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鸭出血性卵巢炎实验感染模型的建立 被引量：32
1
作者 林健 韩春华 +12 位作者 陈华林 蒋桃珍 梁武 何平有 杨保收 王英 韩婧雯 刘东艳 潘洁 段会娟 丁佩佩 胡胜强 刘月焕 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2161-2167,共7页
【目的】建立鸭出血性卵巢炎的实验动物感染模型并对其发病特点进行观察,为疫苗研究和筛选评价抗病毒药物提供工具。【方法】以每只约104个ELD50的剂量经滴鼻、点眼和口服途径感染196日龄北京鸭后,观察鸭临床症状,于感染后5、7、9、21... 【目的】建立鸭出血性卵巢炎的实验动物感染模型并对其发病特点进行观察,为疫苗研究和筛选评价抗病毒药物提供工具。【方法】以每只约104个ELD50的剂量经滴鼻、点眼和口服途径感染196日龄北京鸭后,观察鸭临床症状,于感染后5、7、9、21、28、34 d采血和剖检鸭,应用固定病毒稀释血清的方法测定血清中和抗体,取卵泡膜、肝脏、脾脏和脑组织进行病毒分离,对主要组织脏器进行病理学检查。【结果】攻毒后3、4、5d采食量均显著下降(下降80%),6d采食量恢复至约正常量的50%,11d恢复到正常水平;攻毒后3、4、5d产蛋量出现明显下降,6、7、8d鸭群未见产蛋,36d发病鸭群的产蛋率恢复到60%,39d鸭群的产蛋率达到80%。攻毒后5d 3只(3/3)鸭的卵泡膜和肝脏均可以分离到病毒,7d 2只(2/2)鸭的卵泡膜中均分离到病毒,1只鸭(1/2)脾脏和脑组织中均分离到病毒,9d 1只鸭(1/2)的卵泡膜中分离到病毒,21d和28d卵泡膜病毒分离结果均为阴性。感染鸭的卵巢变性、变形,卵泡膜充血、出血;卵巢、肝脏、脑、脾等组织和脏器均出现以网状细胞(巨噬细胞)增生为主的病理变化,表现为急性出血性卵巢炎、间质性肝炎、非化脓性脑炎、坏死性脾炎、间质性肾炎和轻度的心肌炎。感染后3周可检测出低效价的中和抗体。【结论】实验感染鸭出血性卵巢炎病毒后可引起急性出血性卵巢炎,利用产蛋北京鸭建立的鸭出血性卵巢炎模型,可用于评价抗病毒药物和疫苗的研究。 展开更多
关键词 鸭 出血性卵巢炎 实验模型
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猪流行性腹泻病毒地方株LJB/03分离及培养特性 被引量：22
2
作者 毛雅元 张桂红 +4 位作者 葛俊伟 姜艳平 乔薪瑗 崔文 李一经 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期483-489,共7页
从黑龙江省某猪场疑为病毒性腹泻的发病猪采集腹泻粪便样品,以RT-PCR法扩增出猪流行性腹泻病毒M基因后,采用细胞培养法进行病毒分离。对细胞培养分离物进行间接免疫荧光、免疫电镜观察、RT-PCR及ELISA法检验,其中间接免疫荧光试验可见... 从黑龙江省某猪场疑为病毒性腹泻的发病猪采集腹泻粪便样品,以RT-PCR法扩增出猪流行性腹泻病毒M基因后,采用细胞培养法进行病毒分离。对细胞培养分离物进行间接免疫荧光、免疫电镜观察、RT-PCR及ELISA法检验,其中间接免疫荧光试验可见培养细胞中存在明显的特异性绿色荧光;免疫电镜下可见大小符合预期、有囊膜、花瓣状的典型冠状病毒结构特征;RT-PCR检测证实存在PEDVM基因;间接ELISA检测中平均P/N比值为7.6;从而确认为分离到一株猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),命名为PEDVLJB/03株。随后,对该分离毒株的培养特性及如何提高病毒滴度进行探索。通过摸索该分离毒株的蚀斑形成条件,建立了PEDV蚀斑形成方法,并采用该方法进行病毒的蚀斑纯化,纯化得到PEDV大蚀斑克隆株和小蚀斑克隆株。对大、小两种蚀斑克隆株的病毒滴度测定结果表明,大小蚀斑克隆株细胞感染滴度相差明显。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分离 培养特性
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非洲猪瘟病毒及诊断技术研究进展 被引量：17
3
作者 康亚男 张小波 +7 位作者 刘涛 张倩 张英 朱秀同 赵玉龙 吴雅清 郑朝朝 刘博 《中国猪业》 2019年第8期86-88,共3页
非洲猪瘟病毒是非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员,病毒基因组庞大,能编码100种以上的蛋白质分子。20世纪20年代该病毒首次在非洲的肯尼亚被发现,经过几十年,已经在世界多个国家不断蔓延,我国于2018年8月首次发生非洲猪瘟疫情... 非洲猪瘟病毒是非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员,病毒基因组庞大,能编码100种以上的蛋白质分子。20世纪20年代该病毒首次在非洲的肯尼亚被发现,经过几十年,已经在世界多个国家不断蔓延,我国于2018年8月首次发生非洲猪瘟疫情。目前,非洲猪瘟抗原检测方法有红细胞吸附试验、荧光抗体试验、PCR技术、荧光定量PCR技术、环介导等温扩增技术等。抗体检测技术主要是酶联免疫吸附试验、胶体金试纸条法等。根据非洲猪瘟疫情在我国的发生情况,中国动物疫病预防控制中心组织了非洲猪瘟现场快速检测评审,对各种检测方法进行了技术把关,为非洲猪瘟病毒的检测和防控提供了技术保证。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 ASFV 诊断 抗体 PCR
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我国非洲猪瘟疫情现状及防控措施 被引量：13
4
作者 康亚男 刘涛 +3 位作者 张小波 柳珊 吴雅清 赵玉龙 《中国猪业》 2021年第4期57-60,共4页
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起猪的一种急性、热性、高传染性、出血性疾病,所有品种和年龄的猪均可感染,其发病率、致死率达100%。自2018年8月,我国首例非洲猪瘟疫情在沈阳发生后,据官方统计,截至2020年底,全国先后发生非洲... 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起猪的一种急性、热性、高传染性、出血性疾病,所有品种和年龄的猪均可感染,其发病率、致死率达100%。自2018年8月,我国首例非洲猪瘟疫情在沈阳发生后,据官方统计,截至2020年底,全国先后发生非洲猪瘟疫情181起,对我国生猪产业造成严重的影响。对目前我国非洲猪瘟的流行现状、疫苗研发进展、预防ASF传入和蔓延的措施、生物安全防范等进行分析,为养猪场防控非洲猪瘟病毒的侵害提供理论思考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 流行现状 防控
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血凝和血凝抑制试验操作要领 被引量：13
5
作者 王延树 张芳 《中国动物保健》 2009年第8期75-76,共2页
血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验是目前我国各地对新城疫、禽流感等疾病进行流行病学调查、防疫监测等工作的主要依据,具有经济、快速、可靠等多种优点,但在实际操作中有很多问题致使实验结果不准确,本文就该实验的操作要领做简单汇总,为指... 血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验是目前我国各地对新城疫、禽流感等疾病进行流行病学调查、防疫监测等工作的主要依据,具有经济、快速、可靠等多种优点,但在实际操作中有很多问题致使实验结果不准确,本文就该实验的操作要领做简单汇总,为指导实验操作提供参考依据。 展开更多
关键词 血凝血抑 注意事项
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我国近年来鸡传染性法氏囊病的发病特点、控制对策及治疗措施 被引量：10
6
作者 杨保收 尤永君 《动物科学与动物医学》 2004年第4期1-3,共3页
鸡传染性法氏囊病(IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种急性、接触性、免疫抑制性疾病。IBD对养鸡业危害巨大,一方面由于鸡只死亡率、淘汰率增加,影响鸡体增重,造成直接经济损失,另一方面IBDV诱发免疫抑制,使鸡体对多种疫苗... 鸡传染性法氏囊病(IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种急性、接触性、免疫抑制性疾病。IBD对养鸡业危害巨大,一方面由于鸡只死亡率、淘汰率增加,影响鸡体增重,造成直接经济损失,另一方面IBDV诱发免疫抑制,使鸡体对多种疫苗的免疫应答能力下降或无免疫应答,同时由于机体免疫机能下降,病鸡对病原体易感性增加,容易并发或继发多种其它疾病。本文就我国近年来鸡传染性法氏囊病的发病特点、控制对策及治疗措施作一简述,以供从事养鸡生产的同行们参考。 展开更多
关键词 鸡 传染性法氏囊病 发病特点 症状 病理变化 诊断 控制 治疗
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单宁酸对獭兔生长性能和屠宰性能的影响研究 被引量：12
7
作者 陈赛娟 刘亚娟 +3 位作者 刘涛 李海利 陈宝江 谷子林 《饲料工业》 北大核心 2014年第11期28-30,共3页
研究拟通过测定不同单宁酸水平日粮对獭兔生长性能和屠宰性能的影响,以期扩大单宁酸在家兔上的应用范围。试验选择70日龄左右体重相近的健康獭兔250只,随机分为5组,按照单因素设计进行饲养试验。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ... 研究拟通过测定不同单宁酸水平日粮对獭兔生长性能和屠宰性能的影响,以期扩大单宁酸在家兔上的应用范围。试验选择70日龄左右体重相近的健康獭兔250只,随机分为5组,按照单因素设计进行饲养试验。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组为试验组,在饲喂基础日粮的基础上分别添加0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的单宁酸,预饲期5 d,正饲期30 d。研究发现:试验组家兔的日增重均高于对照组,料重比均低于对照组,但差异均未达到显著水平(P>0.05);对照组家兔腹泻率为10%,而添加单宁酸组的所有家兔均未出现腹泻;对照组与试验组家兔的屠宰率无显著差异;随着试验日粮中单宁酸添加量的增加,肝体指数呈降低趋势,但差异不显著(P>0.05)。结果表明:在獭兔日粮中添加单宁酸可以不同程度地提高生长獭兔的日增重、降低料重比、有效预防腹泻病,且对屠宰性能无不良影响。单宁酸在獭兔日粮中的最适添加量为0.15%。 展开更多
关键词 单宁酸 獭兔 生长性能 腹泻率 屠宰率
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单宁酸对家兔肠道形态和内源酶活性的影响 被引量：9
8
作者 陈赛娟 谷新晰 +4 位作者 刘涛 董兵 黄玉亭 赵超 谷子林 《饲料工业》 北大核心 2015年第9期14-16,共3页
试验旨在研究日粮中添加单宁酸对家兔肠道形态和内源酶活性的影响。选择70日龄左右体重相近的健康獭兔250只,随机分为5组,按照单因素设计进行饲养试验。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组为试验组,在饲喂基础日粮的基础上分... 试验旨在研究日粮中添加单宁酸对家兔肠道形态和内源酶活性的影响。选择70日龄左右体重相近的健康獭兔250只,随机分为5组,按照单因素设计进行饲养试验。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组为试验组,在饲喂基础日粮的基础上分别添加0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的单宁酸,预饲期5 d,正饲期30 d。研究发现:试验组家兔十二指肠、空肠、回肠和盲肠的绒毛高度和肠腺深度均高于对照组;各段肠道的胰蛋白酶活力与对照组相比均有不同程度的提高,十二指肠的淀粉酶活力和脂肪酶活力、回肠的乳糖酶活力也均高于对照组。结果表明:在家兔日粮中添加单宁酸能通过增加肠道吸收营养物质的面积,提高十二指肠、空肠、回肠和盲肠部分消化酶的活力,促进营养物质的消化吸收。 展开更多
关键词 单宁酸 家兔 肠道形态 内源酶活性
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浅谈肉鸡饲养管理技术 被引量：9
9
作者 李言谱 张芳 《湖北畜牧兽医》 2010年第1期19-20,共2页
肉鸡饲养管理应主要从舍内温度、湿度、密度、通气状况、光照控制、药物预防这几个方面着手，为鸡群提供适宜的生长环境，从而提高养殖户的经济效益。
关键词 饲养管理技术 肉鸡 舍内温度 通气状况 光照控制 药物预防 生长环境 经济效益
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非洲猪瘟病毒检测技术研究进展 被引量：7
10
作者 刘涛 李永秀 +3 位作者 康亚男 郭禹 刘朋朋 柳珊 《中国猪业》 2021年第5期57-62,共6页
自2018年我国发生首例非洲猪瘟疫情以来,疫情迅速蔓延至我国的31个省份。随着疫情的发展,快速检测非洲猪瘟病毒技术成为养殖企业及时发现和防控非洲猪瘟疫情的一个手段。本文从非洲猪瘟病毒的核酸检测技术、完整病毒颗粒检测技术和抗体... 自2018年我国发生首例非洲猪瘟疫情以来,疫情迅速蔓延至我国的31个省份。随着疫情的发展,快速检测非洲猪瘟病毒技术成为养殖企业及时发现和防控非洲猪瘟疫情的一个手段。本文从非洲猪瘟病毒的核酸检测技术、完整病毒颗粒检测技术和抗体检测方法等3方面论述了当前我国在非洲猪瘟病毒检测方面的技术和方法。并列举了当前国内非洲猪瘟病毒诊断制品的注册批准情况,以期为养猪企业在排查(检测)非洲猪瘟病毒、选择诊断试剂方面提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 病毒 检测 诊断制品 新兽药注册
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猪流行性腹泻病毒引起疾病的诊断与防治研究进展 被引量：9
11
作者 王娟 吕茂杰 +1 位作者 郁宏伟 杨保收 《畜禽业》 2011年第9期50-51,共2页
主要概括了引起猪病毒性腹泻病的病原之一——猪流行性腹泻病毒的国内外研究进展,通过对猪流行性腹泻病毒的流行特点,临床症状,病理变化,诊断和防治方面进行逐一详述,为猪流行性腹泻病毒引起疾病的预防提供理论基础。
关键词 猪病毒性腹泻病 病原 研究进展
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猪丁型冠状病毒可视化LAMP检测方法的建立与应用 被引量：7
12
作者 赵云环 罗尚星 +5 位作者 顾文源 刘涛 刘莹 郭禹 左玉柱 范京惠 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期19-24,共6页
为建立一种简单、快捷,适用于基层检测猪丁型冠状病毒(PDCo V)的方法,根据Gen Bank上登录的PDCo V N基因的保守序列设计了1组环介导等温扩增(LAMP)引物,以重组质粒p MD19-T-N为模板、羟基萘酚蓝为显色剂,优化反应条件及体系,并检测该方... 为建立一种简单、快捷,适用于基层检测猪丁型冠状病毒(PDCo V)的方法,根据Gen Bank上登录的PDCo V N基因的保守序列设计了1组环介导等温扩增(LAMP)引物,以重组质粒p MD19-T-N为模板、羟基萘酚蓝为显色剂,优化反应条件及体系,并检测该方法的特异性及灵敏度。结果显示,该方法与猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、猪传染性胃肠炎病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型均无交叉反应,且最低检测量为5.1×10^(1)copies/μL。进一步对本实验室2016年至2019年在河北保定收集的95份临床样品进行检测,LAMP检测结果与普通RT-PCR检测结果的符合度高,检测时间为1 h。结果表明,本研究中建立的LAMP检测方法简便、特异、灵敏、快速,有望在PDCo V的临床检测中发挥重要作用。 展开更多
关键词 猪丁型冠状病毒 环介导等温扩增 可视化 羟基萘酚蓝 检测
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鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒的初步应用
13
作者 徐环 刘云涛 +3 位作者 刘涛 赵玉龙 李卫东 唐荣宏 《中国畜禽种业》 2024年第5期122-127,共6页
为建立鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒,该研究以灭活纯化的鸡传染性法氏囊病病毒作为包被抗原,连续制备了3批次鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒中试产品。结果表明:该试剂盒对IBDV阳性血清检测的灵敏度可达1∶6400;... 为建立鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒,该研究以灭活纯化的鸡传染性法氏囊病病毒作为包被抗原,连续制备了3批次鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒中试产品。结果表明:该试剂盒对IBDV阳性血清检测的灵敏度可达1∶6400;对鸡新城疫病毒、鸡减蛋下降综合征病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡抗网状内皮组织增生症病毒、鸡马立克氏病病毒、禽流感病毒H5亚型、鸡传染性贫血病毒阳性血清和SPF鸡阴性血清均无交叉反应;批内和批间重复性的变异系数分别在4.21%和5.07%以内。应用该试剂盒和某进口同类ELISA试剂盒对258份临床白羽肉鸡血清样品同时进行对比检测,相对敏感性、相对特异性和符合率分别为98.44%、96.97%和98.06%。可见,该试验建立的鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒具有有操作简便、特异性强、灵敏度高的特点。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病 血清学诊断 间接ELISA 临床应用
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不同水解单宁酸的添加量对黄羽肉鸡生产性能的影响 被引量：7
14
作者 吴雅清 《畜禽业》 2017年第6期4-5,共2页
不同水解单宁酸的添加量对黄羽肉鸡生产性能的影响。该试验是测试水解单宁酸的不同添加量对黄羽肉鸡生产性能的影响。包括日采食量、日增重、料肉比、成活率及鸡只健康状况的监测。
关键词 黄羽肉鸡 生产性能 影响
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激流灌注式生物反应器培养猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(R98株)工艺的研究 被引量：7
15
作者 郑朝朝 邱贞娜 +3 位作者 李建丽 郁宏伟 梁武 杨保收 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期107-109,共3页
为建立猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗的大规模生产工艺,本研究应用工作体积为100 L的激流灌注式生物反应器培养Marc-145细胞,接种PRRS病毒R98株(PRRSV-R98),进行病毒培养,结果显示,培养6 d细胞数量可增殖5倍～7倍,单次病毒收获量相当于3... 为建立猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗的大规模生产工艺,本研究应用工作体积为100 L的激流灌注式生物反应器培养Marc-145细胞,接种PRRS病毒R98株(PRRSV-R98),进行病毒培养,结果显示,培养6 d细胞数量可增殖5倍～7倍,单次病毒收获量相当于3 000个～5 000个10 L转瓶,而且培养的PRRSV-R98各项指标均符合规程要求。本研究在国内首次建立了应用100 L激流灌注式生物反应器制备PRRS活疫苗的生产工艺,为规模化培养工艺的推广与使用提供了技术参数。 展开更多
关键词 生物反应器 规模化培养 猪繁殖与呼吸综合征活疫苗
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禽流感(H9)和新城疫母源抗体消长规律及其免疫效果 被引量：7
16
作者 王延树 李建丽 +3 位作者 邹丽红 梁武 尤永君 刘浩 《兽医导刊》 2011年第6期67-68,共2页
畜禽母源抗体对保护后代,繁衍种群,起着极为重要的作用。初生动物,由于其本身的防御机能尚未成熟,主要靠母源抗体来保护其健康成长。禽类则通过卵黄将lgG传递给雏禽。
关键词 母源抗体 抗体消长规律 免疫效果 新城疫 禽流感 初生动物 防御机能 LGG
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全氟辛酸对肉鸡肝脏和十二指肠的损伤作用
17
作者 姚文梅 寇晨雨 +2 位作者 孙雨昕 刘涛 王晓丹 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期9-17,共9页
全氟辛酸(PFOA)是环境中常见的一种有机污染物,可以通过饲料或饮水进入机体,对家禽的健康产生威胁。为探究PFOA对肉鸡生长性能、胸肌肉品质、肝脏和十二指肠的影响,本试验将160羽1日龄健康爱拔益佳肉鸡随机分为4个组,分别于试验4~42 d... 全氟辛酸(PFOA)是环境中常见的一种有机污染物,可以通过饲料或饮水进入机体,对家禽的健康产生威胁。为探究PFOA对肉鸡生长性能、胸肌肉品质、肝脏和十二指肠的影响,本试验将160羽1日龄健康爱拔益佳肉鸡随机分为4个组,分别于试验4~42 d在饮水中添加0 mg/L PFOA(C组)、0.5 mg/L PFOA(D组)、1 mg/L PFOA(Z组)和1.5 mg/L PFOA(G组),每组4个重复,每个重复10羽鸡。于试验42 d在每个重复中随机选取4羽鸡处死,收集胸肌、肝脏和十二指肠,计算平均日增重和肝脏指数;检测胸肌亮度值、红度值、黄度值、pH和蒸煮损失;组织病理学观察肉鸡肝脏和十二指肠的形态变化;检测肉鸡肝脏中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活力;检测肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肉鸡肝脏和十二指肠中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果显示,与C相比,PFOA处理会对肉鸡肝脏和十二指肠造成不同程度的损伤,其中1.5 mg/L的PFOA会使肉鸡平均日增重极显著降低(P<0.01),肝脏指数极显著增加(P<0.01),蒸煮损失显著升高(P<0.05),肝细胞出现空泡变性和核固缩,且AST和ALT的活力极显著升高(P<0.01),MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α的含量极显著升高(P<0.01),SOD、CAT和GSH-Px的活性极显著降低(P<0.01);并引起肉鸡十二指肠绒毛高度变低、肿胀,且IL-1β、IL-6和TNF-α的含量极显著升高(P<0.01)。结果表明,饮水中添加1.5 mg/L PFOA会增加肉鸡胸肌蒸煮损失,导致肝脏细胞损伤和炎症反应,使抗氧化能力降低;且导致肉鸡十二指肠绒毛变短、水肿和炎症反应。 展开更多
关键词 全氟辛酸 肉鸡 肝脏 十二指肠
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猪流行性腹泻病毒TaqMan检测方法的建立及基于S基因的遗传变异分析 被引量：2
18
作者 翟刚 顾文源 +4 位作者 刘涛 刘莹 张帅 范京惠 左玉柱 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期847-854,共8页
旨在建立一种能快速、高效且灵敏的检测出猪流行性腹泻病毒(PEDV)的通用型TaqMan qPCR检测方法,并进一步了解河北省PEDV的遗传变异情况。本研究参考PEDV变异株AJ1102的M基因的保守区域设计特异性引物及探针,对引物浓度、退火温度等条件... 旨在建立一种能快速、高效且灵敏的检测出猪流行性腹泻病毒(PEDV)的通用型TaqMan qPCR检测方法,并进一步了解河北省PEDV的遗传变异情况。本研究参考PEDV变异株AJ1102的M基因的保守区域设计特异性引物及探针,对引物浓度、退火温度等条件进行优化,建立了一种应用于猪场筛查PEDV的qPCR方法,并对筛查出的阳性样品S基因扩增测序后进行遗传进化分析。结果显示:该方法的特异性强,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)及传染型胃肠炎病毒(TGEV)等猪病常见病原均无交叉反应;建立的检测方法对pMD19T-PEDV标准品的最低检测下限为1.09×101拷贝·μL^(-1),比普通PCR灵敏约100倍,敏感性高;组内和组间的变异系数均小于1%,重复性良好。基于S全基因成功克隆出的9条序列分布于GⅡ的两个亚群,克隆的9条序列的核苷酸相似性为96.6%~99.1%;氨基酸的相似性为94.6%~98.7%。结果表明:本研究得到的PEDV流行株与近年来国内分离株的关系较为密切,而与中国目前使用的疫苗株以及欧洲株亲缘关系较远,这表明河北部分地区PEDV当前流行毒株比较复杂且有变异的趋势,提示持续检测PEDV流行毒株变异动态的必要性。本研究不仅为PEDV的临床诊断提供了技术支持,更为进一步掌握PEDV遗传进化规律提供了参考依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 qPCR S基因 遗传变异分析
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我国部分地区鸡滑液囊支原体分离株vlhA基因遗传进化和同源性分析 被引量：2
19
作者 刘麒 戎畅 +4 位作者 要纬玉 房思远 刘莹 史万玉 郑朝朝 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第11期85-90,共6页
为了探究鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)在我国的遗传变异情况,试验采集北京市、河南省、辽宁省、河北省、天津市、山东省、安徽省、江苏省、湖北省、江西省10个地区疑似感染MS的发病鸡上颚裂黏液,进行MS分离、纯培养及鉴定,采... 为了探究鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)在我国的遗传变异情况,试验采集北京市、河南省、辽宁省、河北省、天津市、山东省、安徽省、江苏省、湖北省、江西省10个地区疑似感染MS的发病鸡上颚裂黏液,进行MS分离、纯培养及鉴定,采用PCR方法扩增阳性分离株vlhA基因片段并对其进行测序分析,利用MEGA 7.0软件构建分离株与GenBank中28株参考株的系统发育树并分析遗传进化关系,再利用MegAlign软件分析分离株和参考株vlhA基因的同源性。结果表明:共得到17株MS分离株,其中16株的基因型为K型,1株为L型。分离株与国外不同地区的参考株vlhA基因同源性较低,在71.8%~91.8%之间;与国内不同地区的参考株vlhA基因同源性较高,在82.3%~95.9%之间。说明目前在我国流行的MS分离株的优势基因型是K型,并存在一定变异。 展开更多
关键词 鸡滑液囊支原体 vlhA基因 K基因型 L基因型 相似性分析
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淫羊藿素和山柰酚对鸡等级前卵泡颗粒细胞发育的影响 被引量：2
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作者 王明迪 梁天 +6 位作者 赵千惠 孙鹏 朱爱臣 李玉荣 武现军 赵玉龙 霍书英 《中国家禽》 北大核心 2023年第4期57-63,共7页
为探究淫羊藿素和山柰酚对鸡卵泡发育的作用,试验通过MTT法分析不同浓度的淫羊藿素和山柰酚对鸡等级前颗粒细胞活性的影响并确定最佳浓度,通过实时荧光定量PCR检测淫羊藿素和山柰酚对鸡等级前颗粒细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、促卵泡素受... 为探究淫羊藿素和山柰酚对鸡卵泡发育的作用,试验通过MTT法分析不同浓度的淫羊藿素和山柰酚对鸡等级前颗粒细胞活性的影响并确定最佳浓度,通过实时荧光定量PCR检测淫羊藿素和山柰酚对鸡等级前颗粒细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、促卵泡素受体(FSHR)和雌激素受体α(ERα)mRNA表达的影响;通过卵巢组织离体培养,分析淫羊藿素和山柰酚对卵巢组织卵泡发育的影响。结果显示:淫羊藿素和山柰酚均在浓度为1×10^(-4)mol/L时可以显著促进颗粒细胞的增殖,同时可以促进颗粒细胞中PCNA、FSHR和ERαmRNA的表达(P<0.01);淫羊藿素和山柰酚作用的卵巢组织中的卵泡数量明显增多,且颗粒细胞由单层增殖至多层。研究表明,淫羊藿素和山柰酚能够促进等级前卵泡颗粒细胞的增殖,促进FSHR和ERαmRNA的表达,从而促进等级前卵泡向等级卵泡的发育。 展开更多
关键词 淫羊藿素 山柰酚 鸡 等级前颗粒细胞 卵巢组织
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