D-异抗坏血酸生产技术研究进展 被引量：13

1

作者 周强 魏转 +2 位作者 孙文敬 余泗莲 李中兵 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第8期647-651,共5页

D-异抗坏血酸是维生素C的一种光学异构体,主要用于食品的抗氧保鲜。本文介绍了D-异抗坏血酸及其钠盐生产技术的研究进展,提出了国内D-异抗坏血酸及其钠盐生产中存在的主要问题及改善对策。

关键词 抗氧化剂 D-异抗坏血酸 D-异抗坏血酸钠 生产技术

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NaOH预处理对玉米秸秆固态厌氧消化的影响 被引量：15

2

作者 崔凤杰 李向菲 +3 位作者 周宇光 陈华友 孙文敬 黄达明 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1919-1924,共6页

实验主要研究了NaOH预处理对玉米秸秆厌氧消化产气量和产气效率的影响。采用质量分数分别为1.0%、2.5%、5.0%和7.5%NaOH溶液对玉米秸秆进行24 h浸泡和未浸泡等预处理,测定其厌氧消化过程中各指标的变化。结果表明,经质量分数为5.0%NaOH... 实验主要研究了NaOH预处理对玉米秸秆厌氧消化产气量和产气效率的影响。采用质量分数分别为1.0%、2.5%、5.0%和7.5%NaOH溶液对玉米秸秆进行24 h浸泡和未浸泡等预处理,测定其厌氧消化过程中各指标的变化。结果表明,经质量分数为5.0%NaOH浸泡24 h后,玉米秸秆木质素降解率最大,为38.67%;厌氧发酵累积产气量为226.75L/kg VS,与未经碱处理实验组相比提高了38.5%。该结果提示,5.0%NaOH溶液浸泡24 h后可使玉米秸秆厌氧消化的产气量和产气效率显著提高。 展开更多

关键词 固态厌氧消化 玉米秸秆 NaOH预处理 木质素

原文传递

2-酮基-D-葡萄糖酸发酵生产研究进展 被引量：12

3

作者 魏转 余泗莲 +2 位作者 孙文敬 周强 李中兵 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第8期636-639,共4页

2-酮基-D-葡萄糖酸(2KGA)是合成食品抗氧化剂D-异抗坏血酸钠及D-异抗坏血酸的前体,通常采用细菌发酵的方法由D-葡萄糖转化而来。本文概述了2KGA的生物合成途径、2KGA产生菌的选育、2KGA的发酵条件、2KGA的发酵工艺、2KGA发酵产物的提取... 2-酮基-D-葡萄糖酸(2KGA)是合成食品抗氧化剂D-异抗坏血酸钠及D-异抗坏血酸的前体,通常采用细菌发酵的方法由D-葡萄糖转化而来。本文概述了2KGA的生物合成途径、2KGA产生菌的选育、2KGA的发酵条件、2KGA的发酵工艺、2KGA发酵产物的提取、国内2KGA发酵生产中存在的主要问题及改善对策等。 展开更多

关键词 2-酮基-D-葡萄糖酸 发酵 D-异抗坏血酸钠 D-异抗坏血酸

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半连续发酵及其应用研究进展 被引量：7

4

作者 孙文敬 刘长峰 +3 位作者 周延政 王大明 崔凤杰 余琳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期345-350,共6页

半连续发酵是一种重要的生化培养方式。本文介绍半连续发酵的应用领域,详细综述半连续发酵的分类、特点、与连续发酵的联系以及半连续发酵过程中的菌体循环利用方法,并结合当前代谢工程和过程控制策略的发展趋势,对半连续发酵技术的应... 半连续发酵是一种重要的生化培养方式。本文介绍半连续发酵的应用领域,详细综述半连续发酵的分类、特点、与连续发酵的联系以及半连续发酵过程中的菌体循环利用方法,并结合当前代谢工程和过程控制策略的发展趋势,对半连续发酵技术的应用前景进行展望。 展开更多

关键词 半连续发酵 研究现状 应用领域 展望

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D-异抗坏血酸的生产应用现状及前景 被引量：7

5

作者 刘明霞 周强 陈卫平 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期376-381,共6页

D-异抗坏血酸作为一种优良的食品添加剂,在生产加工方面特别是食品工业得到广泛的应用。本文综述了D-异抗坏血酸生产技术研究和应用的现状、存在的问题及前景展望。

关键词 D-异抗坏血酸 生产技术 应用 前景展望

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核黄素磷酸钠生产工艺的研究 被引量：4

6

作者 孙文敬 魏转 +2 位作者 余泗莲 周强 黄达明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第8期188-190,共3页

研究磷酸化反应中核黄素与POCl3及H2O的配比、反应温度、反应时间等因素对核黄素磷酸钠合成的影响。结果表明,在吡啶和乙腈的混合溶剂中,使核黄素与其4倍摩尔量的三氯氧磷在35℃左右反应2h,然后水解反应混合物,再用NaOH溶液中和,能够以... 研究磷酸化反应中核黄素与POCl3及H2O的配比、反应温度、反应时间等因素对核黄素磷酸钠合成的影响。结果表明,在吡啶和乙腈的混合溶剂中,使核黄素与其4倍摩尔量的三氯氧磷在35℃左右反应2h,然后水解反应混合物,再用NaOH溶液中和,能够以75%以上的收率得到核黄素磷酸钠。 展开更多

关键词 核黄素磷酸钠 核黄素 三氯氧磷 生产

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高浓度发酵及膜分离技术在2-酮基-D-葡萄糖酸生产中的应用研究 被引量：4

7

作者 孙文敬 魏转 +2 位作者 林琳 余泗莲 周强 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第17期244-246,共3页

研究中和剂和底物总浓度对2-酮基-D-葡萄糖酸补料分批发酵的影响,并初步考察膜分离技术在发酵产物提取中应用的可行性。结果表明:在2-酮基-D-葡萄糖酸的补料分批发酵中,以NaOH或Na2CO3代替CaCO3作为中和剂,能够有效提高发酵培养基中的... 研究中和剂和底物总浓度对2-酮基-D-葡萄糖酸补料分批发酵的影响,并初步考察膜分离技术在发酵产物提取中应用的可行性。结果表明:在2-酮基-D-葡萄糖酸的补料分批发酵中,以NaOH或Na2CO3代替CaCO3作为中和剂,能够有效提高发酵培养基中的底物总浓度,且发酵转化率可达90%左右;在NaOH或Na2CO3作为发酵中和剂的情况下,膜技术可应用于2-酮基-D-葡萄糖酸的提取中,且有助于其提取率的提高。 展开更多

关键词 2-酮基-D-葡萄糖酸 高浓度发酵:膜分离技术 提取

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肉桂酸Vc酯和肉桂酸异Vc酯的合成及其性能研究 被引量：5

8

作者 郑大贵 祝显虹 +2 位作者 张勇 余泗莲 彭化南 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1502-1506,共5页

肉桂酰氯分别与Vc(L-抗坏血酸)和异Vc(D-异抗坏血酸)反应,得到肉桂酸Vc酯1和肉桂酸异Vc酯2,1和2的结构经IR、1H NMR、13C NMR和EI-MS确证。用分光光度法测试了产物清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基性能,用孔穴扩散法测试... 肉桂酰氯分别与Vc(L-抗坏血酸)和异Vc(D-异抗坏血酸)反应,得到肉桂酸Vc酯1和肉桂酸异Vc酯2,1和2的结构经IR、1H NMR、13C NMR和EI-MS确证。用分光光度法测试了产物清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基性能,用孔穴扩散法测试了产物对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和细黄链霉菌的抗菌性能。结果表明,当受试物的摩尔浓度相同时,产物1和2清除上述三种自由基的能力分别比Vc和异Vc略有提高;当给药量为2 mg·mL-1时,产物1和2对上述四种菌种的抑菌效果与肉桂酸、山梨酸钾和苯甲酸钠大致相当。 展开更多

关键词 肉桂酸Vc酯 肉桂酸异Vc酯 合成 清除自由基性能 抗菌性能

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旋光法测定发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸 被引量：4

9

作者 孙文敬 周延政 +3 位作者 冯晓燕 魏转 余泗莲 周强 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第22期375-377,共3页

通过测定发酵液的旋光度及其葡萄糖质量浓度,计算发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸的质量浓度,并考察该方法实际应用的可行性。结果表明:对照品溶液的旋光度、2-酮基-D-葡萄糖酸质量浓度和葡萄糖质量浓度之间存在良好的线性关系,R2>0.9999... 通过测定发酵液的旋光度及其葡萄糖质量浓度,计算发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸的质量浓度,并考察该方法实际应用的可行性。结果表明:对照品溶液的旋光度、2-酮基-D-葡萄糖酸质量浓度和葡萄糖质量浓度之间存在良好的线性关系,R2>0.9999;该方法精密度、稳定性和重现性良好,2-酮基-D-葡萄糖酸的平均回收率为102.60%,RSD为2.17%(n=5)。该方法可用于发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸的定量检测。 展开更多

关键词 2-酮基-D-葡萄糖酸 葡萄糖 发酵液 旋光法 测定

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维生素酯化衍生物的合成研究进展 被引量：4

10

作者 赵红霞 崔凤杰 +6 位作者 李云虹 孙文敬 周强 余泗莲 董英 宗玲 黄浩 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2013年第6期176-183,共8页

维生素酯是由维生素的醇(酚)羟基与羧酸类化合物经缩合反应合成的一类酯化衍生物。维生素经酯化后,在多种溶剂体系下其稳定性显著提高,同时具备原有和新增功能基团的功能和活性,拓宽了其应用范围。目前,多种经过结构修饰的维生素衍生物... 维生素酯是由维生素的醇(酚)羟基与羧酸类化合物经缩合反应合成的一类酯化衍生物。维生素经酯化后,在多种溶剂体系下其稳定性显著提高,同时具备原有和新增功能基团的功能和活性,拓宽了其应用范围。目前,多种经过结构修饰的维生素衍生物已实现商品化,广泛用作食品添加剂、药品或保健品。例如,改性后的维生素C酯是一种兼具抗肿瘤、抗衰老、抗生物氧化、清除体内自由基等多种功能特性、安全的新型食品添加剂;维生素E酯可作为维生素E替代品而广泛用于医药、食品和化妆品等方面;维生素A酯是重要药品和饲料添加剂。本文主要对几种典型的维生素酯化物如(异)维生素C酯、维生素E酯和维生素A酯的合成技术研究现状进行综述,对相关合成技术中存在的问题进行分析,并对维生素酯化衍生物的发展进行了展望。 展开更多

关键词 维生素酯 酯化衍生物 食品添加剂 合成方法 应用

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真菌β-1,3-葡聚糖基转移酶研究进展 被引量：3

11

作者 付鑫 朱鸿安 +2 位作者 崔凤杰 昝新艺 孙文敬 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期276-282,共7页

真菌葡聚糖作为细胞壁的重要组成部分,与菌丝形成、菌体生长等众多过程密切相关,同时还具有显著的增强免疫、调节肠道菌群、预防心血管疾病等功能。真菌中最重要的葡聚糖主要由β-1,3-糖苷键连接的主链和不同比例和聚合度的β-1,3和/或... 真菌葡聚糖作为细胞壁的重要组成部分,与菌丝形成、菌体生长等众多过程密切相关,同时还具有显著的增强免疫、调节肠道菌群、预防心血管疾病等功能。真菌中最重要的葡聚糖主要由β-1,3-糖苷键连接的主链和不同比例和聚合度的β-1,3和/或β-1,6-糖苷键连接的支链构成。GH72家族的β-1,3-葡聚糖转移酶具有切割和转移葡聚糖糖链的能力。在真菌葡聚糖合成过程中,β-1,3-葡聚糖转移酶通过切割和转移线性葡聚糖链,对其结构进行分支化修饰,形成丰富的分支结构。影响葡聚糖的水溶性、分散性和细胞壁的结构和功能等。该文主要对几种真菌中GH72家族葡聚糖基转移酶的研究现状进行综述,以期为理解真菌葡聚糖的合成途径和葡聚糖合成相关酶系的催化机制提供一定的参考。 展开更多

关键词 真菌 β-1 3-葡聚糖基转移酶 葡聚糖合成 分支化 GH72家族

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脂肪酶催化合成L-抗坏血酸脂肪酸酯和D-异抗坏血酸脂肪酸酯 被引量：4

12

作者 郑大贵 祝显虹 +2 位作者 余泗莲 彭化南 张小兰 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1752-1757,共6页

用固定化脂肪酶Lipozyme 435作催化剂,分别用直接酯化法和酯交换法合成L-抗坏血酸脂肪酸酯和D-异抗坏血酸脂肪酸酯。产物结构经IR、1HNMR、13CNMR和MS表征。结果表明,对于同一目标化合物,相似条件下,直接酯化法的效果优于酯交换法,原料... 用固定化脂肪酶Lipozyme 435作催化剂,分别用直接酯化法和酯交换法合成L-抗坏血酸脂肪酸酯和D-异抗坏血酸脂肪酸酯。产物结构经IR、1HNMR、13CNMR和MS表征。结果表明,对于同一目标化合物,相似条件下,直接酯化法的效果优于酯交换法,原料脂肪酸和脂肪酸甲酯均可回收循环使用。 展开更多

关键词 脂肪酶 直接酯化法 酯交换法 L-异抗坏血酸脂肪酸酯 D-异抗坏血酸脂肪酸酯

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变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸转运蛋白基因的克隆与分析 被引量：4

13

作者 孙文敬 栾方 +3 位作者 王大明 张晓飞 崔凤杰 李运哲 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2016年第6期50-55,共6页

该研究旨在克隆变形假单胞菌JUIM01的2-酮基葡萄糖酸转运蛋白基因kgu T,并明确其基本的生物学信息。根据已报道的假单胞菌的基因组信息及其2-酮基葡萄糖酸操纵子的物理图谱设计简并引物,采用TD-PCR技术从变形假单胞菌中克隆到全长为1278... 该研究旨在克隆变形假单胞菌JUIM01的2-酮基葡萄糖酸转运蛋白基因kgu T,并明确其基本的生物学信息。根据已报道的假单胞菌的基因组信息及其2-酮基葡萄糖酸操纵子的物理图谱设计简并引物,采用TD-PCR技术从变形假单胞菌中克隆到全长为1278 bp的kgu T,其核苷酸序列与Pseudomonas sp.CCOS191的编码2-酮基葡萄糖酸转运蛋白(Kgu T)的核苷酸序列的一致性为87%,编码一个由425个氨基酸残基组成的蛋白。该蛋白与Pseudomonas sp.M1的Kgu T在氨基酸序列上的一致性达90%,定位于细胞膜,是一个具有12个跨膜结构的疏水性的跨膜蛋白,无信号肽,其二级结构中α螺旋、延伸链和无规卷曲所占的比例分别为75.76%、2.12%和22.12%。本研究首次从2-酮基葡萄糖酸的工业生产用菌中克隆到基因kgu T,并对其进行了生物信息学分析,为变形假单胞菌的Kgu T的功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 变形假单胞菌 2-酮基葡萄糖酸转运蛋白 kgu T基因 克隆 生物信息学

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碘量法测定发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸 被引量：3

14

作者 冯晓燕 周延政 +3 位作者 孙文敬 王大明 余泗莲 刘敬泽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第24期314-317,共4页

在优化样品处理条件的基础上,考察葡萄糖对2-酮基-D-葡萄糖酸测定的影响,改进发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸的碘量法测定技术。结果表明:滴定样品溶液所消耗的I2标准溶液的体积、样品溶液中2-酮基-D-葡萄糖酸质量浓度和葡萄糖质量浓度之间... 在优化样品处理条件的基础上,考察葡萄糖对2-酮基-D-葡萄糖酸测定的影响,改进发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸的碘量法测定技术。结果表明:滴定样品溶液所消耗的I2标准溶液的体积、样品溶液中2-酮基-D-葡萄糖酸质量浓度和葡萄糖质量浓度之间存在良好的线性关系,R2>0.9999;该方法精密度、稳定性和重现性良好,2-酮基-D-葡萄糖酸的平均回收率为95.68%,RSD为1.35%(n=5)。该方法准确、快速,操作简便,可用于发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸的定量检测。 展开更多

关键词 2-酮基-D-葡萄糖酸 葡萄糖 发酵液 碘量法

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异VC山茶油脂肪酸酯的抗氧化性能研究 被引量：3

15

作者 余泗莲 余彬 +2 位作者 祝显虹 毛刘量 郑大贵 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2012年第6期161-164,共4页

新鲜猪油中添加异VC山茶油脂肪酸酯和对照的抗氧化剂,按照GB/T5009.37-2003的方法,进行强氧化试验,测定过氧化值(POV);二苯代苦味肼基自由基(DPPH.)无水乙醇溶液中添加异VC山茶油脂肪酸酯和对照的抗氧化剂,用分光光度法测定DPPH.清除率(... 新鲜猪油中添加异VC山茶油脂肪酸酯和对照的抗氧化剂,按照GB/T5009.37-2003的方法,进行强氧化试验,测定过氧化值(POV);二苯代苦味肼基自由基(DPPH.)无水乙醇溶液中添加异VC山茶油脂肪酸酯和对照的抗氧化剂,用分光光度法测定DPPH.清除率(SA)。POV数据表明,参照中国规定的最高允许浓度往猪油中分别添加抗氧化剂,异VC山茶油脂肪酸酯抗氧化能力与异VC棕榈酸酯和TBHQ相当,但比维生素C棕榈酸酯强。SA数据表明,在受试物浓度高于1.666710-4mol.L-1,并且浓度相同时,异VC山茶油脂肪酸酯表现出比异VC棕榈酸酯、VC棕榈酸酯和TBHQ更强的清除能力。 展开更多

关键词 异VC山茶油脂肪酸酯 抗氧化性能 POV法 DPPH’法

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原生质体诱变选育高产异抗坏血酸菌株 被引量：3

16

作者 刘明霞 张凤英 +2 位作者 周强 孙超 陈卫平 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期30-37,共8页

以灰黄青霉菌(Penicillium griseofulvum HL)为出发菌株,试验得到灰黄青霉原生质体制备的优化条件为:菌体培养48h,用0.7mol/L的NaCl溶液作为渗透压稳定剂,用0.5%的蜗牛酶+0.5%的纤维素酶,在pH为6,30℃条件下酶解3h,所得原生质体数最多,... 以灰黄青霉菌(Penicillium griseofulvum HL)为出发菌株,试验得到灰黄青霉原生质体制备的优化条件为:菌体培养48h,用0.7mol/L的NaCl溶液作为渗透压稳定剂,用0.5%的蜗牛酶+0.5%的纤维素酶,在pH为6,30℃条件下酶解3h,所得原生质体数最多,达到3.14×107/ml。原生质体再生的最佳条件为采用双层平板培养法,在用0.7mol/L的蔗糖溶液配制的改进察氏培养基上其再生率最高,达到24.93%。灰黄青霉原生质体经过紫外线诱变,DES诱变,紫外线-DES诱变复合诱变,紫外线-氯化锂复合诱变选育异抗坏血酸高产菌株,通过对再生平板上长出的诱变菌株进行初筛和摇瓶复筛,最终获得一株异抗坏血酸产量较高的菌株ZD4,其产量为5.28mg/ml,提高到出发菌株产量(1.08 mg/ml)的488.9%,且连续传代6代遗传稳定。 展开更多

关键词 原生质体 诱变 选育 异抗坏血酸

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微生物高细胞密度培养技术及其在食品添加剂生产中的应用 被引量：3

17

作者 韦海阳 孙文敬 +2 位作者 崔凤杰 高培玲 余彬 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2013年第2期204-213,共10页

微生物高细胞密度培养具有减少培养体积、强化下游分离提取、缩短生产周期和减少设备投资等优点,已成为生化工程领域重点关注的研究课题之一,并在食品添加剂生产中逐步得到广泛应用。一些限制性因素如限制性底物、生长抑制性物质、溶解... 微生物高细胞密度培养具有减少培养体积、强化下游分离提取、缩短生产周期和减少设备投资等优点,已成为生化工程领域重点关注的研究课题之一,并在食品添加剂生产中逐步得到广泛应用。一些限制性因素如限制性底物、生长抑制性物质、溶解氧和发酵液流变学特性等,对高细胞密度培养的影响显著;选择合适的生物反应器,包括传统搅拌式生物反应器、气升式生物反应器以及新型的膜生物反应器和透析反应器等,是实现高细胞密度培养的保证;采取适当的培养控制策略,包括基于恒溶解氧、恒pH值、CO2释放速率、底物浓度和呼吸熵的反馈控制策略以及预设参数的非反馈控制策略,是实现高密度培养的关键。本文综述了高细胞密度培养的限制因素、生物反应器及培养控制策略方面的近期研究进展,介绍了该技术在虾青素、脂肪酶、植酸酶、二十二碳六烯酸、α-乙酰乳酸脱羧酶和L-乳酸等食品添加剂生产中的应用,并对微生物高细胞密度培养技术的发展前景进行了展望。 展开更多

关键词 高细胞密度培养 生物反应器 补料分批培养控制策略 食品添加剂 应用

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反-β-正烷氧羰基丙烯酸-6-D-异抗坏血酸酯的合成和性能研究 被引量：2

18

作者 郑大贵 祝显虹 +2 位作者 张勇 彭化南 余泗莲 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期305-308,356,共5页

反-β-正烷氧羰基丙烯酸与SOCl2反应得到反-β-正烷氧羰基丙烯酰氯，后者再与D-异抗坏血酸反应，得到标题化合物。其结构经IR、^1HNMR、^13CNMR和MS确证。用分光光度法测试了反-β-正已氧羰基丙烯酸-6-D-异抗坏血酸酯清除DPPH自由基的... 反-β-正烷氧羰基丙烯酸与SOCl2反应得到反-β-正烷氧羰基丙烯酰氯，后者再与D-异抗坏血酸反应，得到标题化合物。其结构经IR、^1HNMR、^13CNMR和MS确证。用分光光度法测试了反-β-正已氧羰基丙烯酸-6-D-异抗坏血酸酯清除DPPH自由基的活性，用孔穴扩散法测试了标题化合物的抗菌活性。结果表明，在物质的量浓度相等时，D-异抗坏血酸与反田．正己氧羰基丙烯酸-6-D-异抗坏血酸酯对DPPH自由基的清除率基本接近；在给药量为2ms／mL时，标题化合物对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径在5．00-7．25mm之间，对细黄链霉菌的抑菌圈直径在15．00—17．50mm之间。 展开更多

关键词 反-β-正烷氧羰基丙烯酸-6-D-异抗坏血酸酯 D-异抗坏血酸 合成 清除自由基活性 抗菌活性

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变形假单胞菌PtxS蛋白基因的克隆与分析 被引量：2

19

作者 张晓飞 王大明 +3 位作者 孙文敬 崔凤杰 李运哲 齐向辉 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第4期284-291,共8页

为从变形假单胞菌中克隆2-酮基葡萄糖酸代谢调控蛋白Ptx S的基因,并明确其基本的生物学信息,采用同源比对的方法设计引物,利用TD-PCR技术克隆Ptx S的基因,再用生物信息学方法对其进行分析。试验结果表明:克隆的基因片段全长1 023 bp,其... 为从变形假单胞菌中克隆2-酮基葡萄糖酸代谢调控蛋白Ptx S的基因,并明确其基本的生物学信息,采用同源比对的方法设计引物,利用TD-PCR技术克隆Ptx S的基因,再用生物信息学方法对其进行分析。试验结果表明:克隆的基因片段全长1 023 bp,其序列与铜绿假单胞菌、恶臭假单胞菌等假单胞菌的转录调控蛋白Ptx S的基因序列一致性达80%左右,编码由340个氨基酸残基组成的蛋白Ptx S。该蛋白与恶臭假单胞菌Ptx S的同源性最高,氨基酸序列一致性达88%。该蛋白定位于细胞质,无信号肽和跨膜区,为亲水性蛋白。该蛋白的氨基酸序列中含有多个结构域,其二级结构中α螺旋、延伸链、β转角和无规卷曲所占的比例分别为54.41%,13.53%,10.88%和21.18%。本研究为该基因的表达及表达产物的分离纯化提供了理论基础。 展开更多

关键词 变形假单胞菌 2-酮基葡萄糖酸 PtxS 克隆 生物信息

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变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸差向异构酶基因的原核表达 被引量：2

20

作者 孙文敬 杨荔 +5 位作者 栾方 何小用 崔凤杰 王大明 钱静亚 齐向辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第2期66-72,共7页

采用降落聚合酶链式反应(touchdown polymerase chain reaction,TD-PCR)技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆了编码2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的基因kgu E。将目的基因与质粒pET-28a(+)重组后转入宿主表达菌中,... 采用降落聚合酶链式反应(touchdown polymerase chain reaction,TD-PCR)技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆了编码2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的基因kgu E。将目的基因与质粒pET-28a(+)重组后转入宿主表达菌中,获得了重组菌株大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-kgu E。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导下,该重组菌株表达了一个分子质量约为30.5 ku的融合蛋白,且该蛋白的Western-blot鉴定结果显示为阳性。生物信息学分析结果表明,该蛋白是一种由256个氨基酸残基组成的分子质量为28.5 ku的亲水性蛋白,与恶臭假单胞菌的2-酮基葡萄糖酸差向异构酶在氨基酸序列上的一致性达78%,定位于细胞质中,其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为40.62%、17.19%和42.19%。本研究结果为变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的功能研究提供了一定理论支持。 展开更多

关键词 变形假单胞菌 2-酮基葡萄糖酸差向异构酶 kgu E基因 克隆 表达 生物信息学

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