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野生热带灵芝Ganoderma tropicum(Jungh.) Bres.菌种分离与驯化研究 被引量:10
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作者 刘国民 吴兴亮 +2 位作者 李娟玲 潘学峰 王康 《海南大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第1期24-29,共6页
以新鲜的野生热带灵芝子实体为材料,经过表面消毒后,分别接种到米饭培养基、CA培养基和PDA培养基上.结果表明,在这3种供试培养基上均能获得纯化的菌丝体.米饭培养基上的菌丝体的生长速度最快;其次为PDA培养基;CA培养基的菌丝体生长最慢... 以新鲜的野生热带灵芝子实体为材料,经过表面消毒后,分别接种到米饭培养基、CA培养基和PDA培养基上.结果表明,在这3种供试培养基上均能获得纯化的菌丝体.米饭培养基上的菌丝体的生长速度最快;其次为PDA培养基;CA培养基的菌丝体生长最慢.对子实体、担孢子和菌丝体的形态特征进行了系统的形态学观察,证实所分离和驯化的菌种为热带灵芝[Ganoderma tropicum(Jungh.) Bres.].用木屑作为主要原料制备培养料对热带灵芝进行了驯化栽培,实验结果表明,冬季较低温条件下形成的子实体多为鹿角状畸形芝;而在2月份中旬以后较高温度下形成的子实体多为正常的掌状子实体.笔者据此认为,在海口地区,热带灵芝宜在春末至秋末气温较高的季节栽培. 展开更多
关键词 热带灵芝 驯化 米饭培养基 CA培养基 PDA培养基
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基因枪法介导GNA基因遗传转化甘蔗的研究 被引量:6
2
作者 长孙东亭 罗素兰 +2 位作者 陈如凯 林皎月 严建燕 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第3期51-55,共5页
目的:将含有雪花莲外源凝集素(GNA)基因的植物表达载体用基因枪法分别导入一个果蔗和一个糖蔗品种中,以期获得转基因植株。方法:将GNA基因插入到植物表达载体上,构建出不同选择标记、不同启动子的表达载体,并用基因枪法将之导入甘蔗胚... 目的:将含有雪花莲外源凝集素(GNA)基因的植物表达载体用基因枪法分别导入一个果蔗和一个糖蔗品种中,以期获得转基因植株。方法:将GNA基因插入到植物表达载体上,构建出不同选择标记、不同启动子的表达载体,并用基因枪法将之导入甘蔗胚性愈伤组织,分别在G418、PPT和Hyg的选择压力下,筛选抗性植株,并进行分子杂交鉴定。结果:通过斑点杂交和PCR-Southern杂交证明GNA基因已整合到甘蔗基因组中。结论:用基因枪法成功获得了含有GNA基因的甘蔗转化株,为培育抗甘蔗绵蚜(Ceratovacuna lanigeraZehnther)的新品种提供了基础。 展开更多
关键词 甘蔗 基因枪转化 GNA基因
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巴斯德毕赤酵母表达系统及其高水平表达策略 被引量:17
3
作者 胡世界 罗素兰 +1 位作者 张吉贞 长孙东亭 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第6期78-83,共6页
毕赤酵母表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一,与现有的其它表达系统相比,巴斯德毕赤酵母在表达产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势,现已广泛用于外源蛋白的表达。该文综述了其自身的优点,表达... 毕赤酵母表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一,与现有的其它表达系统相比,巴斯德毕赤酵母在表达产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势,现已广泛用于外源蛋白的表达。该文综述了其自身的优点,表达载体和宿主菌的特点,以及高水平表达外源基因的策略。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 酵母表达系统 高水平表达 表达策略
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减水剂对混凝土耐久性影响的研究进展 被引量:22
4
作者 潘莉莎 邱学青 +1 位作者 庞煜霞 杨东杰 《混凝土》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期48-51,共4页
分析当今国内外混凝土耐久性的现状和导致混凝土耐久性下降的因素,提出使用减水剂是解决混凝土耐久性经济有效的方法之一。综述了近十年减水剂对混凝土耐久性影响的研究现状,指出目前研究的关键问题是系统全面地研究减水剂对混凝土耐久... 分析当今国内外混凝土耐久性的现状和导致混凝土耐久性下降的因素,提出使用减水剂是解决混凝土耐久性经济有效的方法之一。综述了近十年减水剂对混凝土耐久性影响的研究现状,指出目前研究的关键问题是系统全面地研究减水剂对混凝土耐久性的影响及其作用机理,为工程正确选用减水剂配制具有良好耐久性的高性能混凝土提供工程和理论指导依据。 展开更多
关键词 减水剂 混凝土 耐久性
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本科微生物学实验教学改革初探 被引量:17
5
作者 冯建成 罗素兰 《生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期66-67,共2页
微生物学是一门实验性很强的学科,加强实验教学改革对于培养学生的综合素质和创新精神具有重要意义。从实验内容选取,微生物实验教学方法和教学手段改革等三个方面,提出了实验教学改革的一些设想,目的在于提高实验教学质量,培养创新型... 微生物学是一门实验性很强的学科,加强实验教学改革对于培养学生的综合素质和创新精神具有重要意义。从实验内容选取,微生物实验教学方法和教学手段改革等三个方面,提出了实验教学改革的一些设想,目的在于提高实验教学质量,培养创新型人才。 展开更多
关键词 微生物学实验 教学改革 综合素质
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鳗鲡种质资源的研究进展 被引量:15
6
作者 娄甜甜 齐兴柱 +4 位作者 尹绍武 黄海 廖经球 陈国华 张本 《水产科学》 CAS 北大核心 2007年第6期366-369,共4页
关键词 鳗鲡 种质资源
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高质量毕赤酵母基因组DNA提取方法比较 被引量:14
7
作者 唐天乐 高炳淼 +1 位作者 长孙东亭 罗素兰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期196-199,共4页
旨在比较5种毕赤酵母基因组DNA的提取法,以便获得简便高效的提取高质量酵母基因组DNA的优化方法。分别使用蜗牛酶破壁法,超声波破碎法,液氮研磨法,Lyticase破壁法,试剂盒法提取毕赤酵母基因组DNA,然后进行DNA电泳检测以及紫外分光光度... 旨在比较5种毕赤酵母基因组DNA的提取法,以便获得简便高效的提取高质量酵母基因组DNA的优化方法。分别使用蜗牛酶破壁法,超声波破碎法,液氮研磨法,Lyticase破壁法,试剂盒法提取毕赤酵母基因组DNA,然后进行DNA电泳检测以及紫外分光光度计测定DNA浓度和纯度。结果显示,5种方法均能提取出酵母基因组DNA,而酶法所提取的酵母基因组DNA质量最好。由此证实,蜗牛酶法成本低、效果好,是理想的提取高质量酵母基因组DNA的方法,完全满足后续试验要求。 展开更多
关键词 毕赤酵母 高质量基因组DNA 提取方法优化
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减水剂对水泥水化产物微观形貌的影响 被引量:14
8
作者 潘莉莎 邱学青 庞煜霞 《硅酸盐通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期257-263,共7页
研究木素磺酸钙、改性木素磺酸钙、萘磺酸甲醛缩合物、氨基磺酸甲醛缩合物和三聚氰胺脲醛树脂5种减水剂对水泥水化产物微观形貌的影响。结果表明,掺木素磺酸钙的水泥石中生成较多短柱状钙矾石(AFt);掺改性木素磺酸钙的水泥石中短柱状和... 研究木素磺酸钙、改性木素磺酸钙、萘磺酸甲醛缩合物、氨基磺酸甲醛缩合物和三聚氰胺脲醛树脂5种减水剂对水泥水化产物微观形貌的影响。结果表明,掺木素磺酸钙的水泥石中生成较多短柱状钙矾石(AFt);掺改性木素磺酸钙的水泥石中短柱状和长柱状AFt交错生长;掺萘磺酸甲醛缩合物、氨基磺酸甲醛缩合物和三聚氰胺脲醛树脂可分别使水泥石中AFt呈长杆柱、波浪状和规则六方柱状生长。当水化龄期达到60d时,0.8%木素磺酸钙、改性木素磺酸钙的水泥石中出现连通孔洞;掺0.8%萘磺酸甲醛缩合物和氨基磺酸甲醛缩合物造成水泥石中出现微裂缝;掺加0.4%三聚氰胺脲醛树脂和改性木素磺酸钙的水泥石结构致密。减水剂的分散性、引气性和缓凝性是其对水化产物微观形貌影响的主要原因。 展开更多
关键词 减水剂 水泥 水化产物 微观形貌
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研究生生物化学课堂讨论式教学方法探讨 被引量:13
9
作者 张桂和 《生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期65-67,共3页
通过在研究生生物化学课程中进行讨论式教学方法改革,改变了传统以课堂为中心,以教师为主体,学生为客体的灌输式教学模式。讨论式教学方法以学生为主体,通过课前自学、课堂上师生之间和学生之间的讨论与交流,使学生从被动接受知识转变... 通过在研究生生物化学课程中进行讨论式教学方法改革,改变了传统以课堂为中心,以教师为主体,学生为客体的灌输式教学模式。讨论式教学方法以学生为主体,通过课前自学、课堂上师生之间和学生之间的讨论与交流,使学生从被动接受知识转变为主动获取知识,激发学生对学习的兴趣,开发学生的思维资源,培养学生的自学能力和创造性思维能力。实践证明,讨论式教学方法提高了教学质量和教学效率,提高了学生的综合素质,取得了良好的效果。 展开更多
关键词 生物化学 讨论式教学 教学方法改革
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药用植物内生菌及其对道地药材影响的研究进展 被引量:13
10
作者 范丽霞 郑继平 白新鹏 《安徽农业科学》 CAS 2012年第22期11221-11223,11467,共4页
对近年来药用植物内生菌的研究进展及其对中药材道地性的影响进行综述,以期为内生菌资源的利用和中药材的开发提供参考。
关键词 内生菌 药用植物 道地药材
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毕赤酵母高效电转化条件的研究 被引量:12
11
作者 高炳淼 唐天乐 +1 位作者 长孙东亭 罗素兰 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2010年第2期1-5,共5页
目的建立毕赤酵母的高效电转化方法,为利用毕赤酵母重组表达海洋药物功能基因提供方法基础。方法采用电穿孔的方法把外源DNA转化进毕赤酵母基因组中。通过对毕赤酵母生长状态,电击条件等影响因素进行探索。结果当采用对数生长中期的菌... 目的建立毕赤酵母的高效电转化方法,为利用毕赤酵母重组表达海洋药物功能基因提供方法基础。方法采用电穿孔的方法把外源DNA转化进毕赤酵母基因组中。通过对毕赤酵母生长状态,电击条件等影响因素进行探索。结果当采用对数生长中期的菌体制备感受态细胞、电压为1.5kV、质粒浓度为0.15g.L-1和0.2cm电转化杯时,转化效率达到最大值,为每微克质粒DNA 36个转化子。经抽样PCR鉴定所得到的转化子均为阳性克隆。结论通过对电转化各种条件的优化,获得了高效电转化技术方法。 展开更多
关键词 毕赤酵母 电转化 转化率
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毕赤酵母重组子PCR模板制备方法的比较 被引量:10
12
作者 高炳淼 长孙东亭 +2 位作者 朱晓鹏 吴勇 罗素兰 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2009年第1期7-11,共5页
目的比较5种用于PCR实验的毕赤酵母(Pichia pastoris)重组子基因组DNA的制备方法,以寻求一种稳定、可靠、简便的DNA模板制备方法,用于毕赤酵母重组子的分析。方法分别用酵母基因组提取试剂盒法、蜗牛酶法、煮沸法、煮-冻-煮法、微波法... 目的比较5种用于PCR实验的毕赤酵母(Pichia pastoris)重组子基因组DNA的制备方法,以寻求一种稳定、可靠、简便的DNA模板制备方法,用于毕赤酵母重组子的分析。方法分别用酵母基因组提取试剂盒法、蜗牛酶法、煮沸法、煮-冻-煮法、微波法制备重组毕赤酵母基因组DNA模板,在相同条件下进行PCR扩增并比较其差异。结果以5种方法制备的重组酵母DNA作为模板进行PCR,其结果均可达到鉴定酵母重组子的效果,其中酵母基因组提取试剂盒法和微波法可以鉴定酵母重组子的基因表型。结论微波法所需时间短、费用低、操作简便而且结果稳定,并能够鉴定酵母重组子的基因表型,是采用毕赤酵母表达系统进行PCR鉴定时制备模板DNA的首选方法。 展开更多
关键词 毕赤酵母 重组子 基因纽DNA的制备 聚合酶链式反应
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马氏珠母贝(Pinctada martensii)2个不同地理种群遗传变异的EST-SSR分析 被引量:11
13
作者 侯战辉 王嫣 +2 位作者 石耀华 顾志峰 王爱民 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期178-183,共6页
应用17个EST-SSR位点分析表明,马氏珠母贝印度种群和三亚种群的平均FST值为0.486,两个种群的分化程度高;三亚种群的等位基因数为1—6,有效等位基因数为1.0—3.3;印度种群的等位基因数为2—7,有效等位基因数为1.1—3.3;三亚种群和印度种... 应用17个EST-SSR位点分析表明,马氏珠母贝印度种群和三亚种群的平均FST值为0.486,两个种群的分化程度高;三亚种群的等位基因数为1—6,有效等位基因数为1.0—3.3;印度种群的等位基因数为2—7,有效等位基因数为1.1—3.3;三亚种群和印度种群的平均有效等位基因数分别是1.8和1.9;三亚种群和印度种群的等位基因丰度分别为3.16和3.39;印度种群无论是期望杂合度(HE)还是观察杂合度(HO)都高于三亚种群,印度种群的期望杂合度和观察杂合度分别是0.42和0.16;三亚种群的期望杂合度和观察杂合度分别是0.38和0.15;三亚种群与印度种群的Nei’s遗传距离为1.119。两个种群都保持了中等水平遗传多样性。由于两个种群高度的遗传分化和保持丰富的遗传多样性为开展两个种群间杂交及获得杂种优势奠定了基础。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 地理种群 遗传变异 EST-SSR 微卫星
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体外消化透析法测定朱砂中汞生物可接受率的实验条件确定 被引量:9
14
作者 庞京团 胡广林 +2 位作者 韩彬 齐江宁 李平 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2833-2835,共3页
目的确定体外消化透析法测定朱砂中汞的生物可接受率的实验条件,建立实验流程,并测定朱砂中汞的生物可接受率。方法模拟胃肠消化环境,研究pH、接触时间等因素对朱砂中汞的溶出率及透析时间等对朱砂中汞的生物可接受率的影响规律,确定合... 目的确定体外消化透析法测定朱砂中汞的生物可接受率的实验条件,建立实验流程,并测定朱砂中汞的生物可接受率。方法模拟胃肠消化环境,研究pH、接触时间等因素对朱砂中汞的溶出率及透析时间等对朱砂中汞的生物可接受率的影响规律,确定合适模拟条件。结果确定的实验流程模拟条件为:液/固比100,人工胃液pH=1.5,加入0.16%胃蛋白酶1 m l,接触时间100 m in,透析时间100 m in,加入胰液胆盐混合物量为5 m l。在确定的实验条件下,CV-AFS测得水飞朱砂中汞的溶出率为2.5×10-6(n=6,RSD=4.1%),生物可接受率为4.8×10-7(n=6,RSD=3.5%)。结论体外消化透析法可用于测定朱砂中汞的生物可接受率,可为测定含朱砂中成药中汞的生物可接受率提供方法学上的参考。 展开更多
关键词 体外消化透析法 朱砂 生物可接受率
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高产透明质酸菌种FJ-23的诱变选育 被引量:6
15
作者 冯建成 张容鹄 罗素兰 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第3期28-30,共3页
目的:高产透明质酸菌种的选育是提高透明质酸产量和质量的关键。方法:以马疫链球菌SH-0为出发菌,对其进行紫外诱变和NTG诱变选育。结果:筛选出溶血素和透明质酸酶双缺陷型突变菌株FJ-23,其透明质酸产量提高了7倍;突变株经6次传代,其产... 目的:高产透明质酸菌种的选育是提高透明质酸产量和质量的关键。方法:以马疫链球菌SH-0为出发菌,对其进行紫外诱变和NTG诱变选育。结果:筛选出溶血素和透明质酸酶双缺陷型突变菌株FJ-23,其透明质酸产量提高了7倍;突变株经6次传代,其产酸量及HA的相对分子量保持稳定,为今后进一步研究发酵法生产透明质酸打下基础。 展开更多
关键词 马疫链球菌 诱变 选育
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大豆在萌发过程中的铁锌营养强化 被引量:8
16
作者 余赛西 胡广林 +2 位作者 李凯 刘金芳 唐琦 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2018年第2期141-148,156,共9页
研究在大豆萌发过程中添加食品营养强化剂对微量元素和营养物质的影响。分别用不同浓度的硫酸亚铁(FeSO_4,0~56μg Fe/mL)、硫酸锌(ZnSO_4,0~100μg Zn/mL)及其混合溶液(FeSO_4+ZnSO_4)进行浸种和强化处理,用火焰原子吸收分光光度法(FA... 研究在大豆萌发过程中添加食品营养强化剂对微量元素和营养物质的影响。分别用不同浓度的硫酸亚铁(FeSO_4,0~56μg Fe/mL)、硫酸锌(ZnSO_4,0~100μg Zn/mL)及其混合溶液(FeSO_4+ZnSO_4)进行浸种和强化处理,用火焰原子吸收分光光度法(FAAS)测量铁(Fe)、锌(Zn)、铜(Cu)、锰(Mn)四种微量元素的变化。结果表明,三种强化方式均能不同程度提高大豆萌发后的铁、锌含量,对铜元素的影响无显著性差异(p>0.05)。大豆在适当强化剂浓度下中铁含量最高可提升450.59%(FeSO_4+ZnSO_4,16.8~33.6μg Fe/mL,30~60μg Zn/mL)、203.74%(FeSO_4,16.8~33.6μg Fe/mL)。在铁强化大豆的过程中添加ZnSO_4能够促进大豆对铁的富集能力,在锌强化大豆的过程中添加FeSO_4能降低大豆对锌的富集能力。铁锌强化剂浓度为16.8~33.6μg Fe/mL,30~60μg Zn/mL时大豆铁蛋白有所提升。39.2μg Fe/mL FeSO_4和70μg Zn/mL ZnSO_4强化时大豆抗氧化活性最强。实验结果表明,铁锌强化能够提高大豆中铁含量,促进铁的吸收和铁蛋白的合成。 展开更多
关键词 大豆 营养强化 铁蛋白
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卵形鲳鲹Hepcidin-5的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备 被引量:6
17
作者 何明旺 项雅婧 +2 位作者 孙云 曹贞洁 周永灿 《海南大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第1期34-40,共7页
为了制备高效的卵形鲳鲹hepcidin-5蛋白多克隆抗体和对其特异性进行鉴定,本研究通过PCR扩增的方法获得了卵形鲳鲹抗菌肽hepcidin-5(Tro H5)的成熟肽cDNA序列,并构建了原核表达载体pET-32a(+)/TroH5,然后将其转入大肠杆菌表达菌株BL21(D... 为了制备高效的卵形鲳鲹hepcidin-5蛋白多克隆抗体和对其特异性进行鉴定,本研究通过PCR扩增的方法获得了卵形鲳鲹抗菌肽hepcidin-5(Tro H5)的成熟肽cDNA序列,并构建了原核表达载体pET-32a(+)/TroH5,然后将其转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中进行原核表达.经IPTG诱导,成功表达了相对分子质量约为35kDa的融合重组蛋白.经不同诱导条件的优化,最终确定在IPTG终浓度为0. 1mmol/L和温度为20℃时,其表达量最大.可溶性分析表明:该融合蛋白主要存在于上清中.经镍柱亲和层析纯化获得了纯度较高的融合蛋白,然后以免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA法检测,其效价达到1∶105.蛋白免疫印迹(Western blot)检测表明:所制备的多克隆抗体特异性强.本研究为进一步探究hepcidin-5的生物学功能奠定了基础. 展开更多
关键词 卵形鲳鲹 hepcidin-5 原核表达 多克隆抗体
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池塘封闭循环水养殖废水脱氮的试验研究 被引量:5
18
作者 唐天乐 唐文浩 《渔业现代化》 北大核心 2009年第5期14-18,共5页
确定封闭循环水养殖池塘系统对养殖水体的脱氮能力。循环净水系统主要有生物合成固氮、污泥吸附分离脱氮、光化学脱氮、微生物脱氮、物理脱氮等环节,采用海洋监测国家标准方法对系统中的南美白对虾(Penaeus vannamei)养殖水体进行跟... 确定封闭循环水养殖池塘系统对养殖水体的脱氮能力。循环净水系统主要有生物合成固氮、污泥吸附分离脱氮、光化学脱氮、微生物脱氮、物理脱氮等环节,采用海洋监测国家标准方法对系统中的南美白对虾(Penaeus vannamei)养殖水体进行跟踪监测。结果表明:系统对养殖水体中硝酸盐氮、亚硝酸盐氮和氨氮的去除率分别为10.37%-27.35%、22.45%-44.74%和22.00%-79.53%,脱氮解毒效果较好。 展开更多
关键词 封闭循环水养殖 光化学 养殖废水脱氮 池塘养殖
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毕赤酵母表达体系中重组蛋白的分离纯化 被引量:6
19
作者 高炳淼 长孙东亭 +1 位作者 罗素兰 安婷婷 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期33-36,共4页
随着基因重组技术的快速发展,基因工程产品的利用越来越广泛,但其分离纯化的成本约占总成本的60%-70%。因此,探索一些简单有效的分离纯化方法尤为必要。简单介绍了目前较为流行的毕赤酵母表达体系,着重概述了重组蛋白分离纯化技... 随着基因重组技术的快速发展,基因工程产品的利用越来越广泛,但其分离纯化的成本约占总成本的60%-70%。因此,探索一些简单有效的分离纯化方法尤为必要。简单介绍了目前较为流行的毕赤酵母表达体系,着重概述了重组蛋白分离纯化技术方法的应用情况。 展开更多
关键词 毕赤酵母 重组蛋白质 分离 纯化
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水母毒素研究进展 被引量:4
20
作者 陈琴 罗素兰 长孙东亭 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第6期95-97,F0004,共4页
水母毒素是一类结构独特而新颖的蛋白质,是一大类潜在的海洋药物先导化合物。该文概述了水母及其毒素的基本特征,详细阐述了水母毒素的结构特征、生理效应和生物活性,为以后研究水母毒素的生物活性和药理作用奠定基础,为充分利用其有效... 水母毒素是一类结构独特而新颖的蛋白质,是一大类潜在的海洋药物先导化合物。该文概述了水母及其毒素的基本特征,详细阐述了水母毒素的结构特征、生理效应和生物活性,为以后研究水母毒素的生物活性和药理作用奠定基础,为充分利用其有效成份,开发新型的海洋生物药物提供更多的线索。 展开更多
关键词 水母 毒素 生物活性 应用
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