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大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的编码产物为外膜蛋白前体 被引量：3
1
作者 赵伟东 陈誉华 黄胜和 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期497-501,共5页
为进一步探讨大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的生物学特性 ,将ibeB基因克隆到pET2 8a(+)载体 ,以E .coliBL2 1 (DE3)为宿主菌 ,经IPTG诱导后 ,通过Ni2 + NTA树脂提纯IbeB蛋白 .SDS PAGE确定纯化蛋白的分子量 ;应用无蛋白酶的体... 为进一步探讨大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的生物学特性 ,将ibeB基因克隆到pET2 8a(+)载体 ,以E .coliBL2 1 (DE3)为宿主菌 ,经IPTG诱导后 ,通过Ni2 + NTA树脂提纯IbeB蛋白 .SDS PAGE确定纯化蛋白的分子量 ;应用无蛋白酶的体外转录和翻译系统进一步鉴定ibeB基因表达蛋白的分子量 ;通过 [3 5S]Met标记的体内T7表达体系并结合膜蛋白分离技术定位IbeB蛋白在细菌中的亚细胞分布 ;利用细菌侵袭实验分析IbeB蛋白抗体对E .coliK1侵袭人脑微血管内皮细胞的封闭作用 .结果发现 ,ibeB基因的重组蛋白表达纯化产物呈现出 5 0kD和 34kD两种分子量大小 ,5 0kD存在于表达细菌的可溶性部分 ,而 34kD则存在于包涵体中 ;体外翻译实验也显示出较弱的 5 0kD和较浓的 34kD两个蛋白带 ;体内T7表达体系实验显示 34kD的IbeB成熟蛋白定位于E .coli的外膜 ;抗 34kDIbeB蛋白抗体能封闭E .coli对人脑微血管内皮细胞的侵袭 .这些结果提示 ,大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的编码产物为 5 0kD的外膜蛋白前体 ,该前体可通过分子内剪接形成成熟的 展开更多
关键词 大肠杆菌 ibeB基因 脑膜炎 血脑屏障
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质粒pU3R-ⅢhGH的构建及在体外转录激活研究中的应用
2
作者 孙桂香 H Wu J S Holcenberg 《北京医科大学学报》 CSCD 1993年第5期362-362,365,共2页
TPA诱导HTLV-1、HIV-1等病毒基因在体外转录激活研究的基本模式是用TPA激活pU 3 R-ⅢCAT等转染的靶细胞,并检测报告基因CAT的表达水平,以了解目的基因的转录激活情况。CAT(氯霉素乙酰转移酶)是个好的报告基因,但hGH(人类生长激素)更具优... TPA诱导HTLV-1、HIV-1等病毒基因在体外转录激活研究的基本模式是用TPA激活pU 3 R-ⅢCAT等转染的靶细胞,并检测报告基因CAT的表达水平,以了解目的基因的转录激活情况。CAT(氯霉素乙酰转移酶)是个好的报告基因,但hGH(人类生长激素)更具优点,为此,本文报告新质粒pU 3 R-ⅢhGH的构建及应用。 展开更多
关键词 质粒 构建 转录激活 转染 靶细胞
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小儿急慢性胰腺炎的研究进展 被引量：4
3
作者 席栋 郑玉花 《发育医学电子杂志》 2020年第1期92-96,共5页
胰腺炎是基于病史、医师检查、实验室检查和影像学检查相结合的综合临床诊断,其分为急性胰腺炎、急性复发性胰腺炎和慢性胰腺炎。报告显示,小儿急性胰腺炎的发病率为每年(3~13例)/10万人,慢性胰腺炎的发病率也在逐年升高,部分原因在于... 胰腺炎是基于病史、医师检查、实验室检查和影像学检查相结合的综合临床诊断,其分为急性胰腺炎、急性复发性胰腺炎和慢性胰腺炎。报告显示,小儿急性胰腺炎的发病率为每年(3~13例)/10万人,慢性胰腺炎的发病率也在逐年升高,部分原因在于人们对疾病的认知加强及有了更好的诊断工具[1]。现对小儿急慢性胰腺炎的最新认知、诊断和治疗进行综述。1急性胰腺炎1.1定义急性胰腺炎定义为胰腺的突发炎症,过程可逆,其特征是炎性浸润、间质水肿及不同程度的坏死。有典型腹痛的突然发作,淀粉酶和/或脂肪酶升高,影像学符合急性胰腺炎诊断。 展开更多
关键词 慢性胰腺炎 间质水肿 炎性浸润 急性胰腺炎 影像学检查 诊断工具 临床诊断
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