Akt1在高血压心肌纤维化中的作用及其机制 被引量：40

1

作者 苗艳菊 杨敏 +2 位作者 郑娇 王绿娅 杜杰 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期265-271,共7页

目的观察Akt1在高血压心肌纤维化中的作用,并探讨其对心脏成纤维细胞转分化的影响。方法 34只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和高血压组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),于第7天时采用鼠尾套法检... 目的观察Akt1在高血压心肌纤维化中的作用,并探讨其对心脏成纤维细胞转分化的影响。方法 34只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和高血压组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),于第7天时采用鼠尾套法检测小鼠尾动脉血压、超声检测心脏结构及功能;处死并取其心脏进行组织切片,行Masson染色观察胶原沉积;流式细胞学方法检测心脏中巨噬细胞浸润;免疫组织化学染色检测炎症细胞因子[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]和促纤维化因子[转化生长因子β(TGF-β)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]表达;实时定量PCR检测Akt1及α-SMAmRNA水平;Westernblot检测α-SMA蛋白表达以及Akt1蛋白表达和激活。体外分离原代骨髓巨噬细胞进行Akt1siRNA及ControlsiRNA干扰后与乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)共培养,观察促纤维化因子mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,高血压组在AngⅡ灌注7d时血压升高[(147.1±1.0)比(104.6±2.1)mmHg,P<0.01],射血分数和短轴缩短率均升高(P<0.05);胶原沉积明显增加[(2.06±0.18)%比(0.35±0.04)%,P<0.01];心脏组织中巨噬细胞浸润增加[(1.75±0.15)%比(0.44±0.07)%,P<0.01],促炎因子(iNOS、IL-1β、TNF-α)及促纤维化因子(TGF-β、α-SMA)表达升高(均P<0.01)。高血压组Akt1及α-SMAmRNA表达上调(P<0.01),Akt1磷酸化水平上调(P<0.01),同时α-SMA蛋白表达明显上调(P<0.05)。体外实验,与单独CFs组相比,CFs与转染ControlsiRNA巨噬细胞共培养组促纤维化因子(α-SMA、TGF-β、Ⅰ型胶原)mRNA表达升高(P<0.05或P<0.01),α-SMA蛋白表达明显上调(P<0.01),而CFs与转染Akt1siRNA巨噬细胞共培养组上述促纤维化因子mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01),α-SMA蛋白表达下降(P<0.05)。结论在高血压心脏纤维化疾病早期,心脏组织Akt1活性增加,可能通过促进炎症反应,介导巨噬细胞作用下的成纤维细胞� 展开更多

关键词 高血压 心肌纤维化 炎症反应 AKT1 血管紧张素Ⅱ

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颈动脉斑块内出血的高分辨率MR成像临床应用与技术进展 被引量：14

2

作者 杨利新 董莉 于薇 《磁共振成像》 CAS CSCD 2015年第9期711-715,共5页

脑卒中是目前人类伤残死亡的首要原因,而颈动脉易损斑块(vulnerable plaque)与脑卒中的发生密切相关,其中斑块内出血是易损斑块的一个重要特征。早期识别颈动脉粥样斑块成分对预防和控制缺血性脑卒中至关重要。高分辨率MRI具有高组织分... 脑卒中是目前人类伤残死亡的首要原因,而颈动脉易损斑块(vulnerable plaque)与脑卒中的发生密切相关,其中斑块内出血是易损斑块的一个重要特征。早期识别颈动脉粥样斑块成分对预防和控制缺血性脑卒中至关重要。高分辨率MRI具有高组织分辨率、无创、可重复性的优点,是识别颈动脉血管形态和量化颈动脉斑块成分的有效方法。近年来,快速、准确地诊断斑块内出血的MRI技术不断地发展。作者就高分辨率MRI对颈动脉斑块内出血的临床应用及技术进展方面作一篇全面的综述。 展开更多

关键词 颈动脉狭窄 动脉粥样硬化 磁共振成像

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小鼠心肌梗死后补体系统激活与炎症反应的相关性研究 被引量：12

3

作者 贺忠梅 张红霞 +2 位作者 杨敏 刘婷婷 杜杰 《心肺血管病杂志》 CAS 2014年第1期98-102,共5页

目的:探讨心肌梗死后补体系统激活的作用。方法:采用结扎冠状动脉左前降支的方法,复制心肌梗死小鼠模型,分为心肌梗死组(MI,n=25)与假手术组(Sham,n=12),术后7d超声心动图检测心功能;心肌组织HE染色观察炎症细胞浸润、Masson染色和天狼... 目的:探讨心肌梗死后补体系统激活的作用。方法:采用结扎冠状动脉左前降支的方法,复制心肌梗死小鼠模型,分为心肌梗死组(MI,n=25)与假手术组(Sham,n=12),术后7d超声心动图检测心功能;心肌组织HE染色观察炎症细胞浸润、Masson染色和天狼猩红染色观察胶原沉积与纤维化程度;Real-time PCR定量检测心肌组织中C3a与C5a的mRNA表达水平,并对C3a、C5a mRNA表达量与射血分数(EF)之间作相关性分析。结果:术后7d,MI组小鼠的生存率为68.0%,明显低于Sham组(P<0.05);MI组的LVAWs、EF、FS均明显降低(P<0.05);HE染色可见MI组有大量炎性细胞浸润,Masson染色与天狼猩红染色发现胶原纤维沉积、纤维化面积增加(P<0.01);C3a与C5a的mRNA表达量增加,且这两项指标均与EF之间呈负相关。结论:心肌梗死后补体系统被激活,补体系统的活化程度与射血分数的降低有关,提示补体系统可能通过调控心肌组织的炎症反应和纤维化过程,成为加重心脏病理损伤的重要因素。 展开更多

关键词 心肌梗死 补体系统 炎症 心肌纤维化

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蛋白激酶SGK-1在高血压性心脏纤维化中的表达及影响 被引量：14

4

作者 郑娇 杨敏 +2 位作者 苗艳菊 王绿娅 杜杰 《心肺血管病杂志》 CAS 2012年第2期204-208,共5页

目的:探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1(SGK1)在血管紧张素Ⅱ(AngiotensionⅡ,AngⅡ)所诱导高血压性心脏纤维化中的表达及作用。方法:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为0.9%氯化钠组和AngⅡ组,每组20只。采用植入式胶囊渗透压泵对小鼠... 目的:探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1(SGK1)在血管紧张素Ⅱ(AngiotensionⅡ,AngⅡ)所诱导高血压性心脏纤维化中的表达及作用。方法:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为0.9%氯化钠组和AngⅡ组,每组20只。采用植入式胶囊渗透压泵对小鼠分别灌注0.9%氯化钠和AngⅡ,于第7天时采用鼠尾套法检测小鼠尾动脉血压处死并取其心脏进行组织切片,行HE染色观察心脏组织炎症细胞浸润、Masson染色观察胶原沉积、免疫组织化学染色检测巨噬细胞(Mac-2)及炎症细胞因子[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白介素1β(IL-1β)、精氨酸酶1(Arg1)]和促纤维化的因子[转化生长因子β(TGF-β)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]的表达;Real-time PCR检测SGK1 mRNA表达;Westernblot检测SGK1蛋白水平的表达和活化。结果:与0.9%氯化钠组相比,AngⅡ组灌注7 d时血压显著升高(P<0.01);巨噬细胞Mac2浸润增加、胶原沉积增多、促炎因子(iNOS、IL-1β、Arg1)及促纤维化因子(TGF-β、α-SMA)的表达水平均显著升高(均为P<0.05);Real-time PCR结果显示AngⅡ灌注明显上调SGK1 mRNA表达(P<0.05);Western blot结果显示AngⅡ灌注增加SGK1磷酸化水平(P<0.05)。结论:在高血压性心脏纤维化疾病进程中,炎症反应增加并且SGK1表达明显上调及活性增强,提示SGK1可能是高血压导致心脏纤维化的关键信号分子,并且SGK1可能通过调节炎症反应促进心脏纤维化的进展。 展开更多

关键词 血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1 炎症反应 高血压 心脏纤维化 血管紧张素Ⅱ

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扩散加权成像技术在动脉粥样硬化斑块成像中应用的新进展 被引量：10

5

作者 杜艳妮 于薇 《心肺血管病杂志》 2017年第1期73-75,共3页

磁共振成像作为一种无创影像检查技术,具有无电离辐射、较高的软组织分辨率等优势,可成像多种不同加权图像,反映组织细胞功能和分子水平的信息。MRI水分子扩散加权成像（diffusion weighted imaging,DWI）能够提供活体水分子分布、运动... 磁共振成像作为一种无创影像检查技术,具有无电离辐射、较高的软组织分辨率等优势,可成像多种不同加权图像,反映组织细胞功能和分子水平的信息。MRI水分子扩散加权成像（diffusion weighted imaging,DWI）能够提供活体水分子分布、运动的特征信息,已经成为脑、胰腺等脏器MRI扫描的常规序列-（[1]）。近来,有研究者发现DWI序列及（apparent diffusion coefficient,ADC）值可应用于心血管研究,尤其是对动脉粥样硬化斑块成分的评价、判定及定量评估。 展开更多

关键词 磁共振成像 扩散加权成像 动脉粥样硬化斑块

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补体5a受体在阿霉素致急性心力衰竭心肌损伤的早期研究 被引量：5

6

作者 咸瑛琳 张晶 +2 位作者 王绿娅 李汇华 杜杰 《心肺血管病杂志》 CAS 2012年第2期209-213,共5页

目的:探讨补体系统补体5a受体(complement 5a receptor,C5aR)在急性心力衰竭(心衰)早期,对心脏功能影响以及对心肌损伤的作用。方法:选择12 w龄C57BL/6J野生型及C5aR敲除小鼠各12只,分别随机分为野生小鼠对照组、野生小鼠心衰组、C5aR... 目的:探讨补体系统补体5a受体(complement 5a receptor,C5aR)在急性心力衰竭(心衰)早期,对心脏功能影响以及对心肌损伤的作用。方法:选择12 w龄C57BL/6J野生型及C5aR敲除小鼠各12只,分别随机分为野生小鼠对照组、野生小鼠心衰组、C5aR敲除小鼠对照组和C5aR敲除小鼠心衰组等共4组,每组6只。采用单次腹腔注射阿霉素20 mg/kg建立小鼠急性心衰模型,对照组采用同计量0.9%氯化钠液注射;阿霉素注射3d后显微超声检测小鼠心室射血分数和短轴缩短率,处死后测量体质量以及心脏质量;运用半定量PCR、蛋白印迹技术Western Blotting、免疫荧光等实验方法观察C5aR在野生小鼠心脏中的表达。C5aR敲除小鼠心脏组织采用HE染色观察心肌形态、Masson染色观察心肌纤维化程度,WGA染色观察心肌横截面大小,免疫组化染色观察转化生长因子-β(TGF-β)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在心脏中表达。结果:与野生小鼠对照组相比,野生小鼠心衰组中C5aR的mRNA及蛋白表达均显著上调(P<0.05);与野生小鼠心衰组相比,C5aR敲除小鼠心衰组体质量及血压均显著升高(均为P<0.05),心室射血分数和短轴缩短率均显著升高(均为P<0.05),C5aR敲除小鼠心衰组胶原沉积及α-SMA表达均显著降低(均为P<0.05),TGF-β表达显著降低(P<0.01)。结论:C5aR在阿霉素诱导心衰模型中表达上调、加重了心肌损伤且促进了心脏纤维化,而C5aR敲除保护小鼠心功能并抑制纤维化,提示C5aR在小鼠急性心衰早期具有促进心脏纤维化作用。 展开更多

关键词 急性心力衰竭 补体5a受体 炎症环境

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利用目标基因捕获结合二代测序技术发现左心室心肌致密化不全MYBPC3基因错义突变 被引量：6

7

作者 李然 郭俊 +4 位作者 丁文虹 焦萌 李小燕 王绿娅 杜杰 《心肺血管病杂志》 2016年第1期20-24,共5页

目的:建立目标基因捕获结合第二代测序技术,对孤立性左心室心肌致密化不全(IVNC)患者的已知致病基因MYBPC3进行突变筛查。方法:收集5例IVNC患者及一级亲属的超声影像学资料,并提取外周血全基因组DNA,设计MYBPC3外显子区域特异性捕获探针... 目的:建立目标基因捕获结合第二代测序技术,对孤立性左心室心肌致密化不全(IVNC)患者的已知致病基因MYBPC3进行突变筛查。方法:收集5例IVNC患者及一级亲属的超声影像学资料,并提取外周血全基因组DNA,设计MYBPC3外显子区域特异性捕获探针,与基因组DNA文库进行杂交,富集目标基因组区域DNA片段,利用二代测序技术,确定突变位点,并使用Sanger测序法在其一代亲属中验证。结果:目标基因特异性捕获探针可有效地捕捉并富集基因组DNA目标靶片段。在5例IVNC患者中,发现1例MYBPC3基因杂合非同义突变c.G1000A(p.E334K),该突变位于MYBPC3基因第13外显子中,测序深度249.65。经过数据分析与Sanger测序验证后,父亲发现此突变位点,母亲未发现提示突变的父亲的遗传。结论:本研究所建立的Gen Cap目标基因捕获测序技术结合二代测序技术成功发现了MYBPC3基因突变。 展开更多

关键词 孤立性左心室心肌致密化不全 MYBPC3基因 目标基因捕获技术 二代测序技术

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CD8^+ T细胞在早期内毒素血症对心功能的损害作用 被引量：5

8

作者 屈超 张晶 +2 位作者 蔡伦 王绿娅 杜杰 《心肺血管病杂志》 CAS 2012年第2期200-203,共4页

目的:探讨CD8+T细胞在早期内毒素血症心脏损伤中的浸润及其对心功能的影响。方法:野生雄性小鼠20只随机分为野生对照组和野生内毒素血症组,每组各10只;CD8敲除雄性小鼠10只,随机分为CD8敲除对照组和CD8敲除内毒素血症组,每组各5只。对... 目的:探讨CD8+T细胞在早期内毒素血症心脏损伤中的浸润及其对心功能的影响。方法:野生雄性小鼠20只随机分为野生对照组和野生内毒素血症组,每组各10只;CD8敲除雄性小鼠10只,随机分为CD8敲除对照组和CD8敲除内毒素血症组,每组各5只。对照组均给予0.9%氯化钠液腹腔注射,内毒素血症组均给予脂多糖腹腔注射。6 h显微超声检测射血分数及短轴缩短分数;即刻处死并收取野生对照组及野生内毒素血症组各3只小鼠心脏组织,流式细胞技术检测心脏细胞悬液中巨噬细胞(F4/80+细胞)及CD8+T细胞、CD4+T细胞分布;其余小鼠心脏组织进行病理切片HE染色,观察心肌纤维断裂及炎症细胞浸润。结果:与野生对照组相比,野生内毒素血症组射血分数及短轴缩短分数显著降低(均为P<0.05);野生内毒素血症组F4/80+细胞、CD4+T细胞及CD8+T细胞均显著增加(均为P<0.05)。与野生内毒素血症组相比,CD8基因敲除内毒素血症组射血分数及短轴缩短分数均显著升高(均为P<0.05)。结论:急性内毒素血症导致心肌纤维损伤、心功能不全,心脏组织CD8+T等炎症细胞浸润;而缺乏CD8+T细胞时则减轻内毒素血症导致的心功能损伤,提示CD8+T细胞在急性内毒素血症诱导的心功能不全早期发挥重要作用。 展开更多

关键词 内毒素血症 脂多糖 心功能 CD8+T细胞

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Affymetrix基因芯片研究高血压对小鼠血管基因表达的影响 被引量：3

9

作者 王吉静 李玉琳 +4 位作者 王月丽 郑帅 王绿娅 李汇华 杜杰 《心肺血管病杂志》 CAS 2014年第2期258-262,共5页

目的:利用基因芯片技术研究高血压早期血管损伤中基因表达变化。方法:30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,分为对照组和Ang II(血管紧张素II)组,采用置入式胶囊渗透压泵分别灌注0.9%氯化钠液和Ang II(1 500 ng·kg-1·min-1),于第3天,第... 目的:利用基因芯片技术研究高血压早期血管损伤中基因表达变化。方法:30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,分为对照组和Ang II(血管紧张素II)组,采用置入式胶囊渗透压泵分别灌注0.9%氯化钠液和Ang II(1 500 ng·kg-1·min-1),于第3天,第7天取胸主动脉,提取核糖核酸(RNA),进行基因芯片分析;利用鼠尾套法检测Ang II灌泵3 d及7 d后小鼠尾动脉血压、苏木精伊红染色(HE)染色检测血管结构;实时定量聚合酶链式反应(PCR)验证Ang II灌泵7 d时部分芯片结果。结果:与对照组相比,Ang II组在灌泵7 d时血压升高[(104±4)vs.(146±6)mmHg(1mmHg=0.133kPa),P<0.001];基因芯片结果显示3d时有67个基因表达上调,27个基因表达下调,7d时有31个基因表达上调,没有检测下调基因;PCR验证磷酸分泌蛋白1(SPP1),金属蛋白酶组织抑制因子1(Timp1),4域跨膜超家族A,4C(MS4a4c),胰岛素样生长因子结合蛋白2(Igfbp2),重组激活基因1(Rag1)均表达升高。结论:Ang II导致高血压情况下,血管组织基因表达变化,可能参与高血压血管损伤的过程。 展开更多

关键词 高血压 血管损伤 基因芯片 炎症反应 血管紧张素Ⅱ

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动态观察胱天蛋白酶募集域蛋白9在心肌梗死后表达的基础研究 被引量：3

10

作者 贾之祥 王颖 +1 位作者 王绿娅 杜杰 《心肺血管病杂志》 CAS 2012年第2期196-199,共4页

目的:探讨心肌梗死后小鼠胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain-containingprotein 9,CARD9)的表达及其与炎症的关系。方法:选择野生型小鼠和CARD9敲除小鼠各26只,分为野生型对照组、野生型心肌梗死组、CARD9敲除对照组和C... 目的:探讨心肌梗死后小鼠胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain-containingprotein 9,CARD9)的表达及其与炎症的关系。方法:选择野生型小鼠和CARD9敲除小鼠各26只,分为野生型对照组、野生型心肌梗死组、CARD9敲除对照组和CARD9敲除心肌梗死组共4组,每组13只。心肌梗死模型组是通过结扎冠状动脉前降支复制心肌梗死模型,而对照组仅穿线不结扎。于模型复制后第1天,从每组随机抽取3只小鼠处死并行氯化三苯四氮唑(TTC)染色,观察模型是否复制成功;于第3天和第28天,每组分别随机各抽取3只小鼠,处死后取心肌组织行石蜡切片,苏木素伊红(HE)染色和免疫组化染色观察炎症细胞浸润,免疫组化染色和蛋白定量观察CARD9表达。结果:TTC证实心肌梗死模型复制成功;免疫组化染色和蛋白印迹证实,与野生型对照组比较,野生型心肌梗死组3d及28d时梗死区域CARD9表达均增高(P<0.05)与野生型心肌梗死组比较,3 d时CARD9敲除组心肌梗死组巨噬细胞浸润增加(P<0.05)。结论:心肌梗死后CARD9表达上调,而CARD9敲除炎症细胞浸润增加,提示CARD9参与心肌梗死并对早期炎症可能有一定抑制作用。 展开更多

关键词 心肌梗死 炎症 胱天蛋白酶募集域蛋白9

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组织蛋白酶S抑制剂对兔血管平滑肌细胞凋亡的影响

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作者 张耀中 黄方炯 +4 位作者 秦彦文 崔巍 蔡伦 王绿娅 辛毅 《中国医药》 2012年第7期785-788,共4页

目的研究组织蛋白酶S抑制剂对培养的兔血管平滑肌细胞凋亡的影响及其机制。方法获取兔主动脉组织，传代培养血管平滑肌细胞，将细胞分为对照组、单药组（血管紧张素Ⅱ）、联合组（组织蛋白酶S抑制剂＋血管紧张素Ⅱ）；采用流式细胞术和... 目的研究组织蛋白酶S抑制剂对培养的兔血管平滑肌细胞凋亡的影响及其机制。方法获取兔主动脉组织，传代培养血管平滑肌细胞，将细胞分为对照组、单药组（血管紧张素Ⅱ）、联合组（组织蛋白酶S抑制剂＋血管紧张素Ⅱ）；采用流式细胞术和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺II末端标记法（TUNEL）检测血管平滑肌细胞凋亡，蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤基因．2蛋白、B细胞淋巴瘤基因-2相关蛋白X及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3的表达。结果①流式细胞术检查及TUNEL染色结果均显示，联合组血管平滑肌细胞晚期凋亡数量明显低于单药组；TUNEL染色10h和12h时点，单药组与联合组差异有统计学意义[10h：（23607±176）比（36058±269）个，12h：（29813±205）比（39146±263）个，均P〈0．05]；②蛋白质印迹检测结果显示，与单药组相比，联合组B细胞淋巴瘤基因－2相关蛋白X／B细胞淋巴瘤基因-2蛋白明显下降，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；联合组半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶－3表达明显降低，组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论组织蛋白酶S抑制剂可能通过下调B细胞淋巴瘤基因－2相关蛋白X、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3表达减轻血管平滑肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 肌细胞 平滑肌 组织蛋白酶S 细胞凋亡

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