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TK1和TIMP1基因共表达载体的构建及其在大鼠血管平滑肌细胞中的表达 被引量：1
1
作者 余惠珍 向红 +3 位作者 黄舒洁 朱鹏立 潘玮 张枫 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1072-1078,共7页
目的构建含人组织激肽释放酶1(hTK1)和基质金属蛋白酶组织抑制物(TIMP1)基因的重组腺病毒载体,并观察其在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)中的表达。方法选择相对应酶切位点,酶切含人TIMP1基因片段的原始质粒和腺病毒穿梭质粒pDC316,经连接... 目的构建含人组织激肽释放酶1(hTK1)和基质金属蛋白酶组织抑制物(TIMP1)基因的重组腺病毒载体,并观察其在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)中的表达。方法选择相对应酶切位点,酶切含人TIMP1基因片段的原始质粒和腺病毒穿梭质粒pDC316,经连接、热激、转化等亚克隆而构建成重组穿梭质粒。之后,应用限制性内切酶BglⅡ/SalⅠ,酶切含启动子和hTIMP1基因片段,再通过回收片段以及连接、热激等步骤亚克隆至pDC316-hTK1载体中,构建含双基因(hTK1和hTIMP1)的重组病毒穿梭质粒。利用AdMax腺病毒Cre/loxP重组酶系统,将该质粒和骨架病毒质粒于293A细胞中同源重组包装产生双基因的重组腺病毒载体。采用Western blot测定在VSMCs中的表达。结果经PCR、双酶切和测序证实,重组病毒穿梭质粒pDC316-hTIMP1-EGFP和pDC316-hTK1-hTIMP1构建正确。在293A细胞里成功包装产生含双基因的重组腺病毒载体Ad5-hTK1-hTIMP1感染VSMCs后,hTK1和hTIMP1蛋白呈独立高表达,表达水平呈浓度依赖性增加。结论首次成功构建并包装了含双基因(hTK1和hTIMP1)的重组腺病毒载体,目的蛋白在VSMCs中呈现独立高表达。 展开更多
关键词 组织激肽释放酶1基因 基质金属蛋白酶组织抑制物1基因 重组腺病毒载体 血管重构
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胰腺纤维钙化性糖尿病一例报告及文献复习 被引量：7
2
作者 潘金兴 姜锋 +1 位作者 孙铭遥 林帆 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期563-564,共2页
回顾性分析1例胰腺纤维钙化性糖尿病(FCPD)患者的临床资料及相关文献,探讨FCPD的临床特点,提高对疾病的认识。患者男,31岁,非洲籍,无慢性胰腺炎病史及饮酒史,以急性腹痛就诊。BMI为19.1 kg/m^2,高血糖伴DKA。入院随机BG 62.94 mmol/L,Hb... 回顾性分析1例胰腺纤维钙化性糖尿病(FCPD)患者的临床资料及相关文献,探讨FCPD的临床特点,提高对疾病的认识。患者男,31岁,非洲籍,无慢性胰腺炎病史及饮酒史,以急性腹痛就诊。BMI为19.1 kg/m^2,高血糖伴DKA。入院随机BG 62.94 mmol/L,HbA_1c 21.1%,FC-P 0.24μg/L、2 hC-P 0.18μg/L,胰岛自身抗体阴性。胰腺MRI显示:胰腺萎缩伴胰管明显扩张并胰管内多发结石。根据患者临床特点及辅助检查结果,考虑FCPD。良好的血糖控制是FCPD治疗的基础。 展开更多
关键词 糖尿病 胰腺钙化 胰腺纤维化
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人组织激肽释放酶基因转移对球囊拉伤后大鼠颈总动脉内膜的影响 被引量：4
3
作者 余惠珍 谢良地 +3 位作者 朱鹏立 许昌声 王华军 李体远 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期67-71,共5页
目的探讨重组腺病毒介导的人组织激肽释放酶1（Ad-hKLK1）基因转移对球囊拉伤后的自发性高血压大鼠（SHR）颈动脉新生内膜增生的影响及其机制。方法取SHR，雄性，采用球囊拉伤法建立大鼠颈动脉再狭窄模型，将存活动物随机分为4组，即假... 目的探讨重组腺病毒介导的人组织激肽释放酶1（Ad-hKLK1）基因转移对球囊拉伤后的自发性高血压大鼠（SHR）颈动脉新生内膜增生的影响及其机制。方法取SHR，雄性，采用球囊拉伤法建立大鼠颈动脉再狭窄模型，将存活动物随机分为4组，即假手术组（n=6）、单纯拉伤组（n=8）、拉伤＋注射对照病毒组（n=8）、拉伤＋注射Ad-hKLK1病毒组（n=8）。4周后处死大鼠，测定各实验组再狭窄动脉内膜形态学相关指标。RT-PCR法检测缓激肽受体（B1R和B2R）表达，蛋白免疫印迹法检测细胞周期素激酶抑制蛋白p27Kip1、p21Cip1的表达。结果拉伤＋Ad-hKLK1组大鼠颈总动脉的壁腔面积比W／L明显低于单纯拉伤组（1．056±0．149比1．641±0．194，P〈0．001），抑制率达35．6％，内膜／中膜面积比值显著小于单纯拉伤组（0．77±0．09比1．26±0．051，P〈0．01），抑制率达38．8％（P〈0．001）。拉伤＋Ad-hKLK1组的周期抑制蛋白p27Kip1和p21Cip1表达明显高于单纯拉伤组（0．55±0．05比0．31±0．06，P〈0．001和0．47±0．06比0．26±0．05，P〈0．001）。球囊拉伤后颈动脉的缓激肽B2R的mRNA表达明显高于假手术组（P〈0．01），而各组间的缓激肽B1R的mRNA表达差异无统计学意义。结论hKLK1基因转移可减轻SHR颈动脉球囊损伤后的新生血管内膜形成，注射外源性人组织激肽释放酶基因可上调缓激肽B2RmRNA表达和p27Kip1、p21Cip1的蛋白表达。 展开更多
关键词 血管内膜 基因转移 水平 组织激肽释放酶类
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轻度和中度老年失智患者表达性艺术治疗方案的构建
4
作者 卓雪芳 颜缘娇 +3 位作者 林榕 林烁 郑晓娜 李红 《中国护理管理》 CSCD 2023年第9期1286-1291,共6页
目的 :构建轻度和中度老年失智患者的表达性艺术治疗方案,以期减轻其精神行为症状,缓解认知恶化。方法 :在课题团队前期构建的轻度认知障碍老年人创新表达认知干预方案基础上,采用焦点小组访谈法收集前期参与干预研究人员的建议和研究... 目的 :构建轻度和中度老年失智患者的表达性艺术治疗方案,以期减轻其精神行为症状,缓解认知恶化。方法 :在课题团队前期构建的轻度认知障碍老年人创新表达认知干预方案基础上,采用焦点小组访谈法收集前期参与干预研究人员的建议和研究对象的特点与需求,结合文献分析,构建轻度和中度老年失智患者的表达性艺术治疗方案初稿;通过专家会议法论证并修订初稿,形成终版干预方案。结果 :纳入专家10名,专家权威系数为0.89,最终干预方案包括干预内容、干预流程、干预要素3个方面内容。结论 :构建的表达性艺术治疗方案科学、严谨、有针对性,适用于轻度和中度老年失智患者,可为轻度和中度老年失智患者的非药物干预提供参考。 展开更多
关键词 老年人 失智症 专家会议法 表达性艺术治疗 非药物干预
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胃肠道间质肿瘤DOG1和Ki67、p53的表达及意义 被引量：1
5
作者 郑铭 江淑萍 余惠珍 《福建医科大学学报》 2011年第5期351-354,共4页
目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)患者中的DOG1和细胞增殖核抗原Ki67以及p53突变型蛋白的相互关系及病理学意义。方法应用免疫组织化学方法检测86例GIST患者与20例非GIST患者组织中的DOG1及Ki67、p53的表达,比较分析各个指标在GIST各危险性... 目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)患者中的DOG1和细胞增殖核抗原Ki67以及p53突变型蛋白的相互关系及病理学意义。方法应用免疫组织化学方法检测86例GIST患者与20例非GIST患者组织中的DOG1及Ki67、p53的表达,比较分析各个指标在GIST各危险性分级和各部位的表达情况。结果在86例GIST组织中,DOG1与CD117的表达阳性率间比较差别无统计学意义(97.7%vs 90.7%,P>0.05);而CD117表达阴性的GIST组织中,DOG1阳性表达率为87.5%。GIST经危险性分层后,DOG1阳性表达率在高、中、低、极低度危险组中比较差别无统计学意义(P>0.05)。Ki67和p53在GIST组织中的阳性表达率分别为58.1%和47.7%;Ki67和p53在高度和中度危险性组的表达阳性率显著高于低度和极低度危险性组。GIST组织的DOG1、CD117、Ki67和p53阳性表达率显著增高于非GIST组织(P<0.01)。结论 DOG1联合CD117可作为诊断GIST或鉴别非GIST的一个敏感而特异的重要标记物;Ki67以及突变型p53蛋白可作为判断GIST良恶性的生物学指标以及预后判断的重要标志。 展开更多
关键词 胃肠道间质肿瘤 KI67抗原 基因 p53 原癌基因蛋白质C-KIT 肿瘤标记 生物学 免疫组织化学
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TLR4在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用 被引量：1
6
作者 林苗 林帆 +1 位作者 洪富源 吴家斌 《北方药学》 2016年第11期124-125,共2页
目的:探讨Toll样小体4(TLR4)在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用。方法:分别以TLR+/+和TLR4-/-小鼠为动物模型,检测尿蛋白/肌酐比值和血肌酐水平,透射电镜观察肾小球足细胞的形态,采用荧光实时定量PCR法测定足细胞相关标志物m RNA表达。结... 目的:探讨Toll样小体4(TLR4)在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用。方法:分别以TLR+/+和TLR4-/-小鼠为动物模型,检测尿蛋白/肌酐比值和血肌酐水平,透射电镜观察肾小球足细胞的形态,采用荧光实时定量PCR法测定足细胞相关标志物m RNA表达。结果:与TLR4+/+非糖尿病组相比,TLR4+/+糖尿病组小鼠尿白蛋白/尿肌酐比值明显升高,透射电镜可见足突融合现象,足突消失,足细胞相关标志物Podocin表达量明显下调;TLR4基因敲除的糖尿病小鼠较TLR4+/+糖尿病组尿白蛋白/尿肌酐比值显著下调,足细胞损伤减轻,Podocin表达量上调。结论:TLR4基因敲除可以降低糖尿病小鼠蛋白尿水平,减轻足细胞损害,这种足细胞保护作用与上调足细胞标志物Podocin的表达水平有关。 展开更多
关键词 糖尿病 足细胞 动物模型 Toll样小体
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氮末端B型利钠肽原与老年2型糖尿病患者心脏舒张功能的关系
7
作者 余惠珍 陈良 +1 位作者 朱鹏立 林宁 《大连医科大学学报》 CAS 2012年第3期240-243,共4页
[目的]探讨血浆氮末端B型脑钠肽(NT-proBNP)水平与老年2型糖尿病伴舒张性心功能不全(DHF)的关系及早期诊断的临床意义。[方法]选取67例采用超声心动图检测心脏收缩功能正常的老年2型DM患者,按二尖瓣舒张早期血流速度/二尖瓣舒张晚期血... [目的]探讨血浆氮末端B型脑钠肽(NT-proBNP)水平与老年2型糖尿病伴舒张性心功能不全(DHF)的关系及早期诊断的临床意义。[方法]选取67例采用超声心动图检测心脏收缩功能正常的老年2型DM患者,按二尖瓣舒张早期血流速度/二尖瓣舒张晚期血流速度(E/A)比值分为心功能正常组22例,DHF 1级组18例,DHF 2级组17例,DHF 3级组10例。正常对照组为本院健康体检者23例。采用电化学发光法测定各组血浆NT-proB-NP水平。[结果]与正常对照组和心功能正常组比较,老年2型糖尿病伴DHF组的NT-proBNP水平差异具有显著性意义(P<0.01);NT-proBNP值随着舒张功能不全程度加重而逐渐提高,与E/A比值呈显著负相关(r=-0.78,P<0.01)。[结论]血浆NT-proBNP水平与老年2型糖尿病患者的心脏舒张期功能障碍程度密切相关,可反映老年2型糖尿病患者的心脏舒张功能状态。 展开更多
关键词 2型糖尿病 脑钠素 心脏舒张功能不全 老年
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慢性肾脏病患者静息心率与颈动脉病变的关系
8
作者 王丽丽 缪小玉 +2 位作者 杨国凯 洪富源 舒贵扬 《福建医药杂志》 CAS 2012年第4期13-15,共3页
目的探讨非透析慢性肾脏病(CKD)患者静息心率(RHR)与颈动脉病变的关系。方法将非透析CKD患者102例按RHR值分为3组:RHR 1组33例(RHR<70次/分)、RHR 2组35例(RHR 70～79次/分)和RHR 3组34例(RHR≥80次/分),应用颈动脉超声检测3组患者... 目的探讨非透析慢性肾脏病(CKD)患者静息心率(RHR)与颈动脉病变的关系。方法将非透析CKD患者102例按RHR值分为3组:RHR 1组33例(RHR<70次/分)、RHR 2组35例(RHR 70～79次/分)和RHR 3组34例(RHR≥80次/分),应用颈动脉超声检测3组患者颈动脉内膜中层厚度(IMT)、斑块形成及颈动脉硬化的患病率。结果 3组CKD患者的颈动脉IMT、斑块形成及颈动脉硬化的患病率比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);随着RHR的逐渐增高,颈动脉IMT、斑块形成及颈动脉硬化的患病率也逐渐增高,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);相关分析显示,RHR与颈动脉IMT、斑块形成及颈动脉硬化的患病率呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论非透析CKD患者的RHR增高与颈动脉病变相关,提示,RHR的增高是CKD患者并发动脉粥样硬化的危险因素之一。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 静息心率 颈动脉疾病
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