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毕赤酵母高效电转化条件的研究
被引量:
12
1
作者
高炳淼
唐天乐
+1 位作者
长孙东亭
罗素兰
《中国海洋药物》
CAS
CSCD
2010年第2期1-5,共5页
目的建立毕赤酵母的高效电转化方法,为利用毕赤酵母重组表达海洋药物功能基因提供方法基础。方法采用电穿孔的方法把外源DNA转化进毕赤酵母基因组中。通过对毕赤酵母生长状态,电击条件等影响因素进行探索。结果当采用对数生长中期的菌...
目的建立毕赤酵母的高效电转化方法,为利用毕赤酵母重组表达海洋药物功能基因提供方法基础。方法采用电穿孔的方法把外源DNA转化进毕赤酵母基因组中。通过对毕赤酵母生长状态,电击条件等影响因素进行探索。结果当采用对数生长中期的菌体制备感受态细胞、电压为1.5kV、质粒浓度为0.15g.L-1和0.2cm电转化杯时,转化效率达到最大值,为每微克质粒DNA 36个转化子。经抽样PCR鉴定所得到的转化子均为阳性克隆。结论通过对电转化各种条件的优化,获得了高效电转化技术方法。
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关键词
毕赤酵母
电转化
转化率
原文传递
题名
毕赤酵母高效电转化条件的研究
被引量:
12
1
作者
高炳淼
唐天乐
长孙东亭
罗素兰
机构
热带
生物资源
教育部
重点
实验室
海南大学
园艺
园林
学院
海南大学
海
洋
学院
海南大学
生物
技术
实验
中心
出处
《中国海洋药物》
CAS
CSCD
2010年第2期1-5,共5页
基金
国家自然科学基金(30860368)
国家863计划(2007AA02Z114)
+2 种基金
重大新药创制国家科技重点大专课题(2009ZX09103-644)
海南大学创新团队(hd09xm02)
海南大学重点科研项目(hd09xm15)
文摘
目的建立毕赤酵母的高效电转化方法,为利用毕赤酵母重组表达海洋药物功能基因提供方法基础。方法采用电穿孔的方法把外源DNA转化进毕赤酵母基因组中。通过对毕赤酵母生长状态,电击条件等影响因素进行探索。结果当采用对数生长中期的菌体制备感受态细胞、电压为1.5kV、质粒浓度为0.15g.L-1和0.2cm电转化杯时,转化效率达到最大值,为每微克质粒DNA 36个转化子。经抽样PCR鉴定所得到的转化子均为阳性克隆。结论通过对电转化各种条件的优化,获得了高效电转化技术方法。
关键词
毕赤酵母
电转化
转化率
Keywords
Pichia pastoris electroporation
transformation efficiency
分类号
R965.2 [医药卫生—药理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
毕赤酵母高效电转化条件的研究
高炳淼
唐天乐
长孙东亭
罗素兰
《中国海洋药物》
CAS
CSCD
2010
12
原文传递
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