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抑癌基因PTEN与人大肠癌转移的相关性研究 被引量:10
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作者 郑国宝 王元和 +2 位作者 高春芳 王红阳 万兴旺 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期871-873,共3页
目的 探讨抑癌基因PTEN的表达在大肠癌转移侵袭过程中的作用。方法  (1)应用Nothernblot和免疫组织化学的方法检测 47例大肠癌组织中PTENmRNA和蛋白的表达 ,分析其与大肠癌转移的关系。 (2 )利用Westernblot法检测不同转移潜能的大肠... 目的 探讨抑癌基因PTEN的表达在大肠癌转移侵袭过程中的作用。方法  (1)应用Nothernblot和免疫组织化学的方法检测 47例大肠癌组织中PTENmRNA和蛋白的表达 ,分析其与大肠癌转移的关系。 (2 )利用Westernblot法检测不同转移潜能的大肠癌细胞系内PTEN蛋白的表达水平 ,说明PTEN蛋白的表达对大肠癌细胞转移潜能的影响。 (3 )用阳离子脂质体作载体 ,将PTEN基因转染大肠癌细胞株LOVO后 ,采用计数细胞悬液加到粘附底物后 2 0和 12 0min的细胞贴壁数用以测定细胞粘附能力 ,采用Costar的浸润小室检测PTEN基因转染前后细胞的浸润能力。结果  (1)在有淋巴结及远处转移的大肠癌组织中 ,PTENmRNA和蛋白的表达显著低于无转移者 ;(2 )转移潜能高的LOVO细胞PTEN的表达量通过显著低于转移潜能较低的HT 2 9、LS 174T ;(3 )LOVO、转染 pcDNA3 .0 PTEN的细胞 (LOVO/pcDNA3 .0 PTEN )在特异性粘附底物(Laminin)上 2 0min时贴壁率分别为 (18.6± 1.4) %和 (13 .9± 0 .5 ) % (P <0 .0 5 ) ,12 0min时贴壁率分别为 (71.2± 2 .5 ) %和 (5 6.0± 1.6) % (P <0 .0 5 ) ;(4 )采用Costar的浸润小室对LOVO、LOVO/pcDNA3 .0 PTEN细胞的浸润能力分析结果显示 :细胞悬液静置培养 6h后 ,对照细胞LOVO浸润穿透多聚碳膜的细胞数为 展开更多
关键词 大肠癌 肿瘤转移 抑癌基因 PTEN 相关性研究 基因表达
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抑癌基因PTEN在人大肠癌中的表达及其意义 被引量:9
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作者 郑国宝 王元和 +2 位作者 高春芳 王红阳 万兴望 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第10期599-601,共3页
目的阐明抑癌基因PTEN在大肠癌的发生发展及转移过程中的作用。方法应用Nothernblot和免疫组化的方法检测 4 7例人大肠癌及癌旁组织中PTENmRNA和蛋白的表达 ,分析其与大肠癌的临床病理学分期、分级及其与大肠癌肝转移的关系。结果 PTEN... 目的阐明抑癌基因PTEN在大肠癌的发生发展及转移过程中的作用。方法应用Nothernblot和免疫组化的方法检测 4 7例人大肠癌及癌旁组织中PTENmRNA和蛋白的表达 ,分析其与大肠癌的临床病理学分期、分级及其与大肠癌肝转移的关系。结果 PTENmRNA在大肠癌组织内的表达水平显著低于相应的癌旁组织 ,在癌组织内 ,PTENmRNA表达水平与大肠癌的恶性程度分级、Dukes分期及血清中癌胚抗原 (CEA)水平呈显著负相关 ,PTEN蛋白在大肠癌旁组织中表达阳性率为 10 0 % ,在大肠癌组织中表达阳性率为 76 6 % ,PTEN在大肠癌组织中表达的降低与大肠癌的Dukes分期、淋巴结转移及血清中CEA水平呈显著负相关。 展开更多
关键词 抑癌基因 PTEN 人大肠癌 癌旁组织 病理学分期 基因表达
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常用化疗药物对大肠癌细胞系PTEN蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 郑国宝 王元和 +2 位作者 高春芳 王红阳 万兴望 《实用癌症杂志》 2004年第1期69-71,共3页
目的 探讨常用化疗药物对大肠癌细胞系PTEN蛋白表达的调控作用。方法 采用WesternBlot法 ,检测氟脲嘧啶( 5 Fu)、丝裂霉素及顺铂作用于大肠癌细胞HT 2 96h及 2 4h后PTEN蛋白表达情况。结果  3种药物作用 6h后 ,与对照组比较 ,PTEN... 目的 探讨常用化疗药物对大肠癌细胞系PTEN蛋白表达的调控作用。方法 采用WesternBlot法 ,检测氟脲嘧啶( 5 Fu)、丝裂霉素及顺铂作用于大肠癌细胞HT 2 96h及 2 4h后PTEN蛋白表达情况。结果  3种药物作用 6h后 ,与对照组比较 ,PTEN表达量均呈不同程度增高 ,其中以顺铂的上升幅度最大 ,为对照组的 2 .16倍 ,5 Fu为对照组的 1.2 1倍 ,丝裂霉素为对照组的 1.5 0倍。作用 2 4h后 ,PTEN表达量顺铂为对照组的 3 .5 3倍 ,5 Fu为对照组的 1.68倍 ,丝裂霉素为对照组的 2 .2 1倍。且用上述药物作用 6h后 ,大肠癌细胞的生长速度较对照组明显减慢。 展开更多
关键词 化疗药物 大肠癌 PTEN 蛋白 表达 细胞培养
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连环蛋白基因功能区截短突变体的构建及其功能
4
作者 张瑞 鄢和新 +3 位作者 陈磊 唐亮 杨安钢 王红阳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期385-389,共5页
目的 :观察连环蛋白 (βcatenin)基因功能截短体的亚细胞定位及转录活性的变化。方法 :采用反转录PCR克隆全长野生型βcatenin基因。在此基础上 ,分别构建 βcatenin基因N端、C端及Armadillo区缺失突变体的真核基因表达载体和融合绿色... 目的 :观察连环蛋白 (βcatenin)基因功能截短体的亚细胞定位及转录活性的变化。方法 :采用反转录PCR克隆全长野生型βcatenin基因。在此基础上 ,分别构建 βcatenin基因N端、C端及Armadillo区缺失突变体的真核基因表达载体和融合绿色荧光蛋白 (EGFP)的表达载体。应用双荧光素酶报告系统 ,在2 93细胞中检测不同功能截短体的转录活性。在倒置荧光显微镜下观察不同功能截短体在COS7细胞中的亚细胞定位。结果 :成功地构建了 βcatenin基因不同功能截短体的真核表达载体及与绿色荧光蛋白基因融合的表达载体。在 2 93细胞中检测到Armadillo区缺失的突变体蛋白丧失了转录活性 ,N端及C端缺失突变体蛋白的转录活性较野生型分别下降了80 %和 90 %。在COS7细胞中观察到C端缺失突变体蛋白主要定位于胞浆中 ,N端缺失突变体蛋白以粗颗粒形式定位于胞核中 ,Armadillo区缺失突变体的定位情况类似野生型 βcatenin ,以细颗粒形式定位于胞核中。结论 :βcatenin基因不同功能区亚细胞定位的不同 ,提示其在转录激活过程中发挥着不同的作用。 展开更多
关键词 连环蛋白 绿色荧光蛋白 转录活性 亚细胞定位
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肝癌诊断与预后判断的分子标志物 被引量:21
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作者 王红阳 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期241-243,共3页
自20世纪80年代开始,肝癌发病率不断攀升.肝癌在全世界的发病率位居男性各类肿瘤的第五位,其病死率更是高居第二位;在我国广大农村地区,肝癌的病死率位居男性各类恶性肿瘤病死率的首位.值得关注的是,女性肝癌的发病率呈现上升的趋势.依... 自20世纪80年代开始,肝癌发病率不断攀升.肝癌在全世界的发病率位居男性各类肿瘤的第五位,其病死率更是高居第二位;在我国广大农村地区,肝癌的病死率位居男性各类恶性肿瘤病死率的首位.值得关注的是,女性肝癌的发病率呈现上升的趋势.依据美国癌症协会的最新统计资料,2008年肝癌新发病例约70万,85%的患者来自发展中国家.肝癌是恶性程度高、预后极差的肿瘤之一,仅2008年就有695 500人死于肝癌.肝癌的发病率和病死率高居不下,给原本经济不发达,医疗资源缺乏的发展中国家带来了沉重的经济和社会负担. 展开更多
关键词 肝细胞 诊断 预后 标志物
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Quantitative Detection of Osteopontin High Expression in Human and Rat Hepatocellular Carcinoma
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作者 满晓波 胡和平 +5 位作者 唐亮 程庆保 张宝华 邱秀华 吴孟超 王红阳 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2006年第2期78-81,共4页
Objective: Osteopontin (OPN) is a secreted phosphorylated glycoprotein that is implicated in proliferation and migration of several malignancies including hepatocellular carcinoma (HCC). In pregent study, human H... Objective: Osteopontin (OPN) is a secreted phosphorylated glycoprotein that is implicated in proliferation and migration of several malignancies including hepatocellular carcinoma (HCC). In pregent study, human HCC specimens were collected and rat HCC model was chemical-induced to elucidate the expression significance of OPN in HCC progression. Methods: OPN expression was detected quantitatively by real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Male Sprague-Dawley rats were administrated diethylnitrosamine (DENA) to induce HCC and OPN expression was dynamically assessed. Results: In 69 cases of 103 HCC patients (67%) OPN was highexpressed in HCC tissues than that in adjacent non-tumor liver tissues and in 58 cases of these 69 cases more than 2-fold. OPN expression was significantly different between HCC and adjacent liver tissues (0.53±0.91 vs 0.11±0.28, P〈0.001). OPN expression was gradually elevated in occurrence and development of rat HCC. Conclusion: OPN was highexpressed in human HCC and gradually elevated in rat HCC progression. 展开更多
关键词 OSTEOPONTIN gene expression hepatocellular carcinoma real-time PCR
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受体型酪氨酸磷酸酶的抗体制备与细胞定位研究 被引量:1
7
作者 张鹏 鄢和新 +3 位作者 董辉 何雅琴 洪毅 王红阳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期574-574,共1页
关键词 受体型酪氨酸磷酸酶 抗体 制备 细胞定位 研究 免疫荧光细胞化学
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