烟草赤星病拮抗菌株B75产生抗菌物质的条件 被引量：5

1

作者 方敦煌 吴祖建 +2 位作者 邓云龙 邓建华 林奇英 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2006年第3期244-247,共4页

从烟草根际分离筛选到一株可产生抗烟草赤星病菌物质的枯草芽孢杆菌菌株B75。在以NB培养液进行试验时发现，B75在对数生长的中期开始产生抗菌物质，在生长的衰退期前存在一个产生抗菌物质的高峰期；在25～50℃、pH4．0～8．5范围内均可... 从烟草根际分离筛选到一株可产生抗烟草赤星病菌物质的枯草芽孢杆菌菌株B75。在以NB培养液进行试验时发现，B75在对数生长的中期开始产生抗菌物质，在生长的衰退期前存在一个产生抗菌物质的高峰期；在25～50℃、pH4．0～8．5范围内均可产生抗菌物质，其中30℃和pH6．0的培养条件下最适。不同的装液量试验结果表明，在三角瓶装液量为100ml／500ml时，是B75菌株菌体生长及产生抗菌物质的最适宜量。不同的碳、氮源试验结果表明，甘露醇、酵母膏最有利于B75菌株菌体生长，且产生的抗菌物质抑菌活性较强。 展开更多

关键词 烟草赤星病 拮抗菌 抗菌物质

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臭椿和鸦胆子抗烟草花叶病毒作用研究 被引量：21

2

作者 沈建国 张正坤 +2 位作者 吴祖建 谢联辉 林奇英 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期27-29,共3页

目的:研究臭椿和鸦胆子的抗植物病毒作用。方法:以烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)为供试病毒,采用局部枯斑法测定2种药用植物提取物对TMV侵染的抑制作用;叶碟法研究2种药用植物提取物的抗TMV增殖作用,并通过盆栽试验,测定2种... 目的:研究臭椿和鸦胆子的抗植物病毒作用。方法:以烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)为供试病毒,采用局部枯斑法测定2种药用植物提取物对TMV侵染的抑制作用;叶碟法研究2种药用植物提取物的抗TMV增殖作用,并通过盆栽试验,测定2种药用植物提取物对烟草花叶病的防治作用。结果:臭椿和鸦胆子提取物不仅能有效抑制TMV侵染,而且对TMV的增殖也有明显抑制作用,并对烟草花叶病具有较好的防治效果。结论:臭椿和鸦胆子抗烟草花叶病毒作用显著,在抗植物病毒方面具有进一步研究和开发价值。 展开更多

关键词 臭椿 鸦胆子 烟草花叶病毒 抗病毒

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臭椿抗烟草花叶病毒活性物质的提取及其初步分离 被引量：14

3

作者 沈建国 张正坤 +2 位作者 吴祖建 谢联辉 林奇英 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2007年第4期348-352,共5页

以烟草花叶病毒为供试病毒,采用生物活性跟踪的方法对臭椿抗病毒活性物质进行了提取与初步分离。结果表明,臭椿乙醇提取物、甲醇提取物和丙酮提取物均有较好的抗烟草花叶病毒作用;通过系统溶剂提取、硅胶柱层析分离和活性筛选,从臭椿乙... 以烟草花叶病毒为供试病毒,采用生物活性跟踪的方法对臭椿抗病毒活性物质进行了提取与初步分离。结果表明,臭椿乙醇提取物、甲醇提取物和丙酮提取物均有较好的抗烟草花叶病毒作用;通过系统溶剂提取、硅胶柱层析分离和活性筛选,从臭椿乙醇提取物的氯仿极性部位获得两个抗烟草花叶病毒活性组分Fr3与Fr6;经硅胶柱层析进一步分离,氯仿/甲醇梯度洗脱,得到4种相对较纯的活性成分C1、C2、C3、C4。生测结果显示,4种活性成分对烟草花叶病毒具有一定程度的抑制作用,但效果均低于原乙醇提取物,在活体条件下对烟草花叶病毒系统侵染的防治作用不明显。 展开更多

关键词 臭椿 烟草花叶病毒 抗病毒活性

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毛头鬼伞多糖对烟草酶活性和同工酶谱的影响 被引量：15

4

作者 吴艳兵 谢荔岩 +1 位作者 谢联辉 林奇英 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期29-33,共5页

分析了毛头鬼伞(Coprinus comatus)真菌多糖诱导烟草对烟草花叶病毒(TMV)抗性过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶、-β1,3-葡聚糖酶活性的变化。结果表明,毛头鬼伞多糖可提高POD、PPO、PAL、几丁质酶和-... 分析了毛头鬼伞(Coprinus comatus)真菌多糖诱导烟草对烟草花叶病毒(TMV)抗性过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶、-β1,3-葡聚糖酶活性的变化。结果表明,毛头鬼伞多糖可提高POD、PPO、PAL、几丁质酶和-β1,3-葡聚糖酶的活性,接种TMV后毛头鬼伞多糖处理的烟草酶活性显著高于不处理者。上述结果提示,毛头鬼伞多糖处理后烟草酶活性的增强可能与其诱导烟草获得抗性有关。 展开更多

关键词 毛头鬼伞多糖烟草花叶病毒(TMV)过氧化物酶(POD)多酚氧化酶(PPO)苯丙氨酸解氨酶(PAL)几丁质酶β-1 3-葡聚糖酶

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毛头鬼伞(Coprinus comatus)多糖的理化性质及体外抗氧化活性 被引量：14

5

作者 吴艳兵 谢荔岩 +1 位作者 谢联辉 林奇英 《激光生物学报》 CAS CSCD 2007年第4期438-442,共5页

毛头鬼伞(Coprinus comatus)子实体经热水浸提、乙醇沉淀、脱蛋白和真空干燥后得到毛头鬼伞多糖。经定性化学反应和光谱鉴定,毛头鬼伞多糖不含蛋白质、核酸、酚类物质和糖醛酸,为非淀粉类中性多糖,均分子量为947 kD,完全酸水解后经气相... 毛头鬼伞(Coprinus comatus)子实体经热水浸提、乙醇沉淀、脱蛋白和真空干燥后得到毛头鬼伞多糖。经定性化学反应和光谱鉴定,毛头鬼伞多糖不含蛋白质、核酸、酚类物质和糖醛酸,为非淀粉类中性多糖,均分子量为947 kD,完全酸水解后经气相色谱分析确定其糖基组成及其摩尔组成比为葡萄糖∶甘露糖∶半乳糖=10.5∶1.7∶1。通过对脱氧核糖体系产生的羟基自由基(.OH)的清除作用和邻苯三酚自氧化系统产生的超氧阴离子自由基(O2-.)的清除作用,对毛头鬼伞多糖体外抗氧化活性进行的研究结果表明:该多糖具有一定的抗氧化活性。 展开更多

关键词 毛头鬼伞 多糖 理化性质 抗氧化活性 自由基

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杨梅叶提取物抗烟草花叶病毒活性及其化学成分初步研究 被引量：9

6

作者 沈建国 谢荔岩 +2 位作者 翟梅枝 林奇英 谢联辉 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第4期441-443,共3页

以烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)为供试病毒,对杨梅叶提取物抗病毒活性进行测定.结果表明,杨梅叶提取物具有较强的体外钝化和抗病毒侵染作用;通过系统预试和含量测定,初步确定杨梅叶提取物中主要含有黄酮和鞣质2类成分,两者含... 以烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)为供试病毒,对杨梅叶提取物抗病毒活性进行测定.结果表明,杨梅叶提取物具有较强的体外钝化和抗病毒侵染作用;通过系统预试和含量测定,初步确定杨梅叶提取物中主要含有黄酮和鞣质2类成分,两者含量分别在水和体积分数为70%的乙醇提取物中较高. 展开更多

关键词 杨梅 烟草花叶病毒 叶提取物 TMV 侵染 活性 乙醇提取物 初步研究 化学成分 体外

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防治烟草赤星病拮抗根际芽孢杆菌的筛选 被引量：12

7

作者 方敦煌 吴祖建 +2 位作者 邓云龙 杨波 林奇英 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期555-561,共7页

从健康烟草根分离到669株根际芽孢杆菌,通过平板对峙培养、代谢产物活性检测,筛选到9株抑制烟草赤星病菌(A lternaria alternata)活性较强的菌株,其菌体及粗代谢产物产生的抑菌圈直径均在10 mm以上;离体防效和田间小区防治试验表明,菌... 从健康烟草根分离到669株根际芽孢杆菌,通过平板对峙培养、代谢产物活性检测,筛选到9株抑制烟草赤星病菌(A lternaria alternata)活性较强的菌株,其菌体及粗代谢产物产生的抑菌圈直径均在10 mm以上;离体防效和田间小区防治试验表明,菌株B6、B75的含菌发酵液和粗代谢产物的离体防效分别为75.6%、76.9%和62.5%、64.7%,小区防效分别为70.3%、75.8%和60.3%、64.4%。粗代谢产物的抑菌作用试验发现,菌株B75的粗代谢产物在一定浓度范围内均能抑制赤星病菌孢子萌发、菌丝生长与产孢。 展开更多

关键词 烟草赤星病 拮抗根际芽孢杆菌 筛选 抑制作用

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银胶菊(Parthenium hysterophorus)中抗TMV活性成分的分离及活性测定 被引量：8

8

作者 陈启建 欧阳明安 +1 位作者 谢联辉 林奇英 《激光生物学报》 CAS CSCD 2008年第4期544-548,共5页

采用活性跟踪法从银胶菊中分离获得抗病毒活性物质,经质谱和核磁共振分析,确定该物质为小白菊内酯。采用半叶枯斑法和叶圆盘法测定了其对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的抑制效果,结果表明:0.2 mg/mL的小白菊内酯在混合接种... 采用活性跟踪法从银胶菊中分离获得抗病毒活性物质,经质谱和核磁共振分析,确定该物质为小白菊内酯。采用半叶枯斑法和叶圆盘法测定了其对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的抑制效果,结果表明:0.2 mg/mL的小白菊内酯在混合接种和药液浸泡两种处理中均表现出较好的体外抑制TMV活性,其抑制率分别为69.0%和72.1%;在离体条件下对烟草叶圆盘中的烟草花叶病毒复制也具有良好的抑制效果,抑制率为72.3%。 展开更多

关键词 银胶菊 小白菊内酯 抗TMV活性

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毛头鬼伞多糖CCP60a对TMV外壳蛋白的影响 被引量：7

9

作者 吴艳兵 谢荔岩 +1 位作者 谢联辉 林奇英 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2008年第3期63-66,共4页

对毛头鬼伞(Coprinus comatus Muell.ex Fr.)子实体中的多糖CCP60a进行了提取分离及检测,研究了不同温度条件下CCP60a对烟草花叶病毒(TMV)外壳蛋白体外聚合的影响,并用Western blotting法研究了CCP60a对TMV外壳蛋白表达的影响。结果表明... 对毛头鬼伞(Coprinus comatus Muell.ex Fr.)子实体中的多糖CCP60a进行了提取分离及检测,研究了不同温度条件下CCP60a对烟草花叶病毒(TMV)外壳蛋白体外聚合的影响,并用Western blotting法研究了CCP60a对TMV外壳蛋白表达的影响。结果表明,经沸水浸提、乙醇分级沉淀、DEAE Sephadex A-25离子交换柱层析、Sepharose-6B凝胶柱层析和抗TMV活性跟踪检测可得到均一的多糖CCP60a。随温度的提高,CCP60a处理组在320nm处的吸光度值增加幅度明显小于对照组,表明CCP60a对TMV外壳蛋白体外聚合有一定的抑制作用。Western blotting检测结果显示,CCP60a可以使TMV外壳蛋白的表达明显降低。 展开更多

关键词 毛头鬼伞 多糖CCP60a 烟草花叶病毒(TMV) 外壳蛋白

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枯草芽孢杆菌绿色荧光蛋白高效表达载体的构建 被引量：3

10

作者 刘伟 林志伟 +2 位作者 陈美霞 魏日凤 谢联辉 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期467-471,共5页

利用绿色荧光蛋白基因gfpmut3标记枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的启动子P43;构建1个枯草芽孢杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体pP43GFP。结果表明:P43与gfpmut3构成了融合基因,可调控gfpmut3在枯草芽孢杆菌和大肠杆菌中的表达;荧光检测发现... 利用绿色荧光蛋白基因gfpmut3标记枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的启动子P43;构建1个枯草芽孢杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体pP43GFP。结果表明:P43与gfpmut3构成了融合基因,可调控gfpmut3在枯草芽孢杆菌和大肠杆菌中的表达;荧光检测发现,P43在枯草芽孢杆菌和大肠杆菌中具有极强的启动基因表达能力;质粒稳定性测定表明,连续稀释培养55 h后,质粒的稳定性为85%。 展开更多

关键词 绿色荧光蛋白基因 枯草芽孢杆菌 穿梭载体

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金针菇中蛋白质含量的变化和其中一个蛋白质的生物活性 被引量：2

11

作者 付鸣佳 吴祖建 +1 位作者 林奇英 谢联辉 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期40-44,共5页

　在对金针菇(Flammulinavelutipes)子实体活性蛋白质纯化过程中发现,金针菇在不同环境条件下不同蛋白质的表达量有差异.通过阴离子交换层析、凝胶层析和高压液相色谱,从金针菇中分离纯化获得了一种蛋白质Zb.经SDS-PAGE测定该蛋白分子量... 　在对金针菇(Flammulinavelutipes)子实体活性蛋白质纯化过程中发现,金针菇在不同环境条件下不同蛋白质的表达量有差异.通过阴离子交换层析、凝胶层析和高压液相色谱,从金针菇中分离纯化获得了一种蛋白质Zb.经SDS-PAGE测定该蛋白分子量(Mr)为 30×103,等电聚焦电泳表明该蛋白质的等电点为 4. 7,且该蛋白质不含糖.N-端测序表明,该蛋白质N-端的 20个氨基酸为PQVKTSWEDLANLGWPIQQV.此外,在HepG2. 2. 2. 15细胞株上检测该蛋白质体外对肝炎病毒的抑制作用,发现对HBsAg抑制作用明显,抑制中浓度为 0. 117μg/mL,但对HBeAg几乎无作用.以胃癌细胞株MGC80-3为研究对象,检测表明,该蛋白质对MGC80-3抑制率在 50%时的蛋白质浓度约为 0. 75μg/mL.以起始浓度为 0. 296mg/mL的Zb检测它的血凝活性时发现,Zb对兔血红细胞和人A、B、O血红细胞的血凝滴度为 2-12.但同时观察到Zb处理后的兔血红细胞形态发生改变. 图 6表 1参 展开更多

关键词 金针菇 活性蛋白质 乙肝病毒 抗肿瘤 血凝活性

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绞股蓝核糖体失活蛋白家族编码基因的5个cDNA及其下游非编码区 被引量：1

12

作者 林毅 谢荔岩 +3 位作者 陈国强 吴祖建 谢联辉 林奇英 《植物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期163-168,共6页

通过3'RACE克隆策略获得绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)核糖体失活蛋白(ribosome-inac-tivating protein,RIP)Gynostemmin的5个cDNA序列gynostemminⅠ￣Ⅴ及其下游非编码区(3'untranslatedregion,3'UTR)。它们的编码区长... 通过3'RACE克隆策略获得绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)核糖体失活蛋白(ribosome-inac-tivating protein,RIP)Gynostemmin的5个cDNA序列gynostemminⅠ￣Ⅴ及其下游非编码区(3'untranslatedregion,3'UTR)。它们的编码区长度除gynostemminⅡ为825bp外,其余均为831bp。其下游非编码区的长度分别为279、174、170、161和171bp。在3'UTR中,gynostemminⅠ比另外4个多了两个小的茎环结构和一富含AU的不稳定子元件,其mRNA的稳定性可能因此受到影响。 展开更多

关键词 非编码区 核糖体失活蛋白 绞股蓝 下游 编码基因 家族 cDNA序列 RACE 茎环结构 mRNA 稳定子 稳定性 长度 克隆

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孔石莼(Ulva pertusa)质体蓝素基因的克隆及基因特征分析(英文) 被引量：1

13

作者 刘振宇 吴祖建 +2 位作者 谢荔岩 林奇英 谢联辉 《激光生物学报》 CAS CSCD 2011年第1期61-66,共6页

采用cDNA末端快速扩增的办法,从孔石莼(Ulva pertusa)中克隆获得质体蓝素基因。该基因完整的cDNA为787bp,包括40 bp 5'端非编码区和327 bp的3'端非编码区,以及一个420 bp的开放阅读框架,编码139个氨基酸的蛋白质。该基因编码质... 采用cDNA末端快速扩增的办法,从孔石莼(Ulva pertusa)中克隆获得质体蓝素基因。该基因完整的cDNA为787bp,包括40 bp 5'端非编码区和327 bp的3'端非编码区,以及一个420 bp的开放阅读框架,编码139个氨基酸的蛋白质。该基因编码质体蓝素的前体肽,其N端41个氨基酸残基为信号肽,后面为98个氨基酸残基的成熟肽。从Genbank中选择了13个质体蓝素的前体肽基因进行序列比对分析和构建进化树。孔石莼质体蓝素基因与其它质体蓝素基因的同源性为48.2%至78.8%。该进化树将来源于6种藻类植物的7个质体蓝素基因聚类在一起,显示出它们较近的进化关系。同样,也表现出11种生物的分子进化关系。序列比对结果显示,在质体蓝素的基因序列中存在两个高度保守的基序,它编码质体蓝素蛋白的铜结合活性位点。 展开更多

关键词 质体蓝素基因 孔石莼 RACE CDNA

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绿色荧光蛋白标记检测鸦胆子素D抗TMV活性

14

作者 陈启建 董雷 +2 位作者 欧阳明安 谢联辉 林奇英 《激光生物学报》 CAS CSCD 2010年第6期742-747,共6页

以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)为报告基因,将含TMV表达载体的质粒p35S-30B:GFP转化农杆菌EHA 105,通过渗透法把经MMA诱导后的农杆菌悬浮液注射到本氏烟叶片内,测定了鸦胆子素D(Bruceine D)对烟草植株内TMV的增殖和运... 以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)为报告基因,将含TMV表达载体的质粒p35S-30B:GFP转化农杆菌EHA 105,通过渗透法把经MMA诱导后的农杆菌悬浮液注射到本氏烟叶片内,测定了鸦胆子素D(Bruceine D)对烟草植株内TMV的增殖和运动的抑制作用;通过PEG介导法把p35S-30B:GFP转化到本氏烟叶肉细胞原生质体内,测定了Bruceine D对烟草原生质体中TMV增殖的抑制效果。结果表明,在10μg/mL浓度下,Bruceine D不仅可抑制烟草叶肉细胞原生质体中TMV的增殖,还可以抑制烟草接种叶中TMV向茎部及植株上部叶片移动,且对寄主植物不造成明显的毒害。 展开更多

关键词 绿色荧光蛋白 烟草花叶病毒 鸦胆子素D

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