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金合欢素调节HIF-1α/VEGF信号通路对胆囊癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 严培虎 郭金有 +6 位作者 李伟 张瑞汉 张百飞 刘源 张政 于富强 谢高山 《河北医药》 CAS 2023年第22期3370-3376,共7页
目的探讨金合欢素对胆囊癌细胞恶性生物学行为的影响及其与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的调节关系。方法采用CCK-8法检测经0、10、25、50、100、150μmol/L的金合欢素处理后的人胆囊癌细胞GBC-SD增殖率,... 目的探讨金合欢素对胆囊癌细胞恶性生物学行为的影响及其与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的调节关系。方法采用CCK-8法检测经0、10、25、50、100、150μmol/L的金合欢素处理后的人胆囊癌细胞GBC-SD增殖率,筛选合适的金合欢素作用浓度。将体外培养的GBC-SD细胞随机分为对照组、金合欢素低剂量组、金合欢素高剂量组、金合欢素高剂量+空载组、金合欢素高剂量+HIF-1α过表达组,采用金合欢素和质粒分组处理后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测各组的GBC-SD细胞HIF-1α/VEGF信号通路表达;采用CCK-8法和流式细胞术检测各组GBC-SD细胞增殖率、凋亡率;采用Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测各组GBC-SD细胞侵袭数、迁移率;提取GBC-SD细胞条件培养基,采用酶联免疫吸附反应(ELISA)检测其中VEGF水平。将体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)以同样方法分组以上述提取的GBC-SD细胞条件培养基分组处理,采用小管形成实验检验各组HUVEC细胞成管长度。将分组处理后的各组GBC-SD细胞接种在裸鼠右腋皮下建立移植瘤模型,饲养3周后采用免疫组化染色检测各组裸鼠肿瘤组织微血管密度(CD31表达)及肿瘤体积。结果与对照组相比,金合欢素低、高剂量组GBC-SD细胞HIF-1α、VEGF mRNA与蛋白表达、增殖率、侵袭数、迁移率、GBC-SD细胞培养基中VEGF水平、HUVEC细胞成管长度、裸鼠肿瘤组织CD31阳性细胞比例及肿瘤体积均降低(P<0.05),凋亡率均升高(P<0.05);金合欢素高剂量组与金合欢素低剂量组相比,GBC-SD细胞HIF-1α、VEGF mRNA与蛋白表达、增殖率、侵袭数、迁移率、GBC-SD细胞培养基中VEGF水平、HUVEC细胞成管长度、裸鼠肿瘤组织CD31阳性细胞比例及肿瘤体积降低,凋亡率升高(P<0.05)。与金合欢素高剂量组相比,金合欢素高剂量+HIF-1α过表达组GBC-SD细胞HIF-1α、VEGF mRNA与蛋白表 展开更多
关键词 金合欢素 HIF-1α/VEGF 胆囊癌 恶性生物学行为
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