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低硒与T-2毒素致大鼠的大骨节病动物模型实验研究 被引量：14
1
作者 陈静宏 王治伦 +8 位作者 杨浩杰 薛森海 宋代琴 董璐 杨占田 谭希旺 王伟 于伯全 马天有 《中国地方病防治》 2010年第2期98-101,共4页
目的建立低硒饲料与T-2毒素染毒致SD大鼠的大骨节病动物模型。方法断乳SD大鼠随机分为常规饲料组和低硒饲料组,饲养1个月,全血硒和血清GSH-Px测定,确定大鼠处于低硒状态后,再将大鼠随机分为6组,T-2毒素灌胃饲养1个月后处死,进行常规HE染... 目的建立低硒饲料与T-2毒素染毒致SD大鼠的大骨节病动物模型。方法断乳SD大鼠随机分为常规饲料组和低硒饲料组,饲养1个月,全血硒和血清GSH-Px测定,确定大鼠处于低硒状态后,再将大鼠随机分为6组,T-2毒素灌胃饲养1个月后处死,进行常规HE染色,光镜下观察大鼠膝关节软骨病理改变。结果在低硒饲料加低T-2毒素组和低硒饲料加高T-2毒素组,部分病例可见在骨质交界处的软骨组织深层有片状坏死,软骨细胞死亡变为红染的"细胞影子",或红染的无结构区域;以及软骨的营养不良性变化,如"原纤维显现"、波纹状钙化线和横骨梁形成等。结论本结果为低硒条件下T-2毒素在大骨节病病因中的作用提供了实验依据。 展开更多
关键词 低硒 T-2毒素 SD大鼠 软骨组织深层坏死 大骨节病动物模型
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TG/HDL-C和HDL-C对不同体型冠心病患者的诊断价值 被引量：14
2
作者 刘平 霍建华 +2 位作者 白玲 卢群 马爱群 《中国循证心血管医学杂志》 2017年第9期1037-1039,1044,共4页
目的探讨三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDL-C)和HDL-C对不同体型冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者的诊断价值。方法入选2008年8月~2009年8月于西安交通大学第一附属医院心血管内科住院治疗的急性冠脉综合征患者212例。同时选取... 目的探讨三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDL-C)和HDL-C对不同体型冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者的诊断价值。方法入选2008年8月~2009年8月于西安交通大学第一附属医院心血管内科住院治疗的急性冠脉综合征患者212例。同时选取年龄、性别匹配的健康对照者174例。按照体质指数(BMI)和是否发生急性冠脉综合征分为:正常组(99例,BMI 18.5~23.9 kg/m^2)、肥胖组(75例,≥28 kg/m^2)、冠心病组(79例)、肥胖冠心病组(133例)。入选者检测总胆固醇(TC)、TG、HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A(apo A)和载脂蛋白B(apo B),并计算TG/HDL-C比值。结果肥胖冠心病组男性、高血压病史、糖尿病史和吸烟比例明显高于其他3组,TG和TG/HDL-C明显高于其他3组,差异有统计学意义(P均<0.05)。以是否发生冠心病为因变量,以TG/HDL-C为自变量,经多因素Logistic回归分析,TG/HDL-C是肥胖者发生冠心病的危险因素(OR=1.825,95%CI:1.294~2.573);校正年龄、性别、TC、TG、HDL-C、LDL-C、apo A和apo B后,TG/HDL-C对于肥胖者冠心病发病无影响。以是否发生冠心病为因变量,以TG/HDL-C为自变量,经多因素Logistic回归分析,TG/HDL-C是非肥胖者发生冠心病的危险因素(OR=1.952,95%CI:1.323~2.878);校正年龄、性别、TC、TG、HDL-C、LDL-C、apo A和apo B后,TG/HDL-C对于非肥胖者冠心病发病无影响。TG/HDL-C诊断肥胖冠心病ROC曲线下面积为0.726,HDL-C为0.794;TG/HDL-C诊断体型正常冠心病的ROC曲线下面积为0.751,HDL-C为0.779。结论 TG/HDL-C不是冠心病发病的独立危险因素,TG/HDL-C和HDL-C诊断不同体型冠心病患者的效能较好。 展开更多
关键词 冠心病 肥胖 三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇 高密度脂蛋白胆固醇
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用高表达EGFR细胞膜色谱-HPLC/MS联用快速筛选独活中抗EGFR活性成分 被引量：12
3
作者 王嗣岑 孙萌 +2 位作者 张彦民 张杰 贺浪冲 《中国科学：化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期750-756,共7页
报道了用高表达表皮生长因子受体细胞膜色谱与高效液相色谱/质谱在线联用方法(EGFR/CMC-online-HPLC/MS)快速筛选发现中药独活中的活性成分.实验中,采用高表达EGFR的细胞膜制备色谱固定相,建立EGFR/细胞膜色谱(EGFR/CMC)模型,利用柱切... 报道了用高表达表皮生长因子受体细胞膜色谱与高效液相色谱/质谱在线联用方法(EGFR/CMC-online-HPLC/MS)快速筛选发现中药独活中的活性成分.实验中,采用高表达EGFR的细胞膜制备色谱固定相,建立EGFR/细胞膜色谱(EGFR/CMC)模型,利用柱切换和固相萃取技术,将EGFR/CMC模型与高效液相色谱/质谱(HPLC/MS)在线联用,构成一种新的可同时"识别-鉴定"目标成分的二维色谱系统,并应用于快速筛选独活中具有抗EGFR活性的目标成分.结果发现独活中的蛇床子素具有与对照药物达沙替尼类似的色谱保留特性,能够作用于EGFR;同时MTT及Elisa分析实验证实蛇床子素对HEK293EGFR细胞增殖及EGFR表达均有抑制作用.本文建立的EGFR/CMC-online-HPLC/MS二维色谱方法,可以选择性地从中药复杂体系中快速"识别-鉴定"目标组分,且筛选结果与特定生物效应显著相关. 展开更多
关键词 EGFR/细胞膜色谱二维色谱 快速筛选 独活 抗EGFR活性
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非人工通气下大鼠急性心肌梗死模型的建立 被引量：11
4
作者 魏峰 张静 +4 位作者 韩克 刘昱 王亭忠 倪雅娟 马爱群 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期699-702,共4页
目的在非人工通气条件下,以较小的创伤且简单、快速地建立大鼠急性心肌梗死模型。方法 30只成年SD大鼠麻醉后,在自主呼吸条件下,于胸骨左缘第4肋间钝性分离肋间肌,暴露心脏,迅速结扎左冠状动脉前降支(LAD)建立心肌梗死模型。同时记录术... 目的在非人工通气条件下,以较小的创伤且简单、快速地建立大鼠急性心肌梗死模型。方法 30只成年SD大鼠麻醉后,在自主呼吸条件下,于胸骨左缘第4肋间钝性分离肋间肌,暴露心脏,迅速结扎左冠状动脉前降支(LAD)建立心肌梗死模型。同时记录术前、术中及术后1、3 d,1、2周的心电图变化;术后2周开胸,观察心脏大体形态的改变,LAD供血区出现明显发白的梗死区即为模型建立成功;同时取8只模型的心脏标本行组织病理学HE染色以证实模型建立。结果 25只大鼠成功建立心肌梗死模型,模型存活率为83.33%。心电图监测显示LAD结扎后出现R波峰减低,随即出现ST段抬高和ST-T融合,30 min后可见病理性Q波。术后2周开胸,可见缺血区心肌颜色发白,室壁运动减弱。HE染色可见心肌梗死区心肌细胞消失,代之大量纤维和胶原组织增生,梗死周边区残存心肌排列紊乱、肌丝断裂,间质结构破坏、纤维组织增生。结论本方法可在非人工通气条件下,快速、简单、有效地建立大鼠急性心肌梗死模型。 展开更多
关键词 非人工通气 心肌梗死 动物模型 大鼠
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慢病毒载体介导GFP标记大鼠骨髓间充质干细胞 被引量：9
5
作者 魏峰 马爱群 +1 位作者 王亭忠 张静 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期288-292,共5页
目的探究慢病毒载体介导绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记大鼠骨髓间充质干细胞(mes-enchymal stem cells,MSCs)的理想条件,以获得稳定高表达GFP的MSCs亚群。方法慢病毒载体介导GFP以25、50、100、200和400的感染复数(m... 目的探究慢病毒载体介导绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记大鼠骨髓间充质干细胞(mes-enchymal stem cells,MSCs)的理想条件,以获得稳定高表达GFP的MSCs亚群。方法慢病毒载体介导GFP以25、50、100、200和400的感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别作用12 h和24 h感染MSCs,倒置荧光显微镜及流式细胞术检测各组的感染效率和荧光强度,MTT法评价感染对MSCs增殖的影响,从而确定理想的感染条件。平皿克隆套环法挑选理想条件下感染的MSCs单克隆。结果MOI为100、200和400作用24 h时,感染效率较高,分别为88.94%、99.65%、99.42%;MOI为100和200时,感染对MSCs增殖无影响,MOI为400时,感染的MSCs增殖减慢。挑选MOI为200、作用24 h感染组的单克隆细胞,其1月时感染效率为99.95%,且荧光均一、强度很强。结论MOI为200作用24 h是慢病毒载体介导GFP标记MSCs的理想条件;通过细胞单克隆技术可获得稳定高表达GFP的MSCs亚群。 展开更多
关键词 间充质干细胞 慢病毒载体 绿色荧光蛋白 单克隆
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血清TNF-α、IL-1β、NO水平在成人大骨节病手术治疗中的研究 被引量：8
6
作者 刘丹 高大龙 +4 位作者 李若飞 杨雷刚 王敏 陈庆平 王治伦 《中国地方病防治》 2013年第2期125-126,共2页
目的通过检测不同严重程度大骨节病(KBD)患者实施分级手术治疗前后炎症细胞因子TNF-α、IL-1β和一氧化氮(NO)表达水平,了解大骨节病患者不同临床分期及实施手术治疗前后的细胞炎性因子表达,探讨大骨节病手术治疗的意义。方法陕西咸阳地... 目的通过检测不同严重程度大骨节病(KBD)患者实施分级手术治疗前后炎症细胞因子TNF-α、IL-1β和一氧化氮(NO)表达水平,了解大骨节病患者不同临床分期及实施手术治疗前后的细胞炎性因子表达,探讨大骨节病手术治疗的意义。方法陕西咸阳地区KBD患者45例,临床分期后采用分级手术治疗。健康对照组25例。采集KBD组手术前、术后3月和健康对照组的血清标本,检测IL-1β、TNF-α和NO的水平。结果 KBD患者血清IL-1β、TNF-α和NO的水平分别为(13.6±2.9)pg/ml、(18.2±4.8)pg/ml和(53.2±10.2)μmol/L,与健康对照组比较均具有显著差异(P<0.05);实施分级手术治疗,临床表现为I-IV级患者的TNF-α和NO水平在治疗前后均明显下降(P<0.05),III-IV级患者手术前后IL-1β减低,但无显著差异(P>0.05),I-II级患者手术前后具有显著差异(P<0.05)。结论 KBD中IL-1β、TNF-α和NO的高水平表达,在KBD发病机制中具有重要作用;实施关节置换、关节清理等手术方案,关节炎性指标减低,达到改善病情的目的。 展开更多
关键词 成人大骨节病 TNF-Α IL-1Β 手术
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中国19个不同地区汉族亚群的分子遗传学关系 被引量：7
7
作者 高雅 阎春霞 +3 位作者 金天博 赖江华 陈腾 李生斌 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期111-114,共4页
目的　研究中国不同地区汉族亚群之间的分子遗传学关系。方法　收集我国19 个地区汉族9 个STR基因座的等位基因频率,进行Hardy Weinberg平衡检验,采用Nei s法计算各亚群间的遗传距离,采用组间平均连锁法进行聚类分析,采用UPGMA的算法绘... 目的　研究中国不同地区汉族亚群之间的分子遗传学关系。方法　收集我国19 个地区汉族9 个STR基因座的等位基因频率,进行Hardy Weinberg平衡检验,采用Nei s法计算各亚群间的遗传距离,采用组间平均连锁法进行聚类分析,采用UPGMA的算法绘制系统发生树。结果　不同汉族亚群特定STR的等位基因频率和遗传距离存在差异;聚类分析结果表明广东汉族与广西汉族首先聚类,福建汉族与青岛汉族与我国其他地区汉族差异较大而最后聚类;分子进化树绘制与聚类分析结果相似。结论　9 个STR位点在中国不同地区汉族亚群之间存在多样性;应用该遗传标记进行疾病相关分析、法医学个体识别等研究时应选择不同地区亚群的基础数据进行对比才能够获得科学的结果。 展开更多
关键词 汉族 亚群 STR遗传距离
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苦参碱抑制人雄激素非依赖性PC-3细胞增殖和诱导凋亡的研究 被引量：8
8
作者 张鹏 王子明 +3 位作者 纪宗正 种铁 黄辰 高彩霞 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期510-514,520,共6页
目的研究苦参碱对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法不同浓度苦参碱作用PC-3细胞后,应用MTT法观察苦参碱对PC-3细胞增殖的影响,流式细胞仪研究苦参碱对PC-3细胞周期的影响,TUNEL法、Annexin V/P... 目的研究苦参碱对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法不同浓度苦参碱作用PC-3细胞后,应用MTT法观察苦参碱对PC-3细胞增殖的影响,流式细胞仪研究苦参碱对PC-3细胞周期的影响,TUNEL法、Annexin V/PI双染分析苦参碱对PC-3细胞凋亡的影响。结果苦参碱对PC-3细胞的生长具有抑制作用,与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。苦参碱对PC-3细胞的增殖抑制作用呈现时间及剂量依赖性关系。苦参碱的最佳药物浓度为1.0g/L,最佳作用时间为48h。流式细胞仪分析显示不同浓度苦参碱均可使PC-3细胞阻滞于G0/G1期,随着苦参碱浓度的增加,G0/G1期细胞所占的比例增加,与对照组相比有统计学差异(P<0.01)。TUNEL法、Annexin V/PI分析显示不同浓度苦参碱均可诱导PC-3细胞凋亡,其早期凋亡率及晚期凋亡率随着苦参碱浓度的增加而升高,呈现剂量依赖性关系(P<0.05,P<0.01)。结论苦参碱在体外可抑制PC-3细胞的增殖,具有时间和浓度依赖关系。抑制增殖和细胞周期阻滞与G0/G1期相关。苦参碱可诱导PC-3细胞凋亡,与苦参碱的作用浓度及时间有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 苦参碱 细胞凋亡
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中药健骨片与非甾体类抗炎镇痛药物联用治疗成人大骨节病、骨关节炎短期疗效观察 被引量：6
9
作者 张雪英 刘丹 +1 位作者 陈群 王治伦 《中国地方病防治》 2013年第1期48-49,共2页
目的观察中药健骨片与非甾体类抗炎镇痛药物(NSAIDs)中西药联用治疗成人大骨节病(KBD)和骨关节炎(OA)患者疗效。方法口服健骨片8周,同时联合NSAIDs治疗成人KBD和OA患者70例,通过治疗前后患者临床体征指标评分,观察药物治疗效果和不良反... 目的观察中药健骨片与非甾体类抗炎镇痛药物(NSAIDs)中西药联用治疗成人大骨节病(KBD)和骨关节炎(OA)患者疗效。方法口服健骨片8周,同时联合NSAIDs治疗成人KBD和OA患者70例,通过治疗前后患者临床体征指标评分,观察药物治疗效果和不良反应。结果 8周后,关节疼痛完全缓解12例,改善54例,另有症状出现反复加重及效果不佳各2例。治疗有效率94.28%,无皮疹、明显胃肠道不适等症状,血常规、肝功指标均在正常范围。结论口服健骨片与NSAIDs中西药联合治疗对成人KBD和OA疗效确定,效果明显,是成人KBD、OA有效治疗方法。 展开更多
关键词 健骨片 成人大骨节病 骨关节炎 疗效观察
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公共卫生大数据研究进展——生物信息的新领域 被引量：5
10
作者 马天有 胡曦 +2 位作者 王丽娜 杜建强 吴晓明 《生物信息学》 2017年第4期255-262,共8页
大数据时代的公共卫生面临新的机遇和挑战。为了推动公共卫生大数据的应用,准确把握其内涵,开发针对性的解决方案,达到改善人们健康状况的目的,基于此对公共卫生大数据的现状进行了分析和论证。研究表明:通过对多个不同来源公共卫生数... 大数据时代的公共卫生面临新的机遇和挑战。为了推动公共卫生大数据的应用,准确把握其内涵,开发针对性的解决方案,达到改善人们健康状况的目的,基于此对公共卫生大数据的现状进行了分析和论证。研究表明:通过对多个不同来源公共卫生数据进行收集和整理,能够形成公共卫生大数据,通过深入挖掘和分析,能够获取重大疾病影响因素、流行病的传播规律等信息,帮助医疗卫生人员和相关机构进行预测和评估,以便采取有效的管理手段和措施,保护人民健康,减少医疗花费。发现通过同生物信息技术相结合,公共卫生数据的获取、管理、分析、安全和应用方面都会有很大的发展空间。认为计算机技术的进一步应用,针对性的大数据挖掘方法开发,以及新型公共卫生人才培养,是发展这一领域的关键因素。 展开更多
关键词 公共卫生 大数据 生物信息 数据挖掘 互联网
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成人大骨节病患者分期分级手术术后疗效评价 被引量：5
11
作者 李若飞 高大龙 +3 位作者 刘丹 杨雷刚 巩艺 王治伦 《中国地方病防治》 2013年第2期141-143,共3页
目的通过分析成人大骨节病患者分期分级手术后的疗效,探讨手术治疗膝大骨节病的意义。方法选取陕西咸阳地区在我院接受分级分期手术治疗的膝大骨节病患者,通过随访使用VAS评分和Lequesne指数评分标准对不同手术病人进行评价,对结果进行... 目的通过分析成人大骨节病患者分期分级手术后的疗效,探讨手术治疗膝大骨节病的意义。方法选取陕西咸阳地区在我院接受分级分期手术治疗的膝大骨节病患者,通过随访使用VAS评分和Lequesne指数评分标准对不同手术病人进行评价,对结果进行统计学分析。结果 KBD患者术后,VAS及Lequesne指数评分低于术前。结论分级手术治疗不同程度的KBD患者,术后疗效评价良好,值得推广。 展开更多
关键词 成人大骨节病 手术分级 疗效评价
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急性心肌梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2水平与左室射血分数的关系 被引量：4
12
作者 余航 肖懿慧 +3 位作者 郜珊珊 田刚 袁祖贻 王丽君 《临床与病理杂志》 2020年第11期2870-2875,共6页
目的:探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein associated phospholipase A2,Lp-PLA2)与左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)的关系。方法:纳入2017年6月至2018... 目的:探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein associated phospholipase A2,Lp-PLA2)与左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)的关系。方法:纳入2017年6月至2018年12月西安交通大学第一附属医院心内科确诊的816例AMI患者,收集其一般临床资料、血脂、D-二聚体、高敏性C-反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、Lp-PLA2水平及心脏超声心脏射血分数(left ventr icular ejection fraction,LVEF)等进行数据,采用Spearman相关分析及多因素线性回归分析方法分析血清脂蛋白相关磷脂酶A2水平与AMI LVEF的相关性。结果:LVEF<50%组AMI患者血清Lp-PLA2水平显著高于LVEF≥50%的患者[(163.05±73.95)ng/mL vs(151.18±62.02)ng/mL,P=0.027]。经Spearman相关分析,AMI患者的Lp-PLA2水平与LVEF呈负相关(r=−0.140,P<0.05)。多因素线性回归分析显示,Lp-PLA2水平(β=−0.016,P=0.013)、D-二聚体(β=−0.855,P=0.032)、hs-CRP(β=−0.343,P<0.001)与LVEF呈负相关。结论:AMI患者血清Lp-PLA2水平与LVEF呈负相关,血清Lp-PLA2随LVEF的降低而升高。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 脂蛋白相关磷脂酶A2 左室射血分数
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阿片类药物依赖建模和戒断症状评价方法研究进展 被引量：4
13
作者 赵杨 朱峰 +1 位作者 阎春霞 李生斌 《中国药物依赖性杂志》 CAS CSCD 2012年第6期401-405,共5页
药物成瘾是一种慢性、复发性脑疾病,行为学特征表现为强迫性用药。药物成瘾包括心理性依赖和生理性依赖,心理性依赖是病人对药物的强烈渴求;生理性依赖（也称为躯体性依赖）是重复多次滥用药物,造成中枢神经等全身多系统发生生理、生化、
关键词 阿片类药物依赖 戒断症状 生理性依赖 建模 药物成瘾 滥用药物 行为学特征 中枢神经
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鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药分子特征的研究 被引量：4
14
作者 韩蕾 雷金娥 +2 位作者 祁杰 韩少山 徐纪茹 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期375-378,共4页
目的对110株鲍曼不动杆菌临床分离株进行菌种鉴定,检测其对碳青霉烯类抗生素的耐药性,并在DNA水平对碳青霉烯酶进行分子鉴定。方法收集110株经VITEK-2鉴定的鲍曼不动杆菌,利用特异性引物sp2F、sp4F和sp4R通过PCR扩增法复检菌株;使用VITE... 目的对110株鲍曼不动杆菌临床分离株进行菌种鉴定,检测其对碳青霉烯类抗生素的耐药性,并在DNA水平对碳青霉烯酶进行分子鉴定。方法收集110株经VITEK-2鉴定的鲍曼不动杆菌,利用特异性引物sp2F、sp4F和sp4R通过PCR扩增法复检菌株;使用VITEK-2检测鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的药物敏感性;PCR法检测碳青霉烯酶基因,分析耐药基因型,并使用χ2检验分析碳青霉烯酶与耐药表型的相关性。结果 110株临床样本中96株确认为鲍曼不动杆菌,对亚胺培南和美罗培南的耐药率达83.3%。blaTEM、blaOXA-23-like和blaOXA-51-like等3个碳青霉烯酶基因检测阳性,检出率在所有鲍曼不动杆菌中分别为77.1%、83.3%及100%,并以多基因联合耐药模式为主。blaOXA-23-like与耐药表型显著相关,其次为blaTEM。结论特异性PCR法鉴定鲍曼不动杆菌快速、准确。鲍曼不动杆菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素耐药性高,主要由碳青霉烯酶blaOXA-23-like和blaTEM引起。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 特异性PCR法鉴定 碳青霉烯类抗生素耐药 碳青霉烯酶
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小反应体积实时定量PCR的可行性评价 被引量：4
15
作者 韩燕 朱文华 +4 位作者 何晓静 蒋丛姗 宁启兰 吕社民 孟列素 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期177-180,共4页
目的从扩增稳定性、扩增效率以及可靠性等多方面评估实时定量PCR（RtPCR）反应小体积的可行性,同时确定适合小体积体系的模板量。方法将实验分为10、15、20μL 3个体积组,每组分别采用0.1、0.2、0.3、0.4μL的大鼠cDNA为模板,进行大鼠-... 目的从扩增稳定性、扩增效率以及可靠性等多方面评估实时定量PCR（RtPCR）反应小体积的可行性,同时确定适合小体积体系的模板量。方法将实验分为10、15、20μL 3个体积组,每组分别采用0.1、0.2、0.3、0.4μL的大鼠cDNA为模板,进行大鼠-βactin mRNA的RtPCR扩增。通过扩增曲线和熔解曲线考察反应的稳定性,以梯度模板拟合标准曲线获得反应的扩增效率,其线性相关程度反映模板量是否合适。另外,构建大鼠降植烷诱导的关节炎（pristane-induced arthritis,PIA）模型,采用选定的反应体系,分别对模型组和正常组大鼠脾脏TNF-αmRNA进行扩增,通过TNF-α的相对表达趋势反映小体积扩增的可靠性。结果在大鼠-βactin mRNA的RtPCR扩增中,10、15、20μL 3个体积组均能特异稳定地进行扩增,并保证高扩增效率。而且每个体积组中的模板梯度表现出很好的线性相关趋势。同时选用10μL和20μL反应体积、0.2μL模板对关节炎大鼠脾脏进行TNF-αmRNA扩增,结果一致表现出了预期的显著性上调。结论实验证实10μL、15μL等小反应体积应用于RtPCR扩增中是可行的,具有较好的稳定性和可靠性,同时0.10.4μL cDNA模板在3种体系的合适模板范围内。这种较小的PCR反应体积,不仅节省了试剂和实验材料,对一些来之不易的临床标本尤为重要,也利于高通量大规模的RtPCR检测的实现。 展开更多
关键词 实时定量PCR 小反应体积 稳定性 可靠性
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Med1对T细胞发育及CD4^(+)T细胞在免疫应答中分化的影响
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作者 郑会强 焦安君 +6 位作者 刘海艳 雷蕾 丁人一 封钊 张丹 张连军 张保军 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1296-1303,共8页
目的:CD4^(+)T细胞在免疫应答过程中的分化受到由众多分子组成的复杂而精细的信号通路的调控,且调控T-bet表达的分子机制并未阐明。中介体复合物亚基1(mediator complex subunit 1,Med1)与多种辅助因子结合调节基因转录,促进细胞存活和... 目的:CD4^(+)T细胞在免疫应答过程中的分化受到由众多分子组成的复杂而精细的信号通路的调控,且调控T-bet表达的分子机制并未阐明。中介体复合物亚基1(mediator complex subunit 1,Med1)与多种辅助因子结合调节基因转录,促进细胞存活和增殖,影响恒定自然杀伤T细胞(invariant natural killer T cell,iNKT)的发育。本研究旨在探讨Med1对T细胞发育及CD4^(+)T细胞在免疫应答中分化的影响。方法:构建T细胞特异性敲除Med1基因(KO)小鼠(Med1F/FCD4cre^(+))并对其进行验证。采用流式细胞术检测KO组和对照(Con)组(Med1F/FCD4cre−)小鼠胸腺、脾和淋巴结中CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的百分比及数目;用淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)感染小鼠8 d后,检测小鼠脾中CD4^(+)T细胞及抗原特异性(GP66^(+))CD4^(+)T细胞的百分比及数目、Th1细胞(Ly6c^(+)PSGL1^(+))占CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞的百分比及数目、CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞中Tbet的荧光强度。结果:KO组与Con组小鼠胸腺中CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的百分比及数目、脾和淋巴结中CD4^(+)T细胞的百分比及数目差异均无统计学意义(均P>0.05),但KO组脾和淋巴结中CD8^(+)T细胞的百分比及数目较Con组均显著降低(均P<0.05)。感染LCMV后,KO组与Con组小鼠脾中CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞的百分比及数目差异均无统计学意义(均P>0.05),但KO组Th1细胞占CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞的百分比及数目、CD4^(+)T细胞及抗原特异性CD4^(+)T细胞中T-bet的表达较Con组均显著降低(均P<0.05)。结论:T细胞中特异性敲除Med1基因不影响胸腺中CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的发育,但是影响外周CD8^(+)T细胞的维持。在免疫应答中Med1基因缺失影响转录因子T-bet的表达,最终导致CD4^(+)T细胞向Th1细胞分化减少。 展开更多
关键词 中介体复合物亚基1 T细胞发育 免疫应答 TH1细胞 T-BET
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广西地区15个不同民族人群的群体遗传学关系 被引量：2
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作者 金天博 高雅 +2 位作者 陈腾 阎春霞 李生斌 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期422-424,429,共4页
目的　选择具有高度遗传多态性与稳定性的STR位点进行中国广西地区 15个不同民族人群与我国其他地区 6个民族之间的群体遗传关系分析。方法　收集各个民族血液样本 ,使用ABI377全自动测序仪进行 9个位点的STR分型 ;统计学分析处理 2 1... 目的　选择具有高度遗传多态性与稳定性的STR位点进行中国广西地区 15个不同民族人群与我国其他地区 6个民族之间的群体遗传关系分析。方法　收集各个民族血液样本 ,使用ABI377全自动测序仪进行 9个位点的STR分型 ;统计学分析处理 2 1个不同人群的STR群体遗传学资料。结果　应用 6个常染色体STR的多态性研究结果显示广西地区的京族与苗族之间的关系较近 ,而瑶族、仡佬族、仫佬族与其他民族的关系较远。结论　广西地区 15个不同民族人群之间存在一定的基因交流 ,个别民族相对独立。 展开更多
关键词 广西少数民族 民族起源 STR 遗传距离 进化树
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ApoA1与急性心肌梗死患者左心室收缩功能的关系 被引量：2
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作者 王丽君 王晨 +1 位作者 吴昊渝 郜珊珊 《临床与病理杂志》 CAS 2022年第5期1142-1147,共6页
目的:分析研究血清载脂蛋白A1(Apolipoprotein A1,ApoA1)与急性心肌梗死患者(acute myocardial infarction,AMI)左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)的关系。方法:纳入2017年7月至2018年4月于西安交通大学第一附... 目的:分析研究血清载脂蛋白A1(Apolipoprotein A1,ApoA1)与急性心肌梗死患者(acute myocardial infarction,AMI)左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)的关系。方法:纳入2017年7月至2018年4月于西安交通大学第一附属医院心内科确诊急性心肌梗死并行冠状动脉造影的834例患者,按照血清ApoA1水平分为低、中、高3组,比较各组间基线资料及临床生化指标的差异,logistics回归分析血清ApoA1与患者LVEF的关系。结果:高ApoA1组较低ApoA1组患者左心室舒张末内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDd)更小[(49.45±15.00)mm vs(45.37±15.15)mm,P=0.012],LVEF更高(51.94%±7.07%vs 56.24%±8.51%,P<0.01);Spearman相关分析提示血清ApoA1与LVEF之间呈显著正相关(r=0.131,P=0.004);logistics回归分析显示调整所有基线差异后,ApoA1仍与左心室重度收缩功能不全(LVEF<40%)呈显著负相关(P<0.001);结论:血清ApoA1与急性心肌梗死患者LVEF呈显著正相关,是急性心肌梗死患者左心室收缩功能不全的保护性预测因子。 展开更多
关键词 载脂蛋白A1 冠心病 急性心肌梗死 左心室射血分数
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心力衰竭兔左室I_(to)、I_(k1)通道蛋白表达变化及比索洛尔干预作用 被引量：3
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作者 陈文婷 李溪 +6 位作者 倪雅娟 卢群 卓小桢 王亭忠 沈建 岳鑫 马爱群 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2013年第1期419-423,共5页
目的观察心力衰竭兔左室心肌细胞Ito、Ik1通道蛋白表达变化及比索洛尔的干预作用,探讨心力衰竭时室性心律失常的发生机制及比索洛尔可能的抗心律失常机制。方法 39只新西兰兔随机分为假手术组(SO)、心力衰竭组(HF)及比索洛尔干预组(BF)... 目的观察心力衰竭兔左室心肌细胞Ito、Ik1通道蛋白表达变化及比索洛尔的干预作用,探讨心力衰竭时室性心律失常的发生机制及比索洛尔可能的抗心律失常机制。方法 39只新西兰兔随机分为假手术组(SO)、心力衰竭组(HF)及比索洛尔干预组(BF),以容量负荷联合压力超负荷方法构建心力衰竭兔模型,评价模型成功后,予比索洛尔干预6周;用Westernblot法测定瞬时外向钾电流(Ito)、内向整流钾电流(Ik1)通道蛋白的表达水平。结果①HF组兔心动超声示左房、左室增大,心脏收缩功能和舒张功能减低,BNP水平明显升高,心体比明显增大;比索洛尔干预6周可部分逆转上述变化;②与SO组相比,心力衰竭时左室心肌细胞Kv4.3(介导Ito,f)、Kv1.4(介导Ito,s)及Kir2.1(介导Ik1)蛋白表达水平降低;比索洛尔干预6周后Kv4.3、Kv1.4、Kir2.1蛋白表达较心力衰竭组均有所增加。结论心力衰竭兔左室心肌细胞Kv4.3、Kv1.4、Kir2.1蛋白表达明显下降,可能是心力衰竭时室性心律失常发生的分子基础。比索洛尔干预后可部分逆转Kv4.3、Kv1.4、Kir2.1蛋白表达的下调,可能是其抗心律失常的分子机制。 展开更多
关键词 心力衰竭 钾离子通道 蛋白表达 β受体阻滞剂
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先天性长QT综合征HERG基因L539fs／47及A561V突变的功能研究 被引量：3
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作者 李宇 廉姜芳 +6 位作者 崔长琮 赵永辉 薛小临 张爱峰 杨海涛 王东琦 黄辰 《中华心律失常学杂志》 2007年第5期383-387,共5页
目的探讨HERG基因L539fs／47突变及A561V突变的功能。方法采用交叠聚合酶链式反应（PCR）及克隆载体快速PCR构建突变体，用限制性内切酶法将突变体克隆到真核表达载体pcDNA3中，用Superfect转染试剂将野生型及突变型HERG质粒与荧光载体p... 目的探讨HERG基因L539fs／47突变及A561V突变的功能。方法采用交叠聚合酶链式反应（PCR）及克隆载体快速PCR构建突变体，用限制性内切酶法将突变体克隆到真核表达载体pcDNA3中，用Superfect转染试剂将野生型及突变型HERG质粒与荧光载体pRK5-GFP共转染至HEK293细胞，用免疫荧光化学法及蛋白免疫印记法检测蛋白质表达，用全细胞膜片钳法检测HERG通道的电流表达。结果构建的突变体经DNA直接测序示HERG基因L539fs／47缺失突变及A561V点突变，L539fs／47突变体蛋白质位于细胞膜上，A561V突变体蛋白质位于细胞膜上及细胞浆中，L539fs／47突变体蛋白质条带小于80kDa，A561V突变蛋白仅有135kDa一条蛋白条带，野生型通道记录到尾电流而L539fs／47突变及A561V突变型通道均未检测到电流表达。结论成功构建并表达了HERG基因L539fs／47突变及A561V突变的功能，L539fs／47突变通过电压门控异常机制抑制HERG电流，而A561V突变通过滞留降解及膜通道功能异常机制抑制HERG电流。 展开更多
关键词 先天性长QT综合征 基因突变 功能表达
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