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流行性出血热病毒在人B淋巴母细胞中复制增殖 被引量：1
1
作者 姚志强 杨为松 +4 位作者 刘健 张文彬 白雪帆 李学荣 黄梅 《病毒学杂志》 CSCD 1989年第3期266-270,共5页
本文应用细胞培养、免疫荧光及电镜技术研究了B淋巴母细胞对EHF病毒的易感性。结果表明EHF病毒可在该细胞中增殖。感染细胞无明显细胞病变,在形态上与对照组无差别。虽然大部分感染细胞呈现明亮病毒抗原荧光,但在电镜下却难以找到完整... 本文应用细胞培养、免疫荧光及电镜技术研究了B淋巴母细胞对EHF病毒的易感性。结果表明EHF病毒可在该细胞中增殖。感染细胞无明显细胞病变,在形态上与对照组无差别。虽然大部分感染细胞呈现明亮病毒抗原荧光,但在电镜下却难以找到完整的病毒颗粒,仅在扩张的囊泡中发现一些性质待定的微丝样物质。人B淋巴母细胞持续感染的建立,提示患者外周血中大量出现的异型淋巴细胞可能允许EHF病毒在其中复制。 展开更多
关键词 流行性出血热 病毒定位 B细胞
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ELISA方法用于McAb亲和常数的测定 被引量：15
2
作者 白雪帆 杨为松 +3 位作者 崔运昌 李海凤 梁喆 米力 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期126-128,共3页
以肾综合征出血热病毒(HFRSV)人McAb的检测为模型,建立了测定McAb亲和常数的简易方法。其基本原理是在两种不同浓度抗原包被的微板上进行系列稀释的抗体测定,然后比较由此获得的两条S形反应曲线的OD50(50％最大OD值),代入方程式便可得... 以肾综合征出血热病毒(HFRSV)人McAb的检测为模型,建立了测定McAb亲和常数的简易方法。其基本原理是在两种不同浓度抗原包被的微板上进行系列稀释的抗体测定,然后比较由此获得的两条S形反应曲线的OD50(50％最大OD值),代入方程式便可得出亲和常数K值。该法简便、迅速、可靠,是筛选、测定B细胞杂交瘤产物的理想方法。 展开更多
关键词 亲和常数 ELISA HFRSV
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流行性出血热患者外周血单核细胞产生IL-1和PGE_2的水平及其与IL-2的关系 被引量：6
3
作者 陈龙邦 杨为松 +3 位作者 张文彬 宋勇 朱平 白雪帆 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期235-237,共3页
本文对流行性出血热(EHF)患者外周血单核细胞(PBM)在脂多糖刺激下产生白细胞介素-1(IL-1)和前列腺素E_2(PGE_2)的能力及其与淋巴细胞产生IL-2活性之间的关系作了初步研究。结果表明,EHF患者各病期PBM产生IL-1的能力基本正常,而PGE_2的... 本文对流行性出血热(EHF)患者外周血单核细胞(PBM)在脂多糖刺激下产生白细胞介素-1(IL-1)和前列腺素E_2(PGE_2)的能力及其与淋巴细胞产生IL-2活性之间的关系作了初步研究。结果表明,EHF患者各病期PBM产生IL-1的能力基本正常,而PGE_2的分泌水平在发热期和低血压少尿期明显增高;IL-2活性在病程早期下降,且与PGE_2水平呈负相关,并发现PGE_2水平增加与EHF病毒感染PBM有关,提示EHF病毒感染导致单核细胞免疫调节功能失常是造成本病早期非特异性细胞免疫功能低下的一个重要原因。 展开更多
关键词 流行性出血热 单核细胞 IL PGE2
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三种ELISA法检测HFRSV抗原的比较 被引量：4
4
作者 白雪帆 扬为松 +3 位作者 张文彬 崔运昌 米力 李海凤 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期48-50,共3页
本文报告了BA-ELISA、夹心法ELISA和抗体捕获法ELISA对五株肾综合征出血热病毒(HFRSV)细胞培养物和感染乳鼠脑中病毒抗原的检测情况,结果表明BA-EL ISA敏感性最高,对HFRSV细胞培养物的检测滴度平均达1:576～2304,对感染乳鼠脑研磨液上... 本文报告了BA-ELISA、夹心法ELISA和抗体捕获法ELISA对五株肾综合征出血热病毒(HFRSV)细胞培养物和感染乳鼠脑中病毒抗原的检测情况,结果表明BA-EL ISA敏感性最高,对HFRSV细胞培养物的检测滴度平均达1:576～2304,对感染乳鼠脑研磨液上清平均达1:2000～11200。由于三种方法均采用了HFRS单克隆抗体,因此非特异反应显著降低,敏感性得以提高。文中对三种ELISA方法的优缺点进行了讨论。 展开更多
关键词 HFRSV 病毒抗原 ELISA
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三种ELISA法检测大鼠血清肾综合征出血热病毒特异性抗体的研究
5
作者 徐海峰 崔龙洙 +2 位作者 白雪帆 杨为松 朱德生 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1995年第1期22-25,共4页
肾综合征出血热(HFRS)是由布尼亚病毒科汉坦病毒属引起的自然疫源性疾病。本病的传染源除黑线姬鼠、褐家鼠、欧洲棕背外,能作为家鼠型或实验动物型HFRS传染源的动物,还有实验大白鼠。近十年来世界各地相继暴发了由实验大鼠引起的HFRS流... 肾综合征出血热(HFRS)是由布尼亚病毒科汉坦病毒属引起的自然疫源性疾病。本病的传染源除黑线姬鼠、褐家鼠、欧洲棕背外,能作为家鼠型或实验动物型HFRS传染源的动物,还有实验大白鼠。近十年来世界各地相继暴发了由实验大鼠引起的HFRS流行,日益引起了人们的高度重视,迫切需要一些快速、简便、敏感、特异的检测手段以用于野生及实验动物的HFRS病毒流行病学监测及检疫,以预防野鼠型、家鼠型及实验室型HFRS的发生。虽然间接免疫荧光试验(IFA)一直是主要可靠的血清学诊断手段,但由于需用昂贵的仪器,并且判定结果有一定的主观性,降低了它的应用价值。我们建立了三种检测实验大鼠体内HFRS病毒抗体的ELISA方法,并对这些方法的敏感性。 (一)取代试验:1.用相应包被液或稀释液代替反应系统中一种或二种成分,结果均为阴性(见表1)。2.以JEV抗原和抗体,HSV抗原和抗体分别取代HFRS病毒抗原和A35McAb、Mark-1 McAb及免抗HFRS病毒免疫血清r-G。以酶标免抗人IgG取代酶标Mark-l,酶标H7 McAb和PAP复合物,羊抗人IgG取代桥抗免抗大鼠血清,结果均为阴性(见表2)。 展开更多
关键词 肾综合征出血热 出血热病毒 特异性抗体 ELISA
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体外简便快速增产大鼠杂交瘤细胞分泌单克隆抗体的方法对比研究
6
作者 刘原 徐海峰 杨为松 《西安医科大学学报》 CSCD 1995年第3期324-326,共3页
本文报告了以抗肾综合征出血热病毒(HFRSV)大鼠单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系为模型,研究比较了用常规营养液添加培养法与静置细胞培养法(非添加培养)生产大鼠McAb的产量和滴度的效果。结果表明应用静置细胞培养法,McAb的产量明显高于... 本文报告了以抗肾综合征出血热病毒(HFRSV)大鼠单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系为模型,研究比较了用常规营养液添加培养法与静置细胞培养法(非添加培养)生产大鼠McAb的产量和滴度的效果。结果表明应用静置细胞培养法,McAb的产量明显高于添加细胞培养法2～3倍,抗体效价亦增加至少一个数量级,并且有简便易行、快速省时、减轻劳动强度和节省原材料的特点,值得试用。 展开更多
关键词 单克隆抗体 杂交瘤细胞 肾综合征 出血热病毒
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用ELISA检测大鼠血清中肾综合征出血热病毒特异性抗体
7
作者 徐海峰 杨为松 +2 位作者 崔龙洙 朱德生 白雪帆 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期227-230,共4页
本研究应用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）技术，建立了三种检测大鼠血清中肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）特异性抗体的ＥＬＩＳＡ。通过与间接免疫荧光法（ＩＦＡＴ）对比试验发现，三种ＥＬＩＳＡ在检出大鼠血清ＨＰＲＳＶ特异性抗体的阳... 本研究应用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）技术，建立了三种检测大鼠血清中肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）特异性抗体的ＥＬＩＳＡ。通过与间接免疫荧光法（ＩＦＡＴ）对比试验发现，三种ＥＬＩＳＡ在检出大鼠血清ＨＰＲＳＶ特异性抗体的阳性率和敏感性上均明显高于ＩＦＡＴ试验，并且ＥＬＩＳＡ与ＩＦＡＴ总检出符合率为８８．５％。此外还发现由于引入小鼠抗大鼠Ｋａｐｐａ轻链ＭｃＡｂ，抗体捕捉ＥＬＩＳＡ和间接夹心ＥＬＩＳＡ具有早期诊断的特性，这些方法的建立对野生及实验动物的ＨＦＲＳＶ流行病学监测及检疫有一定价值。 展开更多
关键词 肾病综合征 出血热 抗体 ELISA
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噬菌体展示的抗汉病毒ScFv基因的构建及应用于细胞内免疫的基础研究
8
作者 程卫青 白雪帆 +6 位作者 杨为松 徐海峰 尚高峰 张文祥 程华旭 王斌 李思德 《传染病信息》 1994年第4期164-165,共2页
细胞内免疫(Intracellular Immunization)是一种将抗体基因导入细胞内阻断病毒组装的一项新技术。为探索抗汉坦病毒细胞内免疫的可行性,我们用SOE(Splice by overlapping extention)
关键词 细胞内免疫 ScFv基因 噬菌体展示 抗汉坦病毒 基因克隆 基础研究 overlapping LINKER SCFV 基因融合
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抗汉坦病毒人-大鼠嵌合重链基因在小鼠骨髓瘤细胞中的表达
9
作者 程卫青 杨为松 +5 位作者 白雪帆 徐海峰 尚高峰 程华旭 张文祥 李思德 《传染病信息》 1994年第4期164-164,共1页
从抗汉坦病毒大鼠杂交瘤KF12株细胞中提取总RNA,合成cDNA第一链,以此为模板,用PCR方法分别扩增出免疫球蛋白重链和轻链可变区基因(约360bp)。将PCR产物分别克隆至PWR13质粒中进行测序。结果显示,重链可变区基因(含357bp),轻链可变区基因... 从抗汉坦病毒大鼠杂交瘤KF12株细胞中提取总RNA,合成cDNA第一链,以此为模板,用PCR方法分别扩增出免疫球蛋白重链和轻链可变区基因(约360bp)。将PCR产物分别克隆至PWR13质粒中进行测序。结果显示,重链可变区基因(含357bp),轻链可变区基因(含351bp)有明确的构架区和超变区,经查Genebank。 展开更多
关键词 嵌合重链基因 抗汉坦病毒 小鼠骨髓瘤细胞 重链可变区基因 免疫球蛋白重链 大鼠 杂交瘤 超变区 基因克隆 恒定区
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