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靶向丙型肝炎病毒生命周期的新型抗病毒治疗靶点 被引量:5
1
作者 钱汐晶 朱勇喆 戚中田 《中国病毒病杂志》 CAS 2013年第2期149-154,共6页
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是血液传播的球形包膜病毒,编码单正链RNA,是黄病毒科成员。目前,全世界约有1.7亿患者感染丙型肝炎病毒,每年有300万的新增感染病例,我国HCV感染者近4 000万。HCV慢性化程度高,约80%的急性感染者将... 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是血液传播的球形包膜病毒,编码单正链RNA,是黄病毒科成员。目前,全世界约有1.7亿患者感染丙型肝炎病毒,每年有300万的新增感染病例,我国HCV感染者近4 000万。HCV慢性化程度高,约80%的急性感染者将发展为慢性肝脏疾病,其中又有约20%将最终进展到肝硬化。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 生命周期 抗病毒靶点
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ELISA方法检测肝癌血清标志物的应用 被引量:4
2
作者 王文 王锦红 +2 位作者 缪晓辉 Mark A Feitelson 戚中田 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期307-309,共3页
目的对已建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法进行扩大规模临床样本检测,进一步评价和优化该方法。方法利用本实验室建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法,对407份肝病患者血清和95份正常献血员血清进行检测,并对检测结果进行分析。结果324... 目的对已建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法进行扩大规模临床样本检测,进一步评价和优化该方法。方法利用本实验室建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法,对407份肝病患者血清和95份正常献血员血清进行检测,并对检测结果进行分析。结果324份HBV感染后的肝癌、肝硬化及肝炎患者血清样本中,2种或2种以上指标阳性比例分别为77.6%、76.1%和52.5%,肝癌患者3种或3种以上指标阳性比例较肝硬化和肝炎患者分别高39.9%和310%;在正常献血员、药物性肝炎、酒精性肝炎及其他类型的癌症患者中,87.5%~100%的患者肝癌血清标志物分子≤1种;URG7是最早出现的抗体阳性标志物分子,URG11和S15a抗体则在进展后期或已发展为肝癌的患者血清中呈优势比例出现。结论5种肝癌血清标志物分子与肝癌发生的风险呈正相关,已建立的肝癌血清标志物ELISA检测方法可用于肝癌高危人群的筛选及小肝癌的早期诊断,作为目前AFP和MRI诊断方法的有益补充。 展开更多
关键词 肝癌 血清标志物 ELISA
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丙型肝炎病毒诱发肝细胞肝癌的分子机制 被引量:3
3
作者 高荣 徐力 +1 位作者 徐杰 任浩 《微生物与感染》 2017年第5期310-319,共10页
肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是影响人类健康的恶性肿瘤之一,丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是其主要致病因素之一。HCV诱发的HCC是由病毒和宿主免疫介导的多步骤复杂过程,从慢性炎症发展到肝硬化和肝癌,病毒和宿主... 肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是影响人类健康的恶性肿瘤之一,丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是其主要致病因素之一。HCV诱发的HCC是由病毒和宿主免疫介导的多步骤复杂过程,从慢性炎症发展到肝硬化和肝癌,病毒和宿主因子共同参与此过程。其中,宿主基因突变是导致HCC发生的危险因素之一,全面了解HCV诱发HCC的分子机制将有助于解决此问题。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 肝细胞肝癌 分子机制
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HCV 2a J6JFH细胞感染模型的建立及初步应用 被引量:3
4
作者 任浩 王永智 +2 位作者 赵平 刘媛 戚中田 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期1-5,9,共6页
目的建立能够自主复制的丙型肝炎病毒(HCV)体外细胞感染模型。方法制备HCV2a FL-J6JFH和阴性对照FL-J6JFH(GND)RNA转录体,分别转染Huh-7.5细胞,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测细胞内HCV RNA水平,免疫荧光法(IFA)检测细胞内HCV蛋白的表达。以... 目的建立能够自主复制的丙型肝炎病毒(HCV)体外细胞感染模型。方法制备HCV2a FL-J6JFH和阴性对照FL-J6JFH(GND)RNA转录体,分别转染Huh-7.5细胞,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测细胞内HCV RNA水平,免疫荧光法(IFA)检测细胞内HCV蛋白的表达。以转染细胞上清液感染Na觙ve Huh-7.5细胞,检测HCV感染性病毒颗粒(HCVcc)的产生。将细胞用不同浓度的IFNα处理,观察所建立的细胞感染模型对IFNα的敏感性。结果转染后第5天,FL-J6JFH转染细胞内HCV RNA为1.2×106GE/μg RNA,第9天下降至最低水平,随后上升,于第13天达到最高值6.5×106GE/μg RNA,此后直至第59天,均保持在106GE/μg RNA左右,而FL-J6JFH(GND)转染细胞内HCV RNA则很快消失。FL-J6JFH转染的细胞内始终可以检测到HCV蛋白表达,而对照细胞内均未检测到。从第5天起,各时间点的FL-J6JFH转染细胞均能产生HCVcc。IFNα能够有效抑制HCVcc感染Huh-7.5细胞,并呈剂量依赖性。结论已成功建立了能持续产生HCVcc的HCV2a型体外细胞感染模型,IFNα能抑制FL-J6JFH HCVcc感染细胞中HCV RNA的复制,为研究HCV的结构与功能提供了实验平台。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 2a基因型 J6JFH 细胞感染模型
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宿主细胞硫氧还蛋白互作蛋白与丙型肝炎病毒感染的相互作用研究 被引量:2
5
作者 唐紫薇 王世杰 +2 位作者 王文博 赵平 戚中田 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期597-602,共6页
目的:探究宿主细胞硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)与 HCV 复制的关系以及 TXNIP 促进HCV 复制的分子机制。方法利用转录组芯片和转录组深度测序技术对细胞培养的 HCV(HCVcc)感染的 Huh7细胞进行转录组分析,并通过反转录-实时荧光定量 ... 目的:探究宿主细胞硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)与 HCV 复制的关系以及 TXNIP 促进HCV 复制的分子机制。方法利用转录组芯片和转录组深度测序技术对细胞培养的 HCV(HCVcc)感染的 Huh7细胞进行转录组分析,并通过反转录-实时荧光定量 PCR 和高通量测序差异表达的 TXNIP 进行细胞差异表达验证;同时观察 TXNIP 表达水平对 HCV 感染的影响。结果转录组芯片检测发现, HCVcc 感染的 Huh7细胞中 TXNIP mRNA 较未感染的对照细胞上调约3.7倍;转录组深度测序表明, TXNIP mRNA 在 HCVcc 感染后36、60 h 均明显上调(t 值分别为24.90、8.27,均 P 〈0.01);细胞实验证明,小干扰 RNA(siRNA)干扰 TXNIP 表达可降低 HCVcc 感染,而过表达 TXNIP 可促进 HCV 感染;HCV 感染可诱导 Huh7细胞 TXNIP 上调而不能诱导 Huh7.5.1细胞 TXNIP 上调;α干扰素、β干扰素和λ干扰素处理细胞均可上调 TXNIP 的表达。结论 HCV 感染诱导 TXNIP 表达上调,而 TXNIP 表达上调可促进 HCV 复制,宿主蛋白 TXNIP 在 HCV 复制、感染及免疫逃逸中具有重要作用。 展开更多
关键词 肝炎病毒属 硫氧还原蛋白结合蛋白 干扰素类
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人SR-BI基因表达抑制慢病毒载体构建及其稳定细胞株的筛选 被引量:1
6
作者 高伟 高荣 任浩 《中国热带医学》 CAS 2016年第3期203-207,共5页
目的建立SR-BI表达抑制的肝癌细胞系,以作为研究SR-BI基因突变对HCV感染性影响的细胞模型。方法构建SR-BI短发夹状RNA(Short hairpin RNA,sh RNA)慢病毒重组质粒Lv-SR-BI-sh RNA,挑取克隆进行PCR扩增和序列测定;将阳性重组质粒与慢病毒... 目的建立SR-BI表达抑制的肝癌细胞系,以作为研究SR-BI基因突变对HCV感染性影响的细胞模型。方法构建SR-BI短发夹状RNA(Short hairpin RNA,sh RNA)慢病毒重组质粒Lv-SR-BI-sh RNA,挑取克隆进行PCR扩增和序列测定;将阳性重组质粒与慢病毒辅助质粒共转染HEK2973T细胞,包装SR-BI sh RNA慢病毒并进行病毒滴度测定。SR-BI sh RNA慢病毒感染人肝癌细胞株Huh7和Huh7.5.1细胞,嘌呤霉素筛选,Real-time PCR和Western blot法检测SR-BI m RNA转录和蛋白表达。结果测序结果证实Lv-SR-BI-sh RNA慢病毒载体构建成功并获得HEK293T细胞中包装的慢病毒,Lv-SR-BI-sh RNA重组慢病毒感染Huh7和Huh7.5.1细胞,感染组SR-BI m RNA转录降低,蛋白表达降低。结论建立了SR-BI表达抑制的人肝癌细胞株Huh7-si SR-BI和Huh7.5.1-si SR-BI稳定细胞系。 展开更多
关键词 人SR-BI 短发夹状RNA 肝癌细胞系 构建 筛选
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肠道病毒71型复制周期研究进展 被引量:1
7
作者 陈生林 朱勇喆 戚中田 《中国病毒病杂志》 CAS 2015年第2期144-149,共6页
人类肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)属于小RNA病毒科肠道病毒属。自1969年首次从美国加利福尼亚1名患有中枢神经系统疾病的手足口病婴儿粪便样本中分离出EV71病毒以来,手足口病在世界各地曾多次出现大流行,多发于5岁以下儿童,可... 人类肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)属于小RNA病毒科肠道病毒属。自1969年首次从美国加利福尼亚1名患有中枢神经系统疾病的手足口病婴儿粪便样本中分离出EV71病毒以来,手足口病在世界各地曾多次出现大流行,多发于5岁以下儿童,可引起发热和口腔、手、足部的溃疡或斑疹等症状。少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。如果病情发展快,导致重症患儿死亡[1]。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 入侵受体 翻译 复制 装配 释放
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合成多肽抗原检测原发性肝癌血清标志物ELISA方法的建立及应用 被引量:1
8
作者 王文 王锦红 +2 位作者 缪晓辉 Mark A Feitelson 戚中田 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期399-401,共3页
目的建立用合成多肽抗原检测原发性肝癌血清标志物的ELISA方法,并进行初步应用。方法利用筛选的5种与乙型肝炎病毒X抗原(HBx)诱导肝癌相关的细胞蛋白URG4、URG7、URG11、S15a和Sui1,作为原发性肝癌的筛查和早期诊断的血清标志物,根据上... 目的建立用合成多肽抗原检测原发性肝癌血清标志物的ELISA方法,并进行初步应用。方法利用筛选的5种与乙型肝炎病毒X抗原(HBx)诱导肝癌相关的细胞蛋白URG4、URG7、URG11、S15a和Sui1,作为原发性肝癌的筛查和早期诊断的血清标志物,根据上述蛋白的序列合成多肽(L4A/L4B、L7B、L11-1/L11-3/L11-4、L12A/L12B和Sui1A/Sui1B),作为检测抗原,建立检测相应抗体的间接ELISA法,并进行敏感性、特异性、精密性评价及临床应用。结果所建立的间接ELISA法敏感性为93.8%,特异性为97.9%,试验内和试验间变异系数分别为3.8%~5.6%和7.4%~10.3%;检测161份肝癌、肝硬化及乙型肝炎患者血清样本中,1种指标以上阳性检出率分别为90.4%、92.6%和61.7%,2种指标以上阳性检出率分别为78.6%、70.6%和48.3%;39份正常献血员血清中,1种指标以上阳性检出率为12.2%,2种指标以上阳性检出率为6.3%。结论所建立的ELISA法可作为目前的AFP和核磁共振诊断方法的有益补充,用于原发性肝癌高危人群的筛选和小肝癌的早期诊断。 展开更多
关键词 肝癌 乙型肝炎病毒X抗原 多肽 血清标志物 ELISA
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小鼠截短型可溶性腺苷酸环化酶基因的克隆表达及活性鉴定
9
作者 王文 戚中田 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第2期142-145,共4页
目的克隆表达小鼠截短型可溶性腺苷酸环化酶(mtsAC)基因,并检测其活性,为后续研究提供技术平台。方法Trizol法提取小鼠睾丸组织总RNA,RT-PCR法扩增mtsAC基因,经测序正确后,克隆至真核表达载体pcDNA4-V5,转染HEK293T细胞,Western blot及... 目的克隆表达小鼠截短型可溶性腺苷酸环化酶(mtsAC)基因,并检测其活性,为后续研究提供技术平台。方法Trizol法提取小鼠睾丸组织总RNA,RT-PCR法扩增mtsAC基因,经测序正确后,克隆至真核表达载体pcDNA4-V5,转染HEK293T细胞,Western blot及免疫荧光染色法检测目的蛋白的表达,并检测HEK293T细胞中cAMP的水平。结果所构建的重组表达质粒pcDNA4-V5-mtsAC经酶切和测序证明构建正确,插入的mtsAC基因长度为1549bp;表达的重组mtsAC蛋白相对分子质量为48000,在胞浆及胞核中呈均一性表达;转染质粒pcDNA4-V5-mtsAC的HEK293T细胞中cAMP的水平较未转染的HEK293T细胞升高约17倍,并可被NaHCO3和CaCl2激活。结论已成功克隆了mtsAC基因,并在HEK293T细胞中表达了具有活性的重组mtsAC蛋白,建立了可用于mtsAC特性研究及男性不育药物筛选的技术平台。 展开更多
关键词 可溶性腺苷酸环化酶 克隆 表达 CAMP
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干扰素诱导的MxA蛋白及其抗丙型肝炎病毒感染作用的研究进展
10
作者 吉瑾 赵兰娟 戚中田 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第10期1141-1143,1152,共4页
干扰素α(Interferon α,IFNα)是目前公认的可有效抗丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)的药物,其主要通过诱导细胞产生抗病毒蛋白而发挥作用。抗黏病毒蛋白A(Mixovirus resistance protein A,MxA)是由I型IFN诱导产生的相对分子质量... 干扰素α(Interferon α,IFNα)是目前公认的可有效抗丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)的药物,其主要通过诱导细胞产生抗病毒蛋白而发挥作用。抗黏病毒蛋白A(Mixovirus resistance protein A,MxA)是由I型IFN诱导产生的相对分子质量为78000的抗病毒蛋白,主要分布于细胞质中,具有识别HCV核糖核蛋白复合物(Virus ribonucleoprotein complexes,vRNPs)的功能,通过MxA的GTP酶活性水解HCV核衣壳,使病毒核酸释放并被胞浆中的核酸内切酶降解。本文主要对IFN的分类、MxA的结构和作用机制及近年来MxA抗HCV感染作用的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 干扰素Α 抗黏病毒蛋白A 丙型肝炎病毒
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丙型肝炎无干扰素全口服治疗临床Ⅲ期试验进展
11
作者 唐紫薇 任浩 戚中田 《中国病毒病杂志》 CAS 2015年第3期228-233,共6页
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)为黄病毒属的单股正链RNA病毒,主要通过血液传播,慢性化程度高。目前的标准治疗是聚乙二醇干扰素(pegylated IFN-α)联合利巴韦林(ribavirin,RBV)。自1989年首次鉴定出HCV以来[1],HCV的干扰... 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)为黄病毒属的单股正链RNA病毒,主要通过血液传播,慢性化程度高。目前的标准治疗是聚乙二醇干扰素(pegylated IFN-α)联合利巴韦林(ribavirin,RBV)。自1989年首次鉴定出HCV以来[1],HCV的干扰素治疗虽然有缓慢的进展,如长效干扰素的使用,但仍无法摆脱其不良反应多、持续病 毒学应答率(sustained virologic response,SVR)不够高及使用不便等缺点。近几年,丙型肝炎的抗病毒治疗研究突飞猛进。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 无干扰素 抗病毒治疗 临床Ⅲ期试验
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IL-28B基因多态性在丙型肝炎患者治疗中的作用 被引量:3
12
作者 许刚 任浩 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期661-666,共6页
Interleukin(IL)-28B(interferon lambda3,IFN-λ3)是一类属于IFN-λ家族的新型白介素,编码基因位于19号染色体上.近期的多项研究阐述了IL-28B的基因多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)在丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV... Interleukin(IL)-28B(interferon lambda3,IFN-λ3)是一类属于IFN-λ家族的新型白介素,编码基因位于19号染色体上.近期的多项研究阐述了IL-28B的基因多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)在丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染者治疗上的重要性,并成功的定位了两个关联性最强的SNPs:rs12979860-IL-28B上游3kb处,rs8099917-IL-28B上游8kb处.IL-28B的基因多态性具有很好的临床应用前景,根据其基因型可以预测患者的自愈率,以及对聚乙二醇干扰素-α(PEG-IFN-α)和利巴韦林(ribavirin,RBV)联合治疗的持续应答率,从而有助于确定HCV感染者的个性化治疗方案. 展开更多
关键词 白介素-28B 单核苷酸多态性 丙型肝炎 治疗
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病毒穿越血脑屏障的两种方式与可能机制 被引量:2
13
作者 朱耐伟 朱勇喆 戚中田 《微生物与感染》 2016年第6期366-373,共8页
血脑屏障是维持中枢神经系统内环境稳定的重要结构,限制血液中大多数病原体的入侵;但有些病毒可穿越血脑屏障入侵中枢神经系统,导致神经功能障碍及炎症性疾病。目前认为,病毒可通过细胞和细胞间隙两种方式穿越血脑屏障,前者为直接感染... 血脑屏障是维持中枢神经系统内环境稳定的重要结构,限制血液中大多数病原体的入侵;但有些病毒可穿越血脑屏障入侵中枢神经系统,导致神经功能障碍及炎症性疾病。目前认为,病毒可通过细胞和细胞间隙两种方式穿越血脑屏障,前者为直接感染脑微血管内皮细胞和跨细胞途径,后者为破坏内皮细胞间紧密连接及"特洛伊木马"途径。本文就近年来病毒穿越血脑屏障的途径和机制进行综述。 展开更多
关键词 病毒 血脑屏障 机制
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人类免疫缺陷病毒1型Tat蛋白N末端缺失突变体融合蛋白的表达及其免疫原性分析 被引量:1
14
作者 张华群 廖文婷 +9 位作者 陈秋莉 葛宜兵 杨界 章萍萍 祁培培 刘超 何婷 王锦红 潘卫 曹洁 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期580-586,共7页
本研究采用PCR方法从人类免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus 1,HIV-1)HXB2株tat基因中扩增编码Tat蛋白N末端1-21位氨基酸缺失的突变体Tat22-101基因片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat22-101,经双酶切及测序验证后,转化大... 本研究采用PCR方法从人类免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus 1,HIV-1)HXB2株tat基因中扩增编码Tat蛋白N末端1-21位氨基酸缺失的突变体Tat22-101基因片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat22-101,经双酶切及测序验证后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达及Ni^(2+)-NTA柱亲和层析纯化。纯化后的突变体融合蛋白PET32a-Tat22-101经SDS-PAGE及Western blotting鉴定,其相对分子质量约为26.9kD。该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,经ELISA检测结果表明,pET32a-Tat22-101融合蛋白不仅较好地保留其免疫原性,而且能诱导产生高滴度的针对Tat N末端区之外的Tat其他功能区表位的抗体,为进一步研究Tat生物学功能和研制新型HIV Tat疫苗奠定试验基础。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒1型 TAT蛋白 缺失突变 原核表达 免疫原性
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丙型肝炎病毒细胞侵入机制研究进展
15
作者 童一民 赵平 戚中田 《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》 CAS 2010年第3期52-54,共3页
关键词 丙型肝炎病毒 侵入机制 病毒细胞 血液传播 致病因子 慢性肝炎 感染者 HCV
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