大汗腺中分泌物气味结合蛋白、雄激素受体表达水平及其与腋臭相关性研究 被引量：14

1

作者 栗颖利 陈辉 +4 位作者 杨国栋 曹彦 杜洁 孙超峰 李晓莉 《中国美容医学》 CAS 2010年第12期1822-1826,共5页

目的:对腋臭患者和正常人腋部大汗腺进行形态学观察,探讨大汗腺分泌活动的周期。对两种人群大汗腺组织中雄激素受体(androgen receptor,AR)和大汗腺分泌物气味结合蛋白(apocri ne secreti on odor-bi ndi ng protei n,ASOB)的表达进行检... 目的:对腋臭患者和正常人腋部大汗腺进行形态学观察,探讨大汗腺分泌活动的周期。对两种人群大汗腺组织中雄激素受体(androgen receptor,AR)和大汗腺分泌物气味结合蛋白(apocri ne secreti on odor-bi ndi ng protei n,ASOB)的表达进行检测,探讨二者的表达水平及其在腋臭发病中的作用。方法:对腋部皮肤组织进行HE染色,分析大汗腺不同分泌时期的形态和特点。利用免疫组织化学(i mmunohi stochemi stry)和免疫印迹法(eWstern bl otti ng)检测腋臭组与对照组大汗腺组织中AR和ASOB在大汗腺以及不同分泌时期中的表达情况,使用Image-Pro Pl us 5.0和Fl uorChemFC2分析系统对结果进行分析。结果:①大汗腺的分泌活动具有周期性,可分为活跃期和静息期;②腋臭组中AR和ASOB的表达明显高于对照组;③AR和ASOB在大汗腺不同分泌时期的表达差异有统计学意义;④AR和ASOB在两组人群相同分泌时期的表达差异有统计学意义;⑤AR和ASOB在腋臭大汗腺中的表达有正的直线相关关系。结论:AR和ASOB在腋臭患者大汗腺组织中的表达量同时增多,它们可能在腋臭发病的过程中起了重要作用。 展开更多

关键词 腋臭 大汗腺 雄激素受体 大汗腺分泌物气味结合蛋白

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bcl-2核酶对SMMC7721细胞端粒酶活性的影响作用 被引量：8

2

作者 张传山 王文亮 +3 位作者 彭玮丹 胡沛臻 柴玉波 张衍国 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第6期511-513,共3页

目的　观察 bcl- 2核酶对 SMMC- 772 1细胞的作用 ,探讨 bcl- 2表达水平的改变对细胞端粒酶活性的影响 .方法　经脂质体介导的方法将 PMTr- neo(正向 bcl- 2核酶真核表达载体 )导入 SMMC772 1细胞中 ,细胞克隆转移扩大培养后 ,采用 TU N... 目的　观察 bcl- 2核酶对 SMMC- 772 1细胞的作用 ,探讨 bcl- 2表达水平的改变对细胞端粒酶活性的影响 .方法　经脂质体介导的方法将 PMTr- neo(正向 bcl- 2核酶真核表达载体 )导入 SMMC772 1细胞中 ,细胞克隆转移扩大培养后 ,采用 TU NEL,TRAP- PCR- EL ISA,免疫组化技术结合图像分析技术检测 SMMC772 1/ PMTr- neo细胞凋亡、细胞端粒酶活性及 P16 ,P2 1的改变 .结果　较对照组 SMMC772 1/PMTr- neo细胞 Bcl- 2表达水平显著下降 ,伴有显著细胞凋亡现象 ;同时端粒酶活性下降 ,P16 ,P2 1表达水平显著增加 .结论　 bcl- 2核酶可促进 SMMC772 1细胞发生凋亡 ,并降低细胞端粒酶活性 ,提示 Bcl- 2表达水平的改变对细胞端粒酶活性有一定的影响 . 展开更多

关键词 肝肿瘤 bcl-2核酶 脱噬作用 SMMC7721 细胞端粒酶 基因治疗

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短发卡RNA特异性抑制Survivin基因在U251细胞中的表达 被引量：8

3

作者 甄海宁 章翔 +7 位作者 杨彤涛 吴元明 白文涛 付洛安 章薇 高大宽 胡世颉 王西玲 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2005年第6期496-500,共5页

目的构建针对人Survivin基因的特异性短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其在人脑胶质母细胞瘤U251细胞中对Survivin基因表达的抑制作用。方法根据SurvivincDNA编码序列,设计并合成针对Survivin基因的特异性RNA干涉片断,将其克隆入pWH... 目的构建针对人Survivin基因的特异性短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其在人脑胶质母细胞瘤U251细胞中对Survivin基因表达的抑制作用。方法根据SurvivincDNA编码序列,设计并合成针对Survivin基因的特异性RNA干涉片断,将其克隆入pWH1质粒载体,构建Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1SR。通过脂质体介导将pWH1SR载体和空载体pWH1分别转染入U251细胞,经G418筛选,建立稳定转染的细胞系U251SR和U251P。采用RTPCR、Westernblot和免疫组化方法检测SurvivinmRNA和蛋白在U251、U251P和U251SR细胞中的表达水平。结果成功构建了Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1SR,经酶切鉴定证实克隆正确。获得了稳定转染pWH1SR载体和空载体pWH1的细胞系U251SR和U251P。U251SR细胞SurvivinmRNA和蛋白表达均受到明显抑制,抑制率分别达87%和91%;U251P细胞Survivin基因表达水平无明显变化。结论特异性shRNA能够明显抑制Survivin基因在U251细胞中的表达,这为进一步研究Survivin在U251细胞中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础。 展开更多

关键词 RNA干涉 短发卡RNA SURVIVIN 胶质瘤

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流式细胞术测定骨骼肌细胞分化中DNA合成及其细胞周期变化 被引量：6

4

作者 秦瑞峰 顾晓明 +1 位作者 黄富国 张浩 《第四军医大学学报》 2000年第8期921-923,共3页

目的　分析骨骼肌细胞分化中细胞周期及其对 DNA合成的影响 .方法　采用小鼠 C2 C12骨骼肌细胞系作为体外肌细胞分化的研究模型 ,对照组 10 0 m L· L- 1胎牛血清DMEM培养液培养 ,实验组换为 2 0 m L· L- 1 胎牛血清DMEM培养... 目的　分析骨骼肌细胞分化中细胞周期及其对 DNA合成的影响 .方法　采用小鼠 C2 C12骨骼肌细胞系作为体外肌细胞分化的研究模型 ,对照组 10 0 m L· L- 1胎牛血清DMEM培养液培养 ,实验组换为 2 0 m L· L- 1 胎牛血清DMEM培养液培养 ,诱导肌母细胞分化 ,分别于换 2 0 m L·L- 1 血清浓度 DMEM培养液后的 2 4,48和 72 h进行流式细胞术检测 ,分析肌母细胞分化过程中 DNA合成和细胞周期变化 .结果　发现肌细胞分化早期即 2 4,48h时 ,与对照组比有更多的细胞进入 S期 ;分化后期即 72 h多核肌管形成时 ,S期比对照组明显减少 ,而 G0 / G1 期明显高出对照 .此外 ,在肌分化的 72 h内 G0 / G1 期细胞随时间而递增 ,S期则递减 .结论　上述现象说明随着细胞向成熟分化的进程 ,肌细胞融合成肌管 ,处于 DNA合成复制期的细胞逐渐减小 ,更多的细胞进入相对稳定的 G0 / G1 期 .可见肌细胞的生成和分化是一个不可逆的、高度有序的过程 . 展开更多

关键词 骨骼肌细胞 分化 DNA合成 细胞周期 流式细胞术

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抗前列腺特异抗原重链可变区单域抗体基因的构建及表达 被引量：4

5

作者 袁建林 王智 +1 位作者 武国军 郝晓柯 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第5期425-428,共4页

目的　扩增出抗前列腺特异抗原 (PSA)单克隆抗体(MAb)的重链可变区 (VH)单域抗体基因 ,并在大肠杆菌中表达 .方法　从分泌抗 PSA m Ab的杂交瘤细胞系 E4B7中提取总 RNA,经 RT- PCR扩增 VH 单域抗体基因 ,将其克隆到融合蛋白表达载体 p G... 目的　扩增出抗前列腺特异抗原 (PSA)单克隆抗体(MAb)的重链可变区 (VH)单域抗体基因 ,并在大肠杆菌中表达 .方法　从分泌抗 PSA m Ab的杂交瘤细胞系 E4B7中提取总 RNA,经 RT- PCR扩增 VH 单域抗体基因 ,将其克隆到融合蛋白表达载体 p GEX- 4T- 1中进行表达 .结果　 VH 单域抗体基因全长 36 3bp,含起始码和终止码 .将其克隆到p GEX- 4T- 1内 ,转化大肠杆菌 DH5 α,获得高效表达 ,表达量占全菌总蛋白质的 38% ,以包涵体形式存在 .经初步纯化和复性后 ,用谷胱甘肽 (GST)亲和色谱纯化 ,再经凝血酶水解获得抗 PSA VH 单域抗体 .竞争结合抑制实验证明 ,该表达产物具有前列腺癌细胞亲和活性 .结论　构建成功抗 PSA的 VH单域抗体 。 展开更多

关键词 前列腺特异抗原 单域抗体 克隆 表达 重链可变区

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紫杉醇诱导食管癌细胞凋亡 被引量：4

6

作者 彭玮丹 张杰 +2 位作者 惠宏襄 金明 王成济 《第四军医大学学报》 1998年第2期129-133,共5页

目的:研究紫杉醇对食管瘤细胞生长抑制及诱导凋亡的作用.方法;应用MTT分析法、形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察.结果:紫杉醉在6 nmol.L浓度时对食管癌细胞就有显著的生... 目的:研究紫杉醇对食管瘤细胞生长抑制及诱导凋亡的作用.方法;应用MTT分析法、形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察.结果:紫杉醉在6 nmol.L浓度时对食管癌细胞就有显著的生长抑制作用,并且有时间依赖关系及一定范围的剂量依赖关系.凋亡可发生在细胞间期和分裂期,分别具有典型的凋亡形态特征及分裂期特有的凋亡特征.琼脂糖凝胶电泳显示紫杉醇作用48h便可出现DNA梯带,并呈时间剂量性增强.最低3 nmol/L浓度可见DNA梯带.紫杉醇可很快启动细胞凋亡的程序,并不需要持续作用.用流式细胞仪测定细胞周期,可见明显的凋亡峰.结论:紫杉醇对食管瘤细胞的细胞毒作用是诱导其凋亡的结果,这种诱导凋亡的能力是紫杉醇疗效的基础,因而在对食管瘤的治疗中紫杉醇有着巨大的潜力. 展开更多

关键词 紫杉醇 细胞凋亡 食管肿瘤

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促甲状腺激素释放激素受体基因在小鼠睾丸中的表达 被引量：7

7

作者 张远强 张舒华 +1 位作者 刘新平 L.L.Vacca-Galloway 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1996年第6期540-543,共4页

促甲状腺激素释放激素(Thyrotropin-releasing hormone,TRH)为Shally等人于1969年从羊和猪的下丘脑中提取并分离纯化的3肽。TRH与垂体前叶促甲状腺激素细胞特异性受体结合刺激促甲状腺激素(TSH)的合成和分泌。应用免疫组织化学,TRH定位... 促甲状腺激素释放激素(Thyrotropin-releasing hormone,TRH)为Shally等人于1969年从羊和猪的下丘脑中提取并分离纯化的3肽。TRH与垂体前叶促甲状腺激素细胞特异性受体结合刺激促甲状腺激素(TSH)的合成和分泌。应用免疫组织化学,TRH定位于睾丸内间质细胞中,且TRH基因也已在人、大鼠和小鼠的睾丸中表达。然而,TRH是否通过特异性受体作用于睾丸仍不清楚。目前,编码TRH受体(TRH Receptor,TRH-R)的cDNA克隆已从小鼠垂体促甲状腺激素肿瘤细胞中分离出来,其氨基酸序列显示TRH-R是由7个跨膜区的单一肽链构成,属G蛋白偶联型受体超家族。大鼠和小鼠的TRH-R的核苷酸和氨基酸序列具有高度同源性。TRH可能通过G蛋白偶联受体起到内分泌和神经药理作用。Satoh等人通过Northern印迹杂交和反转录-PCR发现小鼠、大鼠和人的睾丸组织中特异性表达了TRH-R基因,但无定位结果。本文应用原位杂交组织化学(ISHH)技术,首次观察了TRH-R mRNA在小鼠睾丸中的表达和定位,现报道如下: 展开更多

关键词 促甲状腺激素 睾丸 基因表达 TRH 受体

原文传递

rhBMP-2对成纤维细胞成骨表型的影响 被引量：2

8

作者 孟国林 胡蕴玉 +3 位作者 蒲勤 袁志 吕荣 白建平 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第11期984-986,共3页

目的　研究 rh BMP- 2对成纤维细胞成骨表型的影响 ,探讨成纤维细胞成骨条件 .方法　向体外培养的成纤维细胞 (NIH3T3细胞 )内加入不同浓度的 rh BMP- 2 ,在第 3日和第 6日检测碱性磷酸酶 (AL P)活性和骨钙素表达 ,绘制生长曲线 .结果　... 目的　研究 rh BMP- 2对成纤维细胞成骨表型的影响 ,探讨成纤维细胞成骨条件 .方法　向体外培养的成纤维细胞 (NIH3T3细胞 )内加入不同浓度的 rh BMP- 2 ,在第 3日和第 6日检测碱性磷酸酶 (AL P)活性和骨钙素表达 ,绘制生长曲线 .结果　 rh BMP- 2可增加成纤维细胞 AL P活性 ,促进骨钙素表达 ,在 rh BMP- 2浓度为 80 0 μg· m L- 1和 12 0 0 μg·m L- 1作用最强 .rh BMP- 2对细胞增殖规律无明显影响 .结论　 rh BMP- 2可促进成纤维细胞成骨表型表达 . 展开更多

关键词 成纤维细胞 骨形态学生蛋白 成骨表型 RHBMP-2

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Cyclin D1在胶质瘤细胞系中表达分布模式的初步研究 被引量：6

9

作者 黄安炀 章翔 +2 位作者 曹云新 李霞 刘新平 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第22期2024-2026,共3页

目的 :探讨cyclinD1在胶质瘤细胞系中的细胞周期表达模式 ,将为从生物学功能上阐明cyclinD1在胶质瘤细胞周期演进中的作用 .方法 :利用流式细胞仪双参数法和细胞同步化 ,确定cyclinD1在胶质瘤细胞系SHG 4 4和BT 32 5中的细胞周期表达分... 目的 :探讨cyclinD1在胶质瘤细胞系中的细胞周期表达模式 ,将为从生物学功能上阐明cyclinD1在胶质瘤细胞周期演进中的作用 .方法 :利用流式细胞仪双参数法和细胞同步化 ,确定cyclinD1在胶质瘤细胞系SHG 4 4和BT 32 5中的细胞周期表达分布模式 .结果 :在胶质瘤细胞系SHG 4 4和BT 32 5中 ,CyclinD1的表达呈细胞周期依赖性 :在SHG 4 4中 ,cyclinD1在G1期表达最高 ,4h左右达到峰值 ,S期及G2 /M期下降 ,但仍可检测到 ;在BT 32 5中 ,cyclinD1在G1期表达最高 ,6h左右达到峰值 ,S期及G2 /M期下降 ,但仍可检测到 .结论 :cyclinD1蛋白质的表达呈细胞周期依赖性 ,且与细胞周期行进有关 ;cyclinD1在SHG 4 4和BT 32 展开更多

关键词 神经胶质瘤 细胞周期蛋白D1 CYCLIND1 细胞周期表达模式 细胞周期依赖性

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氯通道阻断剂NPPB对肾癌细胞系GRC-1生长的抑制作用 被引量：4

10

作者 马建军 周士胜 +3 位作者 保庭毅 巨生产 胡玉珍 杨安钢 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第9期822-824,共3页

目的 :研究NPPB对肾癌细胞系GRC 1增殖的抑制作用 .方法 :采用倒置光学显微镜观察、MTT比色实验、流式细胞仪检测细胞周期研究NPPB对肾癌细胞系GRC 1生长的抑制作用 .结果 :倒置光学显微镜观察和MTT比色实验显示NPPB对肾癌细胞系GRC 1... 目的 :研究NPPB对肾癌细胞系GRC 1增殖的抑制作用 .方法 :采用倒置光学显微镜观察、MTT比色实验、流式细胞仪检测细胞周期研究NPPB对肾癌细胞系GRC 1生长的抑制作用 .结果 :倒置光学显微镜观察和MTT比色实验显示NPPB对肾癌细胞系GRC 1的生长具有明显抑制作用 ,流式细胞仪检测NPPB使肾癌细胞系GRC 1绝大多数细胞的生长停滞于G0 /G1期 .结论 :NPPB对肾癌细胞系GRC 1生长的抑制作用明显 ,其作用机制为NPPB抑制肾癌细胞系GRC 1的生长停滞于G0 展开更多

关键词 氯通道 肾癌细胞 抑制

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转染野生型MTS1基因的膀胱癌细胞中p16蛋白的可控表达及意义 被引量：6

11

作者 金向阳 金明 +1 位作者 王中琨 王建波 《第四军医大学学报》 2000年第11期1330-1332,共3页

目的　研究 p16蛋白的可控表达 .方法　通过可诱导的真核表达载体 p MDNA3- p16将野生型多肿瘤抑制基因(multiple tumor suppressor1,MTS1)转染至该基因表达功能丧失的人膀胱癌细胞 T2 4中 .应用免疫细胞化学和 m RNA原位杂交的方法检测... 目的　研究 p16蛋白的可控表达 .方法　通过可诱导的真核表达载体 p MDNA3- p16将野生型多肿瘤抑制基因(multiple tumor suppressor1,MTS1)转染至该基因表达功能丧失的人膀胱癌细胞 T2 4中 .应用免疫细胞化学和 m RNA原位杂交的方法检测 p16蛋白的表达 .结果　经重金属离子诱导前与诱导后 ,T2 4细胞中 p16蛋白的表达有明显差异 .结论　通过重金属离子的诱导 ,可以调控 T2 4细胞中 p16蛋白的表达 . 展开更多

关键词 膀胱癌 P16蛋白 MTS1基因转染 T24细胞

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反义PCNA与反义bcl-2脱氧寡核苷酸抑制人视网膜色素上皮生长 被引量：4

12

作者 王琳 惠延年 +2 位作者 王雨生 惠宏襄 金明 《第四军医大学学报》 2000年第2期204-206,共3页

目的　观察反义增生细胞核抗原 (PCNA)和反义 bcl-2脱氧寡核苷酸对培养的人视网膜色素上皮细胞 (RPE)生长的作用 .方法　用 DNA合成仪合成有 1 8个核苷酸的反义PCNA和 1 5个核苷酸的反义 bcl- 2脱氧寡核苷酸片段 ,以不同浓度加入 RPE培... 目的　观察反义增生细胞核抗原 (PCNA)和反义 bcl-2脱氧寡核苷酸对培养的人视网膜色素上皮细胞 (RPE)生长的作用 .方法　用 DNA合成仪合成有 1 8个核苷酸的反义PCNA和 1 5个核苷酸的反义 bcl- 2脱氧寡核苷酸片段 ,以不同浓度加入 RPE培养液 ,培养 2～ 4d,用 SABC法检测细胞PCNA和 bcl- 2的表达 ,用 MTT法及流式细胞仪测定细胞抑制率 .结果　 6 .2 5～ 1 0 0μm ol· L- 1 的反义 PCNA对 RPE的抑制率为 8.3%～ 38.4% ,呈剂量依赖性 ,并抑制细胞 PCNA的表达 .反义 bcl- 2未显示抑制作用 .结论　反义 PCNA脱氧寡核苷酸可抑制近 40 %的 RPE生长 。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮 PCNA bcl-2 反义 脱氧寡核苷酸

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逆转录病毒介导PTEN基因抑制人肝癌细胞系的生长 被引量：6

13

作者 王廷 窦科峰 孙强 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第9期786-789,共4页

目的　研究外源性 PTEN基因对人肝癌细胞系HHCC的细胞周期、增殖及裸鼠致瘤能力的影响 ,探索肝癌基因治疗新途径 .方法　将携有 PTEN基因的真核表达载体体外转染 HHCC细胞 ,筛选稳定转染的细胞克隆并扩增培养 ,以免疫组化方法检测 PTEN... 目的　研究外源性 PTEN基因对人肝癌细胞系HHCC的细胞周期、增殖及裸鼠致瘤能力的影响 ,探索肝癌基因治疗新途径 .方法　将携有 PTEN基因的真核表达载体体外转染 HHCC细胞 ,筛选稳定转染的细胞克隆并扩增培养 ,以免疫组化方法检测 PTEN基因的表达情况 ,应用流式细胞仪、电子显微镜、生长曲线测定等方法研究 PTEN基因对肝癌细胞周期、超微结构、生长速率等特性的影响 ,并观察导入人 PTEN基因对 HHCC细胞裸鼠致瘤能力的影响 .结果　稳定转染 PTEN基因的 HHCC肝癌细胞中 PTEN蛋白稳定表达 ,细胞周期明显改变 ,细胞从 G1 期到 S期发生抑制 ,细胞超微结构有退行性改变 ,细胞增殖活性下降 70 .6 %裸鼠致瘤能力抑制率 72 .2 % .结论　转染外源性 PTEN基因可阻止HHCC肝癌细胞由 G1 期进入 S期 ,并抑制肿瘤细胞增殖 . 展开更多

关键词 PTEN基因 肝肿瘤 基因转染

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PTEN在肝癌中低表达的意义 被引量：3

14

作者 王廷 易军 +2 位作者 王岭 李小军 孙强 《现代肿瘤医学》 CAS 2005年第6期746-747,共2页

目的探讨PTEN表达与肝细胞癌发生、发展的关系。方法检测PTEN在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达情况,以观察该基因与肝癌病理分级、转移和预后的关系。结果肝癌中PTEN表达阴性率为30.16%(19/63),显著高于正常肝组织0(0/8)和肝硬化组织7.15... 目的探讨PTEN表达与肝细胞癌发生、发展的关系。方法检测PTEN在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达情况,以观察该基因与肝癌病理分级、转移和预后的关系。结果肝癌中PTEN表达阴性率为30.16%(19/63),显著高于正常肝组织0(0/8)和肝硬化组织7.15%(1/14)。随着恶性程度的增高,PTEN表达阴性率随之增加。PTEN表达阴性与是否转移及预后显著相关。PTEN在人肝癌细胞系HHCC中也不表达。结论抑癌基因PTEN低表达多见于肝细胞肝癌进展期,并与肝细胞肝癌分化程度、是否转移以及临床预后相关。 展开更多

关键词 PTEN基因 肝细胞肝癌 免疫组织化学

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基因转移技术在骨关节病研究中的应用 被引量：3

15

作者 韩一生 金格勒 +2 位作者 戴先文 李松建 彭玮丹 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期243-246,共4页

基因转移（ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｒ）或基因转染（ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ）技术是近年来分子生物学迅速发展的重要标志，也是临床基因治疗的主要手段［１］。所谓转基因通常是将外源基因（目的基因）通过一定载体导入靶细... 基因转移（ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｒ）或基因转染（ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ）技术是近年来分子生物学迅速发展的重要标志，也是临床基因治疗的主要手段［１］。所谓转基因通常是将外源基因（目的基因）通过一定载体导入靶细胞，以补偿靶细胞的基因缺陷，或调节... 展开更多

关键词 骨关节病 基因转移 基因转染

原文传递

重组人肿瘤坏死因子-α诱导黏液表皮样癌细胞凋亡 被引量：4

16

作者 刘大庆 司徒镇强 +5 位作者 周树夏 曹云新 许彦鸣 于翠娟 王成济 杨安钢 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第1期15-18,共4页

目的 :探讨重组人肿瘤坏死因子 α(rhTNF α)作用于人黏液表皮样癌细胞 (MEC 1 )的效应与机制 .方法 :应用细胞记数、DNA降解片段琼脂糖凝胶电泳观察、电镜观察和细胞周期测定rhTNF α作用后MEC 1细胞的凋亡状况 .结果 :rhTNF α作用于M... 目的 :探讨重组人肿瘤坏死因子 α(rhTNF α)作用于人黏液表皮样癌细胞 (MEC 1 )的效应与机制 .方法 :应用细胞记数、DNA降解片段琼脂糖凝胶电泳观察、电镜观察和细胞周期测定rhTNF α作用后MEC 1细胞的凋亡状况 .结果 :rhTNF α作用于MEC 1细胞后 ,导致细胞存活数目减少 ,大量细胞发生凋亡 ;基因组DNA分解成寡聚核苷酸片段 ,DNA琼脂糖凝胶电泳有梯形条带 ;细胞周期发生改变 ,形态学观察细胞核皱缩 ,染色质边集 .结论 :rhTNF α是通过MEC 展开更多

关键词 重组人肿瘤坏死因子-Α 凋亡 黏液表皮样癌细胞

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流式细胞术外周血样品间标的方法 被引量：4

17

作者 曹云新 刘智广 +1 位作者 张晓楠 董巨莹 《第四军医大学学报》 2000年第2期244-246,共3页

目的　建立一种新的用于流式细胞术 (FCM)外周血样品的间标荧光染色方法 .方法　抗凝全血 1 0 0 μL,加入一抗 5 0μL ,室温下反应 30 min,上 Q- PREP型免疫学样品制备仪 ,溶解红细胞和固定标品 ,加入荧光二抗 5 0 μL ,室温下反应 30 m... 目的　建立一种新的用于流式细胞术 (FCM)外周血样品的间标荧光染色方法 .方法　抗凝全血 1 0 0 μL,加入一抗 5 0μL ,室温下反应 30 min,上 Q- PREP型免疫学样品制备仪 ,溶解红细胞和固定标品 ,加入荧光二抗 5 0 μL ,室温下反应 30 min,再加入 5 0 0 μL 的 PBS制成单细胞悬液 ,上流式细胞仪分析 ,同时与其他 5种常规方法进行比较 .结果　本方法与其他 5种方法的 FCM测定结果基本一致 (P>0 .0 5 ) ,而本方法样品用量少 ,操作简单 ,快速、染色时间仅需 70 m in.结论　我们建立的外周血样品间接荧光染色法 (方法 2 ) ,是外周血 FCM样品染色的理想方法 ,该方法对于 FCM在临床检验和基础研究的应用提供了技术支持 ,具有较强的实用价值 . 展开更多

关键词 血 间接 光染色 外周血样品 流式细胞术

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含多克隆位点的可诱导型真核表达载体的构建 被引量：4

18

作者 张杰 彭玮丹 +2 位作者 惠宏襄 金明 王成济 《第四军医大学学报》 1998年第2期229-230,共2页

我们利用MT-Ⅱ启动子的特性,构建了含多克隆位点的可诱导型真核表达载体pMDNA3-neo.

关键词 基因载体 基因治疗 多克隆位点 构建

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转染bcl-2基因对心肌细胞活力的影响 被引量：3

19

作者 李俊峡 贾国良 +3 位作者 金明 马越云 苏明权 张林 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第2期110-112,共3页

目的 :研究转染抗凋亡基因bcl 2对心肌细胞活力的影响 .方法 :提取含有人bcl 2基因的逆转录病毒真核表达载体 pDOR -SB质粒 ,用脂质体介导的基因转染法分别将pDOR -SB质粒和pDOR质粒 (不含bcl 2基因 )转染心肌细胞 ,观察转染心肌细胞在... 目的 :研究转染抗凋亡基因bcl 2对心肌细胞活力的影响 .方法 :提取含有人bcl 2基因的逆转录病毒真核表达载体 pDOR -SB质粒 ,用脂质体介导的基因转染法分别将pDOR -SB质粒和pDOR质粒 (不含bcl 2基因 )转染心肌细胞 ,观察转染心肌细胞在缺氧环境下的存活能力 .结果 :①原位杂交可见bcl 2基因转染了心肌细胞 ;　②转染bcl 2基因能明显提高心肌细胞在缺氧条件下的存活能力 ,提高对缺氧的耐受力 .结论 :转染bcl 展开更多

关键词 BCL-2基因 心肌细胞活力 基因转染

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改进反向点杂交方法检测脑肿瘤基因突变 被引量：3

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作者 顾建文 章翔 +2 位作者 李侠 费舟 柴玉波 《第四军医大学学报》 2000年第9期1090-1093,共4页

目的　探讨利用改进的反向点杂交方法检测已知细胞因子及肿瘤相关基因在胶质瘤、听神经瘤及脉络丛乳头状瘤中表达及突变的可行性 .方法　分别提取正常脑组织和胶质瘤、听神经瘤、脉络丛乳头状瘤组织中的总 RNA,并反转录为 c DNA,随机引... 目的　探讨利用改进的反向点杂交方法检测已知细胞因子及肿瘤相关基因在胶质瘤、听神经瘤及脉络丛乳头状瘤中表达及突变的可行性 .方法　分别提取正常脑组织和胶质瘤、听神经瘤、脉络丛乳头状瘤组织中的总 RNA,并反转录为 c DNA,随机引物法标记探针 ,与点于特殊尼龙膜上的已知分子进行反向杂交 .结果　该方法可同时检测多种基因在四种组织中的表达 ,其中 BMP- 6、GH,Sis,m dm 2在四种组织中均有较高水平表达 ,而 BMP- 7,IL- 1,- 11,- 12 ,TGF- α,G- CSF,TPO,Endostatin,nm2 3,raf,p5 3,c- er B2 ,ANG在四种组织中均为低表达 ;其余基因在四种组织中的表达水平有较大的差异 .结论　改进的反向点杂交方法可同时检测多种基因的表达 ,并在不同的组织间进行比较 。 展开更多

关键词 反向点杂交 脑肿瘤 基因突变

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