变形链球菌活性氧代谢规律的初步探讨 被引量：8

1

作者 王成龙 李振钢 +3 位作者 吴可 丛建波 赵皿 孙存普 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期202-205,共4页

目的　研究变形链球菌代谢产生活性氧的规律及其酶学基础 ,探讨变形链球菌活性氧代谢产物对菌斑微生态的作用。方法　采用电子自旋捕捉法检测不同培养条件下变形链球菌产生活性氧的情况及还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸 (nicotinamideade... 目的　研究变形链球菌代谢产生活性氧的规律及其酶学基础 ,探讨变形链球菌活性氧代谢产物对菌斑微生态的作用。方法　采用电子自旋捕捉法检测不同培养条件下变形链球菌产生活性氧的情况及还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸 (nicotinamideadeninedinucleotidereduced ,NADH)对次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系和Fe2 + H2 O2 体系产生活性氧的影响。结果　在变形链球菌培养液中可检测到特征性的二甲基吡咯氮氧化物 (dimethylpyridineN oxide,DMPO) O 2 和DMPO OH·的电子自旋共振(electronspinresonance ,ESR)信号及超氧化物歧化酶的活性 ;美蓝使变形链球菌培养过程中产生的特征性ESR信号消失 ;NADH对变形链球菌培养过程中产生的特征性ESR信号没有明显影响 ,但是NADH可使次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系和Fe2 + H2 O2 体系的ESR信号明显减弱甚至消失。结论　变形链球菌在代谢过程中产生了 O 2 和OH·,NADH氧化酶催化的反应可能是变形链球菌产生活性氧的主要来源。 展开更多

关键词 变异链球菌 活性氧组分 氧化还原酶类 代谢规律 龋齿

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骨形成蛋白在狗牙周组织中的分布及其意义 被引量：5

2

作者 刘宏伟 史俊南 +2 位作者 吴织芬 杨连甲 金岩 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1992年第1期26-27,F002,共3页

本研究首次应用bBMP-McAb免疫组化染色法,观察BMP在狗的牙周组织中的分布。结果显示:BMP主要分布于牙周韧带中,尤其是牙槽骨和牙骨质附近染色更深,并发现牙槽骨外侧BMP阳性区经过牙槽(山眷)与牙周韧带BMP阳性区相连续,而牙龈组织染色阴... 本研究首次应用bBMP-McAb免疫组化染色法,观察BMP在狗的牙周组织中的分布。结果显示:BMP主要分布于牙周韧带中,尤其是牙槽骨和牙骨质附近染色更深,并发现牙槽骨外侧BMP阳性区经过牙槽(山眷)与牙周韧带BMP阳性区相连续,而牙龈组织染色阴性。表明牙周韧带细胞与牙龈成纤维细胞不同,前者具有骨母样细胞的特性,并可参与牙周硬组织的形成;未分化细胞是否含有BMP,可作为评价该细胞是否具有骨母样细胞特性的参考标准之一。 展开更多

关键词 BMP 牙周组织 牙周韧带细胞 骨形成蛋白 牙槽骨 免疫组化染色法 牙龈成纤维细胞 分化细胞 发现 硬组织

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牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K催化结构域的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：5

3

作者 张凤秋 杨连甲 +2 位作者 吴织芬 金岩 周鹏 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2003年第4期244-246,共3页

目的 :克隆牙龈卟啉菌蛋白酶K催化结构域 (kgpcd)基因 ,并使其在大肠杆菌中获得表达。方法 :利用PCR方法克隆kgpcd ,并用基因重组融合表达技术获得在大肠杆菌中的表达。结果 :克隆基因测序结果与GeneBank数据库中的序列一致 ,经诱导表达... 目的 :克隆牙龈卟啉菌蛋白酶K催化结构域 (kgpcd)基因 ,并使其在大肠杆菌中获得表达。方法 :利用PCR方法克隆kgpcd ,并用基因重组融合表达技术获得在大肠杆菌中的表达。结果 :克隆基因测序结果与GeneBank数据库中的序列一致 ,经诱导表达见Mr为 5 6× 1 0 3 的融合蛋白。结论 :成功克隆了kgpcd的基因 ,并在大肠杆菌中表达了KGPcd蛋白 。 展开更多

关键词 牙龈卟啉菌 牙龈蛋白酶K 催化结构域 基因克隆 大肠杆菌

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小鼠牙胚cDNA文库的构建 被引量：3

4

作者 顾淑萍 史俊南 +5 位作者 郝建军 费俭 王丽珍 刘正 肖明振 吴补领 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期93-95,共3页

目的 :构建具足够库容量的小鼠牙胚 c DNA文库。方法 :先提取小鼠牙胚 m RNA并反转录成c DNA,经 L D PCR扩增后 ,将双链 c DNA克隆到 λTriple X中 ,包装噬菌体 ,以 XL- l blue为受菌体滴定、扩增文库 ,用已知的牙胚基质蛋白基因引物作 ... 目的 :构建具足够库容量的小鼠牙胚 c DNA文库。方法 :先提取小鼠牙胚 m RNA并反转录成c DNA,经 L D PCR扩增后 ,将双链 c DNA克隆到 λTriple X中 ,包装噬菌体 ,以 XL- l blue为受菌体滴定、扩增文库 ,用已知的牙胚基质蛋白基因引物作 PCR鉴定文库。结果 :5 0 0 μl文库的库容量为 1.3× 10 6 pfu,重组率为 72 % ,从文库中克隆到已知的 5种牙胚基蛋白基因。结论 :构建的文库具较好的库容量和重组率及较大的插入片段。 展开更多

关键词 CDNA文库 牙胚 CDNA 聚合酶链反应

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高效疏水色谱分离不同龋敏感者唾液α-淀粉酶 被引量：2

5

作者 景娟 侯铁舟 +2 位作者 赵东方 王英 阮梅生 《口腔医学》 CAS 2004年第5期264-266,共3页

目的 采用疏水色谱技术分离提纯高龋者和无龋者腮腺液α-淀粉酶的方法,研究人唾液α-淀粉酶与龋病的关系。方法 样品为刺激性唾液,冻干样品配成20 g/L的浓度。以2.0 mol/L(NH4)2SO4和0.02 mol/L KH2PO4溶液分别为A、B流动相,过XDF-SGM... 目的 采用疏水色谱技术分离提纯高龋者和无龋者腮腺液α-淀粉酶的方法,研究人唾液α-淀粉酶与龋病的关系。方法 样品为刺激性唾液,冻干样品配成20 g/L的浓度。以2.0 mol/L(NH4)2SO4和0.02 mol/L KH2PO4溶液分别为A、B流动相,过XDF-SGM型疏水柱,25 min梯度,A:100％-0％、B:0％-100％,于230 nm检测,收集所得6个组分峰,对硝基麦芽糖庚酰(PNPG7)限定底物法测定酶活性,SDS-PAGE电泳测定其分子质量对样品进行定性。结果 经酶活性检测,6号峰被证实为有高的淀粉酶活性,α-淀粉酶的平均出峰时间标准差小,个体间重复性好;高龋和无龋者峰面积百分比差异有显著性(P<0.05)。结论 α-淀粉酶与龋病有一定的相关性。 展开更多

关键词 龋敏感 高效疏水色谱 分离纯化 腮腺液 Α-淀粉酶

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牙本质过敏症治疗的发展与启示 被引量：3

6

作者 任常群 《医学与哲学》 2000年第5期33-35,共3页

关键词 牙本质过敏症 治疗 发展

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TGF-β_1对人牙髓细胞内钙影响的激光共聚焦显微镜动态观察 被引量：2

7

作者 王景杰 牛忠英 +1 位作者 倪龙兴 王春梅 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期192-195,共4页

目的 :探讨 TGF- β1 信号转导过程与人牙髓细胞内钙〔( Ca2 +) i〕的关系。方法 :体外培养人牙髓细胞经钙荧光指示剂 Fluo- 3负载后 ,用激光扫描共聚焦显微镜测定 TGF- β1 影响前后的人牙髓细胞内钙随时间变化情况。结果 :TGF- β1 ( ... 目的 :探讨 TGF- β1 信号转导过程与人牙髓细胞内钙〔( Ca2 +) i〕的关系。方法 :体外培养人牙髓细胞经钙荧光指示剂 Fluo- 3负载后 ,用激光扫描共聚焦显微镜测定 TGF- β1 影响前后的人牙髓细胞内钙随时间变化情况。结果 :TGF- β1 ( 0 .1ng/ L)使人牙髓细胞内钙先升高后降低 ,最后维持在比加药前稍高的静息钙水平上。结论 :通过 TGF-β可引起牙髓细胞内 Ca2 +水平的显著变化 ,证明 Ca2 +参与了人牙髓细胞 TGF-β1 展开更多

关键词 转化生长因子Β 牙髓细胞 激光扫描共聚焦显微镜

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转化生长因子β受体在体外培养的人牙乳头细胞中的表达 被引量：2

8

作者 张莹 张郁 史俊南 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期462-464,I031,共4页

目的　探讨体外培养的人牙乳头细胞中转化生长因子 β(transforminggrowthfactor β ,TGF β)受体的表达情况和外源性的TGF β对人牙乳头细胞TGF β受体的表达影响。 方法　采用常规细胞培养、SP免疫组织化学及图像分析法 ,检测培养的... 目的　探讨体外培养的人牙乳头细胞中转化生长因子 β(transforminggrowthfactor β ,TGF β)受体的表达情况和外源性的TGF β对人牙乳头细胞TGF β受体的表达影响。 方法　采用常规细胞培养、SP免疫组织化学及图像分析法 ,检测培养的人牙乳头细胞TGF β受体的表达情况和外源性TGF β对人牙乳头细胞TGF β受体的表达影响。 结果　TGF βⅠ、Ⅱ型受体为强阳性表达 ,Ⅲ型受体为弱阳性表达。图像分析结果表明 ,各实验组与对照组灰度值经统计学分析差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　体外培养的人牙乳头细胞表达TGF βⅠ、Ⅱ、Ⅲ型受体 ,外源性TGF 展开更多

关键词 牙乳头 细胞培养 TGF-Β受体 病理生理

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牙本质涎磷蛋白G0代转基因小鼠的获得 被引量：2

9

作者 孙汉堂 肖明振 +2 位作者 吴补领 徐国江 费俭 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第16期1454-1456,共3页

目的:构建四环素调控性牙本质涎磷蛋白(DSPP)转基因体系中的受控小鼠系.方法:从质粒pBluescript-DSPP中,将小鼠DSPP编码序列亚克隆到pTRE2的NotI/SalI位点间,构建转基因载体,经酶切鉴定和测序确认后,命名为pTRE2-DSPP;将XhoI酶切线性化... 目的:构建四环素调控性牙本质涎磷蛋白(DSPP)转基因体系中的受控小鼠系.方法:从质粒pBluescript-DSPP中,将小鼠DSPP编码序列亚克隆到pTRE2的NotI/SalI位点间,构建转基因载体,经酶切鉴定和测序确认后,命名为pTRE2-DSPP;将XhoI酶切线性化的载体DNA纯化后,显微注射到小鼠受精卵的雄原核中,挑选生长状态好的受精卵,移植到假孕母鼠的输卵管.仔鼠出生3wk后,用PCR及SouthernBlot检测阳性小鼠.结果:注射的受精卵共存活657枚,移卵至28只假孕母鼠后,产仔85只,PCR检测10只为阳性,SouthernBlot检测6只为阳性.SouthernBlot检测阳性小鼠分别传代,开始建系.结论:显微注射方法获得了DSPP转基因受控小鼠的G0代. 展开更多

关键词 牙 牙本质涎磷蛋白 小鼠转基因 微量注射

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重组人生长激素作用下成骨细胞细胞周期及细胞骨架改变的体外研究 被引量：1

10

作者 郭三萍 石勇 +1 位作者 李晓红 宋玮 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2006年第14期1293-1295,共3页

目的:观察重组人生长激素(rhgh)对体外成骨细胞(OB)细胞周期及细胞骨架Factin的影响.方法:用浓度为10和200μg/L的重组人生长激素加入大鼠OB培养体系,观察对大鼠OB的细胞周期及细胞骨架的影响.结果:定量分析表明,在rhgh作用下,成骨细胞... 目的:观察重组人生长激素(rhgh)对体外成骨细胞(OB)细胞周期及细胞骨架Factin的影响.方法:用浓度为10和200μg/L的重组人生长激素加入大鼠OB培养体系,观察对大鼠OB的细胞周期及细胞骨架的影响.结果:定量分析表明,在rhgh作用下,成骨细胞S期、G2/M期细胞百分比增加,OB的绿色荧光强度、红色荧光强度无显著变化.Factin纤维呈束状平行排列,荧光染色强,分布均匀.结论:重组人生长激素对OB的合成代谢有直接影响,但对细胞骨架无显著影响. 展开更多

关键词 成骨细胞 重组人生长激素 细胞周期 细胞骨架

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人牙本质涎蛋白对狗牙髓损伤修复影响的实验研究 被引量：1

11

作者 张莹 史俊南 +3 位作者 汪平 李洪 王英 王小竞 《临床口腔医学杂志》 2003年第7期389-391,共3页

目的　探讨人牙本质涎蛋白对狗牙髓损伤修复的影响。方法　实验共分 3组 ,实验组 (hDSP组 ) ;对照 1组 (无hDSP组 ) ;对照 2组 (PBS组 ) ;选择 10Kg、6～ 12月龄的杂种狗 3只 ,上、下尖牙、上、下磨牙和下前磨牙为实验牙 ,每只狗选 10个... 目的　探讨人牙本质涎蛋白对狗牙髓损伤修复的影响。方法　实验共分 3组 ,实验组 (hDSP组 ) ;对照 1组 (无hDSP组 ) ;对照 2组 (PBS组 ) ;选择 10Kg、6～ 12月龄的杂种狗 3只 ,上、下尖牙、上、下磨牙和下前磨牙为实验牙 ,每只狗选 10个牙 ,随机分配实验组和对照组 ,实验组共 18个牙 ,对照 1组和 2组各 6个牙。于所选牙齿颈部 ,用 1/ 2球钻在灭菌生理盐水滴注下穿通髓腔、露髓处置上述实验组和对照组胶原膜 ,光固化封闭窝洞。 2、4、8周处死动物 ,经 4%多聚甲醛灌注后 ,分离实验牙 ,再固定 48h后 ,脱钙 3～ 4周 ,脱水 ,石蜡包埋 ,制备 5～ 8μm厚连续切片 ,HE染色。结果　术后 2周 :对照组与实验组无明显差异 ,无牙本质桥形成。术后 4周 :对照组无牙本质桥形成 ,实验组有部分骨样牙本质桥形成。术后 8周 :对照组牙髓组织基本正常 ,无牙本质桥形成 ,实验组有完整的骨样牙本质桥形成 ,其下方有排列整齐的成牙本质细胞样细胞形成。结论　首次发现hDSP在体内能够诱导牙髓细胞分化 。 展开更多

关键词 人牙本质涎蛋白 牙髓损伤 修复 实验研究 胶原

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不同细胞类型对cbf α1调控DSPP基因转录的影响 被引量：1

12

作者 郭婷 曹罡 +2 位作者 余擎 肖明振 赵守亮 《临床口腔医学杂志》 2007年第5期272-274,共3页

目的:观察核心结合因子α1(core binding factor α1,cbf α1)对不同细胞中牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)基因转录调控的影响。方法:选择Hela和小鼠成牙本质细胞样细胞MDPC-23为实验细胞;DSPP基因上游2.6kb片段为启... 目的:观察核心结合因子α1(core binding factor α1,cbf α1)对不同细胞中牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)基因转录调控的影响。方法:选择Hela和小鼠成牙本质细胞样细胞MDPC-23为实验细胞;DSPP基因上游2.6kb片段为启动子。采用瞬时转染、报告基因等方法观察在两种细胞中,cbf α1对DSPP基因启动子启动活性的影响。结果:在MDPC-23及Hela细胞中,pGL3-Enhancer-2.6K与pcDNA3-cbf α1共转染组荧光素酶的表达量均小于pGL3-Enhancer-2.6K与pcDNA3共转染组(P<0.01);在MDPC-23细胞中变化更为明显。结论:cbf α1对DSPP基因的转录调控作用受细胞类型的影响。 展开更多

关键词 核心结合因子Α1 瞬时转染 报告基因 转录调控

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大鼠牙髓细胞复合β-磷酸三钙多孔陶瓷体外培养的实验研究

13

作者 郭红延 郭希民 +2 位作者 王常勇 吴补领 张玉富 《临床口腔医学杂志》 2004年第3期140-142,共3页

目的:研究大鼠牙髓细胞与β-TCP复合培养后的生长情况及细胞活性,探讨β-TCP作为大鼠牙髓细胞支架材料的可行性。方法:实验分两组,实验组为大鼠牙髓细胞与β-TCP复合培养,对照组为大鼠牙髓细胞常规培养。采用相差显微镜、电子显微镜观... 目的:研究大鼠牙髓细胞与β-TCP复合培养后的生长情况及细胞活性,探讨β-TCP作为大鼠牙髓细胞支架材料的可行性。方法:实验分两组,实验组为大鼠牙髓细胞与β-TCP复合培养,对照组为大鼠牙髓细胞常规培养。采用相差显微镜、电子显微镜观察细胞生长、贴附情况;采用MTT、细胞蛋白检测、碱性磷酸酶检测的方法评价大鼠牙髓细胞生长情况及细胞活性。结果:大鼠牙髓细胞复合β-TCP后生长良好,贴附于材料表面及孔隙内壁。MTT及细胞蛋白检测复合培养组和对照组无差异,6 d、9 d时复合β-TCP培养的大鼠牙髓细胞碱性磷酸酶活性明显高于对照组。结论:复合β-TCP进行培养的大鼠牙髓细胞生长良好,没有出现生长抑制现象,其细胞活性更明显增强,表明β-TCP完全符合牙髓细胞支架材料的要求,是一个具有很好应用前景的牙髓组织工程支架材料。 展开更多

关键词 牙髓细胞 组织工程 β—磷酸三钙多孔陶瓷

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变形链球菌活性氧代谢的酶学基础

14

作者 王成龙 刘洪臣 +4 位作者 李振纲 储冰峰 赵皿 孙存普 莫简 《临床口腔医学杂志》 2004年第10期600-603,共4页

目的 :观察不同培养条件下变形链球菌代谢产生活性氧的情况 ,研究变形链球菌活性氧代谢的酶学基础 ,探讨变形链球菌活性氧代谢产物对菌斑微生态的作用。方法 :采用化学发光法检测变形链球菌培养液中超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase... 目的 :观察不同培养条件下变形链球菌代谢产生活性氧的情况 ,研究变形链球菌活性氧代谢的酶学基础 ,探讨变形链球菌活性氧代谢产物对菌斑微生态的作用。方法 :采用化学发光法检测变形链球菌培养液中超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase ,SOD)含量 ;采用电子自旋捕捉法检测不同培养条件下变形链球菌产生活性氧的情况及还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸 (nicotinamideadeninedinucleotidereduced ,NADH)对次黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶体系和Fe+ + —H2 O2 体系产生活性氧的影响。结果 :在生理盐水培养条件下 ,变形链球菌培养液中能检测到特征性的二甲基吡咯氮氧化物 (dimethylpyridineN -oxide ,DMPO) -O2 ·和DMPO -OH·的电子自旋共振 (elec tronspinresonance ,ESR)信号 ;外源性糖使变形链球菌培养过程中产生的特征性ESR信号增强 ;美兰则使ESR信号消失 ;NADH使得次黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶体系和Fe+ + —H2 O2 体系的ESR信号明显减弱甚至消失 ;在变形链球菌培养液中检测到SOD。结论 :不同培养条件下变形链球菌代谢产生O2 ·和OH·的量不同 ,NADH氧化酶催化的反应可能是变形链球菌产生活性氧的主要来源。 展开更多

关键词 变形链球菌 活性氧 NADH氧化酶 菌斑微生态

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小鼠成釉蛋白基因cDNA全序列的克隆

15

作者 顾淑萍 史俊南 +3 位作者 刘晗 郝建军 汪平 费俭 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期278-280,共3页

目的　筛选与小鼠牙胚发育相关的特异基因。方法　利用随机引物、反转录酶合成特异和非特异探针 ,采用差异显示方法筛选小鼠牙胚cDNA文库 ,挑选阳性克隆并测序。结果　得到 6个阳性克隆 ,经测序证实其中 1个克隆序列与大鼠成釉蛋白序列... 目的　筛选与小鼠牙胚发育相关的特异基因。方法　利用随机引物、反转录酶合成特异和非特异探针 ,采用差异显示方法筛选小鼠牙胚cDNA文库 ,挑选阳性克隆并测序。结果　得到 6个阳性克隆 ,经测序证实其中 1个克隆序列与大鼠成釉蛋白序列高度同源 :其中用pTriplEX 3′引物测得的 5 2 6个碱基序列与大鼠成釉蛋白基因 5′端的 32 5 80序列有 4 97个碱基一致 ,5′引物测得的 5 6 7个碱基序列与大鼠成釉蛋白基因 3′端的 12 85 185 4序列有 5 33个碱基一致。结论　筛选到小鼠釉基质特异蛋白———成釉蛋白基因的cDNA全序列。 展开更多

关键词 小鼠 成釉蛋白基因 CDNA 全序列 克隆

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非NMDA受体拮抗剂对大鼠牙髓伤害性刺激诱导的延髓Fos表达

16

作者 倪龙兴 许默菡 牛忠英 《第四军医大学学报》 2000年第11期1338-1340,共3页

目的　研究兴奋性氨基酸非 NMDA受体在牙髓伤害性信息传递中的作用 ,为揭示牙痛的产生机制打下基础 .方法　将实验动物随机分为 4组 .第 1组单纯给予机械穿髓刺激 ;第 2组预先侧脑室注射非 NMDA受体拮抗剂 CNQX,再给予相同的穿髓刺激 ;... 目的　研究兴奋性氨基酸非 NMDA受体在牙髓伤害性信息传递中的作用 ,为揭示牙痛的产生机制打下基础 .方法　将实验动物随机分为 4组 .第 1组单纯给予机械穿髓刺激 ;第 2组预先侧脑室注射非 NMDA受体拮抗剂 CNQX,再给予相同的穿髓刺激 ;第 3组只行 CNQX侧脑室注射 ,不予穿髓刺激 ;第 4组为正常对照组 .动物存活相同时间后取延髓做 Fos蛋白免疫组化反应 ,观察 3组动物 Fos蛋白表达变化 .结果　第 2组动物延髓 Fos免疫反应阳性细胞的数量与第 1组比较没有显著性差异 .第 3组只有很少 Fos阳性细胞出现 .结论　兴奋性氨基酸非 NMDA受体在机械穿髓致痛动物模型中很可能不参与介导牙髓伤害性信息的中枢传递 . 展开更多

关键词 非NMDA受体 兴奋性氨基酸 FOS蛋白 牙髓刺激

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dspp-LacZ转基因小鼠G0代的制备和鉴定

17

作者 孙汉堂 肖明振 +2 位作者 吴补领 费俭 徐国江 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2005年第2期151-154,共4页

目的:构建小鼠牙本质涎磷蛋白(DSPP)特异性启动子启动LacZ表达的转基因小鼠G0代。方法:用PCR方法获得DSPP编码序列上游约1.6kb的启动子序列,测序确认后,通过亚克隆方法将其与LacZ编码序列连接到同一个质粒中,构建转基因载体pTN-DPM-LacZ... 目的:构建小鼠牙本质涎磷蛋白(DSPP)特异性启动子启动LacZ表达的转基因小鼠G0代。方法:用PCR方法获得DSPP编码序列上游约1.6kb的启动子序列,测序确认后,通过亚克隆方法将其与LacZ编码序列连接到同一个质粒中,构建转基因载体pTN-DPM-LacZ;将线性化的载体DNA注射到小鼠受精卵的雄原核,移植到假孕母鼠的输卵管;仔鼠出生后4周,用PCR检测阳性小鼠。结果:注射的受精卵共503个,移卵后产仔89只,阳性12只,阳性鼠分别传代开始建系。结论:通过显微注射方法获得12只G0代dspp-LacZ转基因小鼠,正在建立中的转基因小鼠系将来可以用作研究DSPP确切表达谱的工具。 展开更多

关键词 小鼠 牙本质涎磷蛋白 转基因 LACZ

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牙本质涎蛋白转基因小鼠的建立和转基因表达的初步分析

18

作者 孙汉堂 肖明振 +2 位作者 吴补领 朱庆林 费俭 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2006年第2期181-185,共5页

目的:构建牙本质涎蛋白(DSP)转基因小鼠,并对转基因表达进行初步RT-PCR分析。方法:将pcDNA3.1载体中的CMV启动子替换为启动子cβ-actin,构建载体pcDNA3.1-CX,然后将PCR获得的DSP基因编码序列克隆到pcDNA3.1-CX中,构建DSP转基因载体pcDNA... 目的:构建牙本质涎蛋白(DSP)转基因小鼠,并对转基因表达进行初步RT-PCR分析。方法:将pcDNA3.1载体中的CMV启动子替换为启动子cβ-actin,构建载体pcDNA3.1-CX,然后将PCR获得的DSP基因编码序列克隆到pcDNA3.1-CX中,构建DSP转基因载体pcDNA3.1-CX-dsp;将线性化的载体DNA注射到小鼠受精卵的雄原核,将受精卵移植到假孕母鼠的输卵管。仔鼠出生后,用PCR及Southern印迹检测阳性小鼠,并用RT-PCR对其中一小鼠的F1代进行转基因表达分析。结果:共移植717枚注射过的受精卵至29只受体鼠,移卵后产仔67只,阳性4只。检测到53号小鼠F1代外源性DSP的表达。结论:通过显微注射方法,成功获得了DSP转基因小鼠,并证实外源性DSP可在53号小鼠F1代获得表达。 展开更多

关键词 小鼠 牙本质涎蛋白 转基因 逆转录PCR

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牙髓干细胞研究进展

19

作者 郭红延 王常勇 吴补领 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期528-530,共3页

关键词 干细胞研究 牙髓干细胞 自我更新能力 成体干细胞 分化潜能 胚胎干细胞 细胞因

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龋齿充填中两种预防牙科畏惧症方法的比较 被引量：24

20

作者 吴友农 史宗道 史俊南 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期343-345,共3页

目的　对治疗前教育法和局部麻醉法在龋齿的充填治疗中 ,预防牙科畏惧症 (dentalfear,DF)的效果进行临床评价。方法　对下颌第一恒磨牙面患中或深度龋的小学生 ,采用随机方法等量分为 3组 ,每组 50例 ,男女各 2 5例。治疗前教育组 :提... 目的　对治疗前教育法和局部麻醉法在龋齿的充填治疗中 ,预防牙科畏惧症 (dentalfear,DF)的效果进行临床评价。方法　对下颌第一恒磨牙面患中或深度龋的小学生 ,采用随机方法等量分为 3组 ,每组 50例 ,男女各 2 5例。治疗前教育组 :提前 1h ,在医生带领下 ,观看有关龋病防治的科教录像片 ,熟悉环境、器械 ,回答提问 ;局部麻醉组 :用 2 %利多卡因 1 8ml进行下齿槽神经局部注射麻醉 ;空白对照组 :不做任何针对DF的干预。 3组病例接受同样的常规充填治疗。根据Veerkamp的评价标准 ,3名专家盲法独立评分 ,取均值。结果　 3组的DF值分别为 0 57± 0 59、0 83± 0 66及 1 0 5± 0 68,差异有非常显著性 (H =1 8 646 ,P =0 0 0 0 1 ) ;3组DF的发生率分别为 1 0 %、1 8%和 42 % (χ2 =1 5 50 3 1 ,P =0 0 0 0 4 ) ;治疗前教育法和局部麻醉法均可预防DF ,前者的临床效果更好。结论　在疼痛不是主要矛盾的龋齿充填治疗中 ,治疗前教育法可以更好地预防DF。 展开更多

关键词 牙科教育 龋齿 局部麻醉 牙科畏惧症 充填治疗 DF

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