苦参碱抑制血小板衍生生长因子诱导的小鼠皮肤成纤维细胞增殖 被引量：39

1

作者 伍严安 高春芳 +2 位作者 王皓 黄超 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期724-726,共3页

目的 :探讨苦参碱对血小板衍生生长因子 - BB(PDGF- BB)诱导的小鼠成纤维细胞增殖的影响。方法 :取新生 ICR小鼠皮肤细胞培养成纤维细胞。用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法和细胞计数法分析细胞增殖情况。结果 :5 0～ 2 5 0 μg/ ml的苦参碱能... 目的 :探讨苦参碱对血小板衍生生长因子 - BB(PDGF- BB)诱导的小鼠成纤维细胞增殖的影响。方法 :取新生 ICR小鼠皮肤细胞培养成纤维细胞。用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法和细胞计数法分析细胞增殖情况。结果 :5 0～ 2 5 0 μg/ ml的苦参碱能剂量依赖地降低血清刺激的细胞增殖 ,撤除苦参碱后抑制作用能完全逆转。苦参碱 (10 0～ 5 0 0 μg/ ml)亦能剂量依赖地抑制PDGF- BB诱导的细胞增殖。结论 :苦参碱显示了很强的抗小鼠皮肤成纤维细胞增殖的作用 ,可能通过抑制 PDGF- BB诱导增殖作用来介导的。提示苦参碱可能对皮肤纤维化疾病有潜在的预防和治疗作用。 展开更多

关键词 苦参碱 皮肤 成纤维细胞 细胞增殖 PDGF-BB

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免疫磁珠法分选胚胎大鼠脑神经干细胞的初步研究 被引量：12

2

作者 高国一 卢亦成 +3 位作者 江基尧 李莉 张玲珍 朱诚 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1092-1094,共3页

目的 :探索应用免疫磁珠间接阳性法分选神经上皮干细胞蛋白 (nestin)阳性的神经干细胞群的实验条件 ,为研究神经干细胞的特性与神经干细胞的培养和移植研究创造有利条件。 方法 :制取胎鼠大脑组织细胞悬液 ,免疫磁珠法分选胎鼠脑神经干... 目的 :探索应用免疫磁珠间接阳性法分选神经上皮干细胞蛋白 (nestin)阳性的神经干细胞群的实验条件 ,为研究神经干细胞的特性与神经干细胞的培养和移植研究创造有利条件。 方法 :制取胎鼠大脑组织细胞悬液 ,免疫磁珠法分选胎鼠脑神经干细胞 ,以流式细胞术检测阳性细胞纯度 ,以锥虫蓝染色法检测细胞活性。 结果 :该法分选的 nestin阳性细胞纯度为93.0 %～ 99.7% ,其中活性细胞为 92 %～ 97%。结论 :免疫磁珠法分离胎鼠脑神经干细胞群落简便、有效 ,可以为神经干细胞细胞培养和移植提供细胞来源 ,也为研究高纯度神经干细胞的特性提供了实验基础。 展开更多

关键词 神经干细胞 神经巢蛋白 免疫磁珠法

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雷公藤红素对HMC-1细胞凋亡相关基因表达的影响 被引量：14

3

作者 鲍一笑 张璐定 +2 位作者 李莉 韩连书 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期833-835,共3页

目的 :探讨雷公藤红素诱导人肥大细胞系 HMC- 1细胞凋亡的基因调节机制。 方法 :雷公藤红素 (0 .5μmol/ L )与HMC- 1细胞共育不同时间 (4、8或 12 h)后 ,用 RT- PCR、免疫组化方法检测 bcl- 2家族、c- m yc、白细胞介素 1β转换酶 (ICE... 目的 :探讨雷公藤红素诱导人肥大细胞系 HMC- 1细胞凋亡的基因调节机制。 方法 :雷公藤红素 (0 .5μmol/ L )与HMC- 1细胞共育不同时间 (4、8或 12 h)后 ,用 RT- PCR、免疫组化方法检测 bcl- 2家族、c- m yc、白细胞介素 1β转换酶 (ICE)基因在 m RNA和蛋白质水平表达的变化 ,并分析它们在细胞凋亡中的作用。 结果 :HMC- 1细胞本已存在 Bcl- 2、Bax、C- myc蛋白表达 ;雷公藤红素作用后 ,Bcl- 2蛋白表达受到抑制 ,Bax、C- m yc蛋白表达增加。 HMC- 1细胞能自发表达 bcl- 2、bax、 bcl- XL 和ICE的 m RNA,在雷公藤红素作用下 ,bcl- 2、bax、bcl- XL 的 m RNA表达水平均下降 (以 bcl- 2下降最为明显 ) ,而 ICE m RNA 3次检测 2次上升 ,1次下降。 结论 :雷公藤红素诱导 HMC- 展开更多

关键词 雷公藤红素 肥大细胞 脱噬作用 基因表达 细胞凋亡 HMC-1

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人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性研究 被引量：18

4

作者 王皓 高春芳 +3 位作者 万伟东 伍严安 赵文静 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期711-714,共4页

目的 :探索器官纤维化形成中调控 型胶原基因高水平转录的启动片段。方法 :从人α1( )胶原基因转录起始点上游 - 2 .5 kb～ + 42 bp的片段中 ,取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶 (CAT)报告基因的质粒组成 6个重组体 ,... 目的 :探索器官纤维化形成中调控 型胶原基因高水平转录的启动片段。方法 :从人α1( )胶原基因转录起始点上游 - 2 .5 kb～ + 42 bp的片段中 ,取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶 (CAT)报告基因的质粒组成 6个重组体 ,脂质体法转染上述重组体至正常人原代培养皮肤成纤维细胞 ,CAT- EL ISA测定细胞 CAT表达水平以比较各重组体的启动子活性。结果 :- 2 483～ + 42 bp,- 2 6 8～ + 42 bp序列具有强启动 CAT表达活性 ,而 - 10 5～ + 42 bp片段启动CAT活性最低。结论 :人α1( )胶原基因 - 2 483～ + 42 bp,- 2 6 8～ + 42 bp片段有高启动活性 ,是进一步研究纤维化相关DNA结合蛋白的重要调控靶序列。 展开更多

关键词 启动子 器官纤维化 α1(Ⅰ)胶原基因 基因转录

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慢性乙型肝炎患者血清中肝特异性自身抗体的检测 被引量：15

5

作者 范列英 仲人前 +2 位作者 孔宪涛 薛菖 徐玲玲 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期309-311,共3页

目的：阐明慢性乙型肝炎中是否也存在肝特异性自身抗体及其在病情转归中的作用。方法：以猴肝组织切片和可溶性肝抗原为抗原基质，用间接免疫荧光和蛋白质印迹法检测３３７例慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清中的自身抗体。结果：免疫荧光... 目的：阐明慢性乙型肝炎中是否也存在肝特异性自身抗体及其在病情转归中的作用。方法：以猴肝组织切片和可溶性肝抗原为抗原基质，用间接免疫荧光和蛋白质印迹法检测３３７例慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清中的自身抗体。结果：免疫荧光法显示乙型肝炎后肝硬化自身抗体总的阳性率（２４．０７％）高于慢性乙型肝炎组（１４．２９％），且两组均显著高于正常对照组。蛋白质印迹的阳性率各为４３．４２％和４２．５９％，两者无显著差异。两组病例靶抗原相对分子质量多集中在３．０万～５．５万之间，但肝硬化患者在相对分子质量２．５万和９．０万左右处的阳性条带均多于慢性肝炎患者。结论：慢性肝炎、肝硬化患者血清中存在抗肝组织自身抗体，其相对应的靶抗原有多种。进一步分离、鉴定有意义的靶抗原，并对其进行抗原表位、细胞表面表达等分析，将有助于探讨自身免疫在慢性肝炎发病及转归中的作用。 展开更多

关键词 乙型肝炎 血清诊断 肝特异性自身抗体

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间接免疫荧光法及蛋白质印迹法对肺癌患者体内自身抗体的分析 被引量：14

6

作者 夏晴 仲人前 +3 位作者 范列英 高春芳 薛昌 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期315-317,F003,共4页

目的：了解肺癌患者血清自身抗体阳性率、细胞内定位及荧光图形特点，探索自身抗体作为肿瘤标志物的可能性。方法：应用间接免疫荧光法（ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ，ＩＩＦ）检测 ７７份肺癌以及 １４０... 目的：了解肺癌患者血清自身抗体阳性率、细胞内定位及荧光图形特点，探索自身抗体作为肿瘤标志物的可能性。方法：应用间接免疫荧光法（ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ，ＩＩＦ）检测 ７７份肺癌以及 １４０份不同年龄段正常人血清中自身抗体。提取人喉癌上皮细胞（Ｈｅｐ－２）蛋白抗原，采用蛋白质印迹法对８１份肺癌患者及５２份正常人血清进行分析。结果：肺癌组和对照组的自身抗体阳性率有显著差别，两组人群的自身抗体阳性率皆随年龄增长而增高（Ｐ＜０．０５），在不同年龄段，肺癌组皆显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。肺癌组和对照组在自身抗体荧光图形、靶抗原细胞内定位上均有明显不同。７４份肺癌患者血清中检测到阳性条带（７４／８１，９１．４％），显著高于对照组（３１／５２，６１．５％），其中大多数与自身免疫性疾病中常见的自身抗体不同，并发现８２．７％（６７／８１）的肺癌患者具有针对相对分子质量初步鉴定为６．５万的靶抗原的阳性条带，该条带仅在２２．２％（１２／５２）的正常人中查及。结论：肺癌患者血清的自身抗体谱与正常人生理性自身抗体谱及自身免疫性疾病中的自身抗体谱不同，进一步研究其靶抗原本质及其生物学意义。 展开更多

关键词 肺肿瘤 自身抗体 蛋白质印迹地 间接免疫荧光法

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TNF-α拮抗胰岛素样生长因子-1对人α1(Ⅰ)胶原启动子的激活 被引量：9

7

作者 伍严安 李德岩 +3 位作者 高春芳 万伟东 仲人前 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期715-717,共3页

目的 :探讨 TNF-α对胰岛素样生长因子 - 1(IGF- 1)激活人α1( )胶原启动子的作用。 方法 :构建含不同长短α1( )胶原启动子序列与氯霉素乙酰基转移酶 (CAT)报告基因的重组体 p COL H1 0 .2 7,p COL H1 2 .5 ;用脂质体法瞬时转染至NIH3T... 目的 :探讨 TNF-α对胰岛素样生长因子 - 1(IGF- 1)激活人α1( )胶原启动子的作用。 方法 :构建含不同长短α1( )胶原启动子序列与氯霉素乙酰基转移酶 (CAT)报告基因的重组体 p COL H1 0 .2 7,p COL H1 2 .5 ;用脂质体法瞬时转染至NIH3T3细胞和人皮肤成纤维细胞中 ,加入 IGF- 1或 (和 ) TNF-α,测定 CAT活性。 结果 :10 0 ng/ m l IGF- 1可使转染至NIH3T3细胞的 p COL H1 0 .2 7和 p COL H1 2 .5表达的 CAT活性分别增高至对照的 (5 .4± 0 .2 5 )倍与 (5 .8± 0 .3)倍 ,使转染至人皮肤成纤维细胞的这两个重组体表达的活性分别增高至对照的 (4 .5± 0 .2 2 )倍与 (4 .9± 0 .2 )倍。而 TNF-α能抑制 IGF- 1诱导的 p COL H1 2 .5活性。 结论 :TNF- α在转录启动水平抑制 IGF- 1对人 α1( )胶原基因表达的促进作用。 展开更多

关键词 器官纤维化 TNF-Α IGF-1 α1(Ⅰ)胶原启动子

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慢性肝病及原发性肝癌患者血清中自身抗体分析 被引量：9

8

作者 范列英 仲人前 +1 位作者 李红梅 夏睛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期313-314,共2页

目的：探讨慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌患者血清中自身抗体的变化规律。方法：收集３４２例慢性肝病和肝癌血清标本，以 Ｈｅｐ－２细胞和猴肝组织为抗原基质，采用间接免疫荧光法检测自身抗体。结果：慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者抗... 目的：探讨慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌患者血清中自身抗体的变化规律。方法：收集３４２例慢性肝病和肝癌血清标本，以 Ｈｅｐ－２细胞和猴肝组织为抗原基质，采用间接免疫荧光法检测自身抗体。结果：慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者抗核抗体（ＡＮＡ）的阳性检出率分别为２１．８％（３５／１６０），２７．５％（３０／１０９）和３４．２％（２５／７３），均明显高于对照组的３％（６／２００）。３组ＡＮＡ核型种类较多，但均以颗粒型为主。以蛋白质印迹法检测抗可提取性核抗原（ＥＮＡ）抗体。发现４０例ＡＮＡ颗粒型的患者，有１２例ｎＲＮＰ／Ｓｍ和（或）ＳＳＡ阳性，３例Ｓｃｌ－７０和２例Ｊｏ－１阳性；１５例ＡＮＡ均质型有７例为抗双链ＤＮＡ抗体和１例抗组蛋白抗体。对照组中２例ＡＮＡ颗粒型分别为ｎＲＮＰ／Ｓｍ和ＳＳＡ阳性。３组病例的胞质抗体有多种，以抗线粒体抗体阳性率最高，肝硬化和肝癌组分别达１２．８％和１２．３％；慢性肝炎组为８．９％。结论：慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中不仅存在着自身抗体，而且显著高于正常人。ＡＮＡ的靶抗原中除一部分是目前已鉴定的外，大部分有待于进一步鉴定。 展开更多

关键词 抗体 抗核 核抗原 慢性肝炎 肝肿瘤 自身抗体

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核心蛋白聚糖对肝细胞和肝星形细胞体外增殖的影响 被引量：5

9

作者 王桂琴 郭彩虹 +5 位作者 孔宪涛 仲人前 李莉 张玲珍 刘涛 王红蓓 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期721-723,共3页

目的 :探讨核心蛋白聚糖 (decorin)在肝纤维化形成机制中的作用。方法 :在正常人肝细胞株 L - 0 2及大鼠肝星形细胞株 HSC- T6体外培养体系中 ,分别加入不同质量浓度 (0 .0 1,5 ,10μg/ m l) decorin共培养不同时间后 ,进行细胞计数以及... 目的 :探讨核心蛋白聚糖 (decorin)在肝纤维化形成机制中的作用。方法 :在正常人肝细胞株 L - 0 2及大鼠肝星形细胞株 HSC- T6体外培养体系中 ,分别加入不同质量浓度 (0 .0 1,5 ,10μg/ m l) decorin共培养不同时间后 ,进行细胞计数以及 3H- Td R和 3H- L eu掺入量测定。结果 :实验组经 0 .0 1μg/ m l decorin作用 4d或 6 d后 ,HSC- T6和 L- 0 2细胞增殖数量以及 3H- Td R和 3H- L eu掺入量均显著高于对照组 (P<0 .0 1,P<0 .0 5 )。而 5 ,10μg/ m l decorin作用 4d或 6 d后 ,HSC- T6和 L -0 2细胞增殖数量以及 3H- Td R掺入量均显著低于对照组 (P<0 .0 1,P<0 .0 5 )。 结论 :decorin对细胞体外增殖有双重调节作用 ; 展开更多

关键词 肝纤维化 肝细胞 肝星形细胞 细胞增殖 核心蛋白聚糖

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重视肝纤维化血清学诊断的研究 被引量：6

10

作者 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期701-703,共3页

关键词 肝纤维化 血清诊断 细胞因子 ECM 降解酶

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改良EMSA法分析人α1(Ⅰ)胶原基因序列特异性DNA结合蛋白 被引量：6

11

作者 高春芳 李德岩 +3 位作者 万伟东 伍严安 王皓 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期708-710,共3页

目的 :分析人α1( )胶原基因 5′侧翼区具有较高启动调控活性序列的 DNA结合蛋白。方法 :以原代培养人瘢痕皮肤成纤维细胞为胶原产生细胞 ,采用限制性内切酶消化、DNA混合片段末端标记和增强化学发光的改良电泳迁移率改变实验(EMSA)分析... 目的 :分析人α1( )胶原基因 5′侧翼区具有较高启动调控活性序列的 DNA结合蛋白。方法 :以原代培养人瘢痕皮肤成纤维细胞为胶原产生细胞 ,采用限制性内切酶消化、DNA混合片段末端标记和增强化学发光的改良电泳迁移率改变实验(EMSA)分析人 α1( )胶原基因 5′侧翼区 - 2 6 8～ + 42 bp序列 DNA结合蛋白。结果 :在胶原产生细胞——人瘢痕成纤维细胞中存在 α1( )胶原基因 - 2 6 8～ + 42 bp序列的 DNA结合蛋白 ,其结合活性具有特异性 ,并能被 Sp- 1,NF- 1,NF- κB识别序列所竞争。结论 :改良 EMSA法可用于分析较长序列的 DNA结合蛋白 ,人 α1( )胶原基因 - 2 6 8～ + 42 bp序列中存在转录因子Sp- 1,NF- 1,NF- κB结合序列 ,这些转录因子结合位点可能与人 α1( )胶原基因 - 2 6 8～ + 42 bp序列的高启动活性有关。 展开更多

关键词 基因 胶原 DNA结合蛋白 电泳迁移率改变分析

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小鼠α2(Ⅰ)胶原基因DNA结合蛋白研究 被引量：5

12

作者 高春芳 王皓 +2 位作者 万伟东 徐庆文 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期704-707,共4页

目的 :初步分析小鼠α2 ( )胶原基因上游 5′- U TR近端 80 0 bp(- 780～ + 5 4bp)序列的 DNA结合蛋白。 方法 :PCR扩增小鼠α2 ( )胶原基因 - 2 5 8～ + 5 4bp,- 5 19～ - 2 48bp,- 741～ - 5 0 1bp片段 ,Dig- d U TP末端标记 PCR产物 ... 目的 :初步分析小鼠α2 ( )胶原基因上游 5′- U TR近端 80 0 bp(- 780～ + 5 4bp)序列的 DNA结合蛋白。 方法 :PCR扩增小鼠α2 ( )胶原基因 - 2 5 8～ + 5 4bp,- 5 19～ - 2 48bp,- 741～ - 5 0 1bp片段 ,Dig- d U TP末端标记 PCR产物 ,与经 SDS- PAGE并转印至膜上的胶原产生细胞的核抽提物进行 DNA -蛋白质结合反应 ,以抗 Dig抗体检测结合反应信号。 结果 : 型胶原基因上游 5′- U TR近端 80 0 bp序列中存在至少 3个不同的核转录因子结合位点 ,相识别 (consensus)的核蛋白因子相对分子质量分别为 12万 ,5万 ,2万。TGF- β1可增强细胞中相对分子质量为 12万的核蛋白因子的表达。结论 :小鼠 α2( )胶原基因上游 - 780～ + 5 4bp这 80 0 bp片段中存在与不同的核蛋白因子结合的序列 ,可能与 Sp- 1有关。TGF- β1通过增强相对分子质量为 12万核蛋白的表达而促进该蛋白与靶调控序列的结合。 展开更多

关键词 器官纤维化 α2(Ⅰ)胶原基因 DNA结合蛋白

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人体外周血TGF-﹀1的检测及其在慢性肝病中的诊断价值 被引量：3

13

作者 金志刚 高春芳 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期793-794,共2页

关键词 慢性肝病 血清诊断 TNF-β1 肝纤维化 外周血

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CD28协同刺激分子对T细胞受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响 被引量：3

14

作者 李红梅 张华刚 +3 位作者 王宏程 钱晓萍 陈慰峰 孔宪涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期14-16,共3页

目的:分析anti-TCRαβ mAb、anti-TCRαβ mAb+anti-CD28mAb诱导小鼠胸腺淋巴细胞不同亚群的凋亡及凋亡程度,分析CD28协同刺激分子对TCR受体介导的胸腺细胞亚群凋亡 的影响。方法:新鲜分离胸腺细胞,加入anti-TCRαβ mAb、anti-TCRαβ... 目的:分析anti-TCRαβ mAb、anti-TCRαβ mAb+anti-CD28mAb诱导小鼠胸腺淋巴细胞不同亚群的凋亡及凋亡程度,分析CD28协同刺激分子对TCR受体介导的胸腺细胞亚群凋亡 的影响。方法:新鲜分离胸腺细胞,加入anti-TCRαβ mAb、anti-TCRαβ mAb+anti-CD28 mAb等培养20 h,进行多重染色,流式细胞仪分析。结果:与胸腺细胞自发凋亡的结果相比较:①双信号刺激可明显增加胸腺细胞凋亡的数目,尤其是CD4+ CD8+胸腺细胞的凋亡数目。②凋亡的CD4+ CD8+亚群、CD4+ CD8-亚群细胞表面CD28的表达均增多。结论:CD28共刺激分子对TCR受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响与细胞的成熟程度有关。CD28共刺激分子能明显增强不成熟皮质胸腺细胞的凋亡。 展开更多

关键词 CD28协同刺激分子 T细胞受体介导 胸腺细胞亚群 细胞凋亡

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神经细胞粘附分子对人恶性脑胶质瘤细胞株体内外增殖能力的影响 被引量：2

15

作者 王建军 高莉 +1 位作者 祝峙 李莉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期730-732,共3页

目的 :探讨神经细胞粘附分子 ( neural cell adhesion molecule,NCAM)对人脑胶质瘤细胞株 U2 51 MG增殖行为的影响。 方法 :将外源性 NCAM-1 40质粒转入 U2 51 MG细胞株 ,采用流式细胞仪及培养细胞增殖动力学方法比较转染前后细胞的细... 目的 :探讨神经细胞粘附分子 ( neural cell adhesion molecule,NCAM)对人脑胶质瘤细胞株 U2 51 MG增殖行为的影响。 方法 :将外源性 NCAM-1 40质粒转入 U2 51 MG细胞株 ,采用流式细胞仪及培养细胞增殖动力学方法比较转染前后细胞的细胞周期、增殖细胞核抗原 ( proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达及群体增殖速度 ;在裸鼠颅内原位接种上述细胞 ,观察成瘤率及肿瘤大小。 结果 :NCAM转染后细胞的体外增殖速度减慢 ( P<0 .0 5) ,S期细胞减少 ,PCNA表达率下降 ;裸鼠颅内接种的成瘤率显著降低 ( P<0 .0 1 ) ,肿瘤体积明显较小。 结论 :转染外源性 NCAM在体外、体内均可抑制人脑胶质瘤细胞株 U2 51 MG的增殖。 展开更多

关键词 细胞粘附分子 神经元 基因转染 细胞增殖 恶性脑神经胶质瘤 HCAM

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性别对T细胞受体抗体诱导的小鼠胸腺细胞亚群凋亡的影响 被引量：1

16

作者 李红梅 仲人前 +3 位作者 钱晓萍 于嘉平 孔宪涛 陈慰峰 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2003年第6期382-384,共3页

为分析抗TCR抗体诱导小鼠胸腺细胞的凋亡与性别的关系。用抗TCR抗体腹腔注射、体外包被诱导不同性别小鼠胸腺细胞的凋亡 ,并体外分析雌、雄小鼠在细胞周期凋亡敏感性的差异。腹腔注射抗TCR抗体 4 8h后 ,BALB/c小鼠成熟髓质区高表达TCR... 为分析抗TCR抗体诱导小鼠胸腺细胞的凋亡与性别的关系。用抗TCR抗体腹腔注射、体外包被诱导不同性别小鼠胸腺细胞的凋亡 ,并体外分析雌、雄小鼠在细胞周期凋亡敏感性的差异。腹腔注射抗TCR抗体 4 8h后 ,BALB/c小鼠成熟髓质区高表达TCR的单阳性细胞数目 (CD4 + CD8 、CD4 CD8+ )成倍增加 ,同时皮质区低表达TCR的不成熟双阳性细胞 (CD4 +CD8+ )数目减少。雄性小鼠的这种变化明显于雌性小鼠 ,体外刺激显示类似的结果。抗TCR抗体诱导的凋亡与G0 /G1期细胞的减少有关。结果表明不同性别小鼠在细胞凋亡的敏感性上有差异 ,雄性小鼠更易感。 展开更多

关键词 胸腺细胞的凋亡 T淋巴细胞受体 细胞周期 性别

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共刺激分子CD28和B7在关节炎发病中的作用 被引量：2

17

作者 邓安梅 仲人前 +2 位作者 陈孙孝 施笑梅 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期305-308,共4页

目的：探讨Ｂ７：ＣＤ２８共刺激信号在关节炎发病机制中的作用。方法：经牛Ⅱ型胶原（ＢⅡＣ）诱导ＳＤ大鼠建立关节炎动物模型；分析抗Ｂ７－１和抗Ｂ７－２抗体对关节炎大鼠临床症状和特异性免疫反应的影响。结果：抗Ｂ７－１抗体可... 目的：探讨Ｂ７：ＣＤ２８共刺激信号在关节炎发病机制中的作用。方法：经牛Ⅱ型胶原（ＢⅡＣ）诱导ＳＤ大鼠建立关节炎动物模型；分析抗Ｂ７－１和抗Ｂ７－２抗体对关节炎大鼠临床症状和特异性免疫反应的影响。结果：抗Ｂ７－１抗体可阻止ＳＤ大鼠发生胶原诱发性关节炎，降低大鼠对ＢⅡＣ的体液免疫反应。结论：Ｂ７：ＣＤ２８共刺激信号在诱发 Ｔ细胞介导的自身免疫疾病中起作用，抗Ｂ７－１抗体具有潜在的治疗作用。 展开更多

关键词 共刺激信号 B7 抗原 CD28 类风湿性关节炎

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地塞米松对人α1( Ⅰ )胶原基因启动子活性的影响 被引量：1

18

作者 万伟东 杨松林 +3 位作者 高春芳 王皓 伍严安 林子豪 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期718-720,共3页

目的 :探讨地塞米松对人α1( )原胶原基因调控序列的作用。方法 :用组织块法原代培养人皮肤成纤维细胞并进行传代培养作为本研究的模型细胞。 (1)采用 Brd U掺入的 EL ISA法 ,测定经不同浓度地塞米松处理 2 4h后成纤维细胞的增殖情况。 ... 目的 :探讨地塞米松对人α1( )原胶原基因调控序列的作用。方法 :用组织块法原代培养人皮肤成纤维细胞并进行传代培养作为本研究的模型细胞。 (1)采用 Brd U掺入的 EL ISA法 ,测定经不同浓度地塞米松处理 2 4h后成纤维细胞的增殖情况。 (2 )构建含长短不一的人α1( )原胶原基因 5′侧翼序列与氯霉素乙酰基转移酶 (CAT)报告基因的 3种重组质粒 ;以脂质体法转染人皮肤成纤维细胞 ;EL ISA法测定不同浓度地塞米松作用 2 4h后 ,转染了 3种重组质粒的成纤维细胞的 CAT表达量。结果 :(1)在加入 2 % FCS或 10 % FCS的培养条件下 ,1× 10 - 9～ 1× 10 - 4 m ol/ L 地塞米松处理 2 4h后 ,各浓度组成纤维细胞增殖值之间以及与对照组之间差异均无显著性 (P>0 .0 5 )。 (2 ) 3种重组体转染成纤维细胞 ,并经地塞米松处理 2 4h后 ,转染细胞的 CAT相对表达量测定 :地塞米松组与对照组之间、地塞米松较高浓度组 (1× 10 - 5 m ol/ L)与较低浓度组 (1× 10 - 6mol/ L)之间 ,差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。结论 :地塞米松在 1× 10 - 9～ 1× 10 - 4 mol/ L 浓度范围内 ,对所研究的模型细胞——人皮肤成纤维细胞增殖无明显作用。地塞米松对胶原基因启动序列具有负性调控作用 ,且存在剂量依赖关系。 展开更多

关键词 地塞米松 启动子 器官纤维化 α1(Ⅰ)胶原基因

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脑出血患者外周血淋巴细胞CD_(56)和CD_(69)的表达及其临床意义 被引量：1

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作者 谭清华 赵忠新 +1 位作者 邵福源 李莉 《中国综合临床》 北大核心 2001年第4期263-264,共2页

目的探讨脑出血患者外周血淋巴细胞 CD5 6 和 CD6 9的表达与病情严重程度的关系及临床意义。方法采用流式细胞术动态检测2 5例中、重型脑出血患者在发病后 3天内外周血淋巴细胞 CD5 6 和 CD6 9的表达情况 ,并选择 2 2例同期住院患者作... 目的探讨脑出血患者外周血淋巴细胞 CD5 6 和 CD6 9的表达与病情严重程度的关系及临床意义。方法采用流式细胞术动态检测2 5例中、重型脑出血患者在发病后 3天内外周血淋巴细胞 CD5 6 和 CD6 9的表达情况 ,并选择 2 2例同期住院患者作为对照。结果 CD5 6 和CD6 9在脑出血患者急性期升高 ( P<0 .0 5 )。结论外周血淋巴细胞 CD5 6 和 CD6 9的表达有助于脑出血急性期的诊断。 展开更多

关键词 脑出血 淋巴细胞 CD56 CD69 神经细胞粘附分子 诊断

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利用重组抗原检测抗SSB自身抗体及其临床意义 被引量：1

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作者 邓安梅 仲人前 +2 位作者 陈孙孝 施笑梅 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期301-304,共4页

目的：利用重组抗原检测自身免疫疾病患者血清中抗ＳＳＢ自身抗体并探讨其临床意义。方法：应用ＤＮＡ重组技术构建ＳＳＢ基因工程菌，并表达 ＳＳＢ融合蛋白、经 ＧＳＴ柱层析法纯化后，分别经蛋白质印迹（ＷＢＴ）法和酶联免疫吸附（... 目的：利用重组抗原检测自身免疫疾病患者血清中抗ＳＳＢ自身抗体并探讨其临床意义。方法：应用ＤＮＡ重组技术构建ＳＳＢ基因工程菌，并表达 ＳＳＢ融合蛋白、经 ＧＳＴ柱层析法纯化后，分别经蛋白质印迹（ＷＢＴ）法和酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法检测２０份干燥综合征患者、６０份系统性红斑狼疮患者和３０份正常人血清。结果：经常规试剂盒检测为ＳＳＢ（＋）的２４份患者血清，利用重组抗原检测均阳性；经常规试剂盒检测为ＳＳＢ（－）的５６份患者血清，利用重组抗原检测有１１份阳性（ＷＢＴ法４份，ＥＬＩＳＡ法７份）。结论：利用重组抗原检测抗ＳＳＢ自身抗体敏感性较高。利用重组抗原对自身抗体进行定性、定量分析有助于对自身免疫疾病的诊断。 展开更多

关键词 自身抗原 SSB 自身免疫疾病 WBT ELISA

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