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酿酒酵母ADH3基因的敲除 被引量:9
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作者 宋浩雷 郭晓贤 +2 位作者 杨月梅 江贤章 黄建忠 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期28-32,共5页
设计含有与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编码乙醇脱氢酶Ⅲ的ADH3基因ORF两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除组件。转化酿酒酵母YS3(Saccharomyces cerevisiae),并将质粒pSH65转入阳性克隆... 设计含有与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编码乙醇脱氢酶Ⅲ的ADH3基因ORF两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除组件。转化酿酒酵母YS3(Saccharomyces cerevisiae),并将质粒pSH65转入阳性克隆子。半乳糖诱导表达Cre酶切除Kanr基因,在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,在原ORF处留下一个loxP位点,获得ADH3单倍体缺陷型菌株。利用同样的方法再次敲除双倍体的另一个等位基因。最终获得ADH3双倍体基因缺陷型突变株YS3-ADH3。 展开更多
关键词 酿酒酵母 乙醇脱氢酶 ADH3 基因敲除 PCR
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耐有机溶剂极端微生物的耐受机制及应用 被引量:4
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作者 江欢 舒正玉 +2 位作者 吴继光 黄平 黄建忠 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1744-1749,共6页
耐有机溶剂微生物是一类新颖的极端微生物,直到20世纪80年代才被系统地研究。它们通过各种耐受机制,有效抵御或降低有机溶剂对其细胞产生的毒害作用。因此,在全细胞催化、环境污染治理等领域,耐有机溶剂极端微生物具有广阔的工业应用前... 耐有机溶剂微生物是一类新颖的极端微生物,直到20世纪80年代才被系统地研究。它们通过各种耐受机制,有效抵御或降低有机溶剂对其细胞产生的毒害作用。因此,在全细胞催化、环境污染治理等领域,耐有机溶剂极端微生物具有广阔的工业应用前景。此外,深入透彻地了解耐有机溶剂极端微生物的各种耐受机制,有助于利用基因工程技术改造和优化现有耐有机溶剂极端微生物的各种性能,进一步拓展其工业应用领域。本文将从囊泡外排、改变细胞膜磷脂结构和组成等4个方面概述近年来耐有机溶剂极端微生物的耐受机制研究新进展,并介绍它们在全细胞催化等领域的应用。 展开更多
关键词 极端微生物 耐有机溶剂 机制 应用
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新型微生物脂肪酶资源开发 被引量:4
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作者 舒正玉 薛龙吟 +2 位作者 林瑞凤 蔡少丽 黄建忠 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期747-752,共6页
微生物脂肪酶是一类重要的工业生物催化剂,广泛应用于工农业生产的诸多领域。筛选、挖掘和开发出具有新型催化活性或高稳定性的微生物脂肪酶一直是脂肪酶研究的重点。本文从极端微生物、宏基因组技术、基因组数据库挖掘、定向进化技术... 微生物脂肪酶是一类重要的工业生物催化剂,广泛应用于工农业生产的诸多领域。筛选、挖掘和开发出具有新型催化活性或高稳定性的微生物脂肪酶一直是脂肪酶研究的重点。本文从极端微生物、宏基因组技术、基因组数据库挖掘、定向进化技术、固定化技术和化学修饰技术等方面介绍了当前新型脂肪酶开发的途径和方法。 展开更多
关键词 脂肪酶 极端微生物 宏基因组 基因组数据库 蛋白质工程 固定化 化学修饰
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青霉素酰化酶表达调控的研究进展 被引量:2
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作者 蒋咏梅 章文贤 魏东芝 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期34-37,共4页
青霉素酰化酶(penicillin acylase,PAC)是抗生素工业的重要酶。它在大肠杆菌中需经过复杂的转录、翻译和后翻译才能成熟,且后翻译过程对活性酶的最终形成影响很大。在阐述PAC的苯乙酸诱导机制的基础上,详细论述了PAC的后翻译过程,并对... 青霉素酰化酶(penicillin acylase,PAC)是抗生素工业的重要酶。它在大肠杆菌中需经过复杂的转录、翻译和后翻译才能成熟,且后翻译过程对活性酶的最终形成影响很大。在阐述PAC的苯乙酸诱导机制的基础上,详细论述了PAC的后翻译过程,并对几种主要的影响因素进行了分析。 展开更多
关键词 青霉素酰化酶 大肠杆菌 诱导机制 后翻译过程 影响因素
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提高蛋白质在米曲霉中表达量的策略 被引量:1
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作者 张建军 蔡容华 +1 位作者 李强 施碧红 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期111-115,共5页
米曲霉是一种重要的微生物,在食品、酿造、商业酶和医用蛋白的生产中具有广泛的应用,该菌被美国食品与药品管理局(FDA)认定为GRAS(generally regarded as safe)级。讨论了提高同源和异源蛋白在米曲霉中表达量的几种策略,包括使用强启动... 米曲霉是一种重要的微生物,在食品、酿造、商业酶和医用蛋白的生产中具有广泛的应用,该菌被美国食品与药品管理局(FDA)认定为GRAS(generally regarded as safe)级。讨论了提高同源和异源蛋白在米曲霉中表达量的几种策略,包括使用强启动子、多拷贝编码基因、优化培养基和超表达血红素结构域(HBD)等。异源蛋白容易被米曲霉蛋白酶降解,表达量往往较低,因此使用蛋白酶缺陷型宿主菌是非常必要的。另外将外源蛋白与米曲霉高分泌蛋白融合表达也是提高异源蛋白产量的有效途径。 展开更多
关键词 米曲霉 蛋白质 同源表达 异源表达 蛋白酶缺陷型
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宠物犬肠道可培养细菌耐药性种类及其分布 被引量:3
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作者 Hafeez ul Haq 张沁怡 +9 位作者 黎烨 陈明波 薛海曌 罗成松 方行 刘平平 蒋宁成 张婷 熊娟 田宝玉 《福建农业科技》 2020年第4期9-16,共8页
为探明宠物犬肠道微生物携带抗生素耐药性的流行病学及阐释饲养动物中微生物抗性与人病原微生物抗性基因的关系。采用细菌分离培养鉴定以及影印平板技术对宠物犬肠道可培养肠杆菌携带的耐药性及其种类、多样性和生态分布进行了调查。结... 为探明宠物犬肠道微生物携带抗生素耐药性的流行病学及阐释饲养动物中微生物抗性与人病原微生物抗性基因的关系。采用细菌分离培养鉴定以及影印平板技术对宠物犬肠道可培养肠杆菌携带的耐药性及其种类、多样性和生态分布进行了调查。结果表明:宠物犬肠道可培养细菌具有较高的耐药性比例和多重耐药性。其中大肠杆菌对氨苄西林、磺胺类药物、氯霉素、链霉素和四环素等较早使用的药物耐药率较高,反而对进入临床时间较短的头孢菌素类药物相对较敏感。在调查的细菌中几乎所有的细菌至少有1种抗生素抗性,可分离的肠道细菌中一半以上具有5种以上的抗生素抗性。综上所述,肠道微生物抗性的产生与抗生素的使用时间紧密相关,并且宠物犬肠道可培养细菌的抗性广泛分布,表明宠物很可能成为耐药性基因在环境和人类病原细菌间传播的潜在途径。 展开更多
关键词 宠物犬 抗生素 肠道可培养细菌 耐药性
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