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乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠的研究 被引量：32
1
作者 胡卫江 李建秀 +6 位作者 余宏宇 戴德顺 王新民 孙伟 郝光荣 王肖鹏 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期212-215,共4页
目的：制备含有２．０拷贝乙型肝炎病毒（ＨＢＶ，ａｄｒ亚型）基因组的转基因小鼠，为ＨＢＶ相关医学问题的研究准备实验动物模型。方法：应用受精卵原核显微注射的方法，产生ＨＢＶ转基因小鼠。用ＰＣＲ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ... 目的：制备含有２．０拷贝乙型肝炎病毒（ＨＢＶ，ａｄｒ亚型）基因组的转基因小鼠，为ＨＢＶ相关医学问题的研究准备实验动物模型。方法：应用受精卵原核显微注射的方法，产生ＨＢＶ转基因小鼠。用ＰＣＲ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ杂交、放射免疫、免疫组织化学以及亚显微结构分析等方法，研究外源基因在转基因小鼠体内的整合、表达以及复制。应用常规病理切片及血清生物化学方法分析转基因小鼠的病理学改变。结果：得到了４只整合有ＨＢＶ基因组的建立者小鼠，并证明ＨＢＶ基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传，在肝、肾组织内可特异性表达、复制，并在肝细胞内发现了Ｄａｎｅ颗粒。转基因小鼠的肝、肾组织未见明显的病理学改变。结论：获得了ＨＢＶ的转基因小鼠，其病毒基因可以表达，并有病毒颗粒形成。该小鼠对于ＨＢＶ的各个基因产物是免疫耐受的，其基本生物学特性与人类的ＨＢＶ携带者特征相似。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 转基因小鼠 DANE颗粒 ADR亚型
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人肝癌细胞系P2-HCC的建立及体外诱导分化特性的初步研究 被引量：16
2
作者 朱海英 张朵 +4 位作者 谢东甫 王新民 周旭宇 Joseph T Lau 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期247-250,共4页
目的:从人肝细胞癌中分离肝癌细胞并对其体外诱导分化特性进行分析,试图得到有关导致肝癌发生的“癌干细胞”的相关资料。方法:首先将人原发性肝癌组织小块在裸鼠皮下过继接种,然后将生成的肿瘤进行原代培养并得到单层生长的肿瘤细胞系... 目的:从人肝细胞癌中分离肝癌细胞并对其体外诱导分化特性进行分析,试图得到有关导致肝癌发生的“癌干细胞”的相关资料。方法:首先将人原发性肝癌组织小块在裸鼠皮下过继接种,然后将生成的肿瘤进行原代培养并得到单层生长的肿瘤细胞系,利用体外诱导实验对其形态及分子表型的变化情况进行观察和分析。结果:所分离获得的细胞系具有肝肿瘤细胞的特征,但也表达某些干细胞的分子标志如c met。体外诱导分化实验提示胰岛素/氢化可的松、二甲亚砜可能具有诱导该细胞向成熟肝细胞方向分化的作用,诱导后的细胞又重新表达葡萄糖6 磷酸酶,白蛋白表达明显升高。结论:人P2 HCC细胞具有强大的增殖能力,体外实验提示其具有一定的向成熟肝细胞分化的潜能。这些细胞的发生与肝癌干细胞及肝细胞的关系尚待进一步研究。 展开更多
关键词 癌 肝细胞 肿瘤细胞 培养的 细胞分化
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高等医科院校医学本科生科研能力的培养实践 被引量：17
3
作者 朱海英 《中国临床医学》 2016年第4期530-533,共4页
高等医科院校医学专业本科生科研创新能力的培养是教学实践的重点和难点,关乎医学毕业生的职业发展潜力和前景,是目前高等医学教育研究的热点。由于本科生知识结构的局限性及所从事研究领域所需专业背景的宽泛性,医学专业本科生科研能... 高等医科院校医学专业本科生科研创新能力的培养是教学实践的重点和难点,关乎医学毕业生的职业发展潜力和前景,是目前高等医学教育研究的热点。由于本科生知识结构的局限性及所从事研究领域所需专业背景的宽泛性,医学专业本科生科研能力的培养具有其独特性。因此,多年来我们遵循医学本科生科研创新能力培养规律,利用本科生第二课堂活动的形式在医学生创新能力培养方面做出了显著成绩。本文将其中的经验做法作一总结,以期为我国高等医科院校医学生科研能力培养提供参考。 展开更多
关键词 高等院校 医学教育 本科生科研能力 本科生导师 第二课堂 创新能力 可持续发展
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医学细胞生物学实验教学改革的探索与实践 被引量：16
4
作者 何志颖 朱海英 +3 位作者 陈元晓 訾晓渊 谢东甫 胡以平 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2010年第1期49-52,共4页
突出细胞生物学实验课教学的主体地位,实验课课程设置以验证性实验、综合性实验及创新性实验相结合,激发学生的积极性和主观能动性,培养学生的创新思维和分析问题解决问题的综合实践能力,取得了良好的教学效果。
关键词 细胞生物学 实验课 教学改革
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乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.0)SMMU的生物学特征 被引量：11
5
作者 訾晓渊 姚玉成 +10 位作者 熊俊 金艳花 叶煦亭 李建秀 刘红 朱海英 王新民 倪文君 胡以平 余宏宇 丛文铭 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1179-1183,共5页
目的:评价乙肝转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU生物学特征的稳定性。方法:以F5代乙肝转基因小鼠C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、血清ELISA检测、Western印迹分析、免疫组织化学、血清DNA PCR、透射电镜和... 目的:评价乙肝转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU生物学特征的稳定性。方法:以F5代乙肝转基因小鼠C57-TgN(HBV adr2.O)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、血清ELISA检测、Western印迹分析、免疫组织化学、血清DNA PCR、透射电镜和H-E染色的方法分析HBV基因在转基因小鼠中的整合、表达、复制和组织学变化。结果:F1代乙肝转基因小鼠基因组中稳定整合有HBV基因,肝组织中可检测到HBsAg、HBcAg和X蛋白3种病毒蛋白,血清中HB-sAg和HBeAg的表达率分别为19.54％和3.39％,且在血清和肝组织中存在病毒DNA和病毒样颗粒;长期的病毒DNA整合、表达和复制可以引起转基因小鼠肝、肺等组织的病理性损伤。结论:乙肝转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.O:)SMMU具有基因组中稳定整合病毒DNA、血清和肝组织中有病毒蛋白表达和病毒复制的特征,并具有一定的组织学变化,作为生物医药研究的实验动物模型具有推广应用价值。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 转基因小鼠 免疫组织化学 病理学
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乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠模型的建立及培育 被引量：12
6
作者 熊俊 訾晓渊 +6 位作者 姚玉成 金艳花 李建秀 朱海英 王新民 胡以平 余宏宇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1184-1187,共4页
目的:建立可表达乙型肝炎病毒X蛋白的HBx基因(adr亚型)转基因小鼠模型,以研究x基因的功能。方法:采用基因重组技术构建含有CMV启动子和HBx基因(adr亚型)开放阅读框(ORF)的真核表达载体pcDNA3-HBx。该载体经Sal I限制性内切酶线性化后,... 目的:建立可表达乙型肝炎病毒X蛋白的HBx基因(adr亚型)转基因小鼠模型,以研究x基因的功能。方法:采用基因重组技术构建含有CMV启动子和HBx基因(adr亚型)开放阅读框(ORF)的真核表达载体pcDNA3-HBx。该载体经Sal I限制性内切酶线性化后,琼脂糖电泳回收目的片段,用原核显微注射法将其注射入雄原核,制备转基因小鼠。复合PCR法在基因组水平筛选HBx基因转基因小鼠founder;免疫组织化学法在蛋白水平检测X蛋白在这些小鼠中的表达情况。结果:成功构建了HBx基因真核表达载体pcDNA3-HBx。经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后,出生并存活了11只新生鼠,经PCR检测后获得5只founder转基因小鼠,命名为C57-TgN(HBx)SMMU。免疫组织化学检测发现5只PCR阳性小鼠的肝细胞质中均有X蛋白的表达。将这5只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配,进行传代培育,复合PCR法筛选阳性转基因小鼠,目前已传至F4代。结论:本研究成功地产生了稳定遗传HBx基因并表达X蛋白的转基因小鼠C57-TgN(HBx)SMMU,它将有利于体内研究HBx基因在肝细胞癌发生中的作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 X蛋白 转基因小鼠 HBX基因
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乙型肝炎病毒核心抗原转基因小鼠的建立 被引量：7
7
作者 刘红 姚玉成 +5 位作者 何金 李文林 李建秀 苏小平 张钦宪 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期172-174,共3页
目的 :建立乙型肝炎病毒核心抗原 (ayw亚型 )转基因小鼠模型。 方法 :采用受精卵显微注射的方法制备转基因小鼠 ,以 PCR、免疫组化和 H- E染色法分析导入基因在小鼠基因组中的整合、肝脏中的表达及肝组织的病理变化。结果 :得到 6只基... 目的 :建立乙型肝炎病毒核心抗原 (ayw亚型 )转基因小鼠模型。 方法 :采用受精卵显微注射的方法制备转基因小鼠 ,以 PCR、免疫组化和 H- E染色法分析导入基因在小鼠基因组中的整合、肝脏中的表达及肝组织的病理变化。结果 :得到 6只基因组中整合了核心抗原基因的首建者 (founder)小鼠 ,其中 1只在肝细胞核和胞浆均有 HBc Ag的表达。将肝脏中表达的小鼠继续传代 ,F1 代 10只小鼠中的 4只小鼠肝细胞有 HBc Ag的表达。 结论 :建立了乙型肝炎病毒核心抗原转基因小鼠 ,核心抗原基因能够在小鼠肝脏中表达 。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 核心抗原 转基因小鼠 动物模型
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后基因组时代的基因工程小鼠 被引量：12
8
作者 胡以平 曾溢滔 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期117-119,共3页
基因工程小鼠是当今生命科学中集成度最高的综合性研究体系之一 ,在认识“基因 -蛋白质 -生命现象”、制备人类疾病研究的实验动物模型 ,以及新药开发的评价体系等领域中具有重要作用。随着生命科学中功能基因组学的兴起和模式生物时代... 基因工程小鼠是当今生命科学中集成度最高的综合性研究体系之一 ,在认识“基因 -蛋白质 -生命现象”、制备人类疾病研究的实验动物模型 ,以及新药开发的评价体系等领域中具有重要作用。随着生命科学中功能基因组学的兴起和模式生物时代的到来 ,使得生物医药研究对基因工程小鼠的需求日趋增加 ,同时也促使基因工程小鼠技术体系得到了快速的发展。然而 ,在基因工程小鼠的产生中 ,仍存在着一些问题。它们的解决 。 展开更多
关键词 基因工程小鼠 转基因小鼠 基因剔除小鼠 基因替换小鼠
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裸鼠脑内接种U-251M G细胞建立脑胶质瘤的模型 被引量：9
9
作者 王建军 祝峙 +4 位作者 高莉 陶文照 肖农 颜永碧 刘建涌 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期789-791,共3页
目的：建立裸鼠脑内人胶质瘤模型。方法：应用自制的脑内注射细胞装置，将人的Ｕ－２５１ＭＧ细胞接种于９只裸鼠脑中。分别于接种后１０，２０，３０，４０和７７ ｄ 处死动物并行病理解剖、ＧＦＡＰ免疫组化及电镜检查。结果：我们建... 目的：建立裸鼠脑内人胶质瘤模型。方法：应用自制的脑内注射细胞装置，将人的Ｕ－２５１ＭＧ细胞接种于９只裸鼠脑中。分别于接种后１０，２０，３０，４０和７７ ｄ 处死动物并行病理解剖、ＧＦＡＰ免疫组化及电镜检查。结果：我们建立的模型，肿瘤在脑内生长稳定，其特性同于人脑胶质瘤。结论：接种后２０ ｄ 展开更多
关键词 脑肿瘤 动物模型 脑胶质细胞瘤 U-251MG细胞
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生物技术专业细胞工程实验教学的设计与体会 被引量：10
10
作者 李建秀 张红霞 +2 位作者 谢东甫 訾晓渊 胡以平 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2011年第5期457-459,共3页
为了能使学生的专业技术能力得到强化训练、开拓学生视野、提高学生创新能力,按照新修订的《生物技术四年制本科人才培养方案》,结合学员的实际情况,设计并形成了一套开放性自主综合性实验教学体系,介绍了该实验体系的教学目标、教学内... 为了能使学生的专业技术能力得到强化训练、开拓学生视野、提高学生创新能力,按照新修订的《生物技术四年制本科人才培养方案》,结合学员的实际情况,设计并形成了一套开放性自主综合性实验教学体系,介绍了该实验体系的教学目标、教学内容和教学体会。 展开更多
关键词 细胞工程 实验教学 教学方法
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医学细胞生物学实验教学模块教学设计探讨 被引量：9
11
作者 何志颖 王敏君 +5 位作者 陈费 谢志芳 张红霞 李建秀 朱海英 胡以平 《基础医学教育》 2014年第7期518-520,共3页
医学细胞生物学实验课教学的重要地位日益凸显,而实验课教学中课程内容设置的问题不容忽视。常规课程内容多以验证性实验为主,缺乏综合能力和创新能力的培养,也不利于发挥学生的积极性和主观能动性。在教学实践中,以"模块"为... 医学细胞生物学实验课教学的重要地位日益凸显,而实验课教学中课程内容设置的问题不容忽视。常规课程内容多以验证性实验为主,缺乏综合能力和创新能力的培养,也不利于发挥学生的积极性和主观能动性。在教学实践中,以"模块"为单位组织教学内容,各模块之间具有相对的独立性,在同一模块中可以进行内容、设备和师资的更新和补充,可针对不同的教学对象和教学层次的需要而选择相应的教学模块进行组合,从而更加强调系统集成的特点,使教学内容更具先进性、针对性、灵活性和可选择性,解决了教学内容陈旧过时和学时分配不合理的问题。 展开更多
关键词 细胞生物学 实验课 教学模块
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大鼠肺缺血再灌注损伤引起肺细胞的凋亡 被引量：2
12
作者 谢东甫 秦雄 徐志飞 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期295-297,共3页
目的 :观察肺缺血再灌注损伤对肺细胞凋亡的影响。 方法 :雄性 SD大鼠 4 0只 ,体质量 30 0～ 35 0 g,随机分为 8组(缺血再灌注 6组 ,单纯缺血组 ,对照组 ) ,每组 5只。通过阻断肺门建立大鼠原位肺缺血再灌注模型 ,应用末端脱氧核苷酸转... 目的 :观察肺缺血再灌注损伤对肺细胞凋亡的影响。 方法 :雄性 SD大鼠 4 0只 ,体质量 30 0～ 35 0 g,随机分为 8组(缺血再灌注 6组 ,单纯缺血组 ,对照组 ) ,每组 5只。通过阻断肺门建立大鼠原位肺缺血再灌注模型 ,应用末端脱氧核苷酸转移酶 (Td T)介导的 d U TP缺口末端标记技术 (TU NEL)检测缺血再灌注损伤所引起的肺细胞凋亡的变化及其与再灌注时间的相关性 ;DNA电泳进行肺组织细胞 DNA片段分析 ;电镜观察凋亡细胞的超微结构。结果 :在肺缺血再灌注后早期 (30 min)发生明显的肺细胞凋亡 ,凋亡细胞数峰值位于再灌注后 2 h,再灌注后 1 2 h凋亡细胞数与对照组无显著差别 ;缺血而无再灌注的肺细胞凋亡无明显变化。 结论 展开更多
关键词 大鼠 肺缺血 再灌注损伤 肺细胞 细胞凋亡
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小鼠受精卵显微操作方法的改进 被引量：1
13
作者 李建秀 胡卫江 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期1032-1033,共2页
目的 :改进小鼠受精卵显微操作方法 ,提高小鼠受精卵的存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。方法 :以一定长度大小及浓度的 DNA片段为材料 ,分别进行常规及改进的显微操作后 ,统计分析受精卵存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。 结果 :经改... 目的 :改进小鼠受精卵显微操作方法 ,提高小鼠受精卵的存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。方法 :以一定长度大小及浓度的 DNA片段为材料 ,分别进行常规及改进的显微操作后 ,统计分析受精卵存活率、假孕母鼠生产率及得仔率。 结果 :经改进后缩短操作时间的显微操作法与常规显微操作法相比 ,小鼠受精卵的存活率由 6 0 .3%提高至 79.5 %、假孕母鼠生产率由 35 .7%提高至 5 6 .8%、得仔率由 10 .1%提高至 14.1%,均有显著差别 (P<0 .0 1)。 结论 :改进的显微操作法可推广应用于常规的转基因小鼠制备。 展开更多
关键词 受精卵 存活率 生产率 得仔率 显微操作法
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二乙基亚硝胺诱导转化的肝癌肝组织小鼠中SP细胞的观察 被引量：4
14
作者 张朵 朱海英 +3 位作者 谢东甫 王新民 李建秀 胡以平 《医学研究生学报》 CAS 2006年第5期424-427,i0010,共5页
目的:研究小鼠肝癌组织中的SP细胞,从而推测肝癌干细胞(CSC)存在的可能性。方法:首先用致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)诱导B6C3F1雄性小鼠发生肝癌,在无菌条件下,将肝癌组织消化成单细胞悬液,然后用荧光染料Hoechst 33342对细胞悬液进行染色... 目的:研究小鼠肝癌组织中的SP细胞,从而推测肝癌干细胞(CSC)存在的可能性。方法:首先用致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)诱导B6C3F1雄性小鼠发生肝癌,在无菌条件下,将肝癌组织消化成单细胞悬液,然后用荧光染料Hoechst 33342对细胞悬液进行染色分析。结果:在原代分离的小鼠肝癌细胞群中观察到SP细胞的存在。结论:实验结果推测,在药物诱导转化的小鼠肝癌组织中很可能存在CSC。 展开更多
关键词 转化 SP细胞 肝癌 二乙基亚硝胺
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小鼠肾间质纤维化早期上皮细胞-间充质细胞转型研究(英文) 被引量：2
15
作者 熊俊 胡凯猛 +3 位作者 冀凯宏 汤淑萍 王英 刘厚奇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期355-360,共6页
目的:探讨小鼠肾间质纤维化早期是否存在肾小管上皮细胞间充质细胞转型的形态学变化。方法:利用单侧输尿管梗阻的方法建立小鼠肾间质纤维化模型,常规组织学分析小鼠肾脏病理变化,免疫组化检测α- SMA的表达,肾基底膜六胺银染色和透射电... 目的:探讨小鼠肾间质纤维化早期是否存在肾小管上皮细胞间充质细胞转型的形态学变化。方法:利用单侧输尿管梗阻的方法建立小鼠肾间质纤维化模型,常规组织学分析小鼠肾脏病理变化,免疫组化检测α- SMA的表达,肾基底膜六胺银染色和透射电镜观察肾小管基底膜的变化情况,明胶酶谱分析观察肾脏中MMP2和MMP9的表达情况。结果:成功地建立了小鼠肾间质纤维化模型,并被组织学分析证实。免疫组化分析显示肾脏中出现了大量表达α-SMA的细胞,肾基底膜六胺银染色和透射电镜分析显示小鼠肾间质纤维化早期肾脏出现了肾小管基底膜局部断裂和肾小管上皮细胞迁出的改变,明胶酶谱分析显示小鼠肾脏中MMP2和MMP9于肾间质纤维化早期有一过性增高变化。结论:肾小管基底膜局部断裂,肾小管上皮细胞迁出以及MMP2和MMP9的表达变化参与了小鼠肾间质纤维化早期上皮细胞间充质细胞转型的过程。 展开更多
关键词 肾间质纤维化 肌成纤维细胞 肾基底膜 基质金属蛋白酶
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小鼠单纯肝切除后再生肝组织内大小核分裂相和卵圆细胞的观察 被引量：3
16
作者 余宏宇 李文林 +10 位作者 谢东甫 张朵 肖承志 孙志勇 何金 孙静 苏娟 李建秀 朱明华 Joseph T Lau 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期251-256,共6页
目的:探究C57小鼠单纯2/3肝切除后肝组织内与再生和肝干细胞有关的病理形态学变化及其意义。方法:在4个对照组(正常组、假手术组、倒千里光碱组和倒千里光碱2/3肝切除组)的参照下,观察实验组C57小鼠单纯2/3肝切除后不同时间肝脏病理形... 目的:探究C57小鼠单纯2/3肝切除后肝组织内与再生和肝干细胞有关的病理形态学变化及其意义。方法:在4个对照组(正常组、假手术组、倒千里光碱组和倒千里光碱2/3肝切除组)的参照下,观察实验组C57小鼠单纯2/3肝切除后不同时间肝脏病理形态变化(核分裂相和卵圆细胞等)和CK19、AFP免疫组化检测情况。结果:单纯2/3肝切除后小鼠均出现不同程度的成熟肝细胞通过大核分裂相分裂增生、轻重不等的小胆管/终末胆管增生反应和个别例中有类似于倒千里光碱肝切除模型组的卵圆细胞增生;尤其还有大小核分裂相分布等一些文献未提及的形态学改变。结论:本研究提出肝流域假说的初步设想:肝内成体干细胞存在于小胆管/终末胆管附近,是肝主质细胞的重要源头;在其向中央静脉方向的流向上产生各级分化程度不同的子代(自卵圆细胞到小肝细胞、成熟肝细胞),沿肝板形成该流域干流;而经由血流到达肝脏的过客性干细胞可不同程度地在不同区段作为该流域的支流汇入干流并转分化为肝系细胞。 展开更多
关键词 肝切除术 肝再生 干细胞 肝 大小核分裂相 卵圆细胞
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乙型肝炎病毒(adr亚型)preS2-S基因转基因小鼠的建立 被引量：4
17
作者 苏小平 姚玉成 +8 位作者 訾晓渊 赵书民 熊俊 李建秀 王新民 丁佳 许燕 余宏宇 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期168-171,共4页
目的 :建立可表达乙型肝炎病毒 (adr亚型 )包膜中蛋白的转基因小鼠品系。 方法 :通过原核显微注射法制备带有乙型肝炎病毒 (adr亚型 ) pre S2 - S基因的转基因小鼠。应用 PCR方法筛选乙型肝炎病毒 pre S2 - S基因转基因首建者 (founder... 目的 :建立可表达乙型肝炎病毒 (adr亚型 )包膜中蛋白的转基因小鼠品系。 方法 :通过原核显微注射法制备带有乙型肝炎病毒 (adr亚型 ) pre S2 - S基因的转基因小鼠。应用 PCR方法筛选乙型肝炎病毒 pre S2 - S基因转基因首建者 (founder)小鼠 ,再以免疫组织化学法分析乙型肝炎病毒蛋白在这些小鼠中的表达特性 ,PCR和免疫组化均阳性的转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配用于传代培育 ,并用 PCR法检测其子代小鼠。结果 :共注射受精卵 6 9枚。选取存活受精卵 5 8枚分别植入 4只假孕小鼠 ,产仔并存活 2 3只。经尾组织 DNA PCR筛选得到 5只整合 pre S2 - S基因的 founder小鼠 ,免疫组织化学法发现其中3只小鼠的肝脏中表达 HBs Ag,进而对其中表达较强的阳性鼠进行保种。结论 :所建立的乙型肝炎病毒 (adr亚型 ) pre S2 - S基因转基因小鼠品系具有表达乙肝病毒中蛋白的生物学特性 。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 MHBS 转基因小鼠 preS2-S基因
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骨髓细胞多向分化潜能的初步研究 被引量：3
18
作者 朱海英 苏娟 +5 位作者 李文林 姚玉成 刘红 王新民 胡以平 余宏宇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1172-1174,共3页
目的:探讨骨髓细胞在受致死剂量照射的受体鼠体内的多向分化潜能。方法:将C57-TgN(Mx-cre)雄性小鼠的骨髓细胞经尾静脉植入受致死剂量照射的雌性受体鼠,重建受体鼠骨髓,然后分别用PCR和免疫组化分析检测受体鼠的多个器官组织中sry及Mx-... 目的:探讨骨髓细胞在受致死剂量照射的受体鼠体内的多向分化潜能。方法:将C57-TgN(Mx-cre)雄性小鼠的骨髓细胞经尾静脉植入受致死剂量照射的雌性受体鼠,重建受体鼠骨髓,然后分别用PCR和免疫组化分析检测受体鼠的多个器官组织中sry及Mx-cre基因的分布及表达情况。结果:PCR和免疫组化分析结果均显示,供体细胞的两个标志sry及Mx-cre在受体鼠的肝脏、肾脏、皮肤、脾脏等多个器官中都有表达。结论:骨髓细胞不仅可以重建受致死剂量照射受体鼠的造血系统,而且具有分化为肝脏、肾脏、皮肤、脾脏等组织细胞类型的多向潜能性。 展开更多
关键词 骨髓细胞 造血干细胞 细胞分化
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乙型肝炎病毒preS2蛋白在转基因小鼠肝脏中的表达 被引量：2
19
作者 金艳花 訾晓渊 +8 位作者 姚玉成 熊俊 李建秀 苏小平 王新民 倪文君 丛文铭 杨康鹃 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期175-178,共4页
目的 :分析乙型肝炎病毒 pre S2蛋白在 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠肝脏中的分布及其病理学作用。方法 :采用原核显微注射法将质粒 pc DNA3.1- pre S/ St注射入小鼠受精卵雄原核 ,制备转基因小鼠。PCR法在基因组水平筛选 3′... 目的 :分析乙型肝炎病毒 pre S2蛋白在 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠肝脏中的分布及其病理学作用。方法 :采用原核显微注射法将质粒 pc DNA3.1- pre S/ St注射入小鼠受精卵雄原核 ,制备转基因小鼠。PCR法在基因组水平筛选 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠首建者 (founder)及后代 ;免疫组织化学法在蛋白水平检测 pre S2蛋白在这些小鼠中的表达 ;H- E染色分析转基因小鼠肝组织的病理学变化。结果 :经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后 ,共出生 15只新生小鼠 ,其中存活 7只 ,经 PCR检测后获得 2只 founder转基因小鼠 ,命名为 C5 7- Tg N (pre S/ St) SMMU。免疫组织化学检测发现转基因小鼠肝细胞质中有 pre S 2蛋白表达 ,H- E染色发现转基因小鼠肝组织中央静脉周围有淋巴细胞聚集。将这 2只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配 ,进行传代培育 ,PCR法筛选阳性转基因小鼠 ,目前已传至 F2 代。 结论 :本研究成功建立了稳定遗传 3′末端缺失的 pre S/ S基因并表达 pre S2蛋白的转基因小鼠 C5 7- Tg N((pre S/ St) SMMU,它将是体内研究 3′末端缺失的 pre S/ 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 PRES2蛋白 转基因小鼠 preS/S基因 肝
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂减轻草酸钙结晶肾损伤的实验研究 被引量：5
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作者 汪丽 谌卫 +3 位作者 彭忠将 刘长城 张彩虹 郭志勇 《中国中西医结合肾病杂志》 2014年第10期857-860,I0001,共5页
目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对草酸钙结晶模型小鼠肾结晶沉积的作用,初步探讨SAHA对减轻草酸钙结晶肾损伤的机制。方法:24只ICR雄性小鼠随机分为4组,即空白对照组(A组)... 目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对草酸钙结晶模型小鼠肾结晶沉积的作用,初步探讨SAHA对减轻草酸钙结晶肾损伤的机制。方法:24只ICR雄性小鼠随机分为4组,即空白对照组(A组)和实验组(B、C、D组);B组:50 mg/kg的生理盐水(NS)+100 mg/kg乙醛酸盐,C组:50 mg/kg的DMSO+100 mg/kg乙醛酸盐,D组:50 mg/kg的SAHA+100 mg/kg乙醛酸盐;实验组给予乙醛酸盐6 h前分别予以NS、DMSO、SAHA 50 mg/kg等量腹腔注射,7 d后处死全部小鼠。检测各组小鼠肾组织钙含量水平,丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH)的含量或活力,并且在光镜下观察各组小鼠肾组织切片中草酸钙结晶的分布,免疫组化及其半定量分析比较骨桥蛋白(OPN)、CD44分子在肾脏中的表达情况。结果:与B、C组相比,D组小鼠的肾组织钙含量和MDA含量显著下降(P均<0.05),肾组织切片冯库萨染色显示草酸钙结晶沉积明显减少(P<0.05),OPN与CD44表达水平也明显下降(P<0.05)。而B组与C组肾结晶形成的差异无统计学意义。结论:研究结果首次证实SAHA对减少小鼠草酸钙肾结晶形成有预防作用,而且其机制可能与抑制氧化应激和降低OPN、CD44表达水平有关。 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 草酸钙结晶 氧化应激 CD44 CD44
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