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非人灵长类动物精子冻存技术的研究进展
1
作者 范晓静 魏雅岚 王心睿 《生命科学研究》 CAS 2023年第4期330-337,共8页
随着生物医学技术的发展,应用非人灵长类动物模型进行基础科学研究日益广泛。与此同时,由于栖息地破坏、狩猎和基因隔离,许多非人灵长类动物濒临灭绝。因此,改进非人灵长类动物精子冻存技术对物种遗传资源的保藏具有重要的意义。本文概... 随着生物医学技术的发展,应用非人灵长类动物模型进行基础科学研究日益广泛。与此同时,由于栖息地破坏、狩猎和基因隔离,许多非人灵长类动物濒临灭绝。因此,改进非人灵长类动物精子冻存技术对物种遗传资源的保藏具有重要的意义。本文概述了非人灵长类动物的精液特征,介绍了精液液化和冷冻精子质量评估的方法,分析了冷冻保护剂、冷冻稀释液及冷冻方法等因素对精子冻存效果的影响,总结了目前非人灵长类精子冷冻常用的冷冻保存液和冷冻方法,并对相关精子参数进行了比较,同时探讨了非人灵长类动物精子冻存研究面临的困境,并提出了可行的方案。总之,本文综述了近年来非人灵长类动物精子冻存的重要研究成果,对开发新的冷冻保护剂及改进冷冻技术具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 非人灵长类动物 精液液化 精子冻存 冷冻保护剂 冷冻稀释液
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CRISPR/Cas9介导的KIFC1基因敲除对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响
2
作者 范晓静 魏雅岚 +2 位作者 叶洲杰 朱丽萍 王心睿 《肿瘤防治研究》 CAS 2023年第11期1051-1058,共8页
目的探讨KIFC1基因在宫颈癌细胞中的功能及对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法设计靶向KIFC1基因的sgRNAs并基于pSpCas9(BB)-2A-GFP载体构建重组质粒,共转染至He La细胞。通过流式细胞分选、有限稀释和测序验证筛选单克隆敲除细胞株。采... 目的探讨KIFC1基因在宫颈癌细胞中的功能及对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法设计靶向KIFC1基因的sgRNAs并基于pSpCas9(BB)-2A-GFP载体构建重组质粒,共转染至He La细胞。通过流式细胞分选、有限稀释和测序验证筛选单克隆敲除细胞株。采用RT-qPCR、Western blot和免疫荧光法检测敲除细胞的KIFC1转录及蛋白表达水平,利用相差显微成像、荧光共聚焦显微成像观察细胞核、微管骨架等细胞表型。通过生长曲线绘制、EdU标记、吖啶橙染色分析细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡情况。结果KIFC1基因缺失导致He La细胞形态结构发生显著变化,多核、微核及异常微管骨架的细胞明显增加,细胞周期紊乱,细胞晚期凋亡数量显著升高,细胞增殖能力下降(均P<0.05)。结论KIFC1基因缺失影响He La细胞微管骨架的组装并形成异常延伸和细胞分裂,进而导致细胞核形态异常、染色质丢失、细胞周期停滞、凋亡增加。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 KIFC1 宫颈癌 He La细胞 细胞凋亡 细胞分裂
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