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CellDetect~染色技术在宫颈脱落细胞诊断中的价值 被引量:4
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作者 王桂兰 陈莉 +5 位作者 朱远源 吴美华 叶蕴瑶 沈娟 吉怡 吉志国 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期621-625,共5页
目的探讨CellDetect染色技术对阴道脱落细胞诊断及鉴别诊断作用。方法采用CellDetect染色对正常细胞和肿瘤细胞中颜色变化和细胞形态的相关性进行分析;并在子宫颈鳞状细胞癌(squmous cells carcinoma,SCC)和高级别上皮内瘤变(cervic... 目的探讨CellDetect染色技术对阴道脱落细胞诊断及鉴别诊断作用。方法采用CellDetect染色对正常细胞和肿瘤细胞中颜色变化和细胞形态的相关性进行分析;并在子宫颈鳞状细胞癌(squmous cells carcinoma,SCC)和高级别上皮内瘤变(cervical intraepithelium neoplasia,CIN)的活检组织切片中比较CellDetect染色和HE染色的效果。结果 (1)手工涂片和TCT涂片的CellDetect染色均能较好的显示细胞的形态学特征,同时显示绝大多数正常鳞状上皮呈蓝色/绿色,子宫颈管上皮细胞呈鲜红色,不典型细胞与癌细胞呈红色。炎症细胞核呈红色,胞质大多数呈绿色/蓝色,红细胞胞质均呈绿色。(2)CIN和SCC的CellDetect染色诊断结果和HE染色诊断结果一致。(3)对子宫颈活检组织的切片和涂片分别行CellDetect染色,结果显示上皮原位细胞颜色反应相同,但CellDetect染色在判断癌与间质的关系或癌间质反应不如HE染色清晰。结论 Cell-Detect染色技术具有颜色和形态双重分析功能,适用于不同形式固定组织的细胞涂片染色,是子宫颈癌筛查和早期诊断的有效工具之一。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 脱落细胞 CellDetect染色技术
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CRISPR/Cas9基因组定点编辑技术在病毒性及遗传性疾病治疗中的应用及其进展 被引量:3
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作者 季彬 仇建萍 +3 位作者 周宋峰 陈莉 朱远源 王旻 《抗感染药学》 2017年第1期1-6,共6页
第3代基因组定点编辑技术(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat(CRISPR,成簇规律间隔短回文序列))介导的Cas9核酸酶系统,已被用于真核细胞的基因组编辑和基因修饰。CRISPR/Cas9技术有许多潜在的应用,包括对人类... 第3代基因组定点编辑技术(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat(CRISPR,成簇规律间隔短回文序列))介导的Cas9核酸酶系统,已被用于真核细胞的基因组编辑和基因修饰。CRISPR/Cas9技术有许多潜在的应用,包括对人类基因组进行编辑以治疗遗传缺陷疾病或基因突变疾病;删除病原体基因(如细菌基因组或病毒基因组),消灭病原体,达到消除传染性疾病的目的;也可用于农业生产(包括植物和动物的基因)中农作物的改造。综述基因组定点编辑技术CRISPR/Cas9在病毒感染性疾病和遗传缺陷性疾病中的应用文献,并对其研究进展作了分析。 展开更多
关键词 基因组定点编辑技术 CRISPR/Cas9 成簇规律间隔短回文序列 sgRNA 基因编辑 基因修饰
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MicroRNA在肿瘤诊断、治疗中的应用 被引量:2
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作者 魏清筠 朱远源 +1 位作者 彭薇 王旻 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第19期3794-3797,共4页
MicroRNA(miRNA)是真核生物中一类内源性、长约22个核苷酸的非编码小分子RNA,参与基因转录后水平调控。miRNA的突变或者异常表达,与大多数癌症的发生发展有关,且与某些抗肿瘤药物疗效密切相关。因此,miRNA在癌症的诊断、预后、治疗和指... MicroRNA(miRNA)是真核生物中一类内源性、长约22个核苷酸的非编码小分子RNA,参与基因转录后水平调控。miRNA的突变或者异常表达,与大多数癌症的发生发展有关,且与某些抗肿瘤药物疗效密切相关。因此,miRNA在癌症的诊断、预后、治疗和指导肿瘤个体化用药方面具有一定的临床应用潜力,是肿瘤生物治疗领域的一个新亮点。本文即对miRNA在诊断和治疗肿瘤方面的应用现状作一综述。 展开更多
关键词 MICRORNA 肿瘤 诊断 治疗
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CellDetect~染色技术在宫颈癌筛查中的应用 被引量:2
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作者 李冬梅 倪玉乾 +3 位作者 朱远源 孔令华 顾建刚 钟定荣 《诊断病理学杂志》 CSCD 2015年第5期297-300,共4页
目的评价CellDetect 染色技术在子宫颈癌筛查中应用的可行性及价值。方法 CellDetect染色并观察薄层液基涂片172张,与巴氏染色和活检组织病理学结果进行对比,评估CellDetect染色技术应用于宫颈癌筛查的灵敏度和特异度。活检组织... 目的评价CellDetect 染色技术在子宫颈癌筛查中应用的可行性及价值。方法 CellDetect染色并观察薄层液基涂片172张,与巴氏染色和活检组织病理学结果进行对比,评估CellDetect染色技术应用于宫颈癌筛查的灵敏度和特异度。活检组织染色选自CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级和SCC的病例。结果 CellDetect染色能从颜色上显示出高度病变、低度病变和不典型鳞状上皮细胞,表现为核呈紫红色,而正常的表层细胞表现为细胞质和核为绿色,中间型(副基底细胞和基底细胞)细胞核为绿色或淡粉色;在活检组织中,CellDetect染色于上皮层染色较好,正常组织与病变组织颜色反应分界清楚,对于CIN的分级有很好的帮助。CellDetect染色诊断CIN和SCC的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为85.2%、65.2%、74.2%和78.9%。结论 CellDetect染色对于CINⅡ、Ⅲ和SCC的检出率比较高,与巴氏染色相比,增加了颜色指标,能够区分染色宫颈上皮正常细胞和病变细胞,特别适用于需要临床即时干预的高级别病变的检出,极有可能成为宫颈癌初筛和早期诊断的简单、低价、有效的特殊染色方法。 展开更多
关键词 CellDetect(R)染色 宫颈癌 筛查
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应用RNAi技术治疗HBV的研究进展 被引量:1
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作者 陈雅晴 彭薇 +1 位作者 陆毅祥 奚涛 《生命科学》 CSCD 北大核心 2011年第4期359-363,共5页
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是一种全球性的健康问题。全球大约有4亿HBV慢性感染患者,尤其在中国,感染率高达9.8%。RNAi(RNA interference)技术具有特异性地抑制,甚至关闭基因表达的特点,在治疗HBV感染方面有很大的应用前... 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是一种全球性的健康问题。全球大约有4亿HBV慢性感染患者,尤其在中国,感染率高达9.8%。RNAi(RNA interference)技术具有特异性地抑制,甚至关闭基因表达的特点,在治疗HBV感染方面有很大的应用前景。近年来,研究者针对HBV基因设计或筛选有效siRNA靶点做了很多研究,最近还出现了针对与HBV代谢相关的宿主基因设计或筛选siRNA靶点治疗HBV的新策略。该文对RNAi技术在HBV治疗方面取得的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 RNAI HBV 宿主基因
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Phi29DNA聚合酶最新应用研究进展 被引量:1
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作者 练杜娟 仇建萍 +2 位作者 张平静 朱远源 李谦 《药物生物技术》 CAS 2016年第2期150-154,共5页
phi29 DNA聚合酶来源于枯草芽孢杆菌噬菌体phi29,具有连续合成和链置换性质,且具有高保真性。它是DNA扩增包括滚环扩增和多重置换扩增的理想工具。文章从phi29 DNA聚合酶的来源和结构与功能、近期对于phi29 DNA聚合酶的应用研究入手,综... phi29 DNA聚合酶来源于枯草芽孢杆菌噬菌体phi29,具有连续合成和链置换性质,且具有高保真性。它是DNA扩增包括滚环扩增和多重置换扩增的理想工具。文章从phi29 DNA聚合酶的来源和结构与功能、近期对于phi29 DNA聚合酶的应用研究入手,综述了phi29 DNA聚合酶的结构与功能的关系及其用于核酸测序,病毒检测,miRNA检测方面的应用前景。 展开更多
关键词 phi29 DNA聚合酶 滚环扩增 多重置换扩增 测序 病毒检测 miRNA检测
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RNAi对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白表达的沉默作用观察 被引量:1
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作者 秦军 梁海滨 +4 位作者 吴美华 马利林 柯靖 黄宝玉 樊勇 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第42期22-23,共2页
目的观察RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白(Paxillin)表达的沉默作用。方法构建针对Paxillin基因序列的短发卡RNA(shRNA)表达载体,并转染至结肠癌HCT-8细胞,72 h后分别用实时定量PCR和Western blot法测定转染细胞中Paxillin mRNA... 目的观察RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白(Paxillin)表达的沉默作用。方法构建针对Paxillin基因序列的短发卡RNA(shRNA)表达载体,并转染至结肠癌HCT-8细胞,72 h后分别用实时定量PCR和Western blot法测定转染细胞中Paxillin mRNA及蛋白。结果根据针对Paxillin基因设计了小干扰RNA(siRNA)序列,构建了shRNA表达载体,并成功转染至HCT-8细胞。以空白对照组作均一化,转染Paxillin-shRNA_1、Paxillin-shRNA_2、Paxillin-shRNA_3、Paxillin-shRNA_NC的细胞及空白对照组细胞Paxillin mRNA相对表达量分别为0.66±0.28、0.31±0.11、1.00±0.22、1.05±0.32、1.00±0.29,Paxillin蛋白相对表达量分别为0.62±0.11、0.39±0.13、0.74±0.21、0.94±0.09、1.00±0.16。结论 RNAi可沉默结肠癌HCT-8细胞Paxillin的表达。 展开更多
关键词 RNA干扰 短发卡RNA 小干扰RNA 结肠癌细胞 桩蛋白
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大规模合成长链RNA的简易低成本工艺
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作者 张平静 李铁军 +4 位作者 周宋峰 朱远源 陈建新 陆毅祥 文锋 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期114-120,共7页
由于现有技术所限,RNA分子长度和二级结构往往成为RNA合成困难的主要原因。提供了一种简单低成本大规模制备和纯化长链RNA药物的新工艺,尤其针对具有稳定二级结构的长链RNA药物。采用引物延伸方法替代PCR和线性质粒DNA方法制备线性DNA... 由于现有技术所限,RNA分子长度和二级结构往往成为RNA合成困难的主要原因。提供了一种简单低成本大规模制备和纯化长链RNA药物的新工艺,尤其针对具有稳定二级结构的长链RNA药物。采用引物延伸方法替代PCR和线性质粒DNA方法制备线性DNA模板可减少步骤及降低污染,然后用T7 RNA聚合酶转录制备的甲氧基修饰的线性DNA模板获得高均一度的长链RNA,转录粗产物直接用source 15Q阴离子HPLC分离T7 RNA聚合酶、rNTP、转录中断产物、内毒素和模板DNA等,从而获得高纯度RNA终产物。该工艺无需繁琐的酚/氯仿抽提和RNA变性,尤其适用于RNA的大量制备。 展开更多
关键词 长链 RNA 大规模 转录 纯化
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探讨DetectCell~染色在良恶性细胞鉴别中的价值
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作者 王桂兰 王建力 +6 位作者 朱远源 吉怡 吴美华 沈娟 叶蕴瑶 吉志国 陈莉 《南通大学学报(医学版)》 2012年第4期247-249,244,共3页
目的:用DetectCell染色人结肠癌细胞(HT-29)和小鼠胚胎成纤维细胞(C3H)细胞,探索DetectCell染色在细胞良恶性鉴别中的价值。方法:DetectCell染色试剂主要由含有酸性红,碱性绿和具有特殊反应亲和力的无花果属植物提取液组成。通过检测各... 目的:用DetectCell染色人结肠癌细胞(HT-29)和小鼠胚胎成纤维细胞(C3H)细胞,探索DetectCell染色在细胞良恶性鉴别中的价值。方法:DetectCell染色试剂主要由含有酸性红,碱性绿和具有特殊反应亲和力的无花果属植物提取液组成。通过检测各主要染色试剂pH值、稀释浓度波长的吸光度比值(OD540/OD630)以控制染色试剂的检测标准,然后进行DetectCell染色观察细胞形态与颜色特征。结果:DetectCell主要染液的pH值和540 nm/630 nm波长处OD值均符合检测标准;DetectCell染色HT-29细胞和C3H细胞能保持原有细胞的形态,同时分别使纤维母细胞C3H被染成绿色,使癌细胞HT-29被染成红色。结论:DetectCell染色使癌细胞呈红色,非癌细胞呈绿色,并不影响细胞形态特征,因此该染色提供了颜色和形态双重分析功能。 展开更多
关键词 DetectCell染色 人结肠癌细胞 小鼠胚胎成纤维细胞
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