目的 建立测定b型流感嗜血杆菌（Haemophilus in fluenzae type b,Hib）结合疫苗游离多糖的脱氧胆酸钠（sodium deoxycholate,DOC）沉淀法.方法 在一定的酸性条件下,用1％DOC沉淀分离Hib结合疫苗中的结合多糖和游离多糖,测定上清和沉淀...目的 建立测定b型流感嗜血杆菌（Haemophilus in fluenzae type b,Hib）结合疫苗游离多糖的脱氧胆酸钠（sodium deoxycholate,DOC）沉淀法.方法 在一定的酸性条件下,用1％DOC沉淀分离Hib结合疫苗中的结合多糖和游离多糖,测定上清和沉淀的多糖含量,并对该法进行验证.结果 DOC沉淀法的标准曲线具有可靠的线性,决定系数＞0.999.该法的准确性和精密度良好,多糖加样回收率为103％～108％,相对标准偏差均＜10％.结论 建立的DOC沉淀法可用于Hib结合疫苗中的游离多糖测定.展开更多
目的优化b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b，Hib）多糖纯化工艺，替代传统的苯酚结合乙醇方法。方法采用十六烷基三甲基溴化铵提取粗糖，以脱氧胆酸钠结合乙醇多级纯化进一步纯化粗糖，通过超滤浓缩和除菌过滤获得纯化的...目的优化b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b，Hib）多糖纯化工艺，替代传统的苯酚结合乙醇方法。方法采用十六烷基三甲基溴化铵提取粗糖，以脱氧胆酸钠结合乙醇多级纯化进一步纯化粗糖，通过超滤浓缩和除菌过滤获得纯化的Hib多糖。采用优化的纯化工艺以中试和放大规模各纯化3批Hib多糖，按照《中华人民共和国药典》2010年版三部的要求检测纯化的Hib多糖。结果中试和放大规模纯化的各3批Hib多糖的相对分子质量分别为621800、国4400、659900和597200、612100、583400，均符合规定的标准。中试和放大规模纯化的各3批Hib多糖的细菌内毒素含量分别为2．0、0．5、0．7EU／μg和4．0、2．0、1．0EU／μg，均明显低于规定的标准。鉴别试验显示，中试和放大规模纯化的各批Hib多糖均可与标准Hib抗血清形成明显的沉淀线。结论优化的Hib多糖纯化工艺具有较好的稳定性，且易于工艺放大，可替代传统工艺用于Hib多糖的纯化。展开更多
文摘目的 建立测定b型流感嗜血杆菌（Haemophilus in fluenzae type b,Hib）结合疫苗游离多糖的脱氧胆酸钠（sodium deoxycholate,DOC）沉淀法.方法 在一定的酸性条件下,用1％DOC沉淀分离Hib结合疫苗中的结合多糖和游离多糖,测定上清和沉淀的多糖含量,并对该法进行验证.结果 DOC沉淀法的标准曲线具有可靠的线性,决定系数＞0.999.该法的准确性和精密度良好,多糖加样回收率为103％～108％,相对标准偏差均＜10％.结论 建立的DOC沉淀法可用于Hib结合疫苗中的游离多糖测定.
文摘目的优化b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b，Hib）多糖纯化工艺，替代传统的苯酚结合乙醇方法。方法采用十六烷基三甲基溴化铵提取粗糖，以脱氧胆酸钠结合乙醇多级纯化进一步纯化粗糖，通过超滤浓缩和除菌过滤获得纯化的Hib多糖。采用优化的纯化工艺以中试和放大规模各纯化3批Hib多糖，按照《中华人民共和国药典》2010年版三部的要求检测纯化的Hib多糖。结果中试和放大规模纯化的各3批Hib多糖的相对分子质量分别为621800、国4400、659900和597200、612100、583400，均符合规定的标准。中试和放大规模纯化的各3批Hib多糖的细菌内毒素含量分别为2．0、0．5、0．7EU／μg和4．0、2．0、1．0EU／μg，均明显低于规定的标准。鉴别试验显示，中试和放大规模纯化的各批Hib多糖均可与标准Hib抗血清形成明显的沉淀线。结论优化的Hib多糖纯化工艺具有较好的稳定性，且易于工艺放大，可替代传统工艺用于Hib多糖的纯化。
