目的分析频繁发作和非频繁发作的慢性支气管炎（chronic bronchitis，CB）、肺气肿、哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征（asthma-chronic obstructive pulmonary disease overlap syndrome，ACOS）患者临床特征及诱导痰炎性细胞、递质的...目的分析频繁发作和非频繁发作的慢性支气管炎（chronic bronchitis，CB）、肺气肿、哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征（asthma-chronic obstructive pulmonary disease overlap syndrome，ACOS）患者临床特征及诱导痰炎性细胞、递质的异质性。方法将我院2016年11月至2017年9月收治的91例慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）急性加重期患者分为CB、肺气肿或ACOS表型，其中频繁发作者44例，非频繁发作者47例。分析其临床资料、诱导痰炎性细胞、γ干扰素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、白细胞介素13的差异。结果频繁发作患者第1秒用力呼气容积占预计值百分比（forced expiratory volume in the first second as percentage of predicted value，FEV1%）为（47.0±13.1）%，明显低于非频繁发作患者的（56.2±10.2）%，两者比较差异有统计学意义（P=0.000）。频繁发作患者第1秒用力呼气量占用力肺活量的百分比（forced expiratory volume for the first second percentage of FVC，FEV1/FVC%）为（54.3±9.3）%，明显低于非频繁发作患者的（60.1±7.3）%，两者比较差异有统计学意义（P=0.001）。频繁发作患者中GOLDⅢ、Ⅳ级的患者比例、诱导痰中中性粒细胞百分比、肿瘤坏死因子α、γ干扰素水平明显高于非频繁发作患者（P均〈0.05）。其中FEV1/FVC%、肿瘤坏死因子α是COPD患者频繁发作的独立危险因子（P值分别为0.032、0.021）。CB表型频繁发作患者FEV1%[（47.9±14.9）%]比非频繁发作患者[（57.2±10.9）%]显著降低（P=0.049）；CB表型频繁发作患者FEV1/FVC%为（53.4±9.5）%，明显低于非频繁发作患者的（60.3±6.9）%，两者比较差异有统计学意义（P=0.022）。CB表型频繁发作患者诱导痰中中性粒细胞百分比、肿瘤坏死因子α水平较非频繁发作患者明显增高（P均〈0.01）。肺气肿表型频繁发作患者与非频繁发作患者相比病程�展开更多
目的构建经MHCⅡ通路的屋尘螨1类变应原Der p 1的T细胞表位肽疫苗重组载体。方法分别合成TAT、Ih C和含编码Der p 1的3段T细胞表位的融合核苷酸序列,用特异性引物PCR扩增相应的基因片段,分别用相应的双酶切后,用T4 DNA连接酶连接形成TAT...目的构建经MHCⅡ通路的屋尘螨1类变应原Der p 1的T细胞表位肽疫苗重组载体。方法分别合成TAT、Ih C和含编码Der p 1的3段T细胞表位的融合核苷酸序列,用特异性引物PCR扩增相应的基因片段,分别用相应的双酶切后,用T4 DNA连接酶连接形成TAT-Ih C-Der p 1-3T融合基因,并插入至原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组原核表达载体p ET-28a(+)-TATIh C-Der p 1-3T,Bam HⅠ和XhoⅠ进行双酶切和测序鉴定。重组载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG诱导后,经SDS-PAGE电泳分析和Western blot验证,纯化TAT-Ih C-Der p 1-3T蛋白后进行Ig E结合试验。结果双酶切和测序结果表明,成功构建了p ET-28a-TAT-Ih C-Der p 1-3T重组原核表达载体;SDS-PAGE电泳分析显示TAT-Ih C-Der p 1-3T可诱导表达;Western blot检测表明该融合蛋白纯化成功;Ig E结合试验表明TAT-Ih C-Der p 1-3T结合屋尘螨过敏病人血清Ig E的能力强于Der p 1变应原(P<0.001)。结论成功构建了可表达经MHC通路的编码Der p 1的3段T细胞表位的重组p ET-28a-TAT-Ih C-Der p 1-3T载体,纯化的TAT-Ih C-Der p 1-3T具有较强的Ig E结合能力,从而为后续经MHC通路的特异性免疫治疗奠定基础。展开更多
文摘目的分析频繁发作和非频繁发作的慢性支气管炎（chronic bronchitis，CB）、肺气肿、哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征（asthma-chronic obstructive pulmonary disease overlap syndrome，ACOS）患者临床特征及诱导痰炎性细胞、递质的异质性。方法将我院2016年11月至2017年9月收治的91例慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）急性加重期患者分为CB、肺气肿或ACOS表型，其中频繁发作者44例，非频繁发作者47例。分析其临床资料、诱导痰炎性细胞、γ干扰素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、白细胞介素13的差异。结果频繁发作患者第1秒用力呼气容积占预计值百分比（forced expiratory volume in the first second as percentage of predicted value，FEV1%）为（47.0±13.1）%，明显低于非频繁发作患者的（56.2±10.2）%，两者比较差异有统计学意义（P=0.000）。频繁发作患者第1秒用力呼气量占用力肺活量的百分比（forced expiratory volume for the first second percentage of FVC，FEV1/FVC%）为（54.3±9.3）%，明显低于非频繁发作患者的（60.1±7.3）%，两者比较差异有统计学意义（P=0.001）。频繁发作患者中GOLDⅢ、Ⅳ级的患者比例、诱导痰中中性粒细胞百分比、肿瘤坏死因子α、γ干扰素水平明显高于非频繁发作患者（P均〈0.05）。其中FEV1/FVC%、肿瘤坏死因子α是COPD患者频繁发作的独立危险因子（P值分别为0.032、0.021）。CB表型频繁发作患者FEV1%[（47.9±14.9）%]比非频繁发作患者[（57.2±10.9）%]显著降低（P=0.049）；CB表型频繁发作患者FEV1/FVC%为（53.4±9.5）%，明显低于非频繁发作患者的（60.3±6.9）%，两者比较差异有统计学意义（P=0.022）。CB表型频繁发作患者诱导痰中中性粒细胞百分比、肿瘤坏死因子α水平较非频繁发作患者明显增高（P均〈0.01）。肺气肿表型频繁发作患者与非频繁发作患者相比病程�
文摘目的构建经MHCⅡ通路的屋尘螨1类变应原Der p 1的T细胞表位肽疫苗重组载体。方法分别合成TAT、Ih C和含编码Der p 1的3段T细胞表位的融合核苷酸序列,用特异性引物PCR扩增相应的基因片段,分别用相应的双酶切后,用T4 DNA连接酶连接形成TAT-Ih C-Der p 1-3T融合基因,并插入至原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组原核表达载体p ET-28a(+)-TATIh C-Der p 1-3T,Bam HⅠ和XhoⅠ进行双酶切和测序鉴定。重组载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG诱导后,经SDS-PAGE电泳分析和Western blot验证,纯化TAT-Ih C-Der p 1-3T蛋白后进行Ig E结合试验。结果双酶切和测序结果表明,成功构建了p ET-28a-TAT-Ih C-Der p 1-3T重组原核表达载体;SDS-PAGE电泳分析显示TAT-Ih C-Der p 1-3T可诱导表达;Western blot检测表明该融合蛋白纯化成功;Ig E结合试验表明TAT-Ih C-Der p 1-3T结合屋尘螨过敏病人血清Ig E的能力强于Der p 1变应原(P<0.001)。结论成功构建了可表达经MHC通路的编码Der p 1的3段T细胞表位的重组p ET-28a-TAT-Ih C-Der p 1-3T载体,纯化的TAT-Ih C-Der p 1-3T具有较强的Ig E结合能力,从而为后续经MHC通路的特异性免疫治疗奠定基础。
