期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
尿激酶原cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的高效表达(Ⅰ) 被引量：4
1
作者 李风知 李军 +2 位作者 李秀珍 林建波 俞炜源 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1993年第2期89-92,共4页
借鉴基因表达调控理论的研究结果和作者多年来对高效表达的研究经验,自行设计和构建了一个适合在哺乳动物细胞中高效表达外源基因的新型载体。将插入尿激酶原(pro—UK)cDNA的这一表达载体用磷酸钙共沉淀法转染CHO—dhfr^-细胞,经一系列... 借鉴基因表达调控理论的研究结果和作者多年来对高效表达的研究经验,自行设计和构建了一个适合在哺乳动物细胞中高效表达外源基因的新型载体。将插入尿激酶原(pro—UK)cDNA的这一表达载体用磷酸钙共沉淀法转染CHO—dhfr^-细胞,经一系列筛选、MTX加压扩增、亚克隆和锌离子诱导,获得了高效表达尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)的细胞株,表达水平达800～1500IU/(10~6细胞·d)。 展开更多
关键词 表达载体 尿激酶原 CDNA
原文传递
nutR中的突变对λ噬菌体早期转录抗终止作用的影响 被引量：2
2
作者 张兆山 Patt,TA 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第3期348-353,共6页
将λＤＮＡ的ｎｕｔＲ序列置于Ｌａｃ启动子的下游，在ｎｕｔＲ和β－半乳糖苷酶基因（ｇａｌＫ）之间插入λ噬茵体依赖ｒｈｏ的终止子ｔＲ１，使ｇａｌＫ的表达取决于Ｎ蛋白介导的转录抗终止作用。为研究ｎｕｔＲ对抗终止的影响，系统... 将λＤＮＡ的ｎｕｔＲ序列置于Ｌａｃ启动子的下游，在ｎｕｔＲ和β－半乳糖苷酶基因（ｇａｌＫ）之间插入λ噬茵体依赖ｒｈｏ的终止子ｔＲ１，使ｇａｌＫ的表达取决于Ｎ蛋白介导的转录抗终止作用。为研究ｎｕｔＲ对抗终止的影响，系统地进行了该序列中每个碱基的点突变（Ａ→Ｃ，Ｇ→Ｔ，Ｃ→Ａ及Ｔ→Ｇ）．结果表明ｂｏｘＡ中有两个碱基（位置２和５）的突变对抗终止作用是至关重要的，使抗终止效率降低了１０倍；而其他位置的改变影响甚微。ｂｏｘＡ的缺失在ｎｕｓ￣＋宿主中使抗终止数率降低了４０％，但在ｎｕｓＢ宿主中却恢复到野生型水平。ｂｏｘＢ茎环结构中，茎部顶端的碱基对及环中邻近茎部的两个碱基的突变对抗终止作用影响很大，被认为是Ｎ蛋白的识别序列．ｂｏｘＡ和ｂｏｘＢ之间的间隔序列中有两个碱基的突变几乎使抗终止作用丧失。 展开更多
关键词 Λ噬菌体 nutR 突变 抗终止作用
下载PDF
红细胞生成素受体mRNA在慢性肾功能衰竭大鼠骨髓细胞中表达减少
3
作者 吕秋军 叶棋浓 +3 位作者 高月 温利青 郭绍明 孙哲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期217-220,共4页
采用RT-PCR方法观察次全肾切除大鼠的骨髓细胞中红细胞生成素(EPO)受体mRNA表达的变化,结果发现急性贫血可使骨髓细胞中EPO受体mRNA表达显著增多,而次全肾切除大鼠的骨髓细胞中EPO受体mRNA表达显著减少。结论表明,慢性肾功能衰竭能明显... 采用RT-PCR方法观察次全肾切除大鼠的骨髓细胞中红细胞生成素(EPO)受体mRNA表达的变化,结果发现急性贫血可使骨髓细胞中EPO受体mRNA表达显著增多,而次全肾切除大鼠的骨髓细胞中EPO受体mRNA表达显著减少。结论表明,慢性肾功能衰竭能明显抑制EPO受体基因表达,提示这一作用参与慢性肾功能衰竭贫血的发生。 展开更多
关键词 次全肾切除大鼠 肾功能衰竭 肾性贫血 红细胞生成素 红细胞生成素受体
下载PDF
一种新的大鼠红细胞生成素受体基因的剪切形式
4
作者 吕秋军 叶棋浓 +3 位作者 温利青 高月 孙哲 郭绍明 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第11期580-582,共3页
目的　检测大鼠骨髓细胞中新的红细胞生成素受体（ＥｐｏＲ） 基因的可变剪切形式。方法　对正常Ｗｉｓｔａｒ 大鼠骨髓单个核细胞的总ＲＮＡ 进行逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） ，并测定扩增片段的序列。结果　用一对引物（５... 目的　检测大鼠骨髓细胞中新的红细胞生成素受体（ＥｐｏＲ） 基因的可变剪切形式。方法　对正常Ｗｉｓｔａｒ 大鼠骨髓单个核细胞的总ＲＮＡ 进行逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） ，并测定扩增片段的序列。结果　用一对引物（５′引物为６３７ ～６５７ｂｐ，３′引物为８８２～９０３ ｂｐ） 可扩增出两条片段，一条长约为２６７ ｂｐ，另一条为较长的片段。其中２６７ ｂｐ 的片段为正常的ＥｐｏＲ扩增片段。测序结果显示，较长的扩增片段长度为３４６ ｂｐ，同样为大鼠ＥｐｏＲ 核苷酸序列，但在７３６ 和７３７ 碱基之间插入了长度为７９ ｂｐ的片段。经序列检索发现，７９ｂｐ 的插入序列为滞留的第Ⅴ内含子，但在插入序列的第１６ 位碱基由Ｃ突变为Ｔ，第４９ 位和第５０ 位碱基之间插入了Ｇ 碱基。上述移码突变导致基因的阅读框架发生变化，在第７ 外显子出现终止密码子。结论　在正常的Ｗｉｓｔａｒ 大鼠中发现了新的、胞外近膜区、跨膜区和截短的胞内区编码序列发生变化的ＥｐｏＲｍＲＮＡ 可变剪切形式。这一可变剪切形式的生物学意义有待于进一步研究。 展开更多
关键词 受体 红细胞生成素 基因 聚合酶链反应
原文传递
人尿激酶原在CHO细胞中的基因扩增与高效表达 被引量：1
5
作者 张宏权 李风知 +4 位作者 俞炜源 李秀珍 方继明 费恩阁 黄翠芬 《中国科学（B辑）》 CSCD 北大核心 1993年第5期512-518,共7页
本文通过基因共转染和基因共扩增方法,在SV40病毒晚期启动子控制下成功地在中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-DHFR^-)中高效表达了人尿激酶原,其表达水平在5×10^(-6) mol/L氨甲喋呤存在下可达2—3μg/10~6细胞/24 h。采用... 本文通过基因共转染和基因共扩增方法,在SV40病毒晚期启动子控制下成功地在中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-DHFR^-)中高效表达了人尿激酶原,其表达水平在5×10^(-6) mol/L氨甲喋呤存在下可达2—3μg/10~6细胞/24 h。采用PMA诱导可将表达水平提高至3.5—4μg/10~6细胞/24 h。相应的Pro-UKcDNA在细胞基因组上整合的拷贝数为200—300拷贝/细胞。Western blot分析表明,表达出来的重组Pro-UK与天然Pro-UK具有相似的分子量:S_(2444)测活法证明重组Pro-UK具有体外酰胺水解活性。 展开更多
关键词 人 尿激酶原 CHO细胞 基因扩增
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部