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人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的基因修饰及其在大肠杆菌中的高效表达 被引量:2
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作者 荫俊 孙叶方 +2 位作者 张郁 史俊南 王革 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期31-36,共6页
目的对人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor,GM-CSF)cDNA5′端进行修饰以实现在大肠杆菌中的高效表达。方法采用PCR方法进行... 目的对人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor,GM-CSF)cDNA5′端进行修饰以实现在大肠杆菌中的高效表达。方法采用PCR方法进行插入和定点突变,转化大肠杆菌实现原核系统表达。通过细胞和生物学方法对表达产物进行鉴定。结果修饰后基因的氨基酸序列与文献报道完全一致,重组蛋白表达量占菌体总蛋白的25%;重组蛋白可刺激体外培养的TF-1细胞生长和细胞集落形成;其蛋白比活达到1.5×107/mg。氨基酸N末端序列分析表明,前16位氨基酸序列与天然序列完全一致。结论对GM-CSFcDNA5′端进行修饰可有效地提高N末端启始区的翻译效率,从而实现在大肠杆菌中的高效表达。获得具有生物学活性的重组蛋白。 展开更多
关键词 GM-CSF 基因修饰 表达 大肠杆菌
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产黑普氏菌内毒素脂多糖的免疫生物学活性研究 被引量:1
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作者 荫俊 张松乐 +4 位作者 侯晓军 陈跃峰 王忠泽 张郁 孙叶方 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期94-96,共3页
目的在体外细胞培养系统和小鼠模型中检测产黑普氏菌ATCC25845内毒素脂多糖对内源性细胞因子的介导活性。方法采用Kramer测定法、软琼脂细胞培养法和胸腺细胞增殖法测定内毒素脂多糖对肿瘤坏死因子(tumornecr... 目的在体外细胞培养系统和小鼠模型中检测产黑普氏菌ATCC25845内毒素脂多糖对内源性细胞因子的介导活性。方法采用Kramer测定法、软琼脂细胞培养法和胸腺细胞增殖法测定内毒素脂多糖对肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)、集落刺激因子(colonystimulatingfactor,CSF)、白细胞介素1(interleukin1,IL-1)的诱导活性以及局部皮肤斯氏反应(SPD50)。结果产黑普氏菌ATCC25845内毒素可显著地诱导TNF、CSF和IL-1的产生,在一定剂量范围内呈剂量依赖型。并可导致家兔典型的皮肤局部斯氏反应。 展开更多
关键词 产黑素拟杆菌 细胞因子 内毒素类 生物学活性
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离体培养牙髓等成纤维细胞的研究状况
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作者 郝建军 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1995年第2期119-120,共2页
离体培养牙髓等成纤维细胞的研究状况郝建军综述史俊南审校西安第四军医大学牙髓生物学实验室(710032)牙髓是疏松的胶原性的结缔组织,由细胞和基质组成。承担牙齿的营养代谢、感觉和修复等方面的重要生理功能[1]。但由于牙... 离体培养牙髓等成纤维细胞的研究状况郝建军综述史俊南审校西安第四军医大学牙髓生物学实验室(710032)牙髓是疏松的胶原性的结缔组织,由细胞和基质组成。承担牙齿的营养代谢、感觉和修复等方面的重要生理功能[1]。但由于牙髓被牙体硬组织包围,体内进行研究存... 展开更多
关键词 牙髓 成纤维细胞 离体培养
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牙髓紫卟啉菌内毒素对炎症性细胞因子的介导作用 被引量:4
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作者 荫俊 王忠泽 +4 位作者 侯晓军 陈跃峰 张松乐 张郁 孙叶方 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期37-41,共5页
牙髓紫叶琳菌ATCC35406是近年来新发现的重要致病性专性厌氧菌,采用改良酚-氯仿-石油醚法提取牙髓紫卟啉菌ATCC35406内毒素脂多糖,通过Kramer测定法、软琼脂细胞培养法以及胸腺细胞增殖法测定脂多糖的细胞... 牙髓紫叶琳菌ATCC35406是近年来新发现的重要致病性专性厌氧菌,采用改良酚-氯仿-石油醚法提取牙髓紫卟啉菌ATCC35406内毒素脂多糖,通过Kramer测定法、软琼脂细胞培养法以及胸腺细胞增殖法测定脂多糖的细胞生物学活性。结果显示:纯化脂多糖可不同程度地诱导小鼠模型生成肿瘤坏死因子(TNF)、集落刺激因子(CSF)和白介素-1(IL-1),并在一定范围内呈剂量依赖型,提示牙髓紫卟啉菌内毒素在动物模型和细胞模型中具有显著的细胞生物学和免疫学活性. 展开更多
关键词 牙髓紫卟啉菌 内毒素 细胞因子
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厌氧菌内毒素脂多糖的化学及色谱分析 被引量:1
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作者 荫俊 侯晓军 +4 位作者 张郁 史俊南 王忠泽 张松乐 陈跃峰 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期35-37,共3页
采用化学和色谱技术对产黑普氏菌、中间普氏菌、牙髓普氏菌和具核梭杆菌4种厌氧菌脂多糖的糖和脂肪酸进行化学分析。结果表明,4种厌氧菌内毒素的糖类由氨基葡萄糖、内毒素酸性糖(KDO)和中性糖组成,其中中性糖主要由鼠李戊醛糖... 采用化学和色谱技术对产黑普氏菌、中间普氏菌、牙髓普氏菌和具核梭杆菌4种厌氧菌脂多糖的糖和脂肪酸进行化学分析。结果表明,4种厌氧菌内毒素的糖类由氨基葡萄糖、内毒素酸性糖(KDO)和中性糖组成,其中中性糖主要由鼠李戊醛糖、半乳糖和葡萄糖组成。脂肪酸的组成主要为饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、分枝脂肪酸和羟基脂肪酸组成。 展开更多
关键词 内毒素 普氏菌 具核梭杆菌 化学分析
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中间普氏菌内毒素脂多糖的细胞免疫介导活性 被引量:1
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作者 荫俊 陈跃峰 +4 位作者 张郁 史俊南 张松乐 侯晓军 王忠泽 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期38-41,共4页
采用酚水法提取中间普氏菌ATCC25261内毒素脂多糖,通过Kramer测定法,软琼脂细胞培养法、胸腺细胞增殖法以及局部斯氏反应测定脂多糖的免疫细胞生物学活性。结果显示,纯化脂多糖可显著地诱导小鼠模型生成肿瘤坏死因子... 采用酚水法提取中间普氏菌ATCC25261内毒素脂多糖,通过Kramer测定法,软琼脂细胞培养法、胸腺细胞增殖法以及局部斯氏反应测定脂多糖的免疫细胞生物学活性。结果显示,纯化脂多糖可显著地诱导小鼠模型生成肿瘤坏死因子(TNF)、集落刺激因子(CSF)和白介素-1(IL-1),并在一定范围内呈剂量依赖型。同时中间普氏菌内毒素还可刺激皮肤形成典型的局部斯氏反应。 展开更多
关键词 中间普氏菌 细胞因子 内毒素
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重组人促白细胞生成素对白细胞减少症的作用
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作者 卢宝华 梅其炳 +1 位作者 张郁 孙叶芬 《西北药学杂志》 CAS 1997年第S1期30-30,共1页
关键词 白细胞减少症 促白细胞生成素 GM-CSF 重组人 CFU-GM CFU-S 小鼠 环磷酸胺 第四军医大学 生白能
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