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一种新的凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌组织中的表达 被引量：47
1
作者 孙建国 廖荣霞 +3 位作者 陈正堂 王志新 张青 伍伟玲 《重庆医学》 CAS CSCD 2004年第7期982-984,共3页
目的　探讨一种新的凋亡抑制蛋白 (inhibitorofapoptosisprotein ,IAP)Livin两种异构体Livinα和Livinβ在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC组织类型、放化治疗的关系。方法　采用逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)检测NSCLC... 目的　探讨一种新的凋亡抑制蛋白 (inhibitorofapoptosisprotein ,IAP)Livin两种异构体Livinα和Livinβ在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC组织类型、放化治疗的关系。方法　采用逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)检测NSCLC组织中Livinα和LivinβmRNA的表达 ,并用westernblot分析Livin蛋白的表达。 结果　 4 8例NSCLC组织中Livin表达阳性率为 2 2 .9% ,其表达与NSCLC组织学类型相关 ,腺癌中Livin表达阳性率达 4 5 .5 % ,明显高于鳞癌和大细胞癌 (P <0 .0 1 ) ,而癌旁组织和良性疾病肺组织未检出阳性结果 ;Livin表达还与肿瘤治疗相关 ,放化治疗可明显诱导Livin表达 (P <0 .0 1 )。结论　Livin异构体在非小细胞肺癌组织中表达 ,作为肺腺癌的分子标志物 。 展开更多
关键词 凋亡抑制蛋白 LIVIN 非小细胞肺癌 基因表达
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Livin异构体基因转染对肺腺癌A549细胞生长及放化疗敏感性的影响 被引量：20
2
作者 孙建国 廖荣霞 +4 位作者 陈正堂 王志新 张青 胡义德 王东林 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期836-840,共5页
目的研究转染Livin α、β两种异构体基因对肺腺癌A549细胞生长及放、化疗敏感性的影响.方法基因转染获得稳定表达Livin α和β的A549细胞克隆,逆转录-聚合酶链反应及免疫荧光化学法了解Livin α、β在转染细胞中基因水平和蛋白水平的... 目的研究转染Livin α、β两种异构体基因对肺腺癌A549细胞生长及放、化疗敏感性的影响.方法基因转染获得稳定表达Livin α和β的A549细胞克隆,逆转录-聚合酶链反应及免疫荧光化学法了解Livin α、β在转染细胞中基因水平和蛋白水平的表达情况;用平板克隆形成实验研究细胞生长情况;甲基偶氮唑蓝法研究细胞对放、化疗的敏感性;细胞周期分析法了解细胞凋亡情况.结果与转染前比较,基因转染后,阳性细胞尤其是表达Livin α的A549细胞克隆形成能力提高约20%、倍增时间缩短5～6 h(P<0.05),对多种化疗药物和放射线敏感性降低(P<0.01),10 Gy放射线照射下仅有0.2%细胞发生凋亡.结论 Livin尤其是Livin α参与肺癌的发生发展,是肺癌细胞对放、化疗耐受的重要机制之一. 展开更多
关键词 癌 非小细胞肺 抗药性 肿瘤 基因转染技术 脱噬作用 LIVIN
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Livin异构体特异性siRNA表达载体的构建及其在SPC-A1细胞中的稳定表达 被引量：13
3
作者 孙建国 廖荣霞 +5 位作者 陈正堂 王志新 张青 胡义德 王东林 粟永萍 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期139-143,147,共6页
目的利用基因转染和RNA干涉(RNAinterference,RNAi)技术在肺腺癌SPC-A1细胞株中分别建立2种Livin异构体的基因沉默体系,旨在进一步体外观察两种异构体基因沉默诱导SPC-A1细胞凋亡效应。方法构建Livin两种异构体小干涉RNA(small interfer... 目的利用基因转染和RNA干涉(RNAinterference,RNAi)技术在肺腺癌SPC-A1细胞株中分别建立2种Livin异构体的基因沉默体系,旨在进一步体外观察两种异构体基因沉默诱导SPC-A1细胞凋亡效应。方法构建Livin两种异构体小干涉RNA(small interfering RNA,si RNA)表达载体;以电穿孔法转染SPC-A1细胞,经G418筛选获得稳定转染的细胞克隆;通过半定量RT-PCR和Western blot验证Livin异构体在SPC-A1细胞中的基因沉默效率,建立高效Livin异构体基因沉默体系。结果成功获得Livin异构体si RNA表达载体,经基因转染以及G418抗性筛选,成功建立Livin异构体特异基因沉默SPC-A1细胞克隆。结论RNAi能高效特异阻断两种Livin异构体表达,为进一步研究其不同的抗凋亡生物学功能,探讨其作为诱导肺癌细胞凋亡治疗分子靶点以及提高肺癌细胞放化疗敏感性打下基础。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 RNA干扰 细胞凋亡 基因 Livin SPC-A1细胞
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PBL在八年制医学生物化学教学中的实践与探索 被引量：21
4
作者 甘立霞 《医学教育探索》 2007年第8期687-688,共2页
本文介绍了在八年制医学生物化学教学中进行PBL教学的经验及体会,认为以问题为导向的教学方法能够激发学习的主动性,培养学生提出问题并解决问题的能力,应当在高层次医学教学中实施和推广。
关键词 生物化学 医学教育 基于问题学习
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抑制性消减杂交技术及其应用研究进展 被引量：19
5
作者 何鹏 江渝 《国外医学（临床生物化学与检验学分册）》 2004年第4期356-358,共3页
抑制性消减杂交是结合抑制性PCR和消减杂交技术发展起来的一种高效分离差异表达基因的方法 ,具有特异性高、假阳性率低、操作简便、灵敏度高等特点。在正常和异常状态下基因的表达变化、差异基因的克隆和鉴定对新基因的认识和基因表达... 抑制性消减杂交是结合抑制性PCR和消减杂交技术发展起来的一种高效分离差异表达基因的方法 ,具有特异性高、假阳性率低、操作简便、灵敏度高等特点。在正常和异常状态下基因的表达变化、差异基因的克隆和鉴定对新基因的认识和基因表达调控有着重要意义。SSH在心血管疾病。 展开更多
关键词 抑制性消减杂交技术 PCR 差异表达 SSH 基因片段
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Livin异构体特异性基因沉默诱导肺腺癌SPC-A1细胞凋亡 被引量：11
6
作者 孙建国 廖荣霞 +3 位作者 陈正堂 王志新 张青 胡义德 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第6期505-509,共5页
目的:利用基因转染和RNA干涉(RNAi)技术,在SPC-A1细胞中建立Livin异构体α和β特异的基因沉默体系,探讨其在诱导SPC-A1细胞凋亡效应中的不同作用及价值。方法:在肺腺癌SPC-A1细胞中稳定表达Livinα+β、Livinα和Livinβ特异性小干涉RNA... 目的:利用基因转染和RNA干涉(RNAi)技术,在SPC-A1细胞中建立Livin异构体α和β特异的基因沉默体系,探讨其在诱导SPC-A1细胞凋亡效应中的不同作用及价值。方法:在肺腺癌SPC-A1细胞中稳定表达Livinα+β、Livinα和Livinβ特异性小干涉RNA(siRNA),观察SPC-A1细胞形态、增殖等生物学行为的改变,TUNEL法和流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:Livinα+β、Livinα和Livinβ基因沉默后,SPC-A1细胞克隆形成能力较对照组显著下降(P<0.05);转染后SPC-A1细胞发生凋亡,TUNEL法显示细胞凋亡指数分别为(9.20±1.90)%、(6.75±1.20)%和(4.82±1.20)%,(流式细胞仪检测)细胞凋亡率分别为(7.48±1.30)%、(5.50±0.90)%和(4.16±0.70)%。结论:Livinα和β两种异构体均能作为诱导肺癌细胞凋亡的分子靶点,Livin基因沉默靶向诱导肺癌细胞凋亡可能作为手术、化疗、放疗等传统治疗的辅助手段。 展开更多
关键词 凋亡抑制蛋白 LIVIN 凋亡 基因沉默 RNA干涉 非小细胞肺癌
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胃癌单克隆抗体MG7的噬菌体呈现型抗独特型单链抗体ScFv的制备 被引量：7
7
作者 何凤田 聂勇战 +3 位作者 韩者艺 陈宝军 乔太东 樊代明 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期33-36,共4页
目的　获得胃癌单克隆抗体 (简称单抗 )MG7的噬菌体呈现型抗独特型单链抗体ScFv(抗 IdScFv) ,为研制MG7的抗 IdScFv重组胃癌瘤苗奠定基础。方法　以MG7单抗与匙孔血蓝蛋白(KLH)的交联物免疫Balb/c小鼠 ,取脾分离mRNA。以逆转录聚合酶... 目的　获得胃癌单克隆抗体 (简称单抗 )MG7的噬菌体呈现型抗独特型单链抗体ScFv(抗 IdScFv) ,为研制MG7的抗 IdScFv重组胃癌瘤苗奠定基础。方法　以MG7单抗与匙孔血蓝蛋白(KLH)的交联物免疫Balb/c小鼠 ,取脾分离mRNA。以逆转录聚合酶链反应技术分别扩增抗体重、轻链可变区基因 (VH和VL) ,经linkerDNA连接形成ScFv基因片段。将ScFvDNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1。在辅助噬菌体M13KO7的作用下 ,获得重组噬菌体抗体ScFv。以单抗MG7对重组噬菌体抗体ScFv进行四轮筛选后 ,随机挑取克隆 ,经噬菌体ELISA筛选抗 IdScFv单克隆 ,并对其所属抗 Id类型进行初步鉴定。结果　VH、VL和ScFvDNA分别约为 340、32 0和 75 0bp。经富集后 ,在随机筛检的 6 0个克隆中得到 2 4个噬菌体呈现型抗 IdScFv单克隆 ,阳性率为40 %。在 2 4个克隆中 ,有 5个为 β或γ型抗 IdScFv。 结论　用噬菌体抗体技术能够成功地获得单抗MG7的抗 IdScFv ,为开展用抗 展开更多
关键词 胃肿瘤 噬菌体 胃癌 单克隆抗体 MG7 单链抗体 制备
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教学方法改革在提高生物化学教学质量中的探讨 被引量：13
8
作者 黄刚 付晓红 +3 位作者 连继勤 龚薇 申晓冬 何凤田 《中国当代医药》 2013年第7期134-135,共2页
教学方法改革是本校推进人才培养模式转型的重要举措。生物化学是高校医学专业的必修课程,是进行教学方法改革的重要学科。为进一步提高生物化学教学质量,本研究在不同层次学生的生物化学教学中选择合适的教学方法,进行课堂教学方法改革... 教学方法改革是本校推进人才培养模式转型的重要举措。生物化学是高校医学专业的必修课程,是进行教学方法改革的重要学科。为进一步提高生物化学教学质量,本研究在不同层次学生的生物化学教学中选择合适的教学方法,进行课堂教学方法改革,取得了理想的教学效果,从而为教学方法改革的应用积累了一定的经验。 展开更多
关键词 生物化学 教学方法 教学改革 教学质量
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高等学校实验教学改革的探索与思考 被引量：11
9
作者 刘东 彭家和 江渝 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2004年第6期637-639,共3页
从教育思想与教育观念更新、实验内容建设、教师队伍建设、教学组织、教育手段等多方面对高等学校的实验教学中存在的问题进行讨论,提出了一些可行性的建议与对策,以供参考.
关键词 高等学校 实验教学改革 建议与对策 教育手段 教师队伍建设 教育观念 教育思想 问题 参考 可行性
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推行本科生导师制 提升医学微生物学教学质量 被引量：10
10
作者 李明 申晓冬 +4 位作者 胡晓梅 黎庶 饶贤才 汪正清 胡福泉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期774-778,共5页
本科生导师制是在适应新时期高等医学教育培养体制下产生的一种"以满足学生个性发展和创新精神需要"为理念的制度,它在很大程度上克服了医学微生物学传统教学模式的弊端,体现了"以学生为主体,以提高能力素质为核心"... 本科生导师制是在适应新时期高等医学教育培养体制下产生的一种"以满足学生个性发展和创新精神需要"为理念的制度,它在很大程度上克服了医学微生物学传统教学模式的弊端,体现了"以学生为主体,以提高能力素质为核心"的教学理念,充分调动了学生的积极性和创造力,增强了学生的实践技能和综合素质,切实提高了医学微生物学的教学质量,值得深入学习和推广。 展开更多
关键词 本科生导师制 医学微生物学 教学模式 教学质量
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医学生物化学实验教学中存在的问题与改革措施初探 被引量：10
11
作者 刘东擘 李翔 何凤田 《现代医药卫生》 2015年第5期758-760,共3页
为了适应医学院校培养具有高素质专业性医学人才的需求,从教学实践出发,针对医学生物化学教学实验中存在的教学设施和教学方式落后、实验教学课时量不足、医学生对实验仪器或设备的操作不规范、探索性和综合性实验偏少以及成绩考核不合... 为了适应医学院校培养具有高素质专业性医学人才的需求,从教学实践出发,针对医学生物化学教学实验中存在的教学设施和教学方式落后、实验教学课时量不足、医学生对实验仪器或设备的操作不规范、探索性和综合性实验偏少以及成绩考核不合理等问题。提出通过加大生物化学实验教学力度的支持,改革教学模式;精选实验内容,合理安排课时量;将生物化学实验与临床相结合,培养学生职业和社会责任感;增加设计性和综合性实验,培养学生创新思维;建立合理的考核机制,提高实验教学质量等改革措施,有效地提高学生的积极性、动手能力和创新思维,为其他学科的实验教学改革提供参考。 展开更多
关键词 生物化学 教学方法 专业能力 创造性 医学
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小鼠肝脏特异的微RNA真核表达载体的构建及鉴定 被引量：8
12
作者 廖荣霞 孙建国 +1 位作者 陈正堂 周建新 《重庆医学》 CAS CSCD 2004年第7期965-967,共3页
目的　利用分子克隆技术 ,构建微RNA(microRNA ,miRNA)真核细胞载体。方法　人工合成小鼠肝脏特异的微RNA(miR 1 2 2 )前体基因序列 ,并添加酶切位点及 polyT转录终止序列 ,经退火处理后形成双链结构 ,插入小干涉RNA(smallin terferingR... 目的　利用分子克隆技术 ,构建微RNA(microRNA ,miRNA)真核细胞载体。方法　人工合成小鼠肝脏特异的微RNA(miR 1 2 2 )前体基因序列 ,并添加酶切位点及 polyT转录终止序列 ,经退火处理后形成双链结构 ,插入小干涉RNA(smallin terferingRNA ,siRNA)表达载体 pAVU6 +2 7中 ,经酶切鉴定和测序证实后 ,构建成为miR 1 2 2真核表达载体 (pAVU6 +2 7 mir1 2 2 )。结果　合成的基因序列完全正确并成功克隆到真核表达载体pAVU6 +2 7上。结论　miR 1 2 2真核表达载体的构建 ,为进行真核细胞转染及miR 1 2 展开更多
关键词 微RNA 小干涉RNA 真核表达载体
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过氧亚硝基阴离子的研究进展 被引量：5
13
作者 陈敏 李强 陈彬 《生命的化学》 CAS CSCD 2003年第6期465-467,共3页
过氧亚硝基阴离子 (peroxynitriteanion ,ONOO- )是一氧化氮 (NO)和氧自由基 (O- ·2 )结合生成的。它可能是NO产生病理损伤作用的重要环节。它在休克、缺血 再灌注损伤、败血症、胰岛素依赖性糖尿病、动脉硬化及感染炎症等疾病中... 过氧亚硝基阴离子 (peroxynitriteanion ,ONOO- )是一氧化氮 (NO)和氧自由基 (O- ·2 )结合生成的。它可能是NO产生病理损伤作用的重要环节。它在休克、缺血 再灌注损伤、败血症、胰岛素依赖性糖尿病、动脉硬化及感染炎症等疾病中的作用已愈来愈受到重视。加强对ONOO- 生成途径和NO、O- ·2 与ONOO- 的相互作用的基础研究 ,以及ONOO- 的病理生理作用的研究 ,特别是开展针对抗ONOO- 损伤作用和有效清除体内ONOO- 的新药研制 ,不仅有助于揭示NO的细胞毒作用的分子机制 ,还有助于为治疗某些临床危征提供启示性思路。 展开更多
关键词 过氧亚硝基阴离子 ONOO^- 一氧化氮 NO 氧自由基 O2^-↑· 病理损伤 细胞毒作用 分子机制
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生物化学与分子生物学课程必须适应现代化要求 被引量：10
14
作者 江渝 彭家和 +1 位作者 钟小林 何凤田 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2004年第4期355-356,共2页
在教学内容、培养学生创新能力、运用多媒体及实验教学等方面采取了一系列改革措施,其目的是提高生物化学与分子生物学教学质量,学生普遍反应良好.
关键词 生物化学 分子生物学 教学改革 教学质量 教学手段 多媒体教育
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微RNA研究进展 被引量：7
15
作者 廖荣霞 周建新 《生命的化学》 CAS CSCD 2002年第4期324-326,共3页
近年来,相继发现一些具有调控功能的非编码微RNA,长度约22 nt,与基因表达、细胞周期乃至个体发育过程密切相关,可能对基因功能研究、人类疾病防治及生物进化探索有重要意义。
关键词 微RNA 研究进展 基因表达调控 非编码RNA
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双语教学在医学八年制生物化学教学中的改革探索 被引量：10
16
作者 龚薇 陈珊 +1 位作者 黄刚 何凤田 《现代医药卫生》 2012年第10期1577-1578,共2页
医学八年制教育模式目标是培养高素质复合型人才,熟练掌握和综合应用专业英语是八年制教学中的重点。生物化学是一门涵盖内容广泛的基础医学必修课程,与诸多医学基础学科广泛联系,相互交叉、相互渗透。在医学八年制生物化学教学中开展... 医学八年制教育模式目标是培养高素质复合型人才,熟练掌握和综合应用专业英语是八年制教学中的重点。生物化学是一门涵盖内容广泛的基础医学必修课程,与诸多医学基础学科广泛联系,相互交叉、相互渗透。在医学八年制生物化学教学中开展双语教学顺应了培养国际化高素质综合型人才的需要,为今后学生能在学习及工作中进行国际交流与合作打下坚实基础。本文从多年的探索及不断改革中探讨双语教学在医学八年制生物化学教学中的应用。 展开更多
关键词 教育改革 生物化学 院校 医学 双语教学
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双语和互动式教学在八年制临床医学生物化学教学中的探索与实践 被引量：10
17
作者 杨劲 何凤田 +1 位作者 曾益军 高敏 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第21期4116-4118,共3页
生物化学作为一门基础医学课,是任何学制医学专业学生的必修课,如何有效完成八年制对本课程的更高要求,需要探索适合本专业的教学方法。我们综合运用双语和互动教学法,扩大双语教学的授课范围并强化专业英语的掌握与使用,同时加强互动,... 生物化学作为一门基础医学课,是任何学制医学专业学生的必修课,如何有效完成八年制对本课程的更高要求,需要探索适合本专业的教学方法。我们综合运用双语和互动教学法,扩大双语教学的授课范围并强化专业英语的掌握与使用,同时加强互动,不仅使学生牢固掌握了课程的专业知识,也为更高层次的学习打下了良好的基础。通过对两届八年制学生《生物化学》双语和互动式教学模式的探索和尝试,目前已经取得了较好的效果。 展开更多
关键词 双语教学 互动教学 八年制 生物化学
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生物化学期末考试试卷的分析与评价 被引量：9
18
作者 赵力 李渝萍 +2 位作者 彭家和 闫小晶 何凤田 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2011年第3期231-233,共3页
分析评价临床医学2008级五年制本科2班学生的生物化学期末考试试卷,考试成绩呈负偏态分布,平均成绩为73.35分,难度为0.78,区分度为0.26,信度为0.88。试卷题型分布合理,试题总体难度适中,区分度尚可,信度高,较好地反映了学生的真实水平。
关键词 生物化学 试卷分析 难度 区分度
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生物化学设计性实验教学的探索与体会 被引量：9
19
作者 付晓红 彭家和 何凤田 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2010年第11期1093-1094,共2页
医学本科生物化学实验课在传统的验证性实验的基础上,增设了设计性实验,对教学方式和考核方式进行改革,激发了学生的学习兴趣和探索精神,培养了学生的创新意识和科研能力。在教学实践中不断改进和完善,提高了教学质量和效果。
关键词 生物化学 教学方法 设计性实验
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医学院校开设生物化学设计性实验的实践与探索 被引量：8
20
作者 陈岑曦 何凤田 《中华医学教育探索杂志》 2011年第4期440-442,共3页
设计性实验是一种以学生为主体、教师为引导的新型实验教学模式。为顺应医学院校生物化学实验教学改革的趋势，第三军医大学生化教研室结合医学院校实际教学情况，尝试开展生物化学设计性实验教学。实践结果表明，设计性实验教学有利于... 设计性实验是一种以学生为主体、教师为引导的新型实验教学模式。为顺应医学院校生物化学实验教学改革的趋势，第三军医大学生化教研室结合医学院校实际教学情况，尝试开展生物化学设计性实验教学。实践结果表明，设计性实验教学有利于学生综合素质的提高，是高素质医学人才培养的一条重要途径。 展开更多
关键词 设计性实验 生物化学 实验教学
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