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转染bcl-2基因对心肌细胞缺氧耐受性的影响 被引量：2
1
作者 杨永健 刘世玉 +2 位作者 胡厚祥 祝善俊 祝之明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期727-730,共4页
目的　探讨转染bcl 2基因能否提高心肌细胞对缺氧的耐受性。方法　①重组真核细胞表达载体 :将含编码人bcl 2cDNA完整开放阅读框的bcl 2cDNA重组至逆转录病毒载体 pLXSN的EcoRⅠ位点上 ,用脂质体包裹重组质粒导入PA317细胞株 ,并经G4 1... 目的　探讨转染bcl 2基因能否提高心肌细胞对缺氧的耐受性。方法　①重组真核细胞表达载体 :将含编码人bcl 2cDNA完整开放阅读框的bcl 2cDNA重组至逆转录病毒载体 pLXSN的EcoRⅠ位点上 ,用脂质体包裹重组质粒导入PA317细胞株 ,并经G4 18筛选阳性克隆 ;②用含高滴度重组病毒的上清感染心肌细胞 ,原位杂交鉴定其转染是否成功 ;③观察转染心肌细胞在缺氧环境下的生存率。结果　①重组了含bcl 2的真核细胞表达质粒 ;②转染bcl 2基因能明显提高心肌细胞对缺氧的耐受能力。结论　转染bcl 2基因能显著提高心肌细胞在缺氧环境下的存活能力。 展开更多
关键词 缺氧 基因转染 心肌缺血 BCL-2基因 耐受性
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乳鼠心肌成纤维细胞MyoDcDNA转染后的形态变化
2
作者 王先梅 李震一 +2 位作者 吴志峰 祝善俊 祝之明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1148-1150,共3页
目的　探讨运用MyoD基因转染使乳鼠心肌间质细胞转化为肌细胞的可能性。方法　MyoD基因是具有碱性螺旋 环 螺旋结构的生肌因子之一 ,用脂质体介导法将MyoDcDNA导入培养的乳鼠心肌间质细胞 (主要是成纤维细胞 )。结果　心脏成纤维细胞... 目的　探讨运用MyoD基因转染使乳鼠心肌间质细胞转化为肌细胞的可能性。方法　MyoD基因是具有碱性螺旋 环 螺旋结构的生肌因子之一 ,用脂质体介导法将MyoDcDNA导入培养的乳鼠心肌间质细胞 (主要是成纤维细胞 )。结果　心脏成纤维细胞在导入MyoDcDNA 5d后可见 :①部分细胞形态发生改变 ,类似骨骼肌细胞 ,胞体伸展 ,胞浆颗粒增多 ;②经原位杂交证实 :1.8%～ 10 .9%的细胞有下游生肌分化标志即骨骼肌肌球蛋白重链mRNA的表达。结论　表明心肌成纤维细胞可转化为具有潜在功能的类骨骼肌细胞 。 展开更多
关键词 MyoD基因 脂质体 成纤维细胞
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钙激动剂对心肌肥大有关信号转导的作用 被引量：1
3
作者 杨永健 祝善俊 +3 位作者 祝之明 胡厚祥 钟键 丁刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1151-1154,共4页
目的　探讨钙激动剂对心肌细胞丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性 ,c fos、c myc蛋白核转位表达 ,及蛋白核酸合成的影响。方法　应用血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ,10 -7mol/L)剌激原代培养的心肌细胞钙内流 ,雷尼丁 (RY ,10 -7mol/L)剌激胞内钙释... 目的　探讨钙激动剂对心肌细胞丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性 ,c fos、c myc蛋白核转位表达 ,及蛋白核酸合成的影响。方法　应用血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ,10 -7mol/L)剌激原代培养的心肌细胞钙内流 ,雷尼丁 (RY ,10 -7mol/L)剌激胞内钙释放 ;剌激 5min时测MAPK活性 ,免疫组化方法检测剌激 5、10、2 0、30min时c fos、c myc蛋白定位表达 ;3H Leu和3H TdR掺入法检测剌激 2 4h心肌细胞蛋白核酸合成。结果　AngⅡ和RY剌激心肌细胞 5min时MAPK活性均明显增高 ,与对照心肌细胞相比差异显著 (P <0 .0 1)。免疫组化结果显示 ,RY剌激心肌细胞c fos、c myc蛋白核转位表达早于AngⅡ。AngⅡ和RY剌激 2 4h ,心肌细胞蛋白核酸合成显著增高 ,与对照组心肌细胞相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论　剌激钙内流及钙释放均在早期激活心肌细胞MAPK。钙释放导致的心肌细胞c fos、c myc蛋白核转位表达早于钙内流 ,同时引起心肌细胞蛋白核酸合成明显增加。 展开更多
关键词 钙激动剂 C-FOS MAPK 心肌肥大 信号转导
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高血压患者红细胞Ca^(2+)摄入的特点及对非洛地平的反应
4
作者 谭建聪 祝之明 +3 位作者 刘光耀 祝善俊 刘晓莉 徐有奇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期135-138,共4页
目的 :探讨原发性高血压(EH)和继发性高血压(SH)细胞膜对Ca2 + 调节的特点及钙拮抗剂对其影响。方法 :38例高血压病人分为EH组(20例)和SH组(18例) ,SH组又分为肾血管性(RH ,5例)、肾实质性(PH,7例)和内分泌性(EHT,6例)高血压3个亚组。... 目的 :探讨原发性高血压(EH)和继发性高血压(SH)细胞膜对Ca2 + 调节的特点及钙拮抗剂对其影响。方法 :38例高血压病人分为EH组(20例)和SH组(18例) ,SH组又分为肾血管性(RH ,5例)、肾实质性(PH,7例)和内分泌性(EHT,6例)高血压3个亚组。分别设对照组。用液态闪烁计数法测定红细胞45Ca2 + 摄入 ;采用放射免疫分析法测定血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AⅡ)。EH组和SH组服非洛地平治疗2周后复查。结果 :EH组红细胞45Ca2 + 摄入高于SH组和对照组 ,PRA和AⅡ低于SH组和对照组 ;SH组中 ,RH亚组红细胞45Ca2 + 摄入、PRA和AⅡ高于对照组。在EH组病人中 ,舒张压(DBP)与不同时间红细胞45Ca2 + 摄入量呈正相关 ;在SH组病人RH亚组中 ,舒张压、AⅡ与第1小时红细胞45Ca2 + 摄入量呈正相关。治疗后 ,EH组红细胞45Ca2 + 摄入有不同程度减少 ,PRA和AⅡ增高。SH组病人RH亚组第1小时红细胞45Ca2 + 摄入减少。结论 :EH细胞膜对Ca2 + 被动通透性增加 ,并参与高血压发病机制。这种膜缺陷现象不存在于SH中。SH中RH病人细胞外Ca2 + 内流增加与体液因素改变有关。非洛地平可部分纠正这种异常。 展开更多
关键词 高血压 钙转运 钙拮抗剂 非络地平
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转染血管紧张素Ⅱ受体反义核苷酸对心肌细胞生长的作用
5
作者 杨永健 祝善俊 +2 位作者 祝之明 胡厚祥 丁钢 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期401-403,共3页
目的　评价转染AT1反义核苷酸 (AT1A)对心肌细胞血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )受体亚型mRNA表达 ,及蛋白质和核酸合成的作用。方法　RT PCR克隆AT1cDNA序列 (476bp) ,将克隆的AT1cDNA反向插入PcDNA3 .1(5 .4kb) ,构建一完整的含AT1A的质粒 (PAT... 目的　评价转染AT1反义核苷酸 (AT1A)对心肌细胞血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )受体亚型mRNA表达 ,及蛋白质和核酸合成的作用。方法　RT PCR克隆AT1cDNA序列 (476bp) ,将克隆的AT1cDNA反向插入PcDNA3 .1(5 .4kb) ,构建一完整的含AT1A的质粒 (PAT1A) ,并转染入培养的心肌细胞 ,RT PCR和免疫印迹鉴定其转染后AT1mRNA和蛋白表达。比较AngⅡ 10 -7mol/L剌激 2 4h后的转染及非转染的心肌细胞AT1及AT2 mRNA表达 (RT PCR)、蛋白质和核酸合成 (3 H Leu及3 H TdR掺入量 )。结果　成功构建PAT1A。转染心肌细胞AT1mRNA和蛋白表达量显著减少 ,与正常对照心肌细胞相比差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。AngⅡ 10 -7mol/L剌激 2 4h后 ,与非转染心肌细胞相比 ,转染组AT1mRNA表达明显减少 ,AT2 mRNA表达明显增加 (P <0 .0 1) ,但两组间3 H Leu及3 H TdR掺入量差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　经AT1A封闭后 ,心肌细胞AT1mRNA表达显著抑制 ,同时AT2 mRNA上调。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ 受体 反义核苷酸 心肌细胞 细胞生长 基因转染
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寒冷刺激诱发孕鼠妊娠高血压综合征动物模型研究 被引量：18
6
作者 俞丽丽 李力 +3 位作者 陈鸣 吴国萍 胡春秀 祝之明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期419-421,共3页
目的　探讨寒冷刺激是否能诱发孕鼠妊娠高血压综合征样的改变。方法　将成年Wistar雌鼠随机分为 4组 :非孕对照组 (NN)、非孕寒冷组 (NC)、妊娠对照组 (PN)、妊娠寒冷组 (PC) ,从妊娠第 1天至妊娠第 19天每天分别置于 (4± 2 )℃ 4h... 目的　探讨寒冷刺激是否能诱发孕鼠妊娠高血压综合征样的改变。方法　将成年Wistar雌鼠随机分为 4组 :非孕对照组 (NN)、非孕寒冷组 (NC)、妊娠对照组 (PN)、妊娠寒冷组 (PC) ,从妊娠第 1天至妊娠第 19天每天分别置于 (4± 2 )℃ 4h(寒冷组 )及 2 5℃ (对照组 ) ,测定大鼠血压、尿蛋白、体重、红细胞压积 ,测量胎盘重量、胎鼠重量及身长 ,观察胎盘、肾脏组织学改变。结果　NC及PC组刺激两周后血压升高、尿蛋白增加 ,与NN及PN组相比 ,均有统计学意义。PC组与PN组相比 ,胎盘重量、胎鼠重量及身长均显著降低 ,其肾脏及胎盘各层均有明显的缺血、缺氧的组织学表现。结论　反复寒冷刺激可诱发孕鼠妊娠高血压综合征样的改变 ,为妊娠高血压综合征的动物模型制作提供了一种新的非侵袭性方法。 展开更多
关键词 妊娠高血压综合征 动物模型 寒冷刺激
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