为了建立一种快速、特异、敏感的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)血清学检测方法,本研究将PPRV血凝蛋白(H)和核蛋白(N)克隆至pET28a(+)载体进行诱导表达,并将2种蛋白Ni柱纯化后包被ELISA反应板,建立起检测PPRV...为了建立一种快速、特异、敏感的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)血清学检测方法,本研究将PPRV血凝蛋白(H)和核蛋白(N)克隆至pET28a(+)载体进行诱导表达,并将2种蛋白Ni柱纯化后包被ELISA反应板,建立起检测PPRV特异性抗体的间接ELISA法。结果表明在E.coli BL21(DE3)中表达出2种PPRV蛋白,将2种重组蛋白纯化后按照1:1比例混合,制备PPRV鸡尾酒抗原,成功建立了特异性强、敏感性高的PPRV间接ELISA法;最后用建立的方法对新疆伊犁、塔城、阿勒泰和喀什边境地区采集的325份山羊、789份绵羊和132份牛血清进行了抗体检测,检测结果显示均为阴性,提示在我国新疆边境地区反刍动物尚未发生PPRV感染,但需要及时进行免疫接种以建立预防PPRV从国外传入的免疫带。本研究建立的PPRV间接ELISA法为该病毒的检测提供基础,也为该病的科学防控提供参考。展开更多
根据已发表的猪2型圆环病毒(Porcine circovirus type 2,PCV-2)全基因组序列设计2对引物,用PCR的方法分2段克隆圆环病毒的基因,测序后拼接得到该圆环病毒的基因组。序列分析结果表明,PCV-SHZ基因组全长为1767bp(Genbank登录号:JF718784)...根据已发表的猪2型圆环病毒(Porcine circovirus type 2,PCV-2)全基因组序列设计2对引物,用PCR的方法分2段克隆圆环病毒的基因,测序后拼接得到该圆环病毒的基因组。序列分析结果表明,PCV-SHZ基因组全长为1767bp(Genbank登录号:JF718784),基因型为PCV-2a。用DNAMAN软件将此株病毒基因组与国内其它12个省市PCV-2参考株的基因组核苷酸序列进行同源性比较,同源率为95.25%～99.55%。用MEGA软件分别对该病毒和参考株的全基因组、ORF1和ORF2进行进化树分析,结果表明PCV-2流行株在进化上存在地域上的相关性。展开更多
文摘根据已发表的猪2型圆环病毒(Porcine circovirus type 2,PCV-2)全基因组序列设计2对引物,用PCR的方法分2段克隆圆环病毒的基因,测序后拼接得到该圆环病毒的基因组。序列分析结果表明,PCV-SHZ基因组全长为1767bp(Genbank登录号:JF718784),基因型为PCV-2a。用DNAMAN软件将此株病毒基因组与国内其它12个省市PCV-2参考株的基因组核苷酸序列进行同源性比较,同源率为95.25%～99.55%。用MEGA软件分别对该病毒和参考株的全基因组、ORF1和ORF2进行进化树分析,结果表明PCV-2流行株在进化上存在地域上的相关性。
