三七治疗肾脏病的药理与临床研究进展 被引量：9

1

作者 张恒远 金建生 《医学综述》 2006年第23期1466-1467,共2页

三七具有多种生物学活性。三七可通过对肾小管上皮细胞及肾成纤维细胞的作用延缓肾间质纤维化的进展。其药理作用还包括调节免疫、影响炎性因子表达、清除氧自由基、钙拮抗作用、影响物质代谢和改善微循环等。三七在临床上应用于慢性肾... 三七具有多种生物学活性。三七可通过对肾小管上皮细胞及肾成纤维细胞的作用延缓肾间质纤维化的进展。其药理作用还包括调节免疫、影响炎性因子表达、清除氧自由基、钙拮抗作用、影响物质代谢和改善微循环等。三七在临床上应用于慢性肾小球肾炎、肾病综合征、糖尿病肾病及慢性肾衰竭等各种肾脏疾病的治疗,取得了良好的疗效。对三七的药理和临床研究的进一步深入,有望为肾脏疾病的防治开辟的途径。 展开更多

关键词 三七 三七总甙 肾脏疾病 药理作用 临床应用

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CD40发夹siRNA真核表达载体构建及其对CA46细胞CD40表达的影响 被引量：5

2

作者 陈凌 郑祥雄 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期163-166,共4页

　目的: 构建人类CD40膜蛋白siRNA的真核表达载体, 观察其对CA46细胞上CD40表达、细胞增殖能力和凋亡的影响。方法: 合成两条编码发夹siRNA序列的单链DNA,并将其克隆到pSilenCircle载体中, 构建含目的基因片段的重组质粒siCD40 /pSilenC... 　目的: 构建人类CD40膜蛋白siRNA的真核表达载体, 观察其对CA46细胞上CD40表达、细胞增殖能力和凋亡的影响。方法: 合成两条编码发夹siRNA序列的单链DNA,并将其克隆到pSilenCircle载体中, 构建含目的基因片段的重组质粒siCD40 /pSilenCircle。以同样的方法, 分别构建相对应的编码反义RNA及无关基因的重组质粒antiCD40 /pSilenCir cle和siFly/pSilenCircle。以上述重组质粒分别瞬时转染CA46细胞后, 用流式细胞仪检测CA46细胞上CD40的表达和细胞凋亡情况, 用MTS法(改良的MTT法)测定细胞的增殖能力。结果: ①成功地构建了两个CD40发夹siRNA的真核表达载体siCD40 /pSilenCircle、两个相对应的反义RNA真核表达载体antiCD40 /pSilenCircle和无关基因重组质粒siFly/pSilenCir cle。②与siFly/pSilenCircle转染组相比较, siCD40 /pSilenCir cle转染组和antiCD40 /pSilenCircle转染组CA46细胞上CD40的表达均明显减少, 但细胞的增殖能力和凋亡未发现明显变化。结论: 构建的两个CD40发夹siRNA的真核表达载体siCD40 /pSilenCircle, 可有效地抑制CA46细胞上CD40分子的表达, 但不影响细胞的增殖和凋亡。RNA干扰技术可望作为一种有效地调控基因功能的方法。 展开更多

关键词 RNAI SIRNA CD40 载体构建 CA46细胞

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维持血液透析患者微炎症状态相关因子与低血清白蛋白血症的关系 被引量：4

3

作者 金建生 郑祥雄 +3 位作者 张明 叶洪 林庆友 李频 《福建医科大学学报》 2006年第2期161-163,共3页

目的探讨维持血液透析(MHD)患者微炎症状态相关因子[血清中肿瘤坏死因子(TNFα)、可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)和白细胞介素6(IL6)]与低血清白蛋白(ALB)血症的关系。方法选择39例MHD患者,并根据ALB水平分为2组:ALB<35g/L组(27例)和... 目的探讨维持血液透析(MHD)患者微炎症状态相关因子[血清中肿瘤坏死因子(TNFα)、可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)和白细胞介素6(IL6)]与低血清白蛋白(ALB)血症的关系。方法选择39例MHD患者,并根据ALB水平分为2组:ALB<35g/L组(27例)和ALB≥35g/L组(12例)。应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TNFα、sTNFR和IL6水平,与30例健康体检者(对照组)进行对照。结果MHD患者TNFα、sTNFR和IL6水平高于对照组,且ALB<35g/L组TNFα、sTNFR和IL6水平较ALB≥35g/L组升高更为明显,组间比较有统计学意义(P<0.05);ALB与TNFα、sTNFR及IL6浓度呈负相关。结论MHD患者血清TNFα、sTNFR和IL6水平升高,存在微炎症状态。低ALB血症与高TNFα、sTNFR及IL6浓度相关。 展开更多

关键词 血液透析 低白蛋白血症 肿瘤坏死因子 受体 肿瘤坏死因子 白细胞介素-6

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三七总甙对氧化低密度脂蛋白诱导系膜细胞TGF-β_1与单核细胞趋化蛋白-1表达的影响 被引量：2

4

作者 张恒远 金建生 +2 位作者 陈健实 郑祥雄 李频 《福建医科大学学报》 2008年第1期13-17,共5页

目的探讨三七总甙(PNS)对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导大鼠肾小球系膜细胞表达转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,随机分为对照组、诱导组(OX... 目的探讨三七总甙(PNS)对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导大鼠肾小球系膜细胞表达转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,随机分为对照组、诱导组(OX-LDL50μg/mL)和PNS200,400,800μg/mL组。半定量RT-PCR检测TGF-β1与MCP-1的mRNA表达,ELISA检测TGF-β1与MCP-1蛋白含量,免疫细胞化学观察NF-κBp65核转位。结果OX-LDL诱导系膜细胞TGF-β1与MCP-1表达增强,NF-κB活化,p65核转位率增加。PNS干预后,TGF-β1与MCP-1表达及NF-κBp65核转位率较诱导组明显下降。结论PNS抑制OX-LDL诱导的系膜细胞TGF-β1与MCP-1表达;其机制可能与影响NF-κB核转位有关。 展开更多

关键词 三七皂甙 脂蛋白类 LDL 肾小球膜 细胞 培养的 NF-kB 转化核因子β 单核细胞化学吸引蛋白质1

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白细胞介素33——具有免疫调节作用的白细胞介素1家族新成员 被引量：4

5

作者 刘宁 郑祥雄 《医学综述》 2009年第22期3376-3378,共3页

白细胞介素33(IL-33)是最近通过生物信息学分析发现的一种IL-1家族的细胞因子。IL-33分布广泛,在胃、肺、脊髓、脑和皮肤中高表达,在如Crohn病的患者肠道、类风湿关节炎患者关节滑膜等慢性炎症组织中也能检测到。IL-33具有双重作用,作... 白细胞介素33(IL-33)是最近通过生物信息学分析发现的一种IL-1家族的细胞因子。IL-33分布广泛,在胃、肺、脊髓、脑和皮肤中高表达,在如Crohn病的患者肠道、类风湿关节炎患者关节滑膜等慢性炎症组织中也能检测到。IL-33具有双重作用,作为分泌性细胞因子能够参与调节Th2免疫反应,并具有前炎性因子的作用;作为核因子则能定位于细胞核内,起转录抑制作用。IL-33在类风湿关节炎等慢性炎性疾病过程中扮演重要角色,对其的研究将为理解这些疾病的发病机制,寻找治疗靶点提供新的思路。 展开更多

关键词 白细胞介素33 细胞因子 类风湿关节炎

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骨桥蛋白与自身免疫性疾病的关系 被引量：2

6

作者 刘淑毓 郑祥雄 《医学综述》 2006年第20期1224-1227,共4页

骨桥蛋白(OPN)是一种细胞外基质蛋白。近年来的研究认为,OPN可作为炎性因子参与免疫应答,在多种自身免疫性疾病中表达异常,在疾病的发生发展中起着关键性作用。研究OPN的作用将有利于自身免疫性疾病发病机制的探索,并且为临床治疗提供... 骨桥蛋白(OPN)是一种细胞外基质蛋白。近年来的研究认为,OPN可作为炎性因子参与免疫应答,在多种自身免疫性疾病中表达异常,在疾病的发生发展中起着关键性作用。研究OPN的作用将有利于自身免疫性疾病发病机制的探索,并且为临床治疗提供理论基础。 展开更多

关键词 骨桥蛋白 自身免疫 基因表达调控

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呼吸道感染中白假丝酵母菌的致病性与细胞外水解酶关系 被引量：3

7

作者 陈凌 赵亮 陈贻锴 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期50-53,共4页

将84株呼吸道分离的白假丝酵母菌分为致病组和非致病组,采用卵黄培养基法检测细胞外磷脂酶的活力,用牛血清白蛋白琼脂培养基法检法分泌型天冬氨酸蛋白酶的活力,并用RT-PCR的方法检测这2种酶相关基因PLB1和SAP2的表达情况,分析其组间差别... 将84株呼吸道分离的白假丝酵母菌分为致病组和非致病组,采用卵黄培养基法检测细胞外磷脂酶的活力,用牛血清白蛋白琼脂培养基法检法分泌型天冬氨酸蛋白酶的活力,并用RT-PCR的方法检测这2种酶相关基因PLB1和SAP2的表达情况,分析其组间差别,结果表明致病组菌株的分泌型天冬氨酸蛋白酶的活力要高于非致病组(P=0.034<0.05),细胞外磷脂酶活力二组未见差别,致病组的PLB1和SAP2基因的表达均高于非致病组(P<0.05),PLB1和SAP2的表达存在着明显的正相关(r=0.776,P<0.01),提示分泌型天冬氨酸蛋白酶是呼吸道白假丝酵母菌重要的毒力因子,PLB1和SAP2的表达上调可能影响菌株的毒力,这2个基因的表达量有正相关的关系。 展开更多

关键词 白假丝酵母菌 磷脂酶 蛋白酶

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白色假丝酵母菌耐药性与耐药基因表达及蛋白酶的关系 被引量：2

8

作者 赵亮 陈凌 陈贻锴 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期348-350,共3页

目的研究呼吸道白色假丝酵母菌耐药性与耐药相关基因表达及细胞外蛋白水解酶的关系。方法用NCCLSM27-A方案中的微量液基稀释法检测99株呼吸道分离的白色假丝酵母菌对氟康唑和伊曲康唑的最小抑菌浓度(MIC),RT-PCR半定量检测耐药相关基因C... 目的研究呼吸道白色假丝酵母菌耐药性与耐药相关基因表达及细胞外蛋白水解酶的关系。方法用NCCLSM27-A方案中的微量液基稀释法检测99株呼吸道分离的白色假丝酵母菌对氟康唑和伊曲康唑的最小抑菌浓度(MIC),RT-PCR半定量检测耐药相关基因CDR1和MDR1的表达,牛血清清蛋白平板法检测细胞性蛋白酶活力。结果99株菌对氟康唑的耐药率为4%,对伊曲康唑的耐药率为12.1%,CDR1的表达在氟康唑的剂量依赖性敏感组高于敏感组和耐药组(P<0.05),蛋白酶的活力在氟康唑剂量依赖性敏感组高于敏感组(P<0.05)。结论菌株的耐药性除与CDR1的过表达有关外,还与其他耐药机制有关,耐药程度不同的菌株细胞性蛋白酶活力有差别,提示菌株的耐药性与毒力之间可能有关联。 展开更多

关键词 白色假丝酵母菌 氟康唑 伊曲康唑 蛋白酶

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CD80-IgG1Fc段融合蛋白真核表达载体的构建及表达 被引量：3

9

作者 李和军 李频 +1 位作者 周小玲 郑祥雄 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期40-42,46,共4页

目的构建人CD80-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在CHO细胞中进行表达。方法应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建人CD80膜外段-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并将其转染入CHO细胞株... 目的构建人CD80-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在CHO细胞中进行表达。方法应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建人CD80膜外段-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并将其转染入CHO细胞株并筛选,进行稳定表达。通过Western blot及ELISA法,检测融合蛋白的表达。结果成功地构建了真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcD-NA3.1(+),并建立CHO细胞稳定表达株。Western blot及ELISA法检测到细胞培养上清中有融合蛋白的表达。结论成功地构建了人CD80膜外段-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在CHO细胞中稳定表达,为下一步抗肿瘤的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 CD80 IGG1 FC段 融合蛋白 基因克隆 真核表达

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CD40-IgG1Fc融合蛋白真核表达载体的构建及表达 被引量：2

10

作者 张家永 李和军 +2 位作者 李频 周小玲 郑祥雄 《福建医科大学学报》 2007年第2期105-108,共4页

目的构建人CD40-IgG1Fc融合蛋白的真核表达载体CD40-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)表达。方法应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建人CD40膜外段和IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD40-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),将其转染入... 目的构建人CD40-IgG1Fc融合蛋白的真核表达载体CD40-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)表达。方法应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建人CD40膜外段和IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD40-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),将其转染入CHO细胞株并筛选,进行稳定表达。通过RT-PCR、Western blot法及ELISA法证实融合基因的表达。结果成功构建真核表达载体CD40-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并建立CHO细胞稳定表达株。Western blot及ELISA法检测到细胞培养上清中有融合蛋白的表达。结论通过基因工程生产的人CD40-IgG1Fc融合蛋白,能够特异性阻断CD40-CD40L的相互作用。 展开更多

关键词 抗原 CD40 重组融合蛋白质类 基因表达 克隆 分子

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CD80融合蛋白修饰的H22细胞激发抗肿瘤免疫 被引量：2

11

作者 李和军 李频 +1 位作者 郑祥雄 周小玲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期652-654,共3页

目的探讨CD80-IgG1 Fc段融合蛋白修饰的H22细胞对淋巴细胞抗肿瘤免疫的影响。方法应用福建省临床免疫研究所构建的CD80-IgG1 Fc段融合蛋白,修饰小鼠肝癌细胞株H22细胞,用流式细胞术检测修饰的H22细胞上CD80的表达。将修饰的H22细胞与小... 目的探讨CD80-IgG1 Fc段融合蛋白修饰的H22细胞对淋巴细胞抗肿瘤免疫的影响。方法应用福建省临床免疫研究所构建的CD80-IgG1 Fc段融合蛋白,修饰小鼠肝癌细胞株H22细胞,用流式细胞术检测修饰的H22细胞上CD80的表达。将修饰的H22细胞与小鼠脾细胞悬液混合后进行培养,分别应用MTT比色法、乳酸脱氢酶释放试验,检测经CD80-IgG1 Fc段融合蛋白修饰的H22细胞对脾淋巴细胞增殖及其细胞毒性的影响。结果CD80-IgG1 Fc段融合蛋白可有效地结合于H22细胞膜上(P<0.05),融合蛋白修饰的H22细胞可明显刺激脾淋巴细胞活化增殖并增强CTL的细胞毒活性(P<0.05)。结论CD80在抗肿瘤免疫中起着重要作用,用CD80-IgG1 Fc段融合蛋白修饰的H22细胞能明显增强淋巴细胞的特异性抗肿瘤免疫,为CD80用于肿瘤免疫治疗的研究提供了实验依据,为下一步体内免疫治疗肿瘤奠定了基础。 展开更多

关键词 CD80 融合蛋白 肿瘤免疫

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CD32在人肝癌细胞株上的表达 被引量：2

12

作者 李和军 刘宁 +1 位作者 李频 郑祥雄 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期498-499,共2页

目的检测CD32在人肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7404、HepG2上的表达,探索其在肿瘤免疫治疗中的应用价值。方法分别应用RT-PCR方法、流式细胞术检测3种肝癌细胞株上CD32的表达情况,以u937为阳性对照。结果u937高表达CD32,而肝癌细胞株SMMC-... 目的检测CD32在人肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7404、HepG2上的表达,探索其在肿瘤免疫治疗中的应用价值。方法分别应用RT-PCR方法、流式细胞术检测3种肝癌细胞株上CD32的表达情况,以u937为阳性对照。结果u937高表达CD32,而肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7404、HepG2未检测到CD32的表达。结论肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7404、HepG2不表达CD32,应用基因工程方法调节肿瘤细胞上不同亚型CD32的表达,或许可以激发机体抗肿瘤免疫,成为肿瘤免疫治疗的新途径。 展开更多

关键词 CD32 肝癌细胞 肿瘤免疫治疗

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CD80-IgG1Fc融合蛋白修饰的HepG2细胞对淋巴细胞抗肿瘤免疫的影响 被引量：1

13

作者 李频 李和军 +2 位作者 张家永 石国勋 郑祥雄 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期745-747,共3页

目的:探讨CD80-IgG1Fc段融合蛋白修饰的HepG2细胞对淋巴细胞抗肿瘤免疫的影响。方法:应用福建省临床免疫研究所构建的CD80-IgG1Fc段融合蛋白,修饰肝癌细胞株HepG2细胞,用流式细胞术检测修饰的HepG2细胞上CD80的表达。将修饰的HepG2细胞... 目的:探讨CD80-IgG1Fc段融合蛋白修饰的HepG2细胞对淋巴细胞抗肿瘤免疫的影响。方法:应用福建省临床免疫研究所构建的CD80-IgG1Fc段融合蛋白,修饰肝癌细胞株HepG2细胞,用流式细胞术检测修饰的HepG2细胞上CD80的表达。将修饰的HepG2细胞与健康人外周血淋巴细胞混合后进行培养,分别应用MTT比色法、乳酸脱氢酶释放试验;检测经CD80-IgG1Fc段融合蛋白修饰的HepG2细胞对外周血淋巴细胞增殖及其细胞毒性的影响。结果:CD80-IgG1Fc段融合蛋白可有效地结合于HepG2细胞膜上,结合的量在一定范围内与融合蛋白的浓度呈正相关(P<0.05)。融合蛋白修饰的HepG2细胞可明显刺激外周血淋巴细胞活化增殖并增强CTL的细胞毒活性(P<0.05)。结论:CD80在抗肿瘤免疫中起着重要作用,用CD80-IgG1Fc段融合蛋白修饰的HepG2肿瘤细胞能明显增强淋巴细胞的特异性抗肿瘤免疫,为CD80用于肿瘤免疫治疗的研究提供了实验依据。 展开更多

关键词 CD80 融合蛋白 肿瘤免疫

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三七总苷对氧化低密度脂蛋白诱导大鼠系膜细胞的影响 被引量：1

14

作者 金建生 张恒远 +2 位作者 陈健实 郑祥雄 李频 《中国中西医结合肾病杂志》 2008年第2期126-129,I0002,共5页

目的：探讨三七总苷（PNS）对氧化低密度脂蛋白（OX-LDL）诱导大鼠肾小球系膜细胞合成细胞外基质（ECM）、表达转化生长因子-β1（TGF-β1）的影响。方法：采用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原（ColⅣ）... 目的：探讨三七总苷（PNS）对氧化低密度脂蛋白（OX-LDL）诱导大鼠肾小球系膜细胞合成细胞外基质（ECM）、表达转化生长因子-β1（TGF-β1）的影响。方法：采用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原（ColⅣ）及TGF-β1的mRNA表达;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测FN、ColⅣ及TGF-β1的蛋白含量;免疫细胞化学观察核转录因子-κB（NF-κB）p65核转位。结果：OX-LDL（50μg/ml）诱导系膜细胞FN、ColⅣ及TGF-β1表达增强,NF-κB活化,p65核转位率增加;PNS（200~800μg/ml）作用一定时间后,FN、ColⅣ及TGF-β1表达降低,NF-κBp65核转位率明显低于诱导组。结论：PNS能够抑制OX-LDL诱导的系膜细胞FN、ColⅣ合成,并抑制TGF-β1表达;这种效应可能与影响NF-κB核转位有关。 展开更多

关键词 三七总苷 氧化低密度脂蛋白 系膜细胞 细胞外基质 转化生长因子-Β1 核转录因子-ΚB

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雷帕霉素对糖尿病肾病大鼠病理结构及结缔组织生长因子表达的影响 被引量：1

15

作者 李琳琳 卢衡 郑祥雄 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第15期1909-1912,共4页

目的观察雷帕霉素对糠尿病肾病(DN)的保护作用。方法应用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。24只SD大鼠随机分为3组:对照组、糖尿病组、雷帕霉素组。第5周起雷帕霉素组予雷帕霉素1 mg.kg-1.d-1干预8 w。12 w末观察各组大鼠血糖、内生... 目的观察雷帕霉素对糠尿病肾病(DN)的保护作用。方法应用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。24只SD大鼠随机分为3组:对照组、糖尿病组、雷帕霉素组。第5周起雷帕霉素组予雷帕霉素1 mg.kg-1.d-1干预8 w。12 w末观察各组大鼠血糖、内生肌酐清除率(Ccr)、24 h尿微量白蛋白(24hUalb)、肾重/体重等的变化。光镜观察肾组织病理变化并测定肾小球平均体积及系膜基质扩张指数(EMMI)。RT-PCR及免疫组化法检测肾皮质结缔组织生长因子(CTGF)mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,糖尿病组及雷帕霉素组大鼠血糖、Ccr、24hUalb均显著上升,大鼠肾脏明显肥大,肾小球平均体积、EMMI、毛细血管基底膜厚度均显著增加;肾皮质CTGFmRNA及蛋白表达显著上调。雷帕霉素干预后,上述指标除血糖外均部分被抑制。结论小剂量雷帕霉素能够减轻肾脏肥大,抑制系膜外基质聚集,下调CTGF的表达,延缓DN的进展。 展开更多

关键词 雷帕霉素 哺乳动雷帕霉素靶蛋白 结缔组织生长因子 糖尿病肾病

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MSCs培养上清液对大鼠滑膜细胞株增殖及COX-2、MMP-2表达的影响 被引量：1

16

作者 李和军 刘淑毓 +1 位作者 李频 郑祥雄 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期114-118,共5页

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)培养上清液对大鼠滑膜细胞株RSC-364增殖及环氧化酶-2(COX-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法分离并鉴定大鼠骨髓MSCs,收集MSCs培养上清液(MSCs-SL),分别应用MTT比色法、RT-PCR法检测MSCs... 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)培养上清液对大鼠滑膜细胞株RSC-364增殖及环氧化酶-2(COX-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法分离并鉴定大鼠骨髓MSCs,收集MSCs培养上清液(MSCs-SL),分别应用MTT比色法、RT-PCR法检测MSCs-SL对大鼠滑膜细胞株RSC-364增殖,COX-2、MMP-2mRNA表达的影响。结果 MSCs-SL能够促进滑膜细胞增殖,增强滑膜细胞COX-2、MMP-2mRNA的表达,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MSCs可能通过分泌可溶性因子刺激滑膜细胞增殖,并且改变了滑膜细胞某些蛋白酶的表达水平。 展开更多

关键词 间充质干细胞 滑膜细胞 增殖 环氧化酶-2 基质金属蛋白酶-2

原文传递

CD_(154)反义RNA诱导Jurkat细胞的凋亡

17

作者 郑祥雄 丁健 杨旭伟 《福建医科大学学报》 2002年第2期141-143,156,共4页

目的　探讨 CD1 54反义 RNA诱导 Jurkat细胞凋亡的作用。　方法　应用 RT- PCR扩增人 CD1 54膜外段基因 ,以及 T- A克隆技术和亚克隆技术构建 CD1 54反义 RNA的真核表达载体 ,并将其转染入 Jurkat细胞中。应用电镜及流式细胞仪 (FCM)检... 目的　探讨 CD1 54反义 RNA诱导 Jurkat细胞凋亡的作用。　方法　应用 RT- PCR扩增人 CD1 54膜外段基因 ,以及 T- A克隆技术和亚克隆技术构建 CD1 54反义 RNA的真核表达载体 ,并将其转染入 Jurkat细胞中。应用电镜及流式细胞仪 (FCM)检测观察 Jurkat细胞的凋亡指标。　结果　电镜观察 CD1 54反义 RNA转染的 Jurkat细胞内可见凋亡小体 ,并且 FCM检测显示一明显的凋亡峰。　结论　 CD1 54反义 RNA可诱导 Jurkat细胞凋亡。 展开更多

关键词 RNA 反义 CD154 JURKAT细胞 脱噬作用 转录 遗传 基因表达

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CD40反义RNA对系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞功能的影响

18

作者 郑祥雄 李和军 +1 位作者 李频 叶德富 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2003年第12期722-724,共3页

目的　探讨瞬间表达的CD4 0反义RNA对EB病毒转染的系统性红斑狼疮 (SLE)患者B淋巴细胞CD4 0分子表达、细胞增生以及免疫球蛋白 (Ig)分泌功能的影响。 方法　构建人CD4 0反义RNA的真核表达载体CD4 0 /pcDNA3,并将其转染入EB病毒转染的SL... 目的　探讨瞬间表达的CD4 0反义RNA对EB病毒转染的系统性红斑狼疮 (SLE)患者B淋巴细胞CD4 0分子表达、细胞增生以及免疫球蛋白 (Ig)分泌功能的影响。 方法　构建人CD4 0反义RNA的真核表达载体CD4 0 /pcDNA3,并将其转染入EB病毒转染的SLE患者B淋巴细胞中。应用流式细胞仪 (FACS)检测观察B淋巴细胞膜上CD4 0分子表达的变化 ;应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法 (MTT)观察反义CD4RNA对B淋巴细胞增生能力的影响 ;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定转染后的B淋巴细胞的Ig分泌功能。结果　与转染pcDNA3空载体组相比 ,转染CD4 0 / pcDNA3组的CD4 0分子的表达明显降低 (P <0 0 1) ;细胞的增生能力明显降低 (P <0 0 5 ) ;细胞的Ig分泌功能明显受抑制 (P <0 0 1)。结论　CD4 0反义RNA对SLE患者的B淋巴细胞有明显的免疫调控作用。 展开更多

关键词 CD40 反义RNA 系统性红斑狼疮 B淋巴细胞 功能 影响

原文传递

RNA干扰

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作者 陈凌 《福建医科大学学报》 2003年第1期120-122,共3页

关键词 RNA 双链 转基因 基因组 转录 遗传

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反义CD40 RNA对EB病毒转化的B细胞CD40分子表达和增殖能力的影响

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作者 郑祥雄 李和军 +1 位作者 李频 周小玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期506-507,510,共3页

目的 :探讨瞬时表达的反义CD4 0RNA ,对EB病毒转化的健康人B细胞膜表面CD4 0分子表达和增殖能力的影响。方法 :应用T A克隆技术和亚克隆技术 ,构建人反义CD4 0RNA的真核表达载体pcDNA3/CD4 0 ,并以其转染本室建立的EB病毒转化的健康人B... 目的 :探讨瞬时表达的反义CD4 0RNA ,对EB病毒转化的健康人B细胞膜表面CD4 0分子表达和增殖能力的影响。方法 :应用T A克隆技术和亚克隆技术 ,构建人反义CD4 0RNA的真核表达载体pcDNA3/CD4 0 ,并以其转染本室建立的EB病毒转化的健康人B细胞。应用流式细胞仪 (FACS) ,检测B细胞膜上CD4 0分子表达的变化。应用MTT比色法检测反义CD4 0RNA对B细胞增殖能力的影响。结果 :与转染空载体pcDNA3组相比 ,转染pcDNA3/CD4 0细胞上CD4 0分子的表达降低 (P<0 .0 1) ,其增殖能力明显降低 (P <0 .0 1)。结论 :反义CD4 0RNA技术 ,可作为有效的免疫调控手段。CD4 展开更多

关键词 反义RNA B淋巴细胞 CD40 表达 细胞增殖 EB病毒转化

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