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外泌体源性miR-124对创伤性脑损伤急性期小胶质细胞活化状态的作用研究 被引量：10
1
作者 杨永祥 叶玉勤 +4 位作者 苏鑫洪 张欣 孔垂广 白威 贺晓生 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1189-1194,共6页
目的 探讨外泌体源性微小RNA(miR)-124对创伤性脑损伤(TBI)大鼠急性期损伤区脑组织中小胶质细胞活化状态的作用,为TBI后神经炎症的干预提供实验依据.方法 (1)将体外培养的HEK293细胞分为miR-124转染组和对照组,分别转染载有miR-124的质... 目的 探讨外泌体源性微小RNA(miR)-124对创伤性脑损伤(TBI)大鼠急性期损伤区脑组织中小胶质细胞活化状态的作用,为TBI后神经炎症的干预提供实验依据.方法 (1)将体外培养的HEK293细胞分为miR-124转染组和对照组,分别转染载有miR-124的质粒和空质粒,2~3周后分离出单克隆细胞系,继续培养2周后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测2组细胞miR-124的含量;应用美国系统生物科技(SBI)试剂盒从2组细胞上清液中提取外泌体,电镜下观察外泌体的形态,应用Western blotting检测2组外泌体表面标记分子CD63的表达,RT-PCR检测2组外泌体内miR-124的含量.(2)60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(n=12)、TBI组(n=24)和外泌体组(n=24),后2组大鼠应用控制性皮层撞击(CCl)法建立TBI模型.造模后24 h,外泌体组大鼠通过尾静脉注入外泌体(3×109个微粒),假手术组和TBI组大鼠注入等量溶剂.造模后3 d,应用RT-PCR检测3组大鼠损伤区脑组织miR-124的表达,流式细胞术(FCM)检测脑组织Iba-1^+/CD32+和Iba-1^+/CD206^+小胶质细胞所占百分比,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测脑组织促炎因子白介素(IL)-1、IL-6和抑炎因子IL-4、IL-10的表达.结果 (1)RT-PCR检测显示miR-124转染组细胞miR-124的表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).电镜下显示有直径约100 nm的球形微小颗粒,并有明显的膜性结构;Western blotting检测显示miR-124转染组外泌体表面标记分子CD63的表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测显示miR-124转染组外泌体miR-124的含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).(2)外泌体组大鼠损伤脑组织中miR-124的表达高于TBI组和假手术组,差异有统计学意义(P<0.05).与假手术组比较,TBI组大鼠损伤脑组织Iba-1^+/CD32^+和Iba-1^+/CD206^+小胶质细胞所占百分比增加、IL-1、IL-6和IL-4、IL-10的浓度增加,差异有统计学意义(P<0.05);与TBI组 展开更多
关键词 外泌体 微小RNA-124 创伤性脑损伤 小胶质细胞 细胞活化
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间充质干细胞来源的外泌体与创伤性脑损伤的研究进展 被引量：3
2
作者 杨永祥 孔垂广 贺晓生 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2019年第12期1289-1293,共5页
外泌体是细胞分泌的、直径为30~100 nm的囊性小泡,其内含有蛋白质、脂类、mRNAs和miRNAs等多种分子。其中,来源于间充质细胞(MSCs)的外泌体以其对某些神经系统疾病具有干预和治疗潜能而备受关注。近期研究表明,将MSCs来源的外泌体注入... 外泌体是细胞分泌的、直径为30~100 nm的囊性小泡,其内含有蛋白质、脂类、mRNAs和miRNAs等多种分子。其中,来源于间充质细胞(MSCs)的外泌体以其对某些神经系统疾病具有干预和治疗潜能而备受关注。近期研究表明,将MSCs来源的外泌体注入创伤性脑损伤(TBI)动物体内具有减轻神经炎性反应、促进神经再生及恢复神经功能的作用。鉴于MSCs来源的外泌体具有体积微小、不能增殖、易保存及免疫原性低等诸多优点,可能成为一种治疗TBI的新策略。本文将对MSCs来源外泌体的生物学特性与功能进行阐述,并对其与TBI后神经炎性反应、神经再生及治疗前景的关系进行探讨。 展开更多
关键词 外泌体 创伤性脑损伤 神经炎性反应 神经系统疾病 神经再生 间充质干细胞 间充质细胞 TBI
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高迁移率族蛋白1拮抗剂BoxA对血管性痴呆大鼠急性期海马区域神经炎症的抑制作用 被引量：1
3
作者 黑悦 魏礼洲 +4 位作者 依西才 周跃飞 玉石 高大宽 刘卫平 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第9期1618-1623,共6页
目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)拮抗剂BoxA脑室立体定向注射对双侧颈总动脉闭塞(2VO)后大鼠海马区域神经炎症(血脑屏障通透性、小胶质细胞的激活以及炎症因子水平等)的抑制作用。方法:60只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠分为假手术组(即S... 目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)拮抗剂BoxA脑室立体定向注射对双侧颈总动脉闭塞(2VO)后大鼠海马区域神经炎症(血脑屏障通透性、小胶质细胞的激活以及炎症因子水平等)的抑制作用。方法:60只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠分为假手术组(即Sham组)、PBS组以及BoxA组(各组n=20),分别在行2VO(n=40,正常手术)或假手术(n=20,仅暴露不结扎)后,立即用BoxA(10μg在10uL PBS溶液中,n=20)或者等体积PBS(n=20)立体定向注射到左侧侧脑室中。造模3 d后,用HMGB1和NeuN免疫荧光双染,western blot观察HMGB1出核现象,伊文思蓝(EB)染色和脑水含量测量评价血脑屏障(BBB)通透性,Iba1免疫荧光染色观察小胶质细胞活化,定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测炎症细胞因子(白介素1β(Interleukin-1β, IL-1β)和白介素6(In-terleukin-6, IL-6)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α, TNF-α))的基因表达水平。结果:相比Sham组,PBS组海马CA1亚区HMGB1阳性细胞核(%)以及HMGB1&NeuN阳性细胞/HMGB1阳性细胞(%)显著下降(P<0.01),而BoxA组以上改变较PBS组部分减少(P<0.05)。PBS组EB渗漏、脑含水量均较Sham组显著增加(P<0.001),而BoxA组以上指标均较PBS组明显减轻(P<0.05)。PBS组Iba1阳性细胞相比Sham组明显增多(P<0.01),且炎症因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)表达显著增高(P<0.05);而相比PBS组,BoxA组Iba1阳性细胞表达减少((P<0.05),且炎症因子(IL-1β、IL-6 and TNF-α表达明显减少(P<0.05)。结论:HMGB1抑制剂BoxA立体定向注射能够有效缓解急性期血管性痴呆大鼠海马区域的神经炎症反应。 展开更多
关键词 血管性痴呆 双侧颈总动脉结扎 BoxA 高迁移率族蛋白1 小胶质细胞
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