区痢疾杆菌进行血清学分类及药敏试验,为临床提供耐药谱。方法按细菌检验常规法, 痢疾病人粪便标本接种S-S和麦康凯培养基培养分离,用特异性抗血清鉴定分类,用14种抗菌约物纸片做药敏试验。结果分离山93株痢疾杆菌,福氏志贺菌(B群)为本地区优势菌,占86%;宋内氏菌(D群)占9．7％;鲍氏菌(C群)占4.3％,在B群中以2a 型居多,为57．5％,1b型次之,为21.3％。药敏试验对一种及一种以上药物耐药的菌株达98．8％,3种以上多重耐药菌为94．1％, 最多的对9种药物耐药。其中对四环素(TET)、链霉素(STR)、黄胺(SUL)、红霉素(ERY),痢特灵(FU)、氨苄青霉素(AMP)的耐药率较高,分别为91．8％、81．2％、77．7％、71．7％、70．6％和60％,对氯霉素(CMP)为50．8％,复方新诺明(COS)为36．5％。对庆大霉素(GEN)、先锋霉素(CTN)、丁胺卡那霉素(AKN)新霉素(NEO)的耐药率较低。所有93株试验茵对卡那霉素(KAN)、和妥布霉素 (TOB)均敏感。结论苏州地区痢疾杆菌耐药比率不断增加,要加强抗生素的管理及合理应用,并且要及时监测细菌的耐药动态。 展开更多

关键词 痢疾杆菌 血清学分类 药敏试验

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趋化性细胞因子MIP-1α动员DC前体细胞的体内抗胃癌效应 被引量：2

18

作者 何宋兵 汪良 +1 位作者 黄瑞 张雁云 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第4期387-391,共5页

目的:研究趋化性细胞因子巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammation protein-1α, MIP-1α)在外周血中快速动员树突状细胞 (DC)前体细胞,并荷载小鼠前胃癌(MFC)抗原后,其体内的抗肿瘤免疫效应．方法:B6小鼠尾静脉注射MIP-1α,分选... 目的:研究趋化性细胞因子巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammation protein-1α, MIP-1α)在外周血中快速动员树突状细胞 (DC)前体细胞,并荷载小鼠前胃癌(MFC)抗原后,其体内的抗肿瘤免疫效应．方法:B6小鼠尾静脉注射MIP-1α,分选出外周血B220-CD11c+细胞,以GM-CSF、IL-4及 mTNF-α培养5-6 d,检测其表型和混合淋巴细胞反应;B220-CD11c+细胞荷载MFC抗原后制备成DC疫苗,经皮下回输MFC荷瘤小鼠,观察小鼠瘤体生长和存活时间,检测其体内抗肿瘤效应．未荷载肿瘤抗原的MIP-1α动员的胃癌DC疫苗、MFC肿瘤可溶性抗原和PBS缓冲液作为对照．结果:MIP-1α注射B6小鼠4 h后外周血中 B220-CD11c+细胞即升高,48 h达到高峰,占外周血单个核细胞(MNC)13．7％±0．8％．新鲜分离的B220-CD11c+细胞不具有成熟DC的特征, 经过细胞因子培养的B220-CD11c+细胞具有典型的DC表面标志,在混合淋巴细胞反应中具有极强的刺激T细胞增殖的能力．当荷载MFC 抗原后制成的DC疫苗皮下回输MFC荷瘤小鼠后,观察至第27天,MIP-1α动员的胃癌DC 疫苗和骨髓源性的胃癌DC疫苗实验组小鼠的瘤体大小分别为(2．7±0．6)cm3和(2．8±0．8) cm3,两者之间无显著性差异(P>0．05);而对照组小鼠瘤体迅速生长,瘤体大小分别为23．7± 1．7 cm3、26．4±1．9 cm3和31．2±2．2 cm3,实验组与对照组之间有显著性差异(P<0．05)．此外, 对照组小鼠在荷瘤后25 d内全部死亡,而实验组小鼠的生存期则明显延长,且治疗组小鼠在无瘤存活35 d后,再次接受MFC细胞冲击,继续观察小鼠至60 d仍存活,实验组和对照组的差异有统计学意义(P<0．05)．结论:注射MIP-1α可以直接快速动员B220- CD11c+DC前体细胞进入小鼠外周血,这些 DC前体细胞荷载MFC抗原后制成的胃癌DC 疫苗,可激活机体T细胞,产生明显的体内抗肿瘤效应． 展开更多

关键词 树突状细胞 巨噬细胞炎症蛋白-1Α 抗肿 瘤 胃癌

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霍乱疫苗研究进展 被引量：4

19

作者 王海燕 赵英伟 《微生物与感染》 2007年第3期170-172,176,共4页

关键词 疫苗 霍乱 公共卫生问题 发展中国家 肠道传染病 不良反应 候选株 rBS

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超声波破碎法在原生质体诱变中的运用 被引量：1

20

作者 陆明 祁汝峰 +1 位作者 徐培君 杨勤 《苏州医学院学报》 2001年第4期417-419,共3页

目的　改良螺旋霉素的生产菌株 -生二素链霉菌 ,提高其产量。方法　以超声破碎法破坏出发菌株的细胞壁 ,获得该菌的原生质体 ,在再生培养基上培养后获得的诱变菌 ,其产螺旋霉素的效价上实现了大面积的提高。结果　在参与初筛的菌落中 ,... 目的　改良螺旋霉素的生产菌株 -生二素链霉菌 ,提高其产量。方法　以超声破碎法破坏出发菌株的细胞壁 ,获得该菌的原生质体 ,在再生培养基上培养后获得的诱变菌 ,其产螺旋霉素的效价上实现了大面积的提高。结果　在参与初筛的菌落中 ,摇瓶发酵后有 38.3 %的菌株效价获得提高 ,范围为 1.6 2 %～ 11.92 % ,取效价较高的初筛菌株进行复筛 ,其效价依旧稳定在较高水平 ,提高范围为 5 .48%～ 11.92 % (平均提高率为 8.73 % )。结论　本文采用的超声波破碎法制备的原生质体 ,操作简便 ,成本低廉 ,影响因素少等诸多优势。 展开更多

关键词 生二素链霉菌 原生质体 超声波破碎法 诱变菌 螺旋霉素

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